含Boc側鏈氨基保護的雙保護賴氨酸的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及多肽衍生物的合成領域，具體涉及一種含B〇C側鏈氨基保護的雙保護 賴氨酸(^11〇(3-1^8〇3〇(3)-〇!〇的合成工藝。
【背景技術】
[0002] 賴氨酸是最常見的氨基酸之一，側鏈含有一個氨基，因此是一種堿性氨基酸。側鏈 氨基具有較強的反應活性，因此在多肽合成中需要進行保護。Fm 〇C-L-Lys(B〇C)-OH是一種 常用的雙保護賴氨酸，側鏈氨基保護基則常用Bo c。
[0003] 該產品傳統的制備工藝是利用Cu+2或9-BBN為絡合試劑對賴氨酸alpha-氨基和 羧基進行保護，然后加入Boc酸酐對epsilon-氨基進行選擇性保護，最后用硫化鈉或者8-羥 基喹啉等脫銅試劑除去銅或用三氟過氧乙酸等氧化劑除去9-BBN，再利用Fmoc-OSU對 alpha-氨基進行保護，得到所需產品。傳統工藝脫銅試劑硫化鈉或者8-羥基喹啉，硫化鈉脫 銅時會產生刺激性有毒氣體，給安全環保造成較大壓力。而8-羥基喹啉價格高，提高了原料 成本。
【發明內容】
[0004] 為了克服現有技術的上述技術缺點，本發明的目的是提供一種含Boc側鏈氨基保 護的雙保護賴氨酸(Fmo c-Ly s (Boc) -OH)的新型合成工藝。本發明的工藝將避免硫化鈉脫銅 時產生刺激性有毒氣體，解決安全環保問題；同時解決因8-羥基喹啉價格高而造成的原料 成本偏高的問題。
[0005] 完成上述發明任務的技術方案是，一種含Boc側鏈氨基保護的雙保護賴氨酸 (Fmoc-Lys (Boc)-OH)的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 用三氟化硼為絡合劑，對賴氨酸alpha-氨基和羧基進行保護； 加入Boc酸酐對epsi Ion-氨基進行選擇性保護； 然后用堿液除去硼絡合物； 利用Fmoc-〇SU( 9-芴甲基琥珀酰亞氨基碳酸酯)對alpha-氨基進行保護，得到所需產 品。
[0006] 更具體和更優化地說，本發明的合成方法是： ⑴.將賴氨酸分散于四氫呋喃中； ⑵.冰浴攪拌下加入甲醇鈉； (3).自然升溫至室溫攪拌1小時； ⑷.加入50%的三氟化硼四氫呋喃溶液； (5) .緩慢升溫至50度； (6) .攪拌5小時至體系澄清； (7) .加入二碳酸二叔丁酯的四氫呋喃溶液； (8) . 30%液堿控制pH為8左右至反應完全； (9) .加入液堿； (10) .冰浴攪拌半小時； (11) .減壓回收四氫呋喃，大量白色固體析出； (12) ·尚心得中間體H-Lys (Boc)-OH濕品。
[0007] 以上步驟⑴中，賴氨酸與四氫呋喃的重量-體積比是：1:5-1:1;最佳比例是1:2.05 以上步驟⑵中，賴氨酸與甲醇鈉的摩爾比是：1:0.8-1:1.5;最佳比例是1:1.05 以上步驟⑷中，賴氨酸與三氟化硼的摩爾比是：1:0.9-1:2;最佳比例是1:1.5 以上步驟⑵中，賴氨酸與二碳酸二叔丁酯的摩爾比是：1:0.9-1:5;最佳比例是1:1.2 以上步驟(9)中，賴氨酸與30%液堿的重量比是:4:1-6:1;最佳比例是5.5:1;所述的液堿 可以采用氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀，優先氫氧化鈉。
[0008] 進一步優化，可以增加以下步驟： 03?.所得的H-Lys (Boc)-OH濕品中加水和乙酸乙酯;攪勻后用液堿調節pH至9; 丨14；!.分批投入Fm〇C-〇su( 9-芴甲基琥珀酰亞氨基碳酸酯）至反應完全，反應過程用液 堿控制pH 9-10; 反應結束后用工業鹽酸調pH至3; (丨B；l.分出乙酸乙酯層，乙酸乙酯層加飽和食鹽水洗滌；
[m.無水硫酸鈉干燥，抽濾，脫溶； 加入甲叔醚打漿2小時； iSl .抽濾，固體晾干得HPLC分析產品含量大于99.5%。
[0009] 以上步驟_中，H-Lys(Boc)-〇H折干重量與乙酸乙酯的重量比是：1:2_1:5;最佳比 例是1:3.42; 以上步驟[13丨中的液堿，可以采用氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀，優先碳酸鉀。； 以上步驟(丨4|中，H-Lys(Boc)-0H折干重量與Fmoc-osu的摩爾比是：1:0.8-1:1.5;最佳 比例是1:1.1; 以上步驟_中，H-Lys(Boc)-0H折干重量與加入甲叔醚的重量比是：1:15-1: 25;最佳 比例是1:18。
[0010] 本發明的工藝避免了傳統工藝中硫化鈉脫銅時產生刺激性有毒氣體，解決了安全 環保問題；同時解決了因8-羥基喹啉價格高而造成的原料成本偏高的問題。采用本發明的 工藝，可以比傳統工藝降低成本15%。
【附圖說明】
[0011] 圖1是本發明的合成工藝圖。
[0012] 具體實施辦法 下面結合實例對本發明作進一步的說明，其目的僅在于更好的理解本發明的內容而非 限制本發明的保護內容。
[0013] 實施例1，含Boc側鏈氨基保護的雙保護賴氨酸(Fm〇C-Lys(B〇C)-OH)的合成工藝。 參照圖1。
[0014] (1).將146克賴氨酸分散于300毫升四氫呋喃中；(2).冰浴攪拌下加入甲醇鈉57克； (3).自然升溫至室溫攪拌1小時。⑷.加入50%的三氟化硼四氫呋喃溶液203克；(5).緩慢升溫 至50度;(6).攪拌5小時至體系澄清。(7).加入二碳酸二叔丁酯262克的四氫呋喃溶液;(8).液 堿控制pH為8左右至反應完全。(9).加入液堿20毫升;(10).冰浴攪拌半小時。(11).減壓回收四氫 呋喃，大量白色固體析出；(12).離心得中間體H-Lys (Boc)-OH濕品。
[0015] 實施例2，
[Ι3?.將實施例1中所得H-Lys(Boc)-OH濕品中加水800克，乙酸乙酯800克，攪勻后用液 堿調節pH至9。_ .分批投入Fmoc-osu約350克至反應完全，反應過程用液堿控制pH9-10。[向 .反應結束后用工業鹽酸調pH至3;_.分出乙酸乙酯層，乙酸乙酯層加飽和食鹽水洗滌;昨). 無水硫酸鈉干燥，抽濾，脫溶.加入4.3KG甲叔醚打漿2小時，抽濾，固體晾干得202克。 HPLC分析產品含量大于99.5%。_ .抽濾，固體晾干得HPLC分析產品含量大于99.5%。
[0016] 實施例3,與實施例1、2基本相同，但有以下改變： 步驟⑴中，賴氨酸與四氫呋喃的重量-體積比是：1:5; 步驟⑵中，賴氨酸與甲醇鈉的摩爾比是：1:0.8; 步驟⑷中，賴氨酸與三氟化硼的摩爾比是：1:0.9; 步驟(7)中，賴氨酸與二碳酸二叔丁酯的摩爾比是：1:0.9; 步驟(9)中，賴氨酸與30%液堿的重量比是:4:1;所述的液堿采用氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳 酸鈉或碳酸鉀。
[0017] 實施例4