據本發明，巰基修飾的八臂聚乙二醇的來源沒有特別地限制，可以自行合成也 可以商購。
[0108] 經本發人研究發現，0-PEG的分子量為10000~50000,優選為10000~40000,更 優選為10000~30000,最優選為10000~20000。
[0109] 在上述步驟三中，所述有機溶劑優選為非質子極性溶劑，例如二甲亞砜和Ν，Ν-二 甲基甲酰胺。其中，特別地，優選二甲基亞砜。
[0110] 在上述步驟三中，多巴胺（dopamine/DOPA)是一種天然存在于畔類中的粘附蛋 白，其結構簡單，可利用多巴胺結構中的酚羥基團實現氧化交聯。此外，D0PA的粘附性能是 酚羥基氧化為醌基團所致。同時還研究發現，加入D0PA，可有效增強材料的強度。 h
[0111] 在上述步驟三中， 與多巴胺的摩爾比為
多巴胺=1 :(1~30)，優選為1 :(1.3~20)，更優選為1 : (1. 5~15)，最優選為1 : (2~7. 5)。
[0112] 在上述步驟三中，0-PEG的添加量為使得0-PEG與 的摩 爾量為〇-PE(
(8~60)，優選為1 : (10~40)，更優選為1 :
(12 ~30) 〇 >2
[0113] 在上述步驟三中 與多巴胺的反應時間為10~72小時， 優選為14~60小時，更優選為20~50小時，最優選為40~48小時。
[0114] 在上述步驟三中，加入巰基修飾的八臂聚乙二醇后，繼續反應20~60小時，優選 30~55小時，更優選為37~48小時。
[0115] 在上述步驟三中，在反應體系中加入縛酸劑，其中，縛酸劑的種類并沒有特別地限 制，只要加入到體系中能與反應體系中產生的酸形成鹽即可，特別地，選用三乙胺即可。
[0116] 在上述步驟三中，將包含有第一水凝膠因子的反應體系進行純化后得到的水凝膠 因子。其中，純化的方法并沒有特別地限制，只要能將水凝膠因子純化即可，特別地，可選用 超濾或是透析的方法對水凝膠因子進行純化。
[0117] 當選用透析方法進行純化的時候，選用透析袋的分子量為1000~20000,特別地， 優選1500~15000,更優選為2000~10000。其中，透析的時間為10~100小時，優選20~ 50小時，更優選25~48小時，最終透析液介質由二甲基亞砜變為去離子水，且每8小時換 液一次。
[0118] 在上述步驟三中，純化步驟完成后，進行凍干，則獲得最終產物0-PEG-D0PA。
[0119] 根據本發明，四代聚酰胺-胺型樹枝狀分子（G-4PAMAM)可以商購，也可以自行合 成。在自行制備中，采用發散法合成PAMAM樹枝狀分子。以乙二胺為初始核，分別通過邁克 爾加成和酰胺化反應合成半代和整代的PAMAM樹枝狀分子。
[0120] 在優選的實施方式中，第二水凝膠因子在PAMAM樹枝狀分子的基礎上由包括以下 三個步驟制備得到：
[0121] 負0. 5代的聚酰胺-胺型樹枝狀分子（G-(_0. 5) PAMAM)由下述式III所示：
[0122]
[0123] 上述G-(_0. 5)PAMAM的合成方法如下：在反應容器中加入乙二胺，以甲醇作為 溶劑，在冰浴條件下邊攪拌邊滴加丙烯酸甲酯，其中，乙二胺與丙烯酸甲酯的摩爾比為 1 :(4. 5~10)。滴加完畢后，在氮氣保護作用下以及室溫條件下反應48h，得到包含有 G-(-0. 5)PAMAM的反應體系。
[0124] G-0PAMAM的合成：在反應容器中加入上述G-(-0. 5)PAMAM，以甲醇為溶劑，在冰浴 條件下邊攪拌邊滴加乙二胺，其中G-(-0. 5)PAMAM與乙二胺的摩爾比為1 : (50~100)。滴 加完畢后，在氮氣保護一級室溫條件下攪拌反應，得到包含有G-(-0. 5)PAMAM的反應體系。
[0125] 采用與上述相同的合成步驟，在G-3. 5PAMAM的基礎上合成G-4. 0ΡΑΜΑΜ。
[0126] G-4.0PAMAM樹枝狀分子的末端帶有64個氨基，在氨基上可根據實際需求進行適 當的修飾，從而得到四代聚酰胺-胺型樹枝狀分子的衍生物。
[0127] 步驟一、將制備好的G-4. 0ΡΑΜΑΜ樹枝狀分子與雙官能團聚乙二醇，加入到溶劑 中，然后在室溫下反應，其中，溶劑為水和與水互溶的有機溶劑中的一種或多種。
[0128] 在上述步驟一中，所提及的雙官能團聚乙二醇為聚乙二醇的一端接由馬來酰亞胺 基，另一端接有N-羥基琥珀酰亞胺基，可以表示為：馬來酰亞胺一聚乙二醇一 N-羥基琥珀 酰亞胺，則MAL-PEG-NHS如下式III所示：
[0129]
[0130] 作為與水互溶的有機溶劑的實例，具體提及：甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、二甲基 亞諷和N，N-二甲基甲醜胺。
[0131] 在優選的實施方式中，溶劑為水、甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、二甲基亞砜以及N， N-二甲基甲酰胺中的一種或多種。
[0132] 在進一步優選的實施方式中，溶劑為水、甲醇、乙醇和二甲基亞砜中的一種或多 種。
[0133] 在更進一步的實施方式中，溶劑為水、乙醇和二甲基亞砜中的一種或多種。
[0134] 特別地，溶劑最優選為水。
[0135] 在上述步驟一中，MAL-PEG-NHS的分子量為1000~20000,優選為1500~15000， 更優選為3000~10000,最優選為3500~5500。
[0136] 在上述步驟一中，在式III中所示的結構式中，叫為21~440,優選為30~335,更 優選為62~220,最優選為76~118。
[0137] 在上述步驟一中，G-4. 0ΡΑΜΑΜ樹枝狀分子與馬來酰亞胺一聚乙二醇一N-羥基琥 珀酰亞胺的摩爾比為G-4. OPAMAM樹枝狀分子：馬來酰亞胺一聚乙二醇一N-羥基琥珀酰亞 胺=1 : (2~44)，優選為1 : (5~40)，更優選為1 : (8~30)，最優選為1 : (10~20)。
[0138] 在上述步驟一中，反應時間并沒有特別地限制，只要反應能夠進行完全即可，特別 地，反應時間為8~60分鐘，優選為12~48分鐘，更優選為14~30分鐘，最優選為15~ 25分鐘。
[0139] 步驟二、向步驟一中的體系中繼續加入單官能團聚乙二醇進行反應。
[0140] 在上述步驟二中，所述單官能團聚乙二醇為甲氧基聚乙二醇-N-羥基琥珀酰亞胺 (mPEG-NHS)，其中，mPEG-NHS 由下式IV所示：
[0141]
[0142] 在上述步驟二中，mPEG-NHS共聚物的分子量為1000~20000,優選為1000~ 15000,更優選為1000~10000,最優選為1000~2000。
[0143] 在上述步驟二中，由式IV所示的結構式中，n2為21~440,優選為21~335,更優 選為21~223,最優選為21~42。
[0144] 在上述步驟二中，mPEG-NHS的添加量使得mPEG-NHS與G-4. OPAMAM樹枝狀分子的 摩爾比為mPEG-NHS :G-4. OPAMAM = (10~55) : 1，選擇上述摩爾比范圍，使得最終得到的水 凝膠因子具有良好的生物相容性以及水溶性。
[0145] 在優選的實施方式中，mPEG-NHS與G-4. OPAMAM樹枝狀分子的摩爾比優選為（25~ 50) :1，更優選為（30~45) :1，最優選為（35~40) :1。
[0146] 在上述步驟二）中，反應時間為15~120分鐘，優選為20~100分鐘，更優選為 20~80分鐘，最優選為25~45分鐘。
[0147] 步驟三、向步驟二中的體系中繼續加入多肽化合物，最終得到包含有基于四代聚 酰胺-胺型樹枝狀分子的水凝膠因子的反應體系。
[0148] 在上述步驟三中，多肽化合物并沒有特別地限制，只要在多肽化合物的鏈末端存 在能與步驟二中已連接在樹枝狀分子上的MAL-PEG-NHS中的基團發生成鍵反應即可。
[0149] 在優選的實施方式中，在上述多肽化合物中存在氨基或是巰基。多肽化合物中的 巰基與MAL-PEG-NHS相連接。
[0150] 在進一步優選的實施方式中，多肽化合物為RGDyC、RAADyC和Fmoc-RGDC中的一種 或種。
[0151] 上述所提及的三種多肽化合物RGDyC、RAADyC和Fmoc-RGDC均可以商購獲得。
[0152] 其中，RGDyC的氨基酸排列為：arg-gly-asp-D-tyr-cys，RAADyC的氨基酸排列為： arg-ala-ala-asp-D-tyr-cys, Fmoc-RGDC ：Fmoc-arg-gly-asp-D-cys, ^ 中Fmoc為芴甲氧羰酰基。
[0153] 在上述步驟三中，多肽化合物的添加量為使得多肽化合物與步驟一中所添加的雙 功能聚乙二醇，即MA