況在第 三天的時候換水、剪去泡在水中的麥梗部；
[0033] 抗病實驗:使用異形注射器，采用單花滴注法將10微升孢子懸浮液注射在麥穗中 部小穗，將接種的小麥放入培養盒中，恒溫25°C，恒濕90%，24小時后將濕度調低至70%，連 續培養，記錄第五天數據；
[0034] 鑒定標準：
[0035] 0級：沒有可見癥狀；
[0036] 1級：1個病小穗；
[0037] 2級：2個病小穗；
[0038] 3級：3個病小穗；
[0039] 4級:大于3個病小穗小于1/4的穗面積；
[0040] 5級:病穗小于1/3的穗面積；
[0041] 6級:小于1/2的穗面積；
[0042] 7級:小于2/3的穗面積，梗部輕微變色；
[0043] 8級:小于3/4的穗面積，局部梗變色；
[0044] 9級:大于3/4的穗面積，擴展性梗變色，穗枯死；
[0045] 由所調查的病級計算各品種每次調查的病情指數，具體公式為：
[0046] 病情指數（％)= Σαχ/ηΤΧΙΟΟ,其中:a為發病級數;X為發病穗數;η為發病最高級 數(9) ;Τ為調查樣本數。
[0047] 其中，麥穗離體培養中麥穗培養盒為自制培養盒，麥穗培養盒具有多層結構，包括 了培養盒盒體1、培養盒盒蓋2、培養室3、可調節間隔網4、恒溫恒濕組件室5、注射器室6、溫 度-濕度感應器7、透氣孔8、控制中心9，培養盒盒體1與培養盒盒蓋2通過鉸鏈連接，培養盒 盒體1中設置有培養室3、恒溫恒濕組件室5和注射器室6,恒溫恒濕組件室5和注射器室6位 于培養室3下方，溫度-濕度感應器7安裝于培養室3內，透氣孔8和控制中安9裝于培養盒盒 蓋2內側。
[0048] 其中，異形注射器注射針內直徑為0.2mm，前口封閉，設置6-8個注射孔在注射針 壁，分布在針壁1.5cm范圍內，注射孔直徑為0.1mm。
[0049] 實施例2
[0050] 實驗目的及方法:評測本發明快速鑒定方法的實用性，具體操作步驟同實施例1相 同，此處不再贅述，試驗樣品數目為10種，其中麥穗選自親本為晉麥47X豫麥18的小麥RIL 群體，分別為RIL 1-10,禾谷鐮刀菌為山東小麥病穗上分離的禾谷鐮刀菌。
[0051 ] 實驗結果:如表1-4所示 [0052] 表1第三天病級及病情指數
[0053]
[0054] 表2第五天病級及病情指數
[0055]
[0056] 表3第七天病級及病情指數
[0057]
[0059]表4第九天病級及病情指數
[0060]
[0061] 針對上述10中小麥品種進行檢測，所得到結果與真實情況相符。
[0062] 以上所述，僅為本發明較佳的【具體實施方式】，但本發明的保護范圍并不局限于此， 任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明揭露的技術范圍內，可輕易想到的變化或替換， 都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于，所述的鑒定方法的具體步驟如下： 禾谷鐮刀菌培養:在25 %roA培養基環境下培養禾谷鐮刀菌7天，切3毫米見方的帶有菌 絲的roA塊7-10塊，放入150mL 2%的綠豆湯培養基，置于搖床以150rpm的速度培養7天，使 其產孢，制作孢子懸浮液，過濾得到孢子，加入無菌水使其濃度達到5xl05個/mL，放4 °C冰箱 保存； 麥穗離體培養:剪小麥麥穗放入培養盒內（含穗長，長度為23-25cm)，培養盒內注水，水 深4-5cm;每5支麥穗放入一個培養盒內間隔網中；共需培養5天，可根據實際情況在第三天 的時候換水、剪去泡在水中的麥梗部； 抗病實驗:使用異形注射器，采用單花滴注法將10微升孢子懸浮液注射在麥穗中部小 穗，將接種的小麥放入培養盒中，恒溫25°C，恒濕90%，24小時后將濕度調低至70%，連續培 養，記錄第五天數據。2. 如權利要求1所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于:所述的麥穗離 體培養中麥穗培養盒為自制培養盒，所述的麥穗培養盒具有多層結構，包括了培養盒盒體、 培養盒盒蓋、培養室、可調節間隔網、恒溫恒濕組件室、注射器室、溫度-濕度感應器、透氣 孔、控制中心，所述的培養盒盒體與培養盒盒蓋通過鉸鏈連接，所述的培養盒盒體中設置有 培養室、恒溫恒濕組件室和注射器室，所述的恒溫恒濕組件室和注射器室位于培養室下方， 所述的溫度-濕度感應器安裝于培養室內，所述的透氣孔和控制中安裝于培養盒盒蓋內側。3. 如權利要求1或2所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于:所述的異 形注射器注射針內直徑為〇 . 2mm，前口封閉，設置6-8個注射孔在注射針壁，分布在針壁 1.5cm范圍內，注射孔直徑為0.1mm。4. 如權利要求3所述的一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，其特征在于:所述的鑒定方 法還包括有鑒定標準，所述的鑒定標準如下： 〇級:沒有可見癥狀； 1級：1個病小穗； 2級:2個病小穗； 3級:3個病小穗； 4級:大于3個病小穗小于1/4的穗面積； 5級:病穗小于1/3的穗面積； 6級:小于1/2的穗面積； 7級:小于2/3的穗面積，梗部輕微變色； 8級:小于3/4的穗面積，局部梗變色； 9級:大于3/4的穗面積，擴展性梗變色，穗枯死； 由所調查的病級計算各品種每次調查的病情指數，具體公式為： 病情指數（％) = Σαχ/ηΤΧ 100,其中：a為發病級數;X為發病穗數;η為發病最高級數 (9) ;Τ為調查樣本數。
【專利摘要】本發明涉及糧食選種育種領域，公開了一種小麥赤霉病安全快速鑒定方法，通過自制麥穗培養盒，通過離體培養觀察，杜絕了田間接種可能會對環境造成的污染；改善了之前田間操作困難的缺點；優化了實驗培養步驟及鑒定標準，僅需第五天的數據記錄，相比以往田間接種經常長達14-21天的記錄周期縮短了鑒定周期，能夠更早確定品種抗病能力。
【IPC分類】C12Q1/18, C12N1/14
【公開號】CN105647816
【申請號】
【發明人】穆平, 常樂, 王春華
【申請人】青島農業大學
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月5日