子液中制成18個/mL的菌懸液；
[0039](2)將(I)中的孢子懸浮液，用移液槍吸取1yL于直徑為Icm的圓形鐵片上，置于以氦氣作為工作氣體，電源功率為110W，工作氣流量10L/min的常壓室溫等離子體誘變系統中，處理距離為2mm，分別處理Os、10s、20s、30s、40s、50s、60s、70s、80s、90s，將處理的菌懸液進行梯度稀釋涂平板，制作致死率曲線；
[0040](3)根據(2)的致死率曲線，選擇30s、50s、70s三個不同致死劑量的照射時間，對菌株Meb 1-012的菌懸液進行等離子體誘變；
[0041 ] (4)將(3)中三個不同處理時間的菌懸液混合于裝有生理鹽水的試管中，混合均勻；
[0042](5)將(4)中的誘變菌懸液，進行梯度稀釋10—llO—6，取10—4、10—5、10—6三個稀釋度的菌懸液，分別涂布于含有淀粉顯色平板上；
[0043](6)將(5)中各個平板上淀粉透明圈大的單菌落轉接斜面后，以1%的接種量，接種于種子培養基中，30 °C，140r/min，培養50h后，以10%的接種量將種子液接種于發酵培養基，30°C，150r/min培養3d；種子培養基組成為:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，氯化鈉0.5%，其余為蒸餾水，pH7.0，121°C高壓蒸汽滅菌20min;所述發酵培養基組成為:可溶性淀粉2 %，麩皮粉I %，蛋白胨0.8 %，磷酸氫二鉀0.5%,磷酸二氫鉀0.5%,硫酸鎂0.2%,硝酸鈉0.5%,吐溫40 0.1%，其余為蒸饋水，pH7.0，121°C高壓蒸汽滅菌20min。
[0044](7)取(6)中的發酵液于離心管中，7000r/min離心lOmin，取離心上清液Iml，加入裝有1ml 2%可溶性淀粉的大號試管中，于50°C的水浴搖床上水浴20min，取酶解液過有機濾膜后，利用高效液相色譜法測定麥芽三糖的產量，通過此方法即篩選出麥芽三糖形成酶酶活高的誘變菌株Metp-57。
[0045]本發明的麥芽三糖形成酶的高產菌株的培養方法，包括以下步驟:
[0046]1、培養基的配制
[0047](I)保藏分離培養基:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，氯化鈉0.5%，其余為蒸餾水，pH7.0，121°C高壓蒸汽滅菌20min;
[0048](2)種子培養基:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，氯化鈉0.5%，其余為蒸餾水，pH7.0，121<€高壓蒸汽滅菌20111；[11;
[0049](3)發酵培養基:可溶性淀粉2 %，麩皮粉I %，蛋白胨0.8 %，磷酸氫二鉀0.5 %，磷酸二氫鉀0.5%,硫酸鎂0.2%,硝酸鈉0.5%,吐溫40 0.1%,其余為蒸餾水，pH7.0，121°C高壓蒸汽滅菌20min。
[0050]2、菌種活化
[0051]將甘油保存的菌種Metp-57轉接至保藏分離培養基斜面，于恒溫培養箱中，30°C培養 15d;
[0052]3、種子培養
[0053]選擇生長良好的活化斜面，接種于裝有上述I中制得的種子培養基中，500mL三角瓶內裝1001^培養基，于30°(:，15(^/11^11，培養5011;
[0054]4、發酵培養
[0055]將上述步驟3中制得的種子液以10%(v/v)接種量接種于發酵培養基中，500mL三角瓶內裝80mL培養基，于30°C，150r/min條件下發酵培養5d。
[0056]檢測結果:蛾微桿菌Microbacterium imperiale Metp-57在發酵培養基上麥芽三糖生成酶的產量為241.32U/mL，比出發菌株Mebl-012的產量116.43U/mL，提高了 107.26%。
[0057]實施例2:
[0058]以蛾微桿菌Mebl-012為出發菌株，采用常壓室溫等離子體誘變技術篩選菌株Metp-57，包括以下步驟:
[0059](I)選擇生長良好的產麥芽三糖形成酶的蛾微桿菌Mebl-012斜面菌株，接種一環到種子液中制成18個/mL的菌懸液；
[0060](2)將(I)中的孢子懸浮液，用移液槍吸取1yL于直徑為Icm的圓形鐵片上，置于以氦氣作為工作氣體，電源功率為110W，工作氣流量10L/min的常壓室溫等離子體誘變系統中，處理距離為2mm，分別處理Os、10s、20s、30s、40s、50s、60s、70s、80s、90s，將處理的菌懸液進行梯度稀釋涂平板，制作致死率曲線；
[0061](3)根據(2)的致死率曲線，選擇10s、40s、80s三個不同致死劑量的照射時間，對菌株Meb 1-012的菌懸液進行等離子體誘變；
[0062](4)將(3)中三個不同處理時間的菌懸液混合于裝有生理鹽水的試管中，混合均勻；
[0063](5)將(4)中的誘變菌懸液，進行梯度稀釋10—llO—6，取10—4、10—5、10—6三個稀釋度的菌懸液，分別涂布于含有淀粉顯色平板上；
[0064](6)將(5)中各個平板上淀粉透明圈大的單菌落轉接斜面后，以1%的接種量，接種于種子培養基中，30°C，150r/min，培養45h后，以10%的接種量將種子液接種于發酵培養基，30°C，150r/min培養2d；種子培養基組成為:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，氯化鈉0.5%，其余為蒸餾水，pH7.2，121°C高壓蒸汽滅菌20min;所述發酵培養基組成為:可溶性淀粉2 %，麩皮粉I %，蛋白胨0.8 %，磷酸氫二鉀0.5%,磷酸二氫鉀0.5%,硫酸鎂0.2%,硝酸鈉0.5%,吐溫40 0.1%，其余為蒸饋水，pH7.2，121°C高壓蒸汽滅菌20min。
[°065] (7)取(6)中的發酵液于離心管中，7000r/min離心lOmin，取離心上清液Iml，加入裝有1ml 2%可溶性淀粉的大號試管中，于50°C的水浴搖床上水浴20min，取酶解液過有機濾膜后，利用高效液相色譜法測定麥芽三糖的產量，通過此方法即篩選出麥芽三糖形成酶酶活高的誘變菌株Metp-57。
[0066]本發明的麥芽三糖形成酶的高產菌株的培養方法，包括以下步驟:
[0067]1、培養基的配制
[0068](I)保藏分離培養基:牛肉膏0.5 %，蛋白胨I %，氯化鈉0.5%,其余為蒸餾水，pH7.2，121°C高壓蒸汽滅菌20min;
[0069](2)種子培養基:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，氯化鈉0.5%，其余為蒸餾水，pH7.2，121<€高壓蒸汽滅菌20111；[11;
[0070](3)發酵培養基:可溶性淀粉2 %，麩皮粉I %，蛋白胨0.8 %，磷酸氫二鉀0.5 %，磷酸二氫鉀0.5%,硫酸鎂0.2%,硝酸鈉0.5%,吐溫40 0.1%,其余為蒸餾水，pH7.2，121°C高壓蒸汽滅菌20min。
[0071]2、菌種活化
[0072]將甘油保存的菌種Metp-57轉接至保藏分離培養基斜面，于恒溫培養箱中，30°C培養7d;
[0073]3、種子培養
[0074]選擇生長良好的活化斜面，接種于裝有上述I中制得的種子培養基中，500mL三角瓶內裝10mL培養基，于30 °C，150r/min，培養45h ；
[0075]4、發酵培養
[0076]將上述步驟3中制得的種子液以10%(v/v)接種量接種于發酵培養基中，500mL三角瓶內裝80mL培養基，于30°C，150r/min條件下發酵培養3d。
[0077]檢測結果:蛾微桿菌Microbacterium imperiale Metp-57在發酵培養基上麥芽三糖生成酶的產量為238.49U/mL，比出發菌株Mebl-012的產量116.43U/mL，提高了 104.84%。
[0078]實施例3:
[0079]以蛾微桿菌Mebl-012為出發菌株，采用常壓室溫等離子體誘變技術篩選菌株Metp-57，包括以下步驟:
[0080](I)選擇生長良好的產麥芽三糖形成酶的蛾微桿菌Mebl-012斜面菌株，接種一環到種子液中制成18個/mL的菌懸液；
[0081](2)將(I)中的孢子懸浮液，用移液槍吸取1yL于直徑為Icm的圓形鐵片上，置于以氦氣作為工作氣體，電源功率為110W，工作氣流量lOL/min的常壓室溫等離子體誘變系統中，處理距離為2mm，分別處理Os、10s、20s、30s、40s、50s、60s、70s、80s、90s，將處理的