狀態;植物乳桿菌CGMCC No. 11763降解亞硝酸 鹽速度快，分解能力達到10.9mg/h/kg，該菌種在生產泡菜時，整個發酵過程中亞硝酸鹽濃 度在4.8mg/kg以下；CGMCC No. 11763在發酵60h小時后，對膽固醇降解率可達到64.76%。 CGMCC No · 11763黏附能力測定的自凝集率為95 · 71 %。
[0028] CGMCC No. 11763菌株對膽固醇降解能力研究和測定：
[0029] 取lml CGMCC No. 11763母液接種于10mL的MRS膽固醇液體培養基（膽固醇含量 0. 1mg/ml，pH 6.2)中，37°C的恒溫靜置分別培養20h、40h、60h備用，以接入lmL無菌水的MRS 膽固醇培養基為對照，取以上培養不同時間的菌液樣品及對照液各lml，9000r/min，4°C下 離心10min，得到發酵上清液，鄰苯二甲醛法測定上清液中膽固醇含量(具體為:取各上清液 0 . lml于相應的試管中，加冰醋酸0.3ml，lmg/ml的鄰苯二甲醛0.15ml，緩緩加入濃硫酸 1. 〇ml，混合均勻。室溫靜置10min，于550nm下測吸光值）。每一處理3個重復，以同樣方法制 作膽固醇標準曲線，計算上清液中膽固醇含量及降解率，結果見表1。可知，CGMCC No. 11763 對膽固醇有很好的降解作用，在發酵60h小時后，降解率可達到64.76%。
[0030] 表1對膽固醇的降解情況
[0031]
[0032] CGMCC No .11763菌株的耐膽鹽試驗：
[0033] 取CGMCC No. 11763菌液lmL接種菌種于含有不同膽鹽(含量梯度為0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液體培養基(？!1=6.4)，置于37°(：下分別培養0、2、411， 每個處理3個重復。各取lml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋度溶液，取0.1ml稀釋 液于MRS中涂布，于37°C生化培養箱中倒置培養48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄計算平 板上的菌數個數。結果見表2。可知該菌在膽鹽濃度為1 %處理4h后菌的生長量依然達到 0· 59±0·92 X 107(cfu/ml)，有很好的耐膽鹽能力。
[0034] 表2耐膽鹽能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0035]
[0036] 0611〇：如.11763菌株的耐酸試驗
[0037] 取CGMCC如.11763母液按11111接種菌種于不同？!1值(？!1梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、 3.5、4.0)的10mL MRS液體培養基，置于37 °C下分別培養0、2、4h，每一處理3個重復。各取lml 樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋溶液，取0.1ml稀釋液于MRS中涂布，于37°C生化 培養箱中倒置培養48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄平板上的菌落個數。結果見表3。說 明該菌具有很強的耐酸能力。
[0038]表3耐酸能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0039]
[0040] CGMCC No .11763菌株的黏附能力測定
[0041 ] 培養CGMCC No.ll763(MRS液體培養基）、大腸桿菌DH 5a(LB液體培養基）24h得發 酵液，分別置于3000r/min、4°C下離心10min，收集菌泥，分別用pH= 7.0的無菌磷酸鹽緩沖 液(PBS)洗滌菌泥2次（即在菌落中加入roS，震蕩混合均勻后，置于3000r/min、4°C下離心 lOmin，收集菌體）。自凝集率（％ ):用無菌的roS將菌泥CGMCC No. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為0.4 ±0.1 (A 0)的懸浮菌液及菌懸液，靜置24h后測定吸光值A 24,自凝集率 (%)公式為(A 0-A 24)/A 0。；他凝集率（％):將CGMCC如.11763和大腸桿菌0耶€[的懸菌 液調節成在波長600nm處的吸光值為0.6±0.1 (A 0)的混合懸浮菌液。靜置24H后測定吸光 值八24，他凝集率（％)公式為以0-4 24)/^0。測定結果見表5，可知0610^0.11763的自 凝集率為95.71 %，有很強的黏附能力。
[0042]表4黏附能力表
[0043]
[0045] 菌株生理特性
[0046] 所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏編號為CGMCC No. 11763,保藏 地址為：中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101。
[0047] 該菌株特點如下:在顯微鏡下觀察，該菌株為短桿狀，革蘭氏染色呈陽性，無鞭毛， 不產芽孢;在固體培養基上，該菌菌落為白色，表面光滑，致密，形態為圓形，邊緣較整齊。
[0048] 理化特征為:過氧化氫酶(-)，明膠液化(-)，吲哚實驗( + )，運動性(-)，發酵產氣 (-)，亞硝酸鹽還原(-)，發酵產氣(-)，產硫化氫氣體(_)，pH4.0MRS培養基中生長(+ )。經過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)，命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0049] 該菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0050] 本發明植物乳桿菌由采集人李建樹，從新疆維吾爾族老鄉家中酸奶中分離得到， 采集時間2015年6月2日。
[0051 ] 5L發酵罐試驗
[0052] (1)取斜面上的植物乳桿菌CGMCC No. 11763-環，接入裝有50mL培養基MRS(無瓊 脂）（葡萄糖濃度為150g/L)培養基的250mL三角瓶中，200rpm，37°C培養12h左右，使菌體處 于對數生長中期。
[0053] (2)將對數期的菌種接入裝有3L MRS液體培養基(初始葡萄糖為150g/L)的5L發酵 罐中。接種量為10%，37°(：下100印111培養8小時，對數前期溶氧控制10%(通氣0.5171^11)，后 期厭氧培養63小時。發酵結束后，植物乳桿菌CGMCC No. 11763的乳酸產量達到110g/L。這樣 的產乳酸速率利于泡菜的快速發酵。
[0054] (4)將對數期的菌種接入裝有3L亞硝酸鈉液體篩選培養基（單一氮源為2g/L亞硝 酸鈉的改性MRS篩選培養基）的5L發酵罐中。接種量為10 %，37°C下lOOrprn培養8小時，對數 前期溶氧控制10% (通氣〇.5L/min)，后期厭氧，發酵過程根據亞硝酸鹽的消耗速率流加 20g/L的亞硝酸鈉溶液，培養2-3天。發酵結束后，計算發酵過程植物乳桿菌CGMCC No. 11763 對亞硝酸鈉的降解速率。結果發現:在該條件下，XH對亞硝酸鈉的降解速率可以達到653mg/ h/L〇
[0055] (5)將對數期的菌種10mL接入裝有2kg預處理過的白菜中，按照傳統泡菜方法進行 加工，每12小時測定泡菜中的亞硝酸鹽含量。結果發現，在整個發酵過程中，XH菌對亞硝酸 鈉的分解速率為10.9mg/h/kg白菜。泡菜中的亞硝酸鈉含量始終低于4.8mg/kg，遠低于國家 標準GB2714-2003中規定的含量(20mg/kg)。
[0056] 醋酸桿菌、鼠李糖乳桿菌，釀酒酵母菌、腸膜明串珠菌選擇市場常見菌粉或購自商 業菌種保藏機構。
[0057]泡菜發酵用復合菌劑的使用方法如下:在泡菜生產中按照10~1000克/噸菜品的 比例加入，按照泡菜生產工藝進行生產。
[0058]本發明中干燥設備最好采用真空冷凍干燥設備，真空冷凍干燥設備可以較其他設 備使菌劑中活菌數量多。
[0059]有益效果