專利名稱：中藥青葙殺蟲活性物質的提取方法及應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種植物活性成分的提取方法及應用，特別涉及一種中藥青葙殺蟲活 性物質的提取方法及應用。
背景技術：
20世紀50年代開始，大量使用有機合成殺蟲劑，對害蟲防治起重大作用。然而， 長期大量使用化學殺蟲劑會帶來種種弊端，抗藥性的產生、毒性殘留以及環境污染等已成 為危及人類健康、生態平衡和社會發展的危險因素。與化學殺蟲劑相比，植物源殺蟲劑對人 和動物的毒性低、對生態環境的影響小，具有很大的開發價值和應用前景。從植物中篩選和 發現新的殺蟲活性物質，進而開發出具有一定作用特點的植物源農藥是新農藥開發研究的 一個重要方面。據《本草綱目》記載，中藥植物百部、藜蘆、狼毒、苦參等都有很好的殺蟲作 用。近年來研究較多的殺蟲植物印楝、苦皮藤、黃杜鵑、菖蒲、雷公藤等展現出了良好的應用 價值，從植物中尋找殺蟲活性物質，是開發、研制新型殺蟲劑的熱點之一。青葙(Celosia argentea)是莧科(Amaranthcea) —年生草本植物，分布遍及全 國，生于田野、路旁和荒地，為旱地常見雜草，也是一種著名的中草藥。目前國內外對其研究 主要集中在醫藥方面。青葙具有很強的抗菌消炎作用，對青葙子的研究發現，其種子含有 豐富的脂肪油、不飽和脂肪酸和礦物質，已經從青葙子水提液中分離出來的一種酸性多糖 Celosian,該物質具有保肝作用，可抑制ALT活性的升高，可能是一種治療急性肝炎，保護 肝細胞的有效物質，另外研究還發現青葙子水提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠具有降血糖作 用，青葙子乙醇提取物具有抗糖尿病活性，然而目前對其在農林病蟲害防治方面的作用很 少研究。不同植物體內所含有的活性物質存在很大的差異，即便是存在的同一種物質，其 含量也有所不同，這就造成了它們在提取方法上會多有不同。對植物活性物質的提取工藝 中，提取效能的高低通常與提取溶劑的種類、溶劑的比例、提取時間、提取溫度等因素有關。 不同的提取溶劑、不同的提取設備以及不同的提取時間等，都會造成所提取的活性物質的 種類差異和提取量的差異。
發明內容
本發明的目的是提供一種中藥青葙殺蟲活性物質的提取方法，所得青葙活性物質 提取物用于農業害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污染、無殘留的特點，具有良好 的社會效益和生態效益。本發明的另一目的是提供一種青葙殺蟲活性物質提取物在農業害蟲防治上的應用。本發明所采用的技術方案一種中藥青葙殺蟲活性物質的提取方法，其具體步驟如下1、采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內陰干，于45 55°C烘干至恒重
3后冷卻，粉碎得到青葙粉末。所述青葙全部植物組織是指根、莖、葉、花、種子。2、將青葙粉末與甲醇按體積比為1 5 10的比例混合，反復提取12小時以上， 得到青葙提取液；將青葙提取液進行減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物。3、將青葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 = 1 3 10的重量比例 與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物。4、將青葙粗提物_硅藻土混合物經正己烷萃取后再進行乙醚萃取，收集乙醚萃取 相并減壓濃縮至相對密度為0. 25 lg/cm3，得到青葙殺蟲活性物質提取物。青葙殺蟲活性物質提取物可直接用于植物害蟲的防治，或按體積比1 500 1000的比例加入表面活性劑和蒸餾水，使青葙活性物質提取物溶解，定容后即可作為原藥 液，然后于4°C低溫避光保存。本發明的另一目的是提供一種青葙殺蟲活性物質提取物的應用，該提取物在防 治農業害蟲藥物中的應用。所述農業害蟲為紅脈穗螟(Tirathaba rufivena Walker)、三 藥模榔扁蟲牙(Astegopteryxxinglongensis Zhang)、螺方寵粉風(Aleurodicus dispersus Russell) ^Hl^l^^pygi^ (Cerataphis lataniae Boisduval)。本發明工藝簡單，通過對青葙進行化學提取，有效地保留中藥青葙的殺蟲活性物 質，所得青葙殺蟲活性物質提取物用于農業害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污 染、無殘留的特點，具有良好的社會效益和生態效益。
具體實施例方式下面用實施例對本發明作進一步說明。實施例一1、中藥青葙殺蟲活性物質的提取采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內陰干后放入鼓風式烘干箱內45°C， 烘干24小時，冷卻、粉碎得到青葙粉末；稱取青葙粉末2kg置于索氏提取器中，按體積比為 1 8的比例加入有機溶劑甲醇，溫度65°C反復提取18小時以上，得到青葙提取液；將青葙 提取液移至旋轉蒸發儀上，45°C減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；將青葙 粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 =1 5的重量比例與硅藻土混合均勻，揮干 溶劑甲醇，得到青葙粗提物_硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經正己烷萃取后 再進行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對密度為0. 5g/cm3，得到青葙殺蟲活性 物質提取物。2、青葙殺蟲活性物質提取物對紅脈穗螟生物活性測定將青葙殺蟲活性物質提取物按體積比1 700的比例加入表面活性劑和蒸餾水得 到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效物質50倍、100倍、200倍、500倍和1000倍，用噴 霧法處理紅脈穗螟3齡幼蟲，置于養蟲盒中正常飼養，飼以正常檳榔花穗，并放脫脂棉球保 濕，飼養條件為溫度26°C，相對濕度80%。每處理用蟲50頭，重復3次，藥后12小時、24 小時、48小時、72小時、100小時檢查死亡率，并計算校正死亡率。結果列表如下。表1中藥青葙殺蟲活性物質對紅脈穗螟的殺蟲效果
3、青葙殺蟲活性物質提取物對螺旋粉虱生物活性測定采用浸漬法進行測定。將青葙殺蟲活性物質提取物按體積比1 600的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍。取田間采集的新鮮印度紫檀感蟲葉片，剔除成蟲及其他齡若蟲，僅留 取3齡若蟲供試，放在藥液中浸泡5s后取出，置于室內自然晾干后放入培養皿中培養，用濕 棉球包住葉柄保濕，以蒸餾水處理的葉片作為對照，用保鮮膜為培養皿封口，并在保鮮膜上 扎若干個小孔以利于透氣，處理后24小時、36小時、48小時、60小時、72小時后在雙目顯微 鏡下檢查螺旋粉虱若蟲死亡情況，用解剖針將蟲體翻轉，輕輕觸動蟲體及觸角，完全不動者 為死亡。每個處理重復3次，每重復至少50頭。結果列表如下。表2中藥青葙殺蟲活性物質對螺旋粉虱的殺蟲效果 實施例二1、中藥青葙殺蟲活性物質的提取采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內陰干后放入鼓風式烘干箱內50°C， 烘干18小時，冷卻、粉碎得到青葙粉末；稱取青葙粉末2kg置于索氏提取器中，按體積比為 1 10的比例加入有機溶劑甲醇，溫度65°C反復提取18小時以上，得到青葙提取液；將青 葙提取液移至旋轉蒸發儀上，50°C減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；將青 葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物硅藻土 = 1 8的重量比例與硅藻土混合均勻，揮 干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經正己烷萃取后再進行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對密度為0. 75g/cm3，得到青葙殺蟲活 性物質提取物。2、青葙殺蟲活性物質提取物對三藥檳榔扁蚜生物活性測定采用浸漬法進行測定。將青葙殺蟲活性物質提取物按體積比1 800的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍，對照為蒸餾水。將田間采回的染蟲檳榔花絮，用小毛筆挑去花絮上其 它蚜蟲、剔除若蚜，保留個體一致，健康活潑的無翅成蚜浸入上述溶液中，5s后取出，吸干多 余的藥液，調查蚜蟲基數，然后將枝條插到帶水的玻璃瓶中，每日定時換水，24小時、36小 時、48小時、60小時、72小時在雙目顯微鏡下檢查枝條上的活蚜蟲數。正常爬行的為活蟲， 其它個體(不能爬行、仰翻或完全死亡等)屬于死蟲。每處理用蟲50頭，重復3次。結果 列表如下。表3中藥青葙殺蟲活性物質對三藥檳榔扁蚜的殺蟲效果 3、青葙殺蟲活性物質提取物對三藥檳榔堅蚜生物活性測定采用浸漬法進行測定。將青葙殺蟲活性物質提取物按體積比1 900的比例加 入表面活性劑和蒸餾水得到原藥液，將原藥液用蒸餾水稀釋成有效成分200倍、400倍、800 倍、1600倍和3200倍，對照為蒸餾水。將田間采回的染蟲葉片，用小毛筆挑去葉片上其它有 害生物、剔除若蚜，保留個體一致，健康活潑的無翅成蚜浸入上述溶液中，5s后取出，吸干多 余的藥液，調查蚜蟲基數，然后將其置于養蟲盒中，保濕培養，于處理后24小時、36小時、48 小時、60小時、72小時在雙目顯微鏡下檢查枝條上的活蚜蟲數。正常爬行的為活蟲，其它個 體(不能爬行、仰翻或完全死亡等)屬于死蟲。每處理用蟲50頭，重復3次。結果列表如 下。表4中藥青葙殺蟲活性物質對三藥檳榔堅蚜的殺蟲效果
權利要求
一種中藥青葙殺蟲活性物質的提取方法，其特征在于，其具體步驟如下1)、采集青葙全部植物組織，用清水洗凈，置于室內陰干，于45～55℃烘干至恒重后冷卻，粉碎得到青葙粉末；所述青葙全部植物組織是指根、莖、葉、花、種子；2)、將青葙粉末與甲醇按體積比為1∶5～10的比例混合，反復提取12小時以上，得到青葙提取液；將青葙提取液進行減壓濃縮至提取液變成粘稠膏狀，即為青葙粗提物；3)、將青葙粗提物用甲醇溶解后，按青葙粗提物∶硅藻土＝1∶3～10的重量比例與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物 硅藻土混合物；4)、將青葙粗提物 硅藻土混合物經正己烷萃取后再進行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮至相對密度為0.25～1g/cm3，得到青葙殺蟲活性物質提取物。
2.—種權利要求1所述的提取方法得到的青葙殺蟲活性物質提取物，其特征在于該提 取物在防治農業害蟲藥物中的應用；所述農業害蟲為紅脈穗螟、三藥檳榔扁蚜、螺旋粉虱和 三藥檳榔堅蚜。
全文摘要
本發明涉及一種中藥青葙殺蟲活性物質的提取方法及應用，是將青葙全部植物組織經洗凈、烘干、冷卻、粉碎得到青葙粉末；用甲醇進行提取得到青葙提取液；將青葙提取液減壓濃縮至粘稠膏狀得到青葙粗提物；將青葙粗提物用甲醇溶解后，與硅藻土混合均勻，揮干溶劑甲醇，得到青葙粗提物-硅藻土混合物；將青葙粗提物-硅藻土混合物經正己烷萃取后再進行乙醚萃取，收集乙醚萃取相并減壓濃縮得到青葙殺蟲活性物質提取物。本發明工藝簡單，通過對青葙進行化學提取，有效地保留中藥青葙的殺蟲活性物質，所得提取物用于農業害蟲防治具有防治效果好、防治成本低、無污染、無殘留等特點，具有良好的社會效益和生態效益。
文檔編號A01P7/04GK101919416SQ20101026474
公開日2010年12月22日 申請日期2010年8月17日 優先權日2010年8月17日
發明者呂朝軍, 孫曉東, 李朝緒, 李洪, 覃偉權, 鐘寶珠, 馬子龍 申請人:中國熱帶農業科學院椰子研究所