專利名稱：一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法
技術領域：
本發明涉及一種植物組培種苗工廠化生產方法，特別是一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法。
背景技術：
廣豆根，也稱山豆根、南豆根，為豆科植物越南槐(Sophora tonkinensisGapnep.)的干燥根及根莖，分布于我國南部，以廣西產量最大。具有清火解毒、消腫止痛等 功效，可以治療喉癰、喉風、喉痹、牙齦腫痛、喘滿熱咳、肝炎、便秘、黃疸、下痢、痔疾、禿瘡、疥癬及蚊、蟲、犬咬傷等。醫藥工業用廣豆根作為原料，大量研制開發治療肝炎的針劑、咽喉腫痛的片劑以及抗腫瘤的中成藥。廣豆根地域分布范圍相當有限，且常零星生長于石山巖縫之中，隨著市場需求量的不斷增加，野生廣豆根資源瀕臨枯竭。在自然條件下，廣豆根主要依靠種子進行繁育，但在開花結莢期廣豆根的病蟲害嚴重，且種子成熟時自然脫落的特性常造成種子產量低，生產上難以實現大面積栽培。采用生物技術組織培養技術，是最為快速有效地生產廣豆根種苗的途徑，但目前廣豆根的組織培養體系存在周期長、種苗質量偏低、成活率不高等問題，通過本發明的生產工藝，可以大大縮短生產周期，減低生產成本，提高種苗質量，從而提高種苗成活率及藥材產量。
發明內容
本發明的目的是提供一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，它能夠縮短生產周期，降低生產成本,提高種苗質量,從而提高種苗成活率及藥材產量。本發明通過以下技術方案達到上述目的一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，該方法的具體步驟和操作條件為
(I)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+1. (Tl. 5mg/L BA+ 0. 3mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA +0. 2^0. 5mg/L NAA，繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成I. 5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23^27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天，然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度400(T50001uX。獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條。(2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2. Omg/LNAA+ 0. 2mg/LIBA +0. 2mg/LABT，生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株，其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為 85 90%。(3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出生根苗，洗凈根部殘留培養基，于陰天傍晚移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相對濕度為9(T95%，溫度25 30° C，遮光度6(T75%，加蓋兩層黑色遮陽網，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5 ;或移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90 95%，溫度25 30° C，遮光度60 75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5。其中，MS為MS基本培養基，BA為6_芐基腺嘌呤，IAA為吲哚乙酸，NAA為萘乙酸，KT為激動素，IBA為吲哚丁酸，ABT為生根粉。本發明的突出優點在于
(I)通過生物技術對廣豆根進行組織培養快速繁殖，在短時間內培育出大量可供大田栽培的廣豆根幼苗，顯著提高了廣豆根種苗的繁殖系數和種苗質量，實現規模化生產，滿足生產上的需要。(2)通過繁殖復壯一體化培養、生根煉苗同步化培養兩步培養法進行廣豆根組培苗的工廠化生產，縮短了培養時間，減少培養步驟，降低了培養成本，提高了廣豆根組培種苗的生產效率。(3)在繁殖復壯一體化培養基上培養獲得的無菌枝條健康粗壯、無玻璃化現象，展葉良好，木質化程度較高，接種到生根培養基上生根情況良好，生根率在96%以上，移栽育苗大棚后成活率在98%以上。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明的技術方案進一步說明。實施例I
一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，包括以下步驟
(I)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+1. Omg/L BA+ 0. 3mg/L KT+
0.3mg/L IAA +0. 2mg/L NAA。繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成
1.5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，使其能夠充分吸收培養基中的營養。接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天。然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度400(T50001uX。獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條。(2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2. Omg/L NAA+ 0. 2mg/LIBA +0. 2mg/L ABT。生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株。其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為85 90%。(3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出20瓶生根苗，每瓶15株,共300株,洗凈根部殘留培養基后統計生根植株為292株,生根率為
97.3%。于陰天傍晚將292株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90、5%，溫度25 30° C，遮光度6(T75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5。30天后統計成活植株為288株，成活率為98. 6%o
實施例2
一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，包括以下步驟
(I)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+1. 5mg/L BA+ 0.3 mg/LKT+0. 3mg/L IAA +0. 4mg/L NAA。繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成I. 5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，使其能夠充分吸收培養基中的營養。接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天。然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度400(T50001uX，獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條。(2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2. Omg/L NAA+ 0. 2mg/LIBA +0. 2mg/L ABT。生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株。其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為85 90%。(3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出20瓶生根苗，每瓶15株,共300株,洗凈根部殘留培養基后統計生根植株為295株,生根率為
98.3%。于陰天傍晚將295株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90、5%，溫度25 30° C，遮光度6(T75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5。30天后統計成活植株為293株，成活率為99. 3%o實施例3
一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，包括以下步驟
(I)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+1. 5mg/LBA+ 0.3 mg/L KT+
0.3mg/L IAA +0. 5mg/L NAA。繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成
1.5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，使其能夠充分吸收培養基中的營養。接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天。然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度400(T50001uX，獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條。
(2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2. Omg/L NAA+ 0. 2mg/LIBA +0. 2mg/L ABT。生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株。其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為85 90%。(3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出20瓶生根苗，每瓶15株,共300株,洗凈根部殘留培養基后統計生根植株為296株,生根率為 98.6%。于陰天傍晚將296株生根苗移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90、5%，溫度25 30° C，遮光度6(T75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5。30天后統計成活植株為290株，成活率為98. 0%。實施例4
一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，包括以下步驟
(I)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+1. 2mg/LBA+ 0.3 mg/L KT+
0.3mg/L IAA +0. 4mg/LNAA。繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成I. 5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，使其能夠充分吸收培養基中的營養。接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天。然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度約為400(T50001uX，獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條。(2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2. Omg/LNAA+ 0. 2mg/LIBA +0. 2mg/LABT。生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株。其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為85 90%。(3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出20瓶生根苗，每瓶15株,共300株，洗凈根部殘留培養基后統計生根植株為290株，生根率為96. 7%。將290株生根植株于陰天傍晚移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90、5%，溫度25 30° C，遮光度60 75%，基質為沙子泥土有機肥=20:75:5。30天后統計成活植株為286株，成活率為98. 6%。
權利要求
1. 一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，其特征在于該方法的具體步驟和操作條件為 (1)繁殖復壯一體化培養繁殖復壯一體化培養基為MS+l.(Tl.5mg/LBA+ 0.3 mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA +0. 2^0. 5mg/L NAA，繁殖復壯一體化培養方法為將廣豆根種子消毒后接種到MS+1. 5mg/L BA+0. 3mg/L KT+ 0. 3mg/L IAA繁殖培養基上培養獲得叢生芽，將叢生芽切割成I. 5^2. 5cm的帶芽莖段，平鋪在繁殖復壯一體化固體培養基面上，再用鑷子將莖段的1/2壓入到培養基內，接種完畢后轉入培養室內培養15天，培養條件為培養溫度23^27° C，光照強度15001uX，光照時間為8小時/天，然后再轉入散射自然光照下培養15天，培養溫度25 28° C，光照強度400(T50001uX，獲得葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條， (2)生根煉苗同步化培養生根煉苗同步化培養基為MS+2.Omg/L NAA+0. 2mg/L IBA +0. 2mg/L ABT，生根煉苗同步化培養方法為將繁殖復壯一體化培養獲得的葉片展開、木質化程度較高的健壯枝條剪下，接種到生根煉苗同步化培養基中，在室內培養7天，新根開始萌發后轉入玻璃大棚，進行生根煉苗同步化培養25天，獲得根系發達，適宜移栽的完整植株，其中室內培養條件為培養溫度23 27° C，光照強度15001UX，光照時間為10小時/天；大棚培養條件為溫度23 30° C，光照為自然光，大棚上部覆蓋一層遮陽網，遮光度為15 30%，相對濕度為85 90%， (3)生根苗的移栽在大棚形成完整的植株后，將生根苗的瓶蓋打開，取出生根苗，洗凈根部殘留培養基，于陰天傍晚移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相對濕度為90、5%，溫度25 30° C，遮光度6(T75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5 ;或移栽至育苗大棚，大棚內濕度為90 95%，溫度25 30° C，遮光度60 75%，基質為沙子泥土 有機肥=20:75:5。
全文摘要
一種廣豆根組培種苗工廠化生產方法，包括如下步驟廣豆根組培種苗繁殖復壯、生根馴化以及移栽步驟。采用本發明能夠在短時間內提供大量優質的、適宜山區栽培、移栽成活率達98%以上的廣豆根組培種苗，以滿足生產上的需要。
文檔編號A01H4/00GK102715090SQ20121023879
公開日2012年10月10日 申請日期2012年7月11日 優先權日2012年7月11日
發明者李林軒, 繆劍華, 韋坤華, 韋范 申請人:廣西壯族自治區藥用植物園