肉蓯蓉高效寄生的方法與流程

本發明屬于藥用植物領域，具體涉及一種肉蓯蓉高效寄生的方法。

背景技術：

肉蓯蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)為列當科肉蓯蓉屬(Cistanche)的多年生根寄生植物，其寄主為藜科植物梭梭(Haloxylon ammodendron)，是我國西北荒漠半荒漠地區珍貴的植物資源，為國家二級保護植物，被列入《中國植物紅皮書》。它具有補腎陽、益精血、潤燥通腸等功效，是使用頻率最高的補腎中藥。

自然條件下肉蓯蓉的寄生率很低。這是導致其野生資源日漸稀少的主要原因之一，也是阻礙其人工種植發展的關鍵因素之一。目前，提高肉蓯蓉寄生率的方法主要有：(1)開溝撒種法：即利用機械或人工的方法，在梭梭根系附近開溝，然后將肉蓯蓉種子播種于溝內；(2)破皮法：選擇梭梭直徑0.4cm以上的毛根，劃破其韌皮部，將肉蓯蓉種子沾附在韌皮劃破處；(3)營養誘導法：將營養誘導物質和粘土拌勻，制做成接種盤，將肉蓯蓉種子撒在接種盤上，然后置于梭梭根系分布密集處；(4)專利《一種肉蓯蓉接種方法》(申請號為：201410247325.X)公開了一種肉蓯蓉接種方法，主要是將種子涂布于營養板上，然后將營養板置于寄主根部或者與寄主一起種植；(5)專利《一種盆栽接種肉蓯蓉的方法》(申請號為：201110038872.3)公開了一種盆栽接種肉蓯蓉的方法，主要是利用塑料營養缽，將肉蓯蓉種子、梭梭種子同時種植在營養缽中。以上這些方法操作復雜、耗費大量人力物力、成本較高，而且肉蓯蓉寄生率也不夠理想。因此，需要找到一種操作簡單、成本較低、寄生率較高的寄生方法。

技術實現要素：

本發明目的是提供一種肉蓯蓉高效寄生的方法，本方法在適宜的培養條件下，利用化學物質氟草敏[化學名稱為1-(3-三氟甲基苯基)-4-甲氨基-5-氯-6-噠嗪酮]處理肉蓯蓉種子，然后將肉蓯蓉種子涂布于玻璃纖維濾紙上，再將玻璃纖維濾紙包裹于梭梭根部，促進其寄生。用此方法可有效提高肉蓯蓉的寄生率，適宜于肉蓯蓉人工種植過程中的寄生處理。

實現本發明的方案是：

肉蓯蓉高效寄生的方法，包括如下步驟：

(1)寄主梭梭的選擇：選取1年生梭梭植株，株高20～50cm，直徑0.2～0.5cm，假植于沙土中備用。

(2)肉蓯蓉種子消毒處理：將大小為0.4～0.8mm的肉蓯蓉種子用20～25℃的蒸餾水浸泡12～24小時，再用0.1％次氯酸鈉消毒10～15分鐘，然后用無菌水清洗3～5次。

(3)氟草敏處理：將90mm的玻璃纖維濾紙鋪在90mm無菌玻璃培養皿中，再將經過步驟(1)處理后肉蓯蓉種子放在皿中，用1×10^-5mol·L^-1濃度的氟草敏水溶液對種子進行浸泡處理，置于溫度為24℃、濕度80％、無光照條件下處理48小時。

(4)梭梭根修剪：將經過步驟(1)處理后梭梭用枝剪斷其主根，使主根長為10～15cm。然后將梭梭植株根部在自來水中浸泡10～30分鐘。

(5)寄生接種：將經過步驟(2)處理后肉蓯蓉種子(30～50粒)用毛筆涂布在寬6～8cm、長10～12cm的玻璃纖維濾紙上，再將玻璃纖維濾紙包裹于經步驟(4)處理的梭梭根部，并使肉蓯蓉種子與梭梭根緊密接觸。

(6)寄生培養：選擇直徑20～30cm，高25～30cm，帶底的PVC材質的控根器作為寄生培養容器。先向控根器中加入1/3體積的細質沙土，再將經(5)處理后的梭梭栽種在沙土中，然后填滿沙土，澆水并將沙土壓實。

(7)水分管理：栽種后每隔10～15天用微噴帶澆水1次。

上述步驟(2)中所述的大小為0.4～0.8mm的種子，可以通過將肉蓯蓉種子先過篩孔直徑為0.8mm種子篩，然后將所得的種子過篩孔直徑為0.4mm的種子篩而得到。

上述步驟(3)中氟草敏水溶液可通過將3.037mg的氟草敏溶于1L無菌水中，得到濃度為1×10^-5mol·L^-1的溶液。

上述步驟(6)中細質沙土可通過將沙土過篩孔直徑為0.15mm的泥沙篩而得到。

本發明的優點和有益效果為：(1)操作簡單、節省物力人力；(2)寄生率高，可達90％；(3)縮短寄生所需時間；(4)適宜于肉蓯蓉人工栽培種植的寄生處理。

附圖說明

圖1是寄生培養4個月后寄主梭梭生長情況圖；圖2是寄生培養4個月后肉蓯蓉寄生生長圖。

具體實施方式

實施例1

本試驗2014年在寧夏農林科學院農業生物技術研究中心實驗基地進行，包括以下步驟：

(1)寄主梭梭的選擇：2014年3月21日從內蒙古阿拉善左旗蘇海圖肉蓯蓉鎖陽專業合作社購買1年生梭梭植株，株高20～50cm，直徑0.2～0.5cm，假植于寧夏農林科學院農業生物技術研究中心實驗基地沙土中。

(2)肉蓯蓉種子消毒處理：2014年4月18日取4℃低溫保存的2011年采自于內蒙古阿拉善左旗蘇海圖人工種植的肉蓯蓉種子，將種子先通過篩孔直徑為0.8mm種子篩，然后將所得的種子再通過篩孔直徑為0.4mm的種子篩。取所得到的種子10g用25℃的蒸餾水浸泡12小 時。蒸餾水浸泡后的種子用0.1％次氯酸鈉消毒15分鐘，然后用無菌水清洗5次。

(3)氟草敏處理：2014年4月19日取消毒處理的肉蓯蓉種子，放在鋪有90mm玻璃纖維濾紙90mm的無菌玻璃培養皿中，每皿放入1g肉蓯蓉種子，再向皿中分別加入1×10^-5的氟草敏水溶液5mL，對肉蓯蓉種子進行浸泡處理，置于溫度為24℃、濕度80％、無光照條件下處理48小時。

(4)梭梭根修剪：2014年4月22日將經過步驟(1)處理后梭梭用枝剪斷其主根，使主根長為10～15cm，然后將梭梭植株根部在自來水中浸泡15分鐘。

(5)寄生接種：將經過步驟(2)處理后肉蓯蓉種子(30～50粒)用毛筆涂布在寬7cm、長10cm的玻璃纖維濾紙上。再將玻璃纖維濾紙包裹于經步驟(4)梭梭根部，并使肉蓯蓉種子與梭梭根緊密接觸。

(6)寄生培養：選取直徑20cm，高30cm，帶底的PVC材質的控根器作為寄生培養容器。先向控根器中加入1/3體積的細質沙土，再將經(5)處理后的梭梭栽種在沙土中，然后填滿沙土，澆水并將沙土壓實。

(7)水分管理：栽種后每隔14天用微噴帶澆水1次。

試驗結果：寄生培養4個月后，梭梭植株株高達到75～100cm，肉蓯蓉寄生率達90％，最大肉蓯蓉個體鮮重達到16.5g。