專利名稱：一種飼用蛋白粉及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種動物飼料原料，特別是涉及一種含有特定大腸桿菌卵黃抗體的飼用蛋白粉。本發明還涉及該蛋白粉的制備方法及其應用。
背景技術：
早期斷奶是提高豬場效益的有效手段，但是，在實際生產中，早期斷奶往往會造成仔豬斷奶后生長緩慢和以腹瀉為主要特征的“早期斷奶綜合癥”，從而嚴重影響了仔豬生產性能。如何認識和解決斷奶應激，幫助仔豬盡快平穩過渡到采食固體飼料，一直是養豬生產者和營養學家關注的焦點。仔豬斷奶應激性疾病最常見的是仔豬腹瀉。經研究表明，日糧因素是腸道內日糧抗原的過敏導致仔豬消化道組織學和形態結構的損傷性變化，這是造成腹瀉的重要原因。其中，飼糧抗原可引起仔豬發生細胞介導的超敏反應，造成腸道組織損傷。消化道損傷容易繼發性微生物感染和增殖，一旦有微生物增殖，腹瀉則加劇。為了給斷奶仔豬提供足夠的免疫保護，同時，防止由于日糧抗原所引的斷奶應激，在斷奶仔豬日糧中經常添加一些富含免疫球蛋白的飼料原料，如血漿蛋白粉、血粉。但是，由于這些飼料原料國內產量較小，大部分依靠進口，價格比較昂貴。
由于蛋液中含有大量的蛋白成分，因此，如果能夠增加蛋液中各種免疫球蛋白的含量，增加其卵黃抗體的含量，則蛋液將可能作為很有價值的飼料原料。目前國內的卵黃抗體的制備方法中，多采用分離卵黃進行提純抗體的制備方法，如申請號為01129140.0的“抗幽門螺桿菌細胞毒素雞卵黃抗體其制備及其應用”的專利申請，即是采用分離卵黃、然后冷凍干燥的方法對卵黃抗體進行分離、提純，其存在著下述缺點1)在加工過程中，要分離卵清和卵黃，同時用大量的水溶液稀釋卵黃液，進一步提取免疫球蛋白，再經過長時間的冷凍干燥，具有操作過程復雜、費時、以及電能消耗大等缺點；2)該制備工藝中蛋液與加工成品的比值遠大于20∶1，不利于降低成品的價格。
發明內容
本發明的目的在于提供一種飼用蛋白粉，其能有效的防治仔豬斷奶應激所引起的腹瀉，也能防止仔豬由于微生物引起的繼發性感染。
本發明的另一目的在于提供一種上述飼用蛋白粉制備方法，其具有能保證產品的衛生質量、生產機械性、自動化和連續性及成品比值高等特點。
本發明的再一目的在于將所述蛋白粉用于蛋白類飼料原料及制備用于防治仔豬腹瀉的飼料或制劑。
本發明的上述目的是這樣實現的一種飼用蛋白粉，其含有效價≥1∶64的抗大腸桿菌的卵黃抗體。
本發明所述的飼用蛋白粉，其中大腸桿菌的血清型為K88、K99、987P和F41中的一種或者任意組合的幾種。
該飼用蛋白粉可作為蛋白類飼料原料，也可用于制備防治仔豬腹瀉的飼料或制劑，上述飼料或制劑能有效的防治仔豬斷奶應激所引起的腹瀉，也能防止仔豬由于微生物引起的繼發性感染。
一種制備本發明所述的飼用蛋白粉的方法，其具有如下工藝步驟(1)制備血清型為K88、K99、987P或F41的大腸桿菌免疫原采用普通瓊脂培養基按照常規方法分別培養血清型為K88、K99、987P和F41的大腸桿菌中的一種或者任意組合的幾種，收集菌體，調節含菌量為1.0×106～1.0×1012CFU/ml，向所得活菌溶液中加入總體積的0.4～1.0％的甲醛溶液進行滅活，滅活溫度為35～38℃；滅活時間為16～20小時，取滅活后的菌液作為本發明所用的免疫原；(2)對產蛋母雞的免疫及高免蛋的收集采用上述免疫原對健康產蛋母雞進行免疫，免疫原注射劑量為0.5～3.0ml/只動物，然后自上述免疫后的7～10天開始收集雞蛋，留取含有抗大腸桿菌的卵黃抗體的效價不小于1∶64的雞蛋備用；(3)高免蛋白粉的制備取上述所得雞蛋的全蛋液進行巴氏殺菌，然后將殺菌后的全蛋液進行噴霧干燥，得到本發明的飼用蛋白粉，其中巴氏殺菌的工藝條件為殺菌溫度60～70℃，時間1～4分鐘；噴霧干燥的工藝條件為入口溫度140℃～170℃，出口溫度75～80℃，轉子速度15,000～20,000轉/分；本發明所述的制備飼用蛋白粉的方法，其還可以包括下述步驟之一或任意組合(1)對產蛋母雞的追加免疫上述步驟(2)中對健康產蛋母雞進行免疫7～10天后進行第一次追加免疫，在第一次追加免疫7～10天后進行第二次追加免疫，以后并可根據對雞蛋效價檢測的情況進行追加免疫，追加免疫中免疫原的注射劑量為0.5～3.0ml/只動物；(2)在巴氏殺菌前對雞蛋進行消毒，還包括對所得蛋液進行攪拌、過濾；(3)在噴霧干燥前向步驟(2)制得的全蛋液中添加0.05～0.15wt％苯甲酸鈉、0.5～1.5wt％硅酸鈣。
本發明所述的制備飼用蛋白粉的方法中，巴氏殺菌過程中的優選工藝條件為殺菌溫度60～64.5℃，時間1～3分鐘。
由上可見，本發明具有如下優點1)本發明采用的原料是全蛋液，不需要其它分離過程，且蛋液與加工成品的比值為4∶1，因此，具有省時、減少能耗、以及利于降低成本等優點；2)本發明采用噴霧干燥法生產蛋白粉，該方法具有下述優點A其干燥速度快，因此蛋白質受熱時間短，不易使蛋白質發生變性，蛋液中的其它成分影響微小；B由于干燥快，受熱低，因此加工成的蛋粉還原性能好，色正、味好；C噴霧干燥在密閉條件下進行，成品粉粒小，不必粉碎，故可保證產品的衛生質量。因此，噴霧干燥法生產蛋粉，可使生產機械性、自動化和連續性，生產工藝比較先進、且具有可操作性。
下面結合實施例對本發明作進一步具體說明。
具體實施例方式
實施例1飼用蛋白粉的制備1、菌種的篩選本發明所用的大腸埃希氏菌(Escherichia coli)，屬于埃希氏菌屬腸桿菌科中的一種，是一組革蘭氏陰性，無芽胞，除少數例外為周身鞭毛，能運動，兼性厭氧，發酵葡萄糖，分解乳糖的細菌。大腸埃希氏菌大小為1.1～1.5μm×2.0～6.0μm，兩端鈍圓。
本發明通過篩選大腸桿菌，選出在仔豬斷奶后易引起斷奶仔豬腹瀉的四種大腸桿菌血清型，即K88(中國醫學細菌保藏管理中心，菌種號為44742)、K99(中國醫學細菌保藏管理中心，菌種號為44820)、987P(中國獸醫藥品監察所，菌種號為83916)和F41(中國醫學細菌保藏管理中心，菌種號為44317)。
2、免疫原的培養和制備將血清型為K88、K99、以及987P的大腸桿菌分別接種于普通瓊脂培養基(參照《中國醫學細菌菌種目錄》培養基配方，第249頁牛肉浸液，1000ml；蛋白胨，10克；NaCl，5克；瓊脂，20～25％；pH，7.2～7.4，將培養基在121℃，滅菌不少于30分鐘)，250ml三角瓶中裝置為100ml，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養20小時。培養結束后，將每瓶細菌分別在4℃、3000轉/分離心30分鐘，棄去上清液，沉淀物分別用磷酸緩沖液(pH 7.6)調節為1.0×1010CFU/ml，然后將三種溶液按體積比1∶1∶1混合，配制成活菌數為1.0×1010CFU/ml的免疫原，然后加入滅活菌液總體積的0.5％的甲醛(市售，36％)，在37℃滅活18小時，作為待用免疫原。
3、免疫及高免蛋的收集將上述制得的免疫原對健康產蛋母雞進行皮下或胸腹部肌內免疫注射，免疫劑量為1.0ml，在初免后7天，進行第一次追加免疫；在第一次追加免疫后7天，進行第二次追加免疫，追加免疫的注射劑量仍為1.0ml。
在初免10天后開始收集雞蛋，對雞蛋內含有的雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體的效價采用下述方法進行測定將血清型分別為K88、K99和987P的大腸埃希氏菌分別接種于專用培養基，在37℃振蕩培養18h，6，000rpm，4℃，離心15min，取沉淀懸浮于pH 7.2的50mmol/LPBS溶液中，60℃水浴30min，再經6,000rpm，4℃，離心15min，取上清液用直徑0.45um微孔過濾，除去菌體，即分別得到各血清型菌株的精制纖毛蛋白。將所得的精制纖毛蛋白以0.05M碳酸緩沖液稀釋至蛋白含量為10-15μg/mL，以此作為ELISA方法測定效價中所用的包被液，4℃過夜包被后，按照常規ELISA方法順次在孔內加入待測樣品、三抗(辣根過氧化物酶標記)、終止液(2M硫酸)、以及鄰苯二胺(OPD)顯色液，用酶標比色計(波長492nm)讀取光密度，用常規比值法表示樣本中抗體的含量。
收集采用上述方法測定所含有各種抗體效價不小于1∶64的雞蛋備用，在本工藝過程中，取得雞蛋中所含有三種抗體的效價分別為830、824、722。
4、含有雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體的飼用蛋白粉的制備本發明以含有雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體的蛋液作為原料，用噴霧干燥法生產含有雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體的飼用蛋白粉。
4.1蛋液的攪拌、過濾用0.6％的新潔爾滅溶液對新鮮雞蛋進行表面消毒后，用人工(或機器)打破雞蛋后，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，使蛋液組織狀態均勻，并不易堵塞噴霧器的噴孔和溝槽，使得噴霧工作可正常進行，并可使產品水分含量均勻。
4.2 巴氏殺菌將獲得的全蛋液進行巴氏殺菌，殺菌溫度為64℃，保持2分鐘的低溫。
4.3噴霧干燥在本試驗中噴霧干燥的入口溫度為155℃，出口溫度為75℃，轉子的速度為20,000轉/分。
4.4篩粉、包裝將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
如上所得的高免蛋白粉的理化和營養成分組成如下(表1)(1).形狀粒度均勻的粉末(2).顏色淺黃色或黃色表1飼用蛋白粉的營養成分表項目 含量 項目含量卵黃抗體效價 粗蛋白(％)43.4其中抗K88830其中Tyr 1.8抗K99824 Phe 2.0抗987P 722 Lys 3.0水分(％) 4.0 His 1.1粗脂肪，％36.2 Arg 2.5總能，MJ/kg 27.3 Asp 4.1大腸桿菌數 0 Thr 1.9沙門氏菌數 0 Ser 2.5其它未測成分Glu 6.0包括鈣 未測 Pro 2.0磷 未測 Gly 1.3灰分 未測 Ala 2.2纖維 未測 Val 2.3其他成分 未測 Met 1.2Ile 2.1
Leu3.4采用上述方法制備的含有雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體的高免蛋白粉不僅能防治由致病性病原菌感染所引起的仔豬腹瀉，特別是斷奶仔豬所發生的腹瀉，而且具有提供蛋白質、能量，提高飼料的適合性等特性。
在制造以本發明所述的以雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體為有效成分的高免蛋白粉，可與飼料配方中使用的蛋白粉、血粉等任意飼料原料同時使用，并能與其它飼料原料配制成粉料、顆粒料、膨化料。
一般而言，本發明在飼料配方中的添加量為3～15wt％，為一種蛋白類飼料原料。
實施例2飼用蛋白粉的制備按照上述方法培養血清型為K88的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養16小時。培養結束后，2500轉/分，4℃，離心30分鐘，棄去上清液，沉淀物用磷酸緩沖液(pH 7.6)稀釋調節活菌含量為1.5×109CFU/ml，然后加入占滅菌液總體積數0.6％的甲醛，在35℃滅活16小時，作為待用免疫原。
將免疫原對健康蛋雞皮下注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為1.0ml。在初免7天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫7天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫7天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得抗體效價為844。
將所得雞蛋用0.6％的新潔爾滅溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在60℃保持3分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.05wt％苯甲酸鈉、0.5wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為140℃，出口溫度為75℃，轉子的速度為15,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例3飼用高免蛋白粉的制備按照上述方法培養血清型為K99的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養24小時。培養結束后，3500轉/分，4℃，離心25分鐘，棄去上清液，沉淀物用磷酸緩沖液(pH 7.6)稀釋調節活菌含量為3.0×106CFU/ml，然后加入占待滅活菌液總體積的0.7％的甲醛，在36℃滅活18小時，作為待用免疫原。
將免疫原對健康蛋雞腹部肌內注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為3.0ml。在初免10天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫10天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫10天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得抗體效價為824。
將所得雞蛋用75％的乙醇溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在68℃保持1分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.15wt％苯甲酸鈉、1.5wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為168℃，出口溫度為80℃，轉子的速度為20,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例4飼用蛋白粉的制備按照上述方法培養血清型為987P的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養22小時。培養結束后，4000轉/分，4℃，離心20分鐘，棄去上清液，沉淀物用磷酸緩沖液(pH 7.6)稀釋調節活菌含量為1.0×1012CFU/ml，然后加入占待滅活菌液總體積的0.4％的甲醛，在37℃滅活20小時，作為待用免疫原。
對健康蛋雞胸部肌內注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為0.5ml。在初免8天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫8天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫8天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得抗體效價為756。
將所得雞蛋用0.6％的新潔爾滅溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在64.5℃保持2分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.1wt％苯甲酸鈉、1.0wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為155℃，出口溫度為72℃，轉子的速度為18,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例5飼用蛋白粉的制備按照上述方法培養血清型為F41的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養20小時。培養結束后，3000轉/分，4℃，離心30分鐘，棄去上清液，沉淀物用磷酸緩沖液(pH 7.6)稀釋調節活菌含量為3.0×109CFU/ml，然后加入占待滅活菌液總體積的1.0％的甲醛，在38℃滅活17小時，作為待用免疫原。
對健康蛋雞皮下注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為2.0ml。在初免9天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫9天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫9天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得抗體效價為920。
將所得雞蛋用0.6％新潔爾滅溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在61.5℃保持4分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.08wt％苯甲酸鈉、1.2wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為155℃，出口溫度為80℃，轉子的速度為16,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例6飼用蛋白粉的制備按照上述方法分別培養血清型為K88以及K99的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養20小時。培養結束后，將每瓶細菌分別4℃、3500轉/分離心25分鐘，棄去上清液，沉淀物分別用磷酸緩沖液(pH 7.6)調節為1.0×1010CFU/ml，然后將三種溶液按體積比1∶1∶1混合，配制成活菌數為1.0×1010CFU/ml的免疫原，然后加入占待滅活菌液總體積的0.8％的甲醛，在37℃滅活18小時，作為待用免疫原。
對健康蛋雞胸部肌內注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為2.0ml。在初免9天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫9天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫9天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得所含抗2種血清型的大腸桿菌的抗體效價依次分別為822和812。
將所得雞蛋用0.6％的新潔爾滅溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在65℃保持3分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.1wt％苯甲酸鈉、1.0wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為160℃，出口溫度為75℃，轉子的速度為20,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例7飼用蛋白粉的制備按照上述方法分別培養血清型為K88、K99、987P、以及F41的大腸桿菌，在35℃～40℃培養箱中振蕩培養20小時。培養結束后，將每瓶細菌分別4℃、3000轉/分離心30分鐘，棄去上清液，沉淀物分別用磷酸緩沖液(pH 7.6)調節活菌含量為5.0×109CFU/ml，然后將四種溶液按體積比1∶1∶1∶1混合，配制成活菌數為5.0×109CFU/ml的免疫原，然后加入占待滅活菌液總體積的0.5％的甲醛，在37.5℃滅活19小時，作為待用免疫原。
對健康蛋雞皮下注射所得免疫原進行初免，免疫劑量為1.5ml。在初免9天后，進行第一次追加免疫。在第一次追加免疫9天后，進行第二次追加免疫。從初次免疫9天后收集所得的雞蛋，按上述方法測得所含抗3種血清型的大腸桿菌的抗體效價依次分別為748、664、654和636。
將所得雞蛋用0.6％的新潔爾滅溶液進行表面消毒，打破雞蛋取全蛋液，蛋液經攪拌，用篩片過濾以除去碎蛋殼、系帶、蛋黃膜、蛋殼膜等，將獲得的全蛋液在64℃保持3.5分鐘的低溫進行巴氏殺菌，在全蛋液中加入0.1wt％苯甲酸鈉、1.0wt％硅酸鈣，然后將殺菌后的蛋液進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為入口溫度為165℃，出口溫度為78℃，轉子的速度為17,000轉/分。
將經過噴霧干燥生產的蛋粉晾涼、過篩，使產品均勻，然后進行包裝。蛋粉的包裝可用密封的塑料袋進行包裝，然后用紙盒進行外包裝。
實施例8飼用蛋白粉對斷奶仔豬生產性能的影響將按實施例1所制得的飼用蛋白粉在仔豬飼料中添加，其添加量為4.0wt％其它飼料原料的添加量為玉米、豆粕。試驗豬頭數為36頭，試驗時間為21天，按每周計算平均日增重、平均日采食和飼料轉化效率，結果如表2。在飼料中使用本發明的飼用蛋白粉可以提高平均日增重、平均日采食量，降低飼料轉化效率。其中腹瀉分值按5分計算，即0分正常；1分糞便軟而成形；2分糞便呈黃色液體(中度腹瀉)；3分糞便呈水樣噴射狀(重度腹瀉)。
表2飼用蛋白粉對仔豬生產性能的影響時間，天對照組 4.0wt％高免蛋白粉組0～7天平均日增重，g371.4 508.7平均日采食量，g 448.4 560.5飼料轉化效率 1.231.108～14天平均日增重，g439.7 483.3平均日采食量，g 730.2 750.0飼料轉化效率 1.671.6015～21天平均日增重，g544.4 592.2平均日采食量，g 946.6 981.5飼料轉化效率 1.791.65腹瀉分值 2.5(中度腹瀉) 0.5(無腹瀉)實施例9飼用蛋白粉對飼料消化率的影響將按實施例7所制得的飼用蛋白粉在仔豬飼料中添加，其添加量為4.0wt％。試驗豬頭數為36頭，試驗時間為28天，結果如表3。在飼料中使用本發明的飼用蛋白粉可以提高飼料的消化率。
表3飼用蛋白粉對飼料消化率的影響對照組 4.0wt％高免蛋白粉組干物質，％ 85.38 86.31總能，％ 84.57 86.22粗蛋白，％ 80.23 85.50有機物，％ 85.23 88.69鈣，％ 71.30 76.70總磷，％ 58.22 61.87灰分，％ 62.53 63.44
中性洗滌纖維，％ 80.42 86.24酸性洗滌纖維，％ 78.56 84.07實施例10飼用蛋白粉對經濟效益的影響將按實施例6所制得的蛋白粉在仔豬飼料中添加，其添加量為4.0wt％，血漿蛋白粉添加3.0wt％。試驗豬頭數為36頭，試驗時間為28天，按每噸飼料計算飼料成本，結果如表4。每噸飼料中使用本發明的蛋白粉能降低成本122.3元。
表4飼用蛋白粉對經濟效益的影響飼料原料 原料價格 3.0血漿蛋白粉組4.0％飼用蛋白粉組 相差元/噸 ％ 元/噸 ％ 元/噸玉米1130 58.65 662.8 56.31 636.3 -26.5豆粕2100 21.00 441.0 21.00 441.0 0血漿蛋白粉 45000 3.001350.0 -- -1350高免蛋白粉 30000 --4.001200.0 1200魚粉5400 4.80259.2 6.00324.0 64.8乳清粉 4600 4.50207.0 5.00230.0 23.0小麥麩 1000 2.8028.0 2.9029.0 1.0磷酸氫鈣2400 1.2028.8 1.3031.2 2.4大豆油 5000 1.5075.0 1.0050.0 -251％預混料 14000 1.00140.0 1.00140.0 0石粉300.450.20.450.20食鹽1000 0.313.10.313.10蛋氨酸 25000 0.1230 0.1230.0 0賴氨酸 20000 0.4284 0.3672.0 -12.03309.1 3186.8-122.3根據以上試驗可以證明，以本發明所述的以雞抗豬大腸桿菌卵黃抗體為有效成份的飼用蛋白粉是一種新型的蛋白類飼料原料。這種蛋白粉能有效防治仔豬的腹瀉，改善仔豬的生產性能、降低飼料成本。
權利要求
1.一種飼用蛋白粉，其特征在于，所述蛋白粉內含有效價≥1∶64的抗大腸桿菌的卵黃抗體。
2.如權利要求1所述的飼用蛋白粉，其特征在于，所述大腸桿菌的血清型為K88、K99、987P和F41中的一種或者任意組合的幾種。
3.一種制備權利要求1或2所述的飼用蛋白粉的方法，其特征在于依次包括如下的工藝步驟(1)制備血清型為K88、K99、987P和F41中的一種或者任意組合的幾種大腸桿菌免疫原采用普通瓊脂培養基按照常規方法分別培養血清型為K88、K99、987P和F41的大腸桿菌中的一種或者任意幾種，收集菌體，混合，調節含菌量為1.0×106～1.0×1012CFU/ml，向所得活菌溶液中加入總體積的0.4～1.0％的甲醛溶液進行滅活，所用滅活溫度為35～38℃，滅活時間為16～20小時；(2)產蛋母雞的免疫及高免蛋的收集A采用上述免疫原對健康產蛋母雞進行免疫，免疫原注射劑量為0.5～3.0ml/只動物；B自上述免疫后的7～10天開始收集雞蛋，留取含有抗大腸桿菌的卵黃抗體的效價不小于1∶64的雞蛋備用；(3)蛋白粉的制備A取上述所得雞蛋的全蛋液在下述條件下進行巴氏殺菌殺菌溫度60～700℃，時間1～4分鐘；B將殺菌后的全蛋液采用下述工藝條件在常規噴霧干燥器中進行噴霧干燥，得到本發明的飼用蛋白粉入口溫度140℃～170℃，出口溫度75～80℃，轉子速度15,000～20,000轉/分。
4.如權利要求3所述的制備飼用蛋白粉的方法，其特征在于還包括對產蛋母雞的追加免疫步驟在上述步驟(2)中，對健康產蛋母雞進行免疫7～10天后進行第一次追加免疫，在第一次追加免疫7～10天后進行第二次追加免疫，以后還可根據對雞蛋效價檢測的情況進行再追加免疫，每次在追加免疫中免疫原的注射劑量為0.5～3.0ml/只動物。
5.如權利要求3或4所述的制備飼用蛋白粉的方法，其特征在于，在巴氏殺菌前還包括對雞蛋進行常規消毒、并對所得蛋液進行攪拌、過濾的步驟。
6.如權利要求3或4所述的制備飼用蛋白粉的方法，其特征在于，在巴氏殺菌前還包括向攪拌、過濾后的全蛋液中添加0.05～0.15wt％苯甲酸鈉、0.5～1.5wt％硅酸鈣。
7.如權利要求5所述的制備飼用蛋白粉的方法，其特征在于，在巴氏殺菌前還包括向攪拌、過濾后的全蛋液中添加0.05～0.15wt％苯甲酸鈉、0.5～1.5wt％硅酸鈣。
8.如權利要求3或4所述的制備飼用蛋白粉的方法，其特征在于，巴氏殺菌過程的優選工藝條件為殺菌溫度60～64.5℃，時間1～3分鐘。
9.一種應用權利要求1所述的飼用蛋白粉作為蛋白類飼料原料的應用。
10.一種應用權利要求1所述的飼用蛋白粉在制備用于防治仔豬腹瀉的飼料或制劑中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種含有大腸桿菌卵黃抗體的飼用蛋白粉的制備方法及其應用。該蛋白粉內含有效價≥1∶64的抗大腸桿菌的卵黃抗體。其制備方法包括制備血清型的大腸桿菌免疫原；將免疫原對健康產蛋母雞進行免疫，免疫原注射劑量為0.5～3.0ml/只動物；收集免疫7～10天后的雞下的蛋，留取含有抗大腸桿菌的卵黃抗體的效價不小于1∶64的雞蛋備用；取全蛋液進行巴氏殺菌、在常規噴霧干燥器中進行噴霧干燥得到飼用蛋白粉。該飼用蛋白粉可制備用于防治仔豬腹瀉的飼料或制劑中的應用。本發明采用的原料是全蛋液，不需要其它分離過程，且蛋液與加工成品的比值為4∶1，因此，具有省時、減少能耗、以及利于降低成本等優點。
文檔編號A23J1/08GK1507790SQ02155678
公開日2004年6月30日 申請日期2002年12月13日 優先權日2002年12月13日
發明者李德發, 王吉潭, 胥學新, 邢建軍, 樸香淑, 李寶玉, 范石軍, 龔利敏, 吳連福, 尹靖東 申請人:北京德寶群興科貿有限公司