專利名稱：提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中s-腺苷-l-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法
技術領域：
本發明涉及一種提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法。
背景技術：
利用甜高粱莖稈糖汁發酵生產燃料乙醇是促進非糧作物生產燃料乙醇產業化發展的主要方向。達到產業化要求的液態法甜高粱莖稈生產燃料乙醇工藝技術已經形成，并獲得國家專利保護，其清醪發酵的工藝特點，可以得到高密度高活性的釀酒酵母。在現有技術條件下，副產品廢釀酒酵母常用作飼料原料，附加值很低。已有的研究表明釀酒酵母胞內積累S-腺苷-L-甲硫氨酸的能力要比其它微生物高很多，是目前工業化發酵生產S-腺苷-L-甲硫氨酸的首選原料。釀酒酵母中超氧化物歧化酶的含量也遠高于其它真菌，是未來發展工業化發酵生產超氧化物歧化酶的廉價原料。S-腺苷甲硫氨酸，又稱S-腺苷蛋氨酸(S-Adenosylmethionine，簡稱SAM)，廣泛存在于動物、植物和微生物體內，是人體內的一種重要生理活性物質，它主要作為轉甲基和轉硫基、轉氨丙基三種代謝途徑的前體，參與了人體內40多種生化反應。SAM可以預防肝癌發生，對治療慢性肝炎及肝硬化效果非常好，是國內外公認的最佳治療肝病的醫藥，可以顯著降低肝病的死亡率。能促進軟骨組織的形成和損傷愈合，可用于關節炎的治療。還具有調節神經中樞系統的功能，治療早老性癡呆癥以及抑郁癥，對各種抑郁癥有特殊療效，見效快、無成癮性以及耐受性好等優點。此外，由于其具有修復纖維化皮膚細胞的作用，被廣泛應用于多種化妝品。SAM可以由化學合成、體外酶促合成或經微生物發酵生物合成三種途徑得到，SAM 的旋光性及其不穩定性大大降低了化學合成法的可能性。酶催化合成法是以ATP和L-甲硫氨酸為底物，在SAM合成酶的催化下合成SAM，但是ATP價格昂貴，而且生物細胞中SAM合成酶的濃度很低，造成生產水平不高，提取困難，生產效率很低，成為大規模酶催化生產SAM 的限制因素。釀酒酵母屬微生物(S. cerevisiae)具有較高的過量積累SAM的能力，上世紀六十年代末，國際上就開始研究利用釀酒酵母生產SAM的生產工藝，我國是從七十年代末開始進行此項技術的研發工作，但因發酵水平低、分離純化成本過高，至今未能工業化，相關藥物目前在國內還沒有生產，完全依靠進口，開發利用釀酒酵母生產高產、高質、價廉的 SAM生產工藝顯得極為迫切。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，簡稱SOD)是一種廣泛存在于動植物、 微生物中的金屬酶，能專一催化超氧陰離子自由基02_‘發生歧化反應，從而清除02_‘。這一功能，使它能防御氧毒性，增強機體抗輻射損傷能力，因此可作為抗衰老、抗炎癥、自身免疫疾病患者廣泛應用的醫藥品。此外，SOD對治療貝切特氏癥、心肌梗塞等血虛性心臟病、膠原病、新生兒呼吸困難綜合癥、防御放射性傷害等也有療效。國內外目前商品SOD主要從動物血液及臟器中提取，容易受原料來源、得率、產品質量不穩定及安全性等方面的限制，歐盟從1997年1月起禁止使用動物SOD。植物SOD的制備和動物SOD的制備一樣，具有工藝復雜，成本較高的劣勢，限制其規模化生產。與動植物SOD的制備相比，用微生物為原料制取SOD具有原料便宜易得，可以規模化生產。釀酒酵母SOD的含量高于其它真菌，并且酵母細胞沒有內毒素污染問題，從酵母中提取Cu/Zn-SOD較從其它動物血液中提取的最大特點是不存在抗原反應、成本低，酵母產SOD具有很好的使用價值。國內對SOD的研究起步較晚。目前，國內生產商品SOD仍然主要是從豬血或牛血中提制的，對微生物SOD的研究還處于實驗室階段。僅可查到《甜高粱莖稈汁液制取乙醇及酵母超氧化物歧化酶的方法》一項專利(專利號200710047685.幻，該專利中所述技術僅可提取SOD —項產品。目前國內外未見到以提高SAM和SOD生物合成量為目的的甜高粱莖稈汁液發酵生產燃料乙醇的副產品釀酒酵母活化技術的相關報道。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，通過優化廢釀酒酵母活化培養基及活化培養條件，可同時提高廢釀酒酵母中SAM和SOD的生物合成量。本發明的技術方案概述如下提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，包括如下步驟(1)用釀酒酵母將甜高粱莖稈汁經20-38小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經3000-5000rpm，離心5_15分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)按比例取40_60g所述濕廢酵母菌體，20_50g葡萄糖，0. 5_4g甲硫氨酸，0. 005-0. 015g硫酸銅，0. 03-0. 06g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為13-20%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5.0、通空氣量為0. 8-1. 5vvm、攪拌轉速為120-160rpm及溫度為30°C _34°C條件下，活化培養20-40小時，得到活化發酵液；(3)將所述活化發酵液以3000-5000rpm，離心5_15分鐘，棄上清液，得到活化后濕酵母菌體；(4)取所述活化后濕酵母菌體，加入6-12倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1-2小時，3000-5000rpm，離心5_15分鐘，分離得到SAM上清液；或取所述活化濕酵母菌體，加入8-10倍體積的體積濃度為70-90%的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1-2小時進行破壁，以4000-6000rpm，離心5-15min，棄去上清，得到沉淀；加入2-4倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取1_3個小時，以4000-6000rpm，離心5_15min，得到SOD上清液，所述SAM為S-腺苷-L-甲硫氨酸，所述SOD為超氧化物歧化酶。所述步驟(1)優選為將甜高粱莖稈經對-30小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體。所述步驟( 優選為按比例取50g所述濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，2g甲硫氨酸，0. OlOg硫酸銅，0. 04g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15 %的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. 0、通空氣量為1. 2vvm、攪拌轉速為140rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液。所述步驟( 優選為將所述活化發酵液以4000rpm，離心10分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體。所述步驟(4)優選為取所述活化濕酵母菌體，加入8倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1. 5小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量；或取所述活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為80 %的異丙醇水溶液， 在冰浴中攪拌1. 5小時進行破壁，以5000rpm，離心lOmin，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質量的PH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取2個小時，以 5000rpm，離心lOmin，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量。本發明優點1.本發明極大提高甜高粱莖稈燃料乙醇生產中副產品釀酒酵母附加值，促進了非糧燃料乙醇產業的健康發展；2.本發明首次以提高SAM和SOD生物合成量為目的，對甜高粱莖稈燃料乙醇生產中的副產品釀酒酵母進行活化技術研究，使釀酒酵母中SAM(120mg/g干酵母)和 SOD(2600U/g干酵母)含量超過國內外報道水平，為深度開發生物燃料乙醇產業副產品提供了技術支持；3.國內商品SOD仍然主要是從豬血或牛血中提制的，對微生物SOD的研究還處于實驗室階段，我國尚未實現SAM產品產業化生產，本發明提高了釀酒酵母中SOD和SAM的生物合成量，為實現SOD和SAM的規模化工業生產提供了低成本原料支持；4.本發明具有很大的經濟效益，建設年消耗300噸釀酒酵母干基的SAM和SOD生產廠，總投資約2300萬元，年總收入可達10680萬元，投資利稅率達300%以上。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明。實施例1(1)將甜高粱莖稈汁經觀小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經 4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取50g濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，2g甲硫氨酸，0. Olg硫酸銅，0. 04g硫酸鋅， 加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. O、通空氣量為1. 2vvm、攪拌轉速為140rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心10分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入8倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1. 5小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量為118mg/g干酵母，活化前SAM含量為1. lmg/g干酵母。實施例2(1)將甜高粱莖稈經M小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經 4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；
(2)取40g濕廢酵母菌體，50g葡萄糖，3g甲硫氨酸，0. Olg硫酸銅，0. 03g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為13%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. 0、通空氣量為0. 8vvm、攪拌轉速為160rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以3000rpm，離心15分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入6倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量為122mg/g干酵母，活化前SAM含量為1. 02mg/g干酵母。實施例3(1)將甜高粱莖稈經30小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；( 取50g濕廢酵母菌體，20g葡萄糖，4g甲硫氨酸，0. 015g硫酸銅，0. 04g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. O、通空氣量為1. Ovvm、攪拌轉速為120rpm及30°C活化培養40小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以5000rpm，離心5分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入8倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁2小時，3000rpm,離心5分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量為125mg/g干酵母，活化前SAM含量為1. 08mg/g干酵母。實施例4(1)將甜高粱莖稈經20小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經3000rpm，離心15分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取55g濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，0. 5g甲硫氨酸，0. 015g硫酸銅，0. 05g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為17%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5.0、通空氣量為1. 2vvm、攪拌轉速為140rpm及34°C活化培養20小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心12分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入10倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量為116mg/g干酵母，活化前SAM含量為0. 98mg/g干酵母。實施例5(1)將甜高粱莖稈經20-38小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經5000rpm,離心5分鐘，得到濕廢酵母菌體； (2)取60g濕廢酵母菌體，40g葡萄糖，Ig甲硫氨酸，0. 005g硫酸銅，0. 06g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為20%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. O、通氣量為1. 5vvm、攪拌轉速為150rpm及32°C活化培養23小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心8分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入12倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁2小時，5000rpm，離心15分鐘，分離得到SAM上清液，用高效液相色譜法檢測濕酵母菌體中的SAM含量為120mg/g干酵母，活化前SAM含量為1. 13mg/g干酵母。實施例6(1)將甜高粱莖稈經觀小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經
64000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取50g所述濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，2g甲硫氨酸，0. OlOg硫酸銅，0. 04g 硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5.0、通空氣量為1.2vvm、攪拌轉速為140rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心10分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為80 %的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1. 5小時進行破壁，以5000rpm，離心lOmin，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取2個小時，以5000rpm，離心lOmin，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量為M60U/g 干酵母，活化前為150U/g干酵母。實施例7(1)將甜高粱莖稈經M小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經 4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)按比例取40g所述濕廢酵母菌體，50g葡萄糖，3g甲硫氨酸，O.Olg硫酸銅， 0. 03g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為13%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在 pH = 5. 0、通空氣量為0. 8vvm、攪拌轉速為160rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以3000rpm，離心15分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入8倍體積的體積濃度為80 %的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1小時進行破壁，以6000rpm，離心5min，棄去上清，得到沉淀；加入4倍沉淀質量的 pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取1個小時，以6000rpm，離心 5-15min，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量為2506U/g 干酵母，活化前為153U/g干酵母。實施例8(1)將甜高粱莖稈經30小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經 4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取50g所述濕廢酵母菌體，20g葡萄糖，4g甲硫氨酸，0. 015g硫酸銅，0. 04g 硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5.0、通空氣量為l.Ovvm、攪拌轉速為120rpm及30°C活化培養40小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以5000rpm，離心5分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為70 %的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌2小時進行破壁，以4000rpm，離心15min，棄去上清，得到沉淀；加入2倍沉淀質量的 pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取2個小時，以5000rpm，離心 8min，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量為2602U/g干酵母，活化前為156U/g干酵母。實施例9(1)將甜高粱莖稈經20小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經 3000rpm，離心15分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取55g所述濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，0. 5g甲硫氨酸，0. 015g硫酸銅，0. 05g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為17%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH =5.0、通空氣量為1.2vvm、攪拌轉速為140rpm及34°C活化培養20小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心12分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為90 %的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1小時進行破壁，以5000rpm，離心lOmin，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取3個小時，以4000rpm，離心15min，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量為2588U/g干酵母，活化前為154U/g干酵母。實施例10(1)將甜高粱莖稈經20-38小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經5000rpm,離心5分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)取60g所述濕廢酵母菌體，40g葡萄糖，Ig甲硫氨酸，0. 005g硫酸銅，0. 06g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為20%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH =5. O、通空氣量為1. 5vvm、攪拌轉速為150rpm及32°C活化培養23小時，得到活化發酵液；(3)將活化發酵液以4000rpm，離心8分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體；(4)取活化濕酵母菌體，加入10倍體積的體積濃度為80%的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌2小時進行破壁，以5000rpm，離心8min，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取1個小時，以6000rpm，離心5min，得到SOD上清液，用鄰苯三酚自氧化法檢測濕酵母菌體中的SOD含量為^OOU/g干酵母，活化前為155U/g干酵母。
權利要求
1.提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是包括如下步驟(1)釀酒酵母和甜高粱莖稈汁經20-38小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經3000-5000rpm，離心5_15分鐘，得到濕廢酵母菌體；(2)按比例取40-60g所述濕廢酵母菌體，20-50g葡萄糖，0.5_4g甲硫氨酸，0. 005-0. 015g硫酸銅，0. 03-0. 06g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為13-20%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5.0、通空氣量為0. 8-1. 5vvm、攪拌轉速為120-160rpm及溫度為30°C _34°C條件下，活化培養20-40小時，得到活化發酵液；(3)將所述活化發酵液以3000-5000rpm，離心5_15分鐘，棄上清液，得到活化后濕酵母菌體；(4)取所述活化后濕酵母菌體，加入6-12倍體積的1.5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1-2小時，3000-5000rpm，離心5_15分鐘，分離得到SAM上清液；或取所述活化濕酵母菌體，加入8-10倍體積的體積濃度為70-90%的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1-2小時進行破壁，以4000-6000rpm，離心5-15min，棄去上清，得到沉淀；加入2-4倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取1_3個小時，以4000-6000rpm，離心5_15min，得到SOD上清液，所述SAM為S-腺苷-L-甲硫氨酸，所述SOD為超氧化物歧化酶。
2.根據權利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(1)為將甜高粱莖稈經對-30小時發酵生產燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體。
3.根據權利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟( 為按比例取50g所述濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，2g甲硫氨酸，0. OlOg硫酸銅，0. 04g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質量含量為15%的甜高粱莖稈汁至IL混勻；在pH = 5. 0、通空氣量為1. 2vvm、攪拌轉速為140rpm及32°C活化培養30小時，得到活化發酵液。
4.根據權利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟C3)為將所述活化發酵液以4000rpm，離心10分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體。
5.根據權利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(4)為取所述活化濕酵母菌體，加入8倍體積的1. 5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1. 5小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液；或取所述活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為80%的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1. 5小時進行破壁，以5000rpm，離心lOmin，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質量的pH = 7. 8，濃度為0. 05mol/L的K2HPO4-KH2PO4緩沖液，攪拌提取2個小時，以5000rpm，離心lOmin，得到SOD上清液。
全文摘要
本發明公開了一種提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，包括如下步驟取濕廢酵母菌體，葡萄糖，甲硫氨酸，硫酸銅，硫酸鋅，加入甜高粱莖稈汁至1L混勻；活化培養得到活化發酵液；離心，棄上清液，得到活化后濕酵母菌體；加入高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁，離心分離得到SAM上清液；或取活化濕酵母菌體，加入異丙醇水溶液，攪拌進行破壁，離心，棄去上清，得到沉淀；加入緩沖液，攪拌提取，離心得到SOD上清液，本發明提高甜高粱莖稈燃料乙醇生產中副產品釀酒酵母附加值，使釀酒酵母中SAM和SOD含量提高，降低成本。
文檔編號C12P7/06GK102391998SQ20111033805
公開日2012年3月28日 申請日期2011年10月31日 優先權日2011年10月31日
發明者丁文勇, 凌豐, 孫愛君, 宋彥霞, 岳美琪 申請人:中興能源(天津)有限公司