專利名稱：卡特蘭花粉萌發培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及ー種花粉萌發培養基，尤其涉及ー種卡特蘭花粉萌發培養基。
背景技術：
卡特蘭，屬蘭科(familyOrchideceae)、樹蘭亞科(subfamily Epidendroideae)、樹蘭族(tribe Epidendreae)、蕾莉亞亞族(subtribe Laeliinae),又名嘉德麗亞蘭，附生復莖性蘭類。其花色五彩斑斕、花型碩大多姿、氣息芬芳可人，顏色豐富多彩，在國際上有“洋蘭之王”的美稱。原產于美洲熱帶和亞熱帶，其中哥倫比亞和巴西野生最多，哥倫比亞、巴西、哥斯達黎加等國更以卡特蘭為國花。卡特蘭在泰國、新加坡、印度尼西亞、馬來西亞、菲律賓和我國臺灣都有規模性生產，這些地區成為世界卡特蘭的主產區。目前報道的卡特蘭原生種約有110種(http://apps. kew. org/wcsp/home. do),但其與近緣屬Brassavola (白拉索蘭)、Laelia (蕾利亞蘭)、Sophronitis (索芙羅蘭)等成功進行了屬間雜交，已育成大量的雜交種，目前所指的卡特蘭是泛指Cattleya屬及其它相關近緣屬的所有原種及雜交種，包括卡特蘭屬原種及屬內雜交種，卡特蘭近緣屬及屬內雜交種，卡特蘭屬與近緣屬的雜交種，以及卡特蘭近緣屬之間的雜交種，形成了龐大的卡特蘭家族品種。由于各種類卡特蘭花期不一致，在雜交育種過程中，常出現花期不遇，需要對采集的花粉塊進行貯藏，貯藏后花粉生活力對雜交育種的成功具有重要影響。由于蘭科植物的花粉外面包裹類脂膜，使得花粉粒粘連成花粉塊，使花粉不易分散，這不利于對花粉萌發進行觀察。現有技術中，對卡特蘭花粉的萌發沒有過研究，在蘭科植物中，僅見于對大花蕙蘭(Cymbidium h ybridium)和臺灣金線蓮(Anoectochilus formosanus)花粉的萌發進行了研究，并且使用的都是固體培養基，大花蕙蘭的花粉在固體培養基上培養4天才能萌發，臺灣金線蓮花粉塊固體培養時需要48小時才能萌發。耗時長，萌發率低，而且固體培養基配制繁瑣
發明內容
本發明的目的是提供一種耗時短、萌發率高的卡特蘭花粉萌發培養基。本發明的目的是通過以下技術方案實現的本發明的卡特蘭花粉萌發培養基，該培養基為液體培養基，所述液體培養基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。由上述本發明提供的技術方案可以看出，本發明提供的卡特蘭花粉萌發培養基，由于該培養基為液體培養基，所述液體培養基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。耗時短、萌發率高，大大提高了工作效率。
具體實施例方式下面將對本發明實施例作進ー步地詳細描述。
本發明的卡特蘭花粉萌發培養基，其較佳的具體實施方式
是該培養基為液體培養基，所述液體培養基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。優選的組合為所述蔗糖、H3BO3, CaCl2在液體培養基中的濃度分別為100gじ1、40mg r\l50mgじ1。采用本發明的卡特蘭花粉萌發培養基，在3小時后就可以觀察到花粉的萌發現象，24小時后花粉塊完全溶解在培養液中，可清晰地觀察到花粉的萌發，所以使用本發明的卡特蘭花粉萌發培養基能夠大大提高效率。同吋，也為有效開展卡特蘭雜交育種研究提供技術支撐，如果再加入合適的激素或其它活性物質，卡特蘭萌發所用時間可能更短，萌發率可能會更高。
具體實驗例首先通過單因子試驗，研究了蔗糖、硼、鈣、鎂、鉀等因素對雜種卡特蘭花粉萌發的影響。在單因子試驗的基礎上，選取對雜種卡特蘭花粉萌發影響較大的蔗糖、H3BO3和CaCl23個因子，各設5水平，設計正交試驗。結果表明，蔗糖的作用極顯著，H3BO3次之，CaCl2是在蔗糖和H3BO3的主導作用下起輔助作用。卡特蘭花粉培養的最佳組合為蔗糖IOOgr1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1，在此培養液中培養花粉塊，3小時后就可以觀察到花粉管的萌發，但此時萌發量小，而且花粉相互粘連，不利于觀察計數。在培養24小時后，花粉塊能夠充分溶解在培養液中，花粉也大量萌發，萌發率最高能達到68. 7%。以后隨著培養時間的延長，營養液中微生物含量逐漸增加，對觀察效果產生影響。蔗糖濃度是影響蘭花花粉在人工培養基上萌發的重要而且獨立的因素，蔗糖在花粉萌發過程中，除了能夠為花粉提供能源外，還能起到調節滲透壓的作用，但若濃度過高，則會造成原生質體脫水，反而抑制了花粉萌發。本申請的研究結果表明，蔗糖是影響雜種卡特蘭花粉萌發的主要因子，當蔗糖濃度為IOOgじ1時最有利于花粉的萌發。硼能促進糖的吸收與代謝，并促使花粉管的伸長生長。Ca2+主要影響花粉萌發速度和花粉管的生長速度。本申請的研究結果表明，雜種卡特蘭花粉萌發的適宜H3BO3濃度為40mgじ1，CaCl2濃度為150mgじ1，H3BO3和CaCl2濃度過高和過低，都不利于花粉管的萌發和生長。當鈣和硼酸與糖共同存在時，糖起主要作用，硼酸起次要作用，鈣處于附屬地位。在優選出的最佳培養液蔗糖IOOg r1+H3B0340mg ^+CaCl2ISOmgじ1中培養花粉塊，3小時后就可以觀察到花粉管的萌發，但此時萌發量小，而且花粉相互粘連，不利于觀察計數。在培養24小時后，花粉塊能夠充分溶解在培養液中，花粉也大量萌發。以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式
，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，可輕易想到的變化或替換，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。因此，本發明的保護范圍應該以權利要求書的保護范圍為準。
權利要求
1.ー種卡特蘭花粉萌發培養基，其特征在干，該培養基為液體培養基，所述液體培養基中包含蔗糖、H3B03、CaCl2。
2.根據權利要求I所述的卡特蘭花粉萌發培養基，其特征在于，所述蔗糖、H3B03、CaCl2在液體培養基中的質量濃度分別為=IOOg r\40mgじ1、150mgじ1。
全文摘要
本發明公開了一種卡特蘭花粉萌發培養基，該培養基為液體培養基，所述液體培養基中包含蔗糖、H3BO3、CaCl2。優選的組合為所述蔗糖、H3BO3、CaCl2在液體培養基中的濃度分別為100g L-1、40mg L-1、150mg L-1。采用本發明的卡特蘭花粉萌發培養基，在3小時后就可以觀察到花粉的萌發現象，24小時后花粉塊完全溶解在培養液中，可清晰地觀察到花粉的萌發，能夠大大提高效率。
文檔編號C12N5/04GK102618483SQ201210066900
公開日2012年8月1日 申請日期2012年3月14日 優先權日2012年3月14日
發明者王雁, 鄭寶強 申請人:中國林業科學研究院林業研究所