專利名稱：一種畜禽糞污微生物除臭菌劑、其制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及ー種微生物除臭菌劑及其制備方法，具體涉及根據微生物生態學原理，利用菌株之間的共生、互生、協同作用等相互作用關系構建成的微生物除臭菌劑及其制備方法。
背景技術：
惡臭污染是世界公認的七大環境公害之一，隨著我國 農業和農村經濟結構的調整，畜牧業得到持續健康快速的發展，但由畜禽糞便引起的惡臭污染已成為惡臭污染的最主要貢獻之一，尤其是隨著經濟的發展和人們生活水平的逐步提高，對環境質量的要求也日趨強烈，由畜禽糞便等所產生的惡臭越來越受到人們的關注。糞便惡臭污染不但給人們生活帶來不便，而且其中含有多種有毒成分，其中氨氣、硫化氫、硫醇和甲硫醇是主要有害氣體成分，給養殖環境帶來很大危害，影響養殖動物的健康生長，需大量化學消毒剤、抗生素等藥物進行場區消毒和衛生防疫，導致大量化學消毒剤、抗生素等大量有害物質通過食物鏈進入人體，嚴重危及人類健康與食品安全。同時大量的化學有害物質也對水體和土壌造成嚴重危害。并且臭氣氣體的排放會對周邊環境造成嚴重污染，人們長期吸入后對身體健康造成嚴重傷害。因此實施畜禽糞便惡臭污染控制和管理，開展脫除惡臭氣體的研究具有重要意義。目前，針對畜禽糞便惡臭脫除研究可分為化學除臭和生物除臭兩大方面，化學除臭原理是通過外源強氧化物質對惡臭成份進行氧化降解，近而消除惡臭，其雖針對性強，見效快，但其應用范圍小，遇到復雜惡臭氣體成份時，除臭效能將失效，并且使用化學除臭劑后殘留的化學物質往往會引起二次污染。生物除臭原理是通過外源功能菌種或生物酶對惡臭的直接降解或對產惡臭微生物的抑制來脫除惡臭。生物除臭能持久消除惡臭，無二次污染，使用方便，成本低廉等特點，成為惡臭控制的研究熱點。生物除臭的核心是高效除臭功能微生物菌劑，通過分離篩選高效除臭功能菌株并優化組合配伍成微生物除臭菌劑，再接種于畜禽糞便中可以有效降低其釋放的惡臭強度，達到畜禽糞便惡臭原位控制目的。
發明內容
針對畜禽養殖場畜禽舎、糞污貯存池等主要惡臭釋放源，本發明的目的是提供一種高效微生物除臭菌劑及其制備方法。本發明提供ー種畜禽糞污微生物除臭菌劑，該菌劑含有保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO :5984的酵母菌種釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。進ー步地，本發明的畜禽糞污微生物除臭菌劑中，所述的杰丁畢赤酵母Pichiajadinii和釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae的菌液比例為2 I (體積/體積)。其中涉及的相關保藏信息為
保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址北京市朝陽區北辰西路I號院，中國科學院微生物研究所；保藏日期2012年4月10日；保藏編號CR(CGMCC NO :5982)和 NR (CGMCC NO :5984);分類名:CR 為杰丁畢赤酵母 Pichia jadinii,NR 為釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。本發明可以通過以下方式來實現I、所用的菌株為ニ株酵母菌，分別是CR (CGMCC NO :5982)和 NR (CGMCC NO :5984)，其中 CR 為杰丁畢赤酵母 Pichiajadinii, NR 為釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。2、ニ株酵母菌的優化配伍比例為CR NR=2:1 (體積/體積)，其中CR和NR分別為ニ株酵母菌發酵后的菌液，其菌液濃度均為108CFU/mL。·3、培養基(I) YPD固體培養基,用于菌種活化,其配方為蛋白胨20g、牛肉膏 10g、葡萄糖 20g、水 1000mL、瓊脂 15-20g、pH 6. 5-7. O0(2)用于微生物除臭菌劑發酵的液體培養基配方為蛋白胨5g、麥芽浸粉10g、氯化鈉5g、葡萄糖20g、水1000mL、pH 6. 5-7. O0固體菌劑所用吸附劑為經過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物，其用量為每升混合菌液(微生物除臭菌劑)加入吸附劑I千克；用于活化菌劑的促進劑為麥芽浸粉，其用量為每千克烘干菌劑中加入促進劑5g。4、菌劑的制備方法液態微生物除臭菌劑的制備方法為( I)將兩種菌種分別接入YPD固體斜面培養基活化備用。(2)將滅菌處理過的液體培養基定量備用。(3)將活化后的菌種分別接入滅菌處理過的液體培養基中培養24小時。(4)分別將培養好的各菌液計數調節(優選分別調ニ菌株的含菌量均為IO8CFU/mL)，然后將兩種菌液進行組合(優選按比例為2 1 (體積/體積)進行組合)，即為液態微生物除臭菌劑。固態微生物除臭菌劑的制備方法為( I)將滅菌處理過的麩皮或米糠或木屑或其混合物干燥定量，作吸附劑用。(2)每升混合菌液(上面制備得到的液態微生物除臭菌劑)加入吸附劑I千克，攪拌混勻，然后在40°C恒溫培養箱中烘干培養20-24小吋，至含水量為15-20%，即為烘干菌齊U，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進劑，攪拌均勻，即為固態微生物除臭菌劑，定量封包低溫保存。所述的吸附劑為經過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物；所述的促進劑為用于活化菌劑的麥芽浸粉。上述制備的微生物除臭菌劑的主要指標為液態微生物除臭菌劑活菌數大于等于I億CFU/mL ；pH 6-7 ;懸液、顏色微紅。固態微生物除臭菌劑活菌數大于等于I億CFU/g ;顆粒干燥、表面乳白。5、使用方法及條件
該微生物除臭菌劑用于畜禽養殖場畜禽舍、糞污貯存池等臭氣釋放場所。其使用方法為液態微生物除臭菌劑直接噴灑于畜禽舍和糞污貯存池；固態微生物除臭菌劑先用生理鹽水把菌劑調勻，在30°C環境下活化3-5小吋，隨后散撒在畜禽舍和糞污貯存池。本發明的優越之處在于(I)菌劑微生物可以在糞污中良好生長，占據有利生態位，抑制了產惡臭微生物生長繁殖，降低惡臭釋放強度，實現了惡臭原位源頭控制。(2)菌劑由有益微生物 酵母菌構成，酵母菌在糞污中的生長繁殖，構建充滿有益微生物的養殖環境，有效改善了養殖環境，提高了養殖動物免疫力，減少了抗生素使用量，保證了養殖動物食用安全。(3)實現了菌株的有效組合，組合后的菌劑比單菌除臭效果明顯提高。(4)改進了菌劑的保藏方法，延長了產品的使用壽命。(5)符合生物安全法規，菌劑中包含的菌株均從被畜禽糞便污染長期脅迫選擇環境中篩選得到，不會對周圍環境和生態平衡造成危害。(6)使用方面,包裝、運輸便利，易形成商品化。
具體實施例方式以下結合實施例詳細地說明本發明。實施方案為便于更好的理解本發明，但并非對本發明的限制。一、微生物除臭菌劑的制備實施例I :(I)、將高溫滅菌處理(121°C、30分鐘)的YPD固體培養基定量備用，固體YI3D培養基的配方為蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、水1000mL、瓊脂15-20g、pH 6. 5-7.0。(2)、將菌種CR和NR分別接入滅菌處理過(121°C、30分鐘)的YPD固體斜面培養
基中活化備用。(3)、將高溫滅菌處理過(121°C、30分鐘)的液體培養基定量備用，液體培養基配方為蛋白胨5g、麥芽膏10g、葡萄糖20g、水IOOOmL, pH 6. 5-7.0。(4)、將活化的菌種分別接入到液體培養基中振蕩(30°C、160轉/分鐘)培養24小時。(5)、將培養好的菌液計數，調ニ菌株的含菌量為108CFU/mL，在按CR NR=2:1的體積比進行組合成混合菌液，即為液態微生物除臭菌劑。(6)、將定量的混合菌液(液態微生物除臭菌劑)加入吸附劑中，加入量為混合菌液IL+吸附劑lKg，然后在40°C的恒溫培養箱中烘干(含水量為15% 20%)，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進劑，攪拌均勻，最后封包低溫保存(4°C -IO0O0ニ、微生物除臭菌劑的應用實施例2 向裝有200g新鮮豬糞的燒杯(1L)中加入IOml液態微生物除臭菌劑，保鮮膜密封燒杯；同時做不加菌劑的對照，每組實驗設置三個重復，15天后測定惡臭強度、氨氣濃度、硫化氫濃度，測定結果如下表I :表I :菌劑除臭效果
權利要求
1.一種畜禽糞污微生物除臭菌劑，其特征在于，其中含有保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO :5984的酵母菌種釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae。
2.一種如權利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑，其特征在于，所述的杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae的菌液比例為2 :1 (體積/體積)。
3.—種如權利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，先將保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO:5984的酵母菌種釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae分別在YPD固體斜面培養基中活化，再分別接種到菌劑液體培養基培養24小時，分別調二菌株的含菌量均為108CFU/mL，然后將兩種菌液進行組合，制備得到液態微生物除臭菌劑。
4.根據權利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，兩種菌液按比例為2:1 (體積/體積)進行組合。
5.根據權利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，所述的菌劑液體培養基的配方為蛋白胨5g、麥芽浸粉10g、氯化鈉5g、葡萄糖20g、水lOOOmL、pH6.5~7. O0
6.根據權利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，將制得的液態微生物除臭菌劑按每升混合菌液加入吸附劑I千克的比例，攪拌混勻，然后在40°C恒溫培養箱中烘干培養20-24小時,至含水量為15-20%,即為烘干菌劑，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進劑，攪拌均勻，即為固態微生物除臭菌劑。
7.根據權利要求6所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，所述的吸附劑為經過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物；所述的促進劑為用于活化菌劑的麥芽浸粉。
8.權利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑在畜禽糞污處理的除臭處理中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其具體使用方法為液態微生物除臭菌劑直接噴灑于畜禽舍和糞污貯存池；固態微生物除臭菌劑先用生理鹽水把菌劑調勻，在30°C環境下活化3-5小時，隨后散撒在畜禽舍和糞污貯存池。
全文摘要
本發明涉及一種畜禽糞污微生物除臭菌劑、其制備方法及應用。公開了用于公廁除臭的復合生物制劑，該復合生物制劑含有保藏編號為CGMCC NO5983的乳酸菌種乳桿菌Lactobacillus sp、保藏編號為CGMCC NO5985的乳酸菌種嗜熱鏈球菌Streptococcus thermophilus和桔皮提取液。本發明還公開了上述復合生物制劑的制備方法，包括液態復合生物制劑和固態復合生物制劑的制備方法；以及該復合生物制劑的用途。
文檔編號C12N1/18GK102851210SQ20121019060
公開日2013年1月2日 申請日期2012年6月11日 優先權日2012年6月11日
發明者閆志英, 劉曉風, 袁月祥, 廖銀章, 李志東, 許力山 申請人:中國科學院成都生物研究所