一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法
【專利摘要】本發明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，涉及一種花粉萌發能力的測定方法，特別是涉及一種用于甜瓜的花粉萌發能力的測定方法。其目的是為了提供一種耗時短、操作簡單、成本低的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法。本發明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法包括以下步驟：制備培養液；花粉萌發培養；觀察統計。本發明的一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，培養液制備方便，操作簡單，耗時短，成本低，效果好。本發明用于甜瓜花粉萌發能力的測定領域。
【專利說明】一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種花粉萌發能力的測定方法，特別是涉及一種用于甜瓜的花粉萌發 能力的測定方法。
【背景技術】
[0002] 公元前4000-2000年，生物技術首次被人類利用，將某些雄性樹的花粉選擇性地 授予雌性樹來培育棕櫚樹。18世紀初實現了在不同谷物植物中成功雜交。花粉的離體培養 開始于20世紀50年代，Tulecke首先培養銀杏的成熟花粉粒得到愈傷組織。我國的研究 始于20世紀70年代，將花粉離體培養和傳統育種手段相結合先后培育出大批具有研究和 應用價值的品種，如煙草、小麥、玉米、甜椒等。
[0003] 在生物技術工作中，珍貴、稀有遺傳種質的儲備很重要，而成熟花粉包含著植物的 全部遺傳信息，花粉貯藏是有效利用珍稀種質的簡捷、高效途徑。為了進行雜交授粉和人工 輔助授粉，通常需要早期采集和貯藏花粉，尤其是在雜交育種中，為解決親本花期不一致 和遠距離雜交的問題，都需要進行花粉貯藏，需要對花粉活力進行測定，從而打破雜交親本 的空間和時間隔離，擴大雜交育種的范圍，增加獲得新品種的機會。
[0004] 花粉活力是指花粉具有存活、生長、萌發或發育的能力。花粉壽命表示花粉在自然 狀態下的生命期限，是影響花粉活力的一個重要因素。花粉活力受自身遺傳特性和外界因 素的影響。
[0005] 在親本花期不一致或者遠距離雜交的研究中，運輸及貯藏花粉經常需要對花粉活 力進行測定。現有技術對花粉活力的測定中，采用固體培養基培養操作相對復雜，不便于攜 帶和制備，無法隨時使用；而采用液體培養基，一般需要培養2小時左右才能進行觀察和測 定，且大多需要蓋上蓋玻片，蓋蓋玻片會導致花粉生長一段時間后因缺氧死亡，無法觀察花 粉從開始生長到釋放內容物的全過程，如何快速的培養花粉萌發，也是目前急需解決的問 題。
【發明內容】
[0006] 本發明是為了解決以上技術問題，而提供的一種耗時短、操作簡單、成本低的快速 有效測定甜瓜花粉活力的方法。
[0007] 本發明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0008] -、培養液的制備；
[0009] 二、將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在培養液上； [0010] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在黑暗或自然光中培養 2〇-30min； toon] 四、鏡檢，計算萌發率；
[0012]其中，所述的培養液包括質量濃度為10 % -15 %的蔗糖、質量濃度為 0. 01% -0. 05%的硼酸和水。
[0013] 可選的，本發明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法中所述步驟一中的培養基 中還包括氯化鈣，所述的氯化鈣的濃度為0. 01% -0. 05%。
[0014] 本發明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法具有如下有益效果：
[0015] 1、采用本發明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，只需培養20-30分鐘即可得 到結果，大大縮短了實驗時間，該方法操作簡單，更適用于實際的生產應用。
[0016] 2、本發明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法中，培養基質的配制簡單易操作， 相比人工及大型機械等費用、成本低。
[0017] 3、采用本發明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，可以實時觀察，提前檢測花 粉活力，避免直接人工授粉后由于甜瓜花粉活性的缺失，而造成的制種經濟損失。
[0018] 下面結合實施例和驗證試驗對本發明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法作進 一步說明。
【具體實施方式】
[0019] 實施例1
[0020] 本實施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0021] 一、制備培養液：稱取125g蔗糖、0. 2g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養液；
[0022] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養液上；
[0023] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在自然光中培養30min;
[0024] 四、鏡檢，計算萌發率。
[0025] 實施例2
[0026] 本實施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0027] -、制備培養液：稱取140g蔗糖、0. 5g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養液；
[0028] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養液上；
[0029] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在黑暗中培養20min;
[0030] 四、鏡檢，計算萌發率。
[0031] 實施例3
[0032] 本實施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0033] -、制備培養液：稱取IOOg蔗糖、0. 3g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養液；
[0034] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養液上；
[0035] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在自然光中培養25min;
[0036] 四、鏡檢，計算萌發率。
[0037] 實施例4
[0038] 本實施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0039] -、制備培養液：稱取150g蔗糖、0.Ig硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養液；
[0040] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養液上；
[0041] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在自然光中培養30min;
[0042] 四、鏡檢，計算萌發率。
[0043] 實施例5
[0044] 本實施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0045] 一、制備培養液：稱取IlOg蔗糖、0. 4g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養液；
[0046] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養液上；
[0047] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在黑暗中培養20min;
[0048] 四、鏡檢，計算萌發率。
[0049]經鏡檢驗證，實施例1-5中培養的花粉，萌發率高于95%，花粉管長度為花粉粒直 徑的6-8倍，花粉管生長的一致性高，適于萌發率的觀察和計算。
[0050] 驗證試驗
[0051] 為了驗證本發明快速有效測定甜瓜花粉活力的方法的效果，設計以下試驗進行驗 證。
[0052] 不同培養基配方對甜瓜花粉活力測定的影響
[0053] 1、設計9組含蔗糖和硼酸的不同濃度梯度的培養培養液，編號1-9 ;3組添加不同 濃度氯化鈣的培養液，編號10-12 ;由于目前沒有針對甜瓜花粉的培養基，也沒有同屬種花 粉的培養基，所以選用花粉基本培養基作為對照：蔗糖濃度2 %，硼酸濃度0. 1 %，氯化鈣濃 度0. 1% (所述濃度均為質量濃度）。具體參數如表1所示。
[0054] 表1對比試驗中各成分的配比
[0055]
【權利要求】
1. 一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，其特征在于包括以下步驟： 一、 培養液的制備； 二、 將一滴步驟一中制備的培養液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在培養液上； 三、 將載玻片置于放有濕濾紙的培養皿中，放置在黑暗或自然光中培養20-30min ; 四、 鏡檢，計算萌發率； 其中，所述的培養液包括質量濃度為10% -15%的蔗糖、質量濃度為0. 01% -0. 05%的 硼酸和水。
2. 根據權利要求1所述的一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，其特征在于：所述 步驟一中的培養基中還包括氯化鈣，所述的氯化鈣的濃度為0. 01% -0. 05%。
【文檔編號】C12Q1/02GK104357532SQ201410534166
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月11日 優先權日:2014年10月11日
【發明者】黨繼革, 范冬冬, 趙翠媛, 代云志, 李濤, 吳濤, 高雪萍, 張慧 申請人:河北雙星種業有限公司