專利名稱：：控制脂肪細胞脂肪積聚的方法
技術領域：
：本發明涉及用于控制脂肪積聚和防治體重增加的組合物和方法。例如，本發明涉及采用包含一種多甲氧基化黃酮的組合物，以控制脂肪細胞內脂肪的積聚和阻止脂肪形成的方法。在一些實施方式里，提供了防止巳經歷減肥的個體的體重反彈的方法。3.
背景技術：
肥胖癥是一種重要的難以滿足的醫療需求，正蔓延性增長。三分之一多的美國人屬于臨床上的超重，體重控制的年均花費超過了300億美元。在人體，肥胖癥的特征在于儲存脂肪的脂肪細胞數量(超常增生)以及大小(肥大)的增加。通過脂肪形成產生新的脂肪細胞，這是一個過程，通過該過程位于脂肪組織(前體脂肪細胞)的特異性成纖維細胞被觸發進行脂肪細胞分化。在哺乳動物整個生命期里，新生的脂肪細胞分化可由補充成纖維細胞前體開始啟動。抗肥胖癥藥物是許多醫藥公司的主要目標，目前市場上尚無有效的藥物。急需預防、治療肥胖癥的有效的食品添加劑或安全有效的藥物。4.發明概要一方面，本發明提供控制脂肪積聚的方法。在一些實施方式里，本發明提供控制脂肪在脂肪細胞中積聚的方法。在一些實施方式里，脂肪細胞是在個體，優選為哺乳動物，最優選為人中。特別是，所提供的方法包含給予個體有效量的包含一如下所述的多甲氧基化黃酮(PMF)組分的組合物，依此控制個體內脂肪細胞里的脂肪積聚。在某些實施方式里，提供了方法，以控制超重的或肥胖的個體內脂肪積聚。在一些實施方式里，人具有不希望的體重增加史，在沒有用上述描述的控制脂肪積聚方法治療時容易變成超重或者肥胖。在某些實施方式里，本發明所提供的方法在有需要的人里預防脂肪的形成。在某些實施方式里，本發明所提供的方法在有需要的人里預防在成熟脂肪細胞內的脂肪積聚。在某些實施方式里，本發明所提供的方法用來預防脂肪細胞中的脂肪積聚，包含使脂肪細胞與包含多甲氧基化黃酮(PMF)組分和非PMF組分的組合物接觸。在一些實施方式里，脂肪細胞與組合物體外接觸。在一些實施方式里，脂肪細胞在個體內與組合物接觸。在另一方面，本發明提供預防有需要的人的反彈性體重增加的方法，該方法包含給予個體有效量的包含如下所述的PMF組分的組合物，依此阻止反彈性體重增加。本方面所述的組合物包含一種或多種PMF。在某些實施方式里，本組合物包含一PMF組分和一非PMF組分，其中PMF組分包含一種或多種PMF。在某些實施方式里，本發明的組合物包含一種橙皮提取物。在一些實施方式里，本發明的組合物基本上由橙皮提取物組成。一般而言，本組合物不是一種自然原料，例如橙皮。在某些實施方式里，本發明的組合物包含30X(w/w)(干重)一75%(w/w)(干重)的PMF組分。在某些實施方式里，本發明的組合物包含40X(w/w)(干重)一75X(w/w)(干重)的PMF組分。在一些實施方式里，PMF組分的含量范圍為0.5%(w/w)—5%(w/w)，1%(w/w)—10%(w/w)，10%(w/w)—20%(w/w)，20%(w/w)—30%(w/w)，30%(w/w)_40%(w/w)，40%(w/w)—50%(w/w)，50%(w/w)—60%(w/w)，60%(w/w)—70%(w/w)，70%(w/w)—80%(w/w)，80%(w/w)—98%(w/w)。在一些實施方式里，本發明所述組合物的PMF組分包含PMF中的至少1種，至少2種，至少3種，至少4種，至少5種，至少6種，至少7種，至少8種，至少9種，至少10種，至少11種，至少12種，至少13種，或至少14種，選自以下的PMF:5,6,7,3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5，6，7，8，3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6，7，8，4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6，7，8,3，,4'-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；5,7,8,3，，4，-五甲氧基黃酮；5，7，8，4'-四甲氧基黃酮;3，5，6，7，8，3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6,7，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；5_羥基-6，7，8,4'-四甲氧基黃酮；5，6，7,4，-四甲氧基黃酮;7-羥基-3,5，6,8，3，，4'-六甲氧基黃酮;和7-羥基-3,5,6,3，，4，-五甲氧基黃酮。在一些實施方式里，本發明所述組合物的PMF組分由PMF中的至少1種，至少2種，至少3種，至少4種，至少5種，至少6種，至少7種，至少8種，至少9種，至少10種，至少11種，至少12種，至少13種，或至少14種選自以下的PMF組成5,6,7,3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；5，6，7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6,7，8，4，-五甲氧基黃酮(桔皮素);5-羥基-6，7'8，3，,4'-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7，8,3，，4'-四甲氧基黃酮；5,7-雙羥基-6，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5,7,8,3，，4，-五甲氧基黃酮；5,7,8，4'-四甲氧基黃酮;3，5,6，7，8，3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6,7，8,3',4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8,4，-四甲氧基黃酮；5,6，7，4，-四甲氧基黃酮;7-羥基-3,5，6，8，3',4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3，5，6，3'，4'-五甲氧基黃酮.在一些實施方式里，本發明所述組合物包含PMF混合物，其中組合物中PMF的濃度不同于在該PMF天然原料中的濃度，或組合物中一種PMF與另一PMF的比例不同于各PMF在天然原料里的比例。這種組合物可通過以下方法制備例如，加工PMF的天然原料，例如橙皮，以致于至少一種特殊的PMF被選擇性地除掉、保留或富聚。可選擇地，一種或多種分離的或合成的PMF可用于制備上述組合物或能加入到PMF天然原料的加工物里。在一些實施方式里，本發明所述組合物包含一種橙皮提取物。在一些實施方式里，本發明所述組合物是一種營養品組合物，包含一種或多種PMF和食品、食品添加劑、膳食補充劑或藥膳食品。典型地，在本發明所述的方法里，個體所給予的組合物的量每天可為約0.05mg，約O.1mg，約0.5mg，約1.Omg,約5mg,約10mg，約15mg，約20mg，約25mg,約30mg，約35mg，約40mg，or約50mg，to約75ing，約100mg,約200mg，約250mg，約300mg,約400mg，約500mg，約600mg，約700mg，約750mg，約800mg，約900mg,約1g,約2g,約3g，或約5g。在某些實施方式里，按本發明所述的方法，給予個體的組合物里PMF組分的量的變化范圍每天可為約0.05mg，約0,1mg，約0.5mg，約1.0mg，約5mg，約10mg，約15mg，約20mg，約25mg，約30mg，約35mg,約40mg,or約50mg，to約75mg，約100mg,約200mg，約250mg,約300mg，約400mg，約500mg，約600mg,約700mg，約750mg，約800mg,約900mg，約1g，約2g，約3g，或約5g。在一些實施方式中，本組合物每天可以被給予1次、2次或多次。在一些實施方式中，本組合物可連續數日給予，如2天、3天或更多天，直到約7天、約2周、約3周、約4周、約30天、約5周、或約6周。在一些實施方式中，本組合物可偶爾被給予，例如，當個體已攝取或打算攝取高碳水化合物或高脂肪含量的食物時給予。在一些實施方式中，按本發明所述方法，給予的組合物可采取口腔黏膜、鼻腔、口服、非腸胃道、直腸、舌下、局部給藥或透皮途徑給予在一些實施方式中，本發明所述方法里給予的組合物可采用下列劑型被給予氣霧劑、咀嚼棒，散狀或蓬松干粉，膠囊，乳膏，飲料，酏劑，乳劑，液劑，膠體，顆粒劑，咀嚼膠，洗劑，錠劑，軟膏劑，糊劑，貼劑，丸劑，粉劑，溶液劑，噴劑，栓劑，混懸劑，糖漿劑，片劑，茶劑，酊劑，吸入劑或薄片。5.圖1提供在采用關于用DMS0處理的細胞組(對照)或不同濃度上述試驗組合物處理的細胞組的基于色度法的3T3-L1細胞增殖/細胞毒性分析所得的平均吸光率(光密度單位)。這些結果表明在試驗組合物約20微克/mL或更高濃度下細胞增殖被抑制。圖2提供了在第0("生長")、2、4、10天時，在沒有試驗組合物的條件下用分化因子處理的前體脂肪細胞標志基因的被觀察到RNA表達水平。圖3提供了在第4、10天時，相對對照細胞水平(見圖2)，用試驗組合物處理的細胞標志基因的RNA表達水平的百分比變化。圖4提供了用試驗組合物處理的細胞內HMGA2的表達水平。圖5提供了喂養標準飲食、標準飲食加包含PMF的組合物、高脂肪飲食或髙脂肪飲食加包含PMF的組合物的小鼠食物消耗每周均值(單位大卡)。圖6提供了喂養標準飲食(SD)、標準飲食加包含PMF的組合物(SD70y。0PE)、高脂肪飲食(HFD)或高脂肪飲食加包含PMF的組合物(HFD70%0PE)的小鼠體重增加百分比。圖7提供了喂養標準飲食(SD)、標準飲食加包含PMF組合物(SD70%0PE)、高脂肪飲食(HFD)或高脂肪飲食加包含PMF的組合物(HFD7(W0PE)的小鼠體脂肪百分比。圖8提供了喂養16周的標準飲食(SD)、標準飲食加包含PMF的組合物(SD70。/。0PE)、高脂肪飲食(HFD)或高脂肪飲食加包含PMF的組合物(HFD70M0PE)的小鼠個體脂肪墊重量。圖9提供了采用不同飲食的小鼠的血糖控制。4個小時禁食后檢測小鼠禁食血糖水平(A)和糖基化血紅蛋白(HbAlc)(B)。圖10提供了高脂肪飲食轉換成高脂肪飲食加包含70%0PE喂養小鼠的體重增長百分比以及高脂肪飲食加包含70%0PE轉換成高脂肪飲食喂養小鼠的體重增長百分比。圖11提供了采取指定的食譜包括轉換食譜喂養的小鼠脂肪量百分比。圖12提供了采取指定的食譜包括轉換食譜喂養的小鼠個體脂肪墊重量。6.術語在本文，"約"是指不高于或低于被該詞修飾的數值的10%的數值。例如，"約5分鐘"意味為4.5-5.5分鐘的范圍。在本文，"組合物"為包含藥學組分、生理可接受的組分和營養制品組分。應該理解的是，在一個"組合物"中，一個組分，例如，一種PMF，也存在于天然原料(如橙皮)中時，術語"組合物"不由該組分的天然原料(例如，橙皮)構成，但在一些實施例里可包含該天然原料的物理或化學改性的或加工的形式，例如這種天然原料的提取物。在本文，"有效量"是指當被給予個體時，化合物或組合物的量足夠產生希望的或有益的效果。在某些實施例中，與未同該化合物或組合物接觸的前體脂肪細胞或未被給予該化合物或組合物的個體的脂肪細胞比較，化合物或組合物的"有效量"能預防、遲滯、減緩或減少與該化合物或組合物接觸的脂肪細胞內或被給予該化合物或組合物的個體的脂肪細胞內脂肪，如三酰基甘油的積聚。在一些實施例中，與未被給予該化合物或組合物的個體比較，該化合物或組合物的"有效量"能預防、遲滯、減緩或減少被給予該化合物或組合物的個體的反彈性體重增加。當用在從天然原料獲得的化合物組合物的場合時，"分離的"是指從來源于天然原料的一種或多種組分中分離出的化合物或組合物。天然原料可為真菌類、植物或動物或由真菌類、植物或動物產生的天然或非天然的產物，包括血液、胞質、樹葉、乳汁、黏液、果皮、血漿、樹脂、殼、樹液、唾液、莖、汗液、尿液等。因此，一種"分離的"化合物或組合物是處在一種形式，以致于它的濃度或純度高于它在天然原料中的濃度或純度。。例如，在某些實施例中，一種"分離的"化合物或組合物能通過從天然原料純化或部分純化該化合物或組合物而獲得。在一些實施例中，一種"分離的"化合物或組合物能通過合成、生物合成或半合成的有機化學反應混合物而體外獲得。在本文，"控制"、"控制中"和"控制"是指當本發明所述方法被應用到個體時，該個體所獲得的有益效果。在某些實施例中，與未被給予組合物的個體比較，個體被給予本發明所述"控制"脂肪積聚的組合物，以便預防、遲滯、減緩或減少該個體的脂肪細胞中脂肪的積聚。在一些實施例中，與未被給予組合物的個體比較，體被給予本發明所述"控制"脂肪積聚的組合物，以便預防、遲滯、減緩或減少個體的脂肪形成。除非另有所指，"多甲氧基化黃酮"或"PMF"是指具有下列結構的化合物其中，在化學價許可下，上述結構式上至少1個碳原子，優選2個或多個碳原子與-0CH3基團連接(取代一個或多個H，未在結構式標出)。任意地，取代基，例如羥基、鹵素、單糖或其它基團，可取代到1個或多個未被甲氧基取代的碳原子上。例如，一種"羥基化PMF"是1個或多個羥基連接到未被甲氧基取代的碳原子上的PMF."反彈性體重增加"是指伴隨個體停止或減少鍛煉療法、限制熱量飲食或服藥(包括煙草)時，個體內身體脂肪的增加發生，超過了個體減肥或保持他或她體重的時期。典型地，"反彈性體重增加"是出現在個體停止或減少鍛煉療法、限制熱量飲食或服藥(包括煙草)后數天、數周、更普遍地為數月直到一年的時期。"溶劑化物"是指一種化合物，例如，一PMF，還包括化學計量或非化學計量量的通過非共價的分子間力而結合的溶劑。當溶劑是水時，溶劑化物為水合物。在本文，"個體"是指一哺乳動物(例如小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、牛、豬、馬、驢、山羊、綿羊、駱駝、貓、狗)，更優選為靈長類(例如猴子、猿、大猩猩、黑猩猩)，和最優選為人類。7.發明詳述脂肪細胞的主要功能是在過量的能量可用時儲備三酰基甘油或脂肪。正如下面實施例的結果所支持的，一種包含如多甲氧基化黃酮(PMF)組分的組合物能有效的控制個體內脂肪積聚。尤其，不必然局限任何特別的理論或機理，實施例中的結果表明包含PMF的組合物能遲滯或阻止脂肪形成，也減少或阻止了脂肪積聚進入脂肪細胞。采用包含PMF組分的組合物的方法在7.1節描述。包含PMF的組合物和它們的制備方法在7.2節描述。7.1使用包含PMF組分的組合物的方法一方面，本發明提供控制脂肪積聚的方法。在某些實施方式里，本發明提供控制脂肪細胞里脂肪積聚的方法。在一些實施方式里，脂肪細胞在個體里，優選為哺乳動物，最優選為人。在一些實施方式里，本方法提供包含給予個體有效量的含多甲氧基化黃酮(PMF)組分的組合物，依此控制個體內脂肪細胞里脂肪積聚。在某些實施方式里，提供了方法，以控制超重的或肥胖的個體內的脂肪積聚。在一些實施方式里，有意外體重增加歷史的人群，在沒有上述描述的控制脂肪積聚方法的情況下，是易于變得體重超重或肥胖。在某些實施方式里，本發明為有需要的人提供控制脂肪積聚的方法，其特征在于脂肪形成被控制、被阻止、被遲滯、被減緩或被減少。在一些實施方式中，本發明為有需要的人提供控制脂肪積聚的方法，其特征在于成熟脂肪細胞內脂肪積聚被控制、被阻止、被遲滯、被減緩或被減少。在某些實施方式里，本發明控制脂肪積聚的方法是滿足具有減肥需求的人或保持體重需求的人。具有減肥需求的人體普遍具有的體質指數(BMI)超過正常值(如25)。在一些實施例里，人體具有體質指數(BMI)^30，即肥胖個體。一方面，本發明為有需要的人的提供控制反彈性體重增加的方法，該方法包含給予該個體有效量的包含PMF組分的組合物，依此控制反彈性體重增加。在某些實施例里，本發明提供控制伴隨個體停止或減少鍛煉療法、限制熱量飲食或服藥(包括煙草)的個體的反彈性體重增加的方法。在一方面，本發明為個體提供減肥、控制體重、阻止反彈性體重增加的方法，該方法包含給予該個體有效量的組合物，該組合物包含一至少40X(w/w)(干重)_75%(w/w)(干重)的多甲氧基化黃酮(PMF)組分。在某些實施例里，該組合物包含一至少30X(w/w)(干重)—75%(w/w)(干重)的PMF組分。一方面，為了增加個體痩體重或肌肉體重，本發明所提供的方法包含給予個體有效量的組合物以有效減少個體內脂肪積聚，其中該組合物包含一至少40%(w/w)(干重)一75%(w/w)(干重)的多甲氧基化黃酮(PMF)組分，從而增加個體瘦體重或肌肉體重。在某些實施例里，該組合物包含一至少30%(w/w)(干重)—75%(w/w)(干重)的PMF組分。在另一方面，為了減少個體腰圍，本發明所提供的方法包含給予個體有效量的組合物，該組合物包含一至少40%(w/w)(干重)一75%(w/w)(干重)的多甲氧基化黃酮(PMF)組分。在某些實施例里，該組合物包含一至少30%(w/w)(干重)_75%(w/w)(干重)的PMF組分。一方面，為了增加個體代謝率，本發明所提供的方法包含給予個體有效劑量一組合物，該組合物包含一至少40%(w/w)(干重)—75%(w/w)(干重)的多甲氧基化黃酮(PMF)組分。在某些實施例里，該組合物包含一至少30%(w/w)(干重)_75%(w/w)(干重)的PMF組分。另一方面，為了阻止脂肪細胞內的脂肪積聚，本發明所提供的方法包含使脂肪細胞與包含PMF組分的組合物接觸。7.2包含PMF的組合物和它們的制備方法本發明所提供的組合物通常包含PMF組分和非PMF組分。在某些實施例里，PMF組分包含一種或多種PMF。在某些實施例里，PMF能從天然原料中分離，如提取，以作為本發明所述方法中所使用的組合物的內含物。在一些實施例中，組合物是一種包含PMF組分的天然原料的提取物。在一些實施例里，本發明所述方法中所使用的組合物包含來源于冷壓處理的橙皮油固體的提取物。優選的，本發明所述方法中所使用的組合物包含來源于夏橙和哈姆林橙的提取物。在一些實施例里，本發明所述方法中所使用的組合物包含PMF的混合物，其中組合物中PMF的濃度不同于天然原料中該PMF的濃度。在一些實施例里，本發明所述方法中所使用的組合物包含一PMF組分，其中組分中的一種PMF與另一種PMF的比例不同于在PMF在天然原料里的比例。在某些實施例里，PMF能合成獲得，以作為本發明所述方法中所使用的組合物的內含物。PMF能無限定地使用任何合成或半合成技術合成獲得。常見的黃酮合成路線可在，例如，CushmanandNagarathnarn(1990)TetrahedronLetters31:6497-6500中找至lj。通常，高效液相色譜(HPLC)可被用作一種純化或部分純化PMF的制備技術，也可作為分析技術鑒別來源于天然原料的混合物或合成反應混合物中PMF。例如，為了分離橙皮提取物中的PMF，采用尺寸為4.6mmi.d.,x25cm長的硅膠HPLC柱(MacModAnalyticalCo.,ChaddsFord，PA)，采用10%—90%氯仿(溶于已烷)梯度洗脫(20分鐘)，加上20分鐘90%氯仿洗脫。PMF的分子量鑒別采用大氣壓化學電離質譜。在某些實施例里，本發明所述方法中所使用的組合物包含30%(w/w)(干重)一75%(w/w)(干重)的一PMF組分。在某些實施方式里，本發明的組合物包含40%(w/w)(干重)_75%(w/w)(干重)的一PMF組分。在一些實施方式里，PMF組分的含量范圍為0.5%(w/w)—5%(w/w)，1%(w/w)—10%(w/w),10%(w/w)—20%(w/w)，20%(w/w)—30%(w/w)，30%(w/w)—40%(w/w)，40%(w/w)—50%(w/w)，50%(w/w)—60%(w/w)，60%(w/w)—70%(w/w)，70%(w/w)—80%(w/w)，80%(w/w)—98%(w/w)。應該理解的是，PMF組分可包含一種PMF或包含多種PMF。在某些實施例里，本發明所述方法中所使用的組合物的PMF組分至少包含5,6，7，3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5，6,7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6,7,8,4'-五甲氧基黃酮(桔皮素);5-羥基-6，7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7，8，3，，4'-四甲氧基黃酮；5,7-雙羥基-6，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5,7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮;5，7，8,4'-四甲氧基黃酮;3，5，6，7，8，3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3,6,7,8，3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8，4'-四甲氧基黃酮；5，6，7，4，-四甲氧基黃酮;7-羥基_3，5，6，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；和7_羥基-3，5，6,3，，4'-五甲氧基黃酮中之一。在一些實施方式里，本發明所述方法中使用的組合物的PMF組分包含PMF中的至少1種，至少2種，至少3種，至少4種，至少5種，至少6種，至少7種，至少8種，至少9種，至少10種，至少11種，至少12種，至少13種，或全部PMF，該PMF選自5,6,7,3，,4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5,6，7，8,3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素);5，6，7，8，4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6,7,8,3'，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7，8，3，，4'-五甲氧基黃酮；5,7,8，4，-四甲氧基黃酮;3，5，6，7，8,3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3,6，7,8,3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6,7,8,4，-四甲氧基黃酮;5，6，7，4，-四甲氧基黃酮;7-羥基-3，5，6，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3,5，6，3，，4，-五甲氧基黃酮。在一些實施方式里，本發明所述方法中所使用的組合物由一種或多種PMF組成。在一些實施方式里，本發明所述方法中所使用的組合物基本上由一種或多種PMF組成。在一些實施方式里，本發明所述方法中使用的組合物的PMF組分包含一種或多種PMF，該PMF選自5,6，7，3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；5，6，7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素);5，6，7,8，4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6,7,8,3，，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7，8，3'，4，-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6，8，3',4'-四甲氧基黃酮；5，7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮;5，7，8，4'-四甲氧基黃酮;3，5，6，7,8,3，,4，-七甲氧基黃酮;5-羥基-3,6,7，8,3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8，4'-四甲氧基黃酮；5，6,7，4，-四甲氧基黃酮；7-羥基-3,5,6,8，3'，4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3,5，6，3，，4，-五甲氧基黃酮。在一些實施方式里，本發明所述方法中所使用的組合物包含羥基化的多甲氧基黃酮。在一些實施例中，該組合物至少包含5-羥基-6,7,8,3'，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7,8,3',4'-四甲氧基黃酮；5,7-雙羥基-6，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5-輕基-3，6，7，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6,7，8,4，-四甲氧基黃酮；7-羥基-3,5,6,8,3，，4'-六甲氧基黃酮;和7-羥基-3，5,6,3'，4'-五甲氧基黃酮中之一。在一些實施方式里，本發明所述方法中所使用的組合物包含五甲氧基黃酮、六甲氧基黃酮、七甲氧基黃酮或八甲氧基黃酮。在一些實施例中，該組合物至少包含5,6,7，8，3'，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；3，5，6，7，8，3'，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基_3，6，7，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；7-羥基_3，5，6,8,3'，4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3,5，6,3'，4'-五甲氧基黃酮中之一。在一些實施方式里，本發明所述方法中所使用的組合物包含一種或多種羥基化的PMF。在某些實施方式里，本組合物包含PMF組分和一種或多種非PMF組分，其中PMF組分包含一種或多種羥基化的PMF。在一些實施方式里，本發明所述方法中使用的組合物或組合物中的PMF組分基本上由一種羥基化的PMF，或至少2種，至少3種，至少4種，至少5種，至少6種，或更多種羥基化的PMF組成，該羥基化的PMF選自3-羥基-5，6，7，4，-四甲氧基黃酮；3-羥基_5，6，7，8，4，-五甲氧基黃酮;3-羥基-5,6,7,8,3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-3，6，7，8,3，，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-3，7，8，3，,4，-五甲氧基黃酮;5-羥基-3，7，3，，4'-四甲氧基黃酮；5-羥基-6,7,8,3，，4'-五甲氧基黃酮；5-羥基6,7，8，3'，4，，5'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6,7，8,4'-四甲氧基黃酮；5-羥基-6,7，4，-三甲氧基黃酮；5，3'-雙羥基-6,7,8,4，-四甲氧基黃酮；5-羥基-7,8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5,7-雙羥基-6,8,3，，4'-四甲氧基黃酮；7-羥基-3,5,6，8，3',4，-六甲氧基黃酮；7-羥基-3,5，6，3'，4'-五甲氧基黃酮;3'-羥基-5,6，7，4'-四甲氧基黃酮；3，-羥基-5,6,7，8，4，-五甲氧基黃酮；3',4'_雙羥基-5,6,7,8-四甲氧基黃酮；和4'-羥基-5，6，7，8，3，-五甲氧基黃酮。在一些實施方式里，本發明所述方法中使用的組合物不含有可檢測數量的檸檬苦素類化合物。在一些實施方式里，本組合物不含有可檢測濃度的檸檬苦素或nomalin。7.2.1營養制品在一些實施方式里，本發明所述方法中使用的組合物可為營養組合物。在本文，術語"營養組合物"是指包含食品、食品添加劑、營養添加劑、藥膳或特殊營養用途食物和PMF組分的組合物。在一些實施方式里，本發明所述營養組合物常包含一種或多種可消費的媒介物、載體、輔料或填充劑。術語"可消費的"是指通常適合被動物或更具體被人消費的或被聯邦或州政府監督部門認可的。在本文，"食品"是指預期能被動物包括人所消費的任何物質，無論是加工的、半加工的或生的，但不包括化妝品、煙草制品或僅作為藥物的物質。在本文，術語"營養添加劑"是指補充日常膳食的物質(不包括煙草)。通常，營養添加劑是指被標識為營養補充品的物質，不被描述以常規食物或作為膳食或日常飲食的一項而使用。通常，營養添加劑包括一種或多種下列營養成分維生素、礦物質、草本或其它植物、氨基酸、通過增加整個營養攝取補充營養而為人所用的營養品、或任何組分的濃縮物、代謝物、組成物、提取物或這些成分的組合。。營養添加劑能不依賴于任何食物地被人消費，不像在食物加工、制造、準備或運輸過程中或剛在它消費前摻合到食品中的食品添加劑。在本文，術語"藥膳"是指以在醫生監督下被消費化或腸內給藥而按配方制造的、為針對疾病的特定膳食管理的，基于已公知的科學原理被醫學評價所確認的特殊營養要求的食物。藥膳例子包括但不限于單來源營養產品(solesourcenutritionproducts),它為完全的營養產品，可用于替代所有其它食物攝取；口服再水合溶液，用于替代腹瀉或嘔吐后損失的體液和電解質；含有特別選擇的成分的模塊營養產品(modularnutrientproducts),它無意成為全面的營養來源但是設計為針對特定的疾病的管理，它還連帶地主張具有直接或暗示的功效；以及打算用于先天性代謝障礙的膳食管理的產品。在本文，"特殊營養用途的食物"指的是一種食物，它意圖用于或被描述用于至少下列情況之一供應特殊的飲食需求，因身體、生理、病理或其它情況的原因，包括但不限于疾病、康復、懷孕、哺乳、嬰幼兒期、食物過敏性超敏反應、體重過輕、超重或控制鈉攝取需求的情況；補充維生素、礦物質或通過增加總的膳食攝取來補充膳食的其它成分；以及作為膳食的單項而使用的食物的原因而提供的特殊膳食需求。本發明所述方法所用的營養制品也包括1種或多種能帶來額外健康的或醫學的益處的其它成分。在一些實施例中，本發明所述方法所用的營養制品包括PMF組分和1種或多種"公認安全的""GenerallyRegardedAsSafe"("GRAS")物質。i午多GRAS物質是公知的，已被列在多份美國公共健康部門的規章中，21CFR73，74，75,172，173,182，184and186。這里這些規章作為整體引入本文。在某些實施例里，術語"藥膳"或"特殊營養用途食物"、"營養添加劑"或"食品添加劑"的詞義如美國州政府或聯邦政府的監督部門，包括美國食品藥品管理局，所定義的詞義。在一些實施例中，本發明所述方法所用的營養制品包含約0.001%-90y。重量比的PMF組分。該組合的其它量可以是約0.0075%-約75%,約0.005%-約50%，約0.0P/。-約35%,0.1%-約20%,0.1%-約15%,1%-約10%，和2%—7%重量比的PMF組分。7.2.2藥物配方在一些實施例中，本發明所述方法所用的包含1種或多種PMF和1種或多種生理上可接受的載體或輔料的藥物組合物可采用常規方法制劑。1種或多種生理上可接受的載體或輔料和1種或多種PMF及其生理上可接受的鹽和溶劑化物的組合可按吸入或噴射入(通過口或鼻腔)口服、黏膜、非腸胃道、直腸或透皮途徑服用方法而制劑。為了口服給藥，藥物組合物可采用例如藥片或膠囊的形式，這些可以與藥學上可接受的賦形劑，如黏合劑(例如預先明膠化的玉米淀粉、聚乙烯基吡咯烷酮、或羥丙基甲基纖維素)，填料(如乳糖、微晶纖維素、或磷酸氫鈣)，潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石粉或硅膠)，崩解劑(如馬鈴薯淀粉和羥基乙酸淀粉鈉)，或潤濕劑(如月桂基硫酸鈉)一起用常規的方法制備。藥片可用本領域公知的方法包衣。口服用的液體制劑可采用例如溶液、糖漿或懸浮液的形式，或者可才用干粉的形式，在使用前用水或其他合適的載體重建。這樣的液體制劑可與藥學上可接受的添加劑(如山梨糖醇糖漿、纖維素衍生物或氫化的使用脂肪)，乳化劑(如卵磷脂或阿拉伯樹膠)，非水性介質(如杏仁油、油脂、乙醇或分級的植物油)，和防腐劑(如對羥基苯甲酸架酯或丙酯或抗壞血酸)用常規方法制造。制劑也可含有緩沖鹽、調味劑、著色劑和甜味劑。口服制劑還可合適地配制為一種或多種PMF的控制釋劑。為了含服給藥，組合物可用常規方法配制成藥片或錠劑。為了吸入給藥，本發明組合物可方便地用加壓包或噴霧器一氣溶膠噴霧劑的形式用合適的推進劑輸送，如二氟二氯甲烷、三氟氯甲烷、二氯四氟乙垸、二氧化碳或其他合適的氣體。在加壓的氣溶膠的情況下，劑量單位可通過閥門輸送計量的量來控制。用于吸入器的明膠膠囊或藥包可配制成含一種或多種PMF和合適的粉基如乳糖或淀粉的粉末混合物。本發明組合物可配制成通過注射用于胃腸外給藥，如藥團注射或連續輸液。注射用制劑可以是在安瓿中或在多劑容器中的單位劑量形式，帶有防腐劑。組合物可采取以下形式在油或水性載體中的懸浮液、溶液或乳液，可含有配制劑如懸浮劑、穩定劑和/或分散劑。或者，活性成分可以是粉末形式，用來與合適的載體如滅菌無熱源水在使用前重建。藥物組合物還可配制為直腸組合物如栓劑或保留灌腸劑，如含有常規栓劑基料(如可可酯或其他甘油酯)。用于本發明方法的組合物可配制來用于透皮或局部外用給藥。例如，本發明頭皮或外用劑型包括但不限于，眼科溶液、噴霧劑、氣溶膠、膏劑、洗液、油膏、凝膠、溶液、乳劑、懸浮液、或其他本領域公知的形式。見，例如，Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,21、版，Lippincott，Williams&Wilkins,Philad印hia(2005);Ansel，sPharmaceuticalDosageFormsandDrugDelive;ySystems,8thed.，Lippincott，Williams&Wilkins，Philadelphia(2004).。透皮劑型包括"儲槽型"和"基質型"貼劑，可貼在皮膚上并穿戴一段時間以允許所需量的活性成分的滲透。除了以上敘述的制劑外，組合物還可配制為儲存制劑。這種長期有效的制劑可通過移植(如皮下或肌肉內)給藥，或通過肌肉內注射。因此，例如，復合物可用合適的聚合的或親脂的材料(如在可接受的油中的懸浮液)或離子交換樹脂，或難溶解的衍生物，例如難溶解的鹽。如果需要，組合外可存在于藥包或分散器中，其中含有一個或多個含活性成分的單位計形。藥包例如可包含金屬或塑料膜，如泡包。藥包或分散器可帶有說明書說明如何給藥。7.3含PMF的組合物的給藥本發明要給予個體的組合外的量以及給藥頻率可隨著例如年齡、體重、給藥的反應和過去的醫療歷史而改變。可從由體外或動物模型試驗系統得到的劑量-反應曲線推斷有效劑量。一般，本發明方法給予個體的活性成分，即一種或多種PMF的量為約0.001嗎/kg，約0.005叫/kg，約0.01叫/kg，約0.05嗎/kg,約0.1嗎/kg，約0.5嗎/kg，約1(ig/kg，約5嗎/kg，約10叫/kg，約50嗎/kg，約100pg/kg,約500|ag/kg，約1mg/kg，約5mg/kg，約10mg/kg，約25mg/kg,約50mg/kg或約75mg/kg，其中單位指每個體體重(kg)微克(ng)活性成分。在一些實施方式中，本發明組合外當給予個體，優選人時，所給藥的組合外的PMF的量為從約O.05mg,約0.1mg，約0.5mg，約1.0mg,約5rag，約10mg，約15mg，約20mg，約25mg,約30mg，約35rng，約40mg，或約50mg，到約75mg,約100mg，約200mg，約250mg,約300mg，約400mg，約500mg，約600mg，約700mg，約750mg，約800mg，約900mg，約1g,約2g，約3g,或約5g每天.在一些實施方式中，所給藥的組合外中PMF組分的量為約50rng到約2g每天。在一些實施方式中，本發明提供在個體中控制脂肪積聚的方法，方法是對有此需要的個體給予按計劃的給藥，使得能充分控制脂肪的積聚。在一些實施方式中，組合外可連續數天給予，如2天、3天或更多天，約2周，約3周，約3周，約30天，約5周，約6周，約7-12周，或直到約一年或終身服用。在一些實施方式中，組合物在為時一周到約8周的時間里每隔天一次給予個體，或3天一次，4天一次，5天一次，或每周一次。在一些實施方式中，組合物可偶爾給予，例如，當個體想進食高碳水化合物或高脂肪食物是給予。含PMF的組合物可以任何合適的途徑給予，只要能保證在個體的循環中的PMF的生物利用度。可以使用任何能提供有效量PMF組合物的的給藥途徑。特別是，如上述，可由制劑的類型，如營養品或藥物組合物來指示給藥途徑。在一些實施方式中，本發明方法的組合物可通過以下途徑給予含服、經鼻、經口、胃腸外、直腸、舌下、局部外用、或透皮給藥。7.4.組合方法另一方面，本發明對有需要的個體提供控制脂肪積聚的方法，包含給予該個體含有一種或多種PMF和第二藥物(非含PMF的組合物)的組合物，以有效地控制脂肪的積聚。在一些實施方式中，該第二藥物促進瘦肌肉的發展。有效控制脂肪積聚或促進痩肌肉發展的藥物(非含PMF的組合物)是本領域公知的，包括，例如但不限于，coleusforskohlii提取物、ginicobiloba葉提取物、glalangalrhizome提取物、葡糖胺、葡萄籽提取物、綠茶提取物、海藻酸鎂、甲硫氨酸、泛酰巰基乙酸、釩等等。在一些實施方式中，本發明要以聯合方式給予的第二藥物(非含PMF的組合物)是姜醇、ECGC(印igallocatechingallate)、紅茶提取物、芹菜籽提取物、藤黃醇、枳子果提取物、虎杖根提取物、或檸檬素。在一些實施方式中，本發明要以聯合的方式給予個體的第二藥物(非含PMF的組合物)是熱量生成劑(如ECGC)、飽脹感啟動子(如纖維素)、脂肪吸收障礙物(如殼聚糖)、去脂肪體重啟動子(如共軛亞油酸，CLA)或脂肪預防物。在一些實施方式中，第二藥物(非含PMF的組合物)同時給予個體。在一些實施方式中，含PMF的組合物和第二藥物(非含PMF的組合物)可先后給予個體。在一些實施方式中，在接受手術除去體脂肪后給予含PMF的組合物以防止體重增加。除去體脂肪的手術包括例如吸脂。7.5.生物學分析在應用到人體前，本發明所述方法所用的組合物的各個方面，包括藥學的和營養學的組合物，可在體外采用細胞培養系統，和/或動物模型，如嚙齒類動物模型，常規地檢測所需的活性。例如，分析可包括細胞培養分析，在細胞培養分析中組織樣品生長在培養基中，，曝露于包含PMF的組合物或與其接觸，觀察這些組合物對組織樣品的效果。典型地，前體脂肪細胞、成熟脂肪細胞或脂肪細胞樣細胞如3T3-Ll細胞能用于這樣的分析。本發明所述方法所用的組合物可被檢測它們抑制或誘導基因產物(如細胞蛋白質或RNA)的表達和/或激活的能力，正如下面實施例部分中舉例說明的。因為脂肪形成所需要的基因(至少是某些基因)表達的暫時型式(te卿oralpattern)是公知的，那么為了評價組合物阻止脂肪細胞內脂肪積聚的潛能，檢測組合物抑制或誘導這些基因表達的能力是一適當的指標。基因產物的表達的抑制或誘導或激活能通過本領域技術人員所公知的技術檢測，包括ELISA、流式細胞儀、Northern印跡分析、Western印跡分析、RT-PCR、激酶分析和電泳淌度遷移分析(electrophoreticmobilityshiftassays).本發明所述方法中所使用的包含PMF的組合物的毒性和/或有效性可通過細胞培養或實驗動物的標準程序來檢測，例如測定LD50(整體50%致死劑量)和ED50(整體50%的治療有效劑量)。毒性和治療有效的劑量比為治療指數，可用LD50/ED50比表示。優選具有最大治療指數的包含PMF的組合物。從細胞培養和動物研究得到的數據可用來描述包含PMF的組合物用于人體的劑量范圍。這些組合物的劑量優選設定在包括ED50具有極小毒性或無毒性的循環濃度范圍。根據使用的劑型和采用的給藥途經，劑量可以在上述范圍內變動。就任何本發明所述方法中所使用的組合物而言，治療有效劑量可從細胞培養分析初步評估。當在細胞培養確定劑量后，該劑量可在配制在動物模型中以獲得包含IC50(即能達到癥狀的半最大抑制的試驗化合物的濃度)在內的循環血漿濃度范圍。這些信息可被用于更精確地確定在人體的使用劑量。血漿中的水平可例如采用高效液相色譜(HPLC)和放免分析(RIA)來測定。預防的或治療的組合物的藥代動力學可例如通過測量各種參數諸如峰值血漿水平(peakplasmalevel(Cmax))、曲線下面積(AUC，通過繪制組合物血漿濃度與時間的圖而測量，表示生物利用度)，化合物半衰期(t1/2)、和最大濃度時間來測定。8.實施例下面內容提供制備包含PMF的組合物的方法和顯示抗脂肪細胞新生的效果的研究結果。在本文，試驗中所用的3T3-L細胞株為本領域公知的研究人脂肪形成的模型。體外，在胰島素、地塞米松(DEX),和甲基異丁基黃嘌呤(methylisobutylxanthine(MIX))聯合處理下，匯合的3T3-L細胞能分化，參見Studentetal.(1980)J.Biol.Chem.255:4745-4750。包括MIX，DEX和胰島素的脂肪形成的混合物通常縮寫為MDI。為了前體脂肪細胞分化為功能型脂肪細胞，基因誘導是必需的。8.1制備包含PMF的組合物從夏橙和哈姆林橙獲得橙固體(包括皮)，是橙汁工業的副產品。采取加壓處理從橙皮壓榨油、通過離心使油澄清、冰凍(降溫)以沉淀蠟狀物而獲得冷壓處理的橙皮油。橙皮油包括0.4%PMF組分，98%輕揮發性組分和2%殘余物。通過減壓蒸餾，橙皮油可濃縮約30倍，它接著通過超高真空蒸餾來得到揮發性回收物(VR)，濃度增加到約50倍。用溶劑萃取接著干燥萃取物進行對VR的分離工藝，產生粉末狀的橙皮提取物。該橙皮提取物具有PMF組分，占提取物的約70%(w/w)，以及非PMF組分。通常，lkg冷壓油產生3克70y。(w/w)橙皮提取物。非PMF組分含臘質、不飽和脂肪酸和13-谷甾醇。在非PMF組分中沒有檢驗出檸檬苦素。PMF用反相HPLC和正相HPLC分析。典型地，就正相HPLC而言，尺寸為4.6mrai.d.,x25cm長的硅膠HPLC柱(MacModAnalyticalCo.，ChaddsFord,PA)采用90M已烷/10%氯仿作為開始溶液。采用10%—90%氯仿梯度洗脫20分鐘，接著90%氯仿洗脫20分鐘。質譜分析法結合HPLC以鑒定各個PMF。大氣壓化學電離質譜被用于測定分子量。標準來自佛羅里達柑橘系(Lakeland,FL)。橙皮提取粉末包含多種甲氧基化黃酮類似物的混合物，包括5，6，7，3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5,6,7,8,3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素);5,6,7,8,4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6，7，8,3，，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7,8,3',4'-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；5,7,8,3，，4'-五甲氧基黃酮；5,7，8,4'-四甲氧基黃酮；3,5,6,7,8,3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6,7,8，3，，4，-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7,8,4，-四甲氧基黃酮;5,6,7,4'-四甲氧基黃酮;7-羥基-3，5,6,8,3，，4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3，5，6,3',4'-五甲氧基黃酮中之一。HPLC/MS被用于鑒定橙皮提取物中甲氧基化黃酮。PMF標準品來源于佛羅里達柑橘系(Lakeland,FU<>在進行下列研究之前，用DMS0將提取物稀釋到適當的濃度。8.2.細胞增殖/細胞毒性研究如7.1節所描述的，制備包含70%PMF組分的PMF組合物("70%0PE")。采用檢測活細胞數量的色度法評估包含PMF組分的組合物抑制細胞增殖和/或所具有細胞毒性的能力。在這種分析法中，相對于對照組，處理組中所觀察到的減少的細胞計數為減少的細胞增殖或細胞毒性的函數。細胞制備96孔平板的孔被植入5,000嚙齒類3T3-L1細胞，細胞在橙皮提取物(20Hg/mL)或DMS0(對照)條件下生長24小時。在2個不同平板里，橙皮提取物被試驗3次。預留包含溶液和提取物(無細胞)的孔，作為用于檢測提取物在比色測定里特異性吸收，即站旦冃足。分析CELLTITER96AQUEOUSONESOLUTION細胞增殖分析儀(Proraega,MadisonWI按廠商建議操作。簡而言之，比色法試劑直接加入到培養孔，孵育l-4小時。通過96孔板閱讀器記錄450nm吸光率。結果2(^g/mL橙皮提取物處理培養組的細胞數約為對照處理培養組的74X。采用濃度低于2(^g/mL橙皮提取物處理培養組的細胞增殖與為對照處理培養組相似(圖1)。100pg/mL或更大的橙皮提取物濃度表現細胞毒性。8.3.脂肪細胞基因表達/細胞分化分析如8.1節所描述而制備的70%OPE在脂肪細胞分化方面的效果采用細胞通過RT-PCR分析來評價，以監測伴隨脂肪細胞分化所公知的基因標記的相對水平。油紅0染色油紅0優先染色細胞內脂肪，細胞油紅O染色后進行細胞光學顯微鏡檢査。簡而言之，細胞被磷酸鹽緩沖的食鹽溶液(PBS)清洗2次，室溫下用0.5%油紅0溶液(60%異丙醇)染色15分鐘，用脫色緩沖液清洗和移除。在光學顯微鏡(NikonCorporation,Tokyo,Japan)下觀察細胞，通過視覺評分來評定染色程度。3T3-L1細胞處理小鼠3T3-Ll細胞(AmericanTypeCultureCollection,Manassas,VA)在潮濕的5%C02大氣條件下生長在包括10%FBS，100U/mi青霉素和100g/ml鏈霉素DMEM(pH7.4)中。對于分化試驗，在6孔板里，200，000-250,000細胞被允許在生長溶液里增殖2—3天，在橙皮提取物(20g/mL)或DMSO存在下，細胞接受標準分化誘導物質(100nMinsulin,1Mdexamethasoneand250工LMMIX)。在第0("生長控制")、2、4、10天收集細胞。基因表達檢測采用RNEASYMINI試劑盒(Qiagen，ValenciaCA)根據廠商說明書，從收集的細胞抽取RNA。采用TAQMANREVERSETRANSCRIPTION試劑盒s(AppliedBiosystems，FosterCityCA)從1.5微克RNA制備cDNA。這些cDNA然后，采用SYBRGREENPCRcorereagents(AppliedBiosystems)和合適引物在7900HT序列檢測系統(AppliedBiosystems)被用于RT-PCR，根據廠商說明書，以確定脂肪細胞分化標記物(脂肪基因)的表達水平，過氧化物酶體、增殖體-話化的受體(proliferator-activatedrec印tor)、(PPAR'y)，CCAAT/增強子結合蛋白(enhancerbindingprotein)x(CEBPa)，adipoQ，ap2，HM-12,HM-21和gaiectin-12。獲得的數據采用SDS2.1軟件包(AppliedBiosystems)分析。尤其，RNA表達的分析采用以，3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)作為歸一劑(normalizer)的對比Ct(MCt)法進行分析。結果圖2表明第0天分化因子處理的對照細胞與第10天細胞分化為脂肪細胞的RNA水平變化。這些細胞未采用試驗提取物處理。對試驗提取物(即橙皮)處理的細胞，以對應天數的對照細胞里被測的RNA水平相對百分比計算RNA水平。例如，圖3表示了第4、10天試驗提取物組的RNA水平的百分比變化。如圖3所示，橙皮提取物第4天抑制除1個脂肪基因外所有脂肪基因的表達，第10天抑制所有脂肪基因的表達。視覺顯微鏡檢表明全部時間點在這些細胞內脂肪積聚與對照細胞比較極大減少。進一步的用橙皮提取物進行的脂肪細胞基因表達/細胞分化檢測確認這些結果。8.4.HMGA2檢測(分析)高遷移率族蛋白A2(highmobilitygroupproteinA2,HMGA2)是適應高脂肪飲食而被誘導的前體脂肪細胞特異性轉錄因子(AnandandChada(2000)Nat.Genet.24:377-380)。缺乏HMGA2的小鼠與正常小鼠相比脂肪減少了5-10%。抑制HMGA2表達的提取物同樣會減少脂肪組織形成。小鼠3T3-L1按每孔種植200,000細胞種植在6孔板中，在包含PMF的橙皮提取物(20pg/mL)或DMS0(對照)條件下生長。處理6小時后，收集細胞和按上述8.3節里基因表達檢測所述的操作抽提RNA以檢測HMGA2表達。數據按對照處理的細胞歸一化。如圖4所述，與對照細胞相比較，橙皮提取物具有減少處理細胞內HMGA2表達的效果。8.5.體外脂肪積聚檢測這個實施例證實包含PMF的組合物在抑制脂肪細胞內脂肪積聚的效果。包含PMF的組合物包括40%PMF組分("40%0PE"),70%PMF組分("70%OPE")，或包含5,6,7,8,3'，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)或5-羥基-6,7,8,3'，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)單體化合物如上述從橙皮提取物制備。在如上述8.3節所述的標準分化誘導物質的條件下，脂肪細胞(3T3-L1cells)生長，從而在無或存在不同濃度的包含PMF的組合物條件下，發生脂肪細胞分化和脂肪積聚到脂肪細胞。油紅0優先染色脂肪，油紅0染色細胞后進行細胞光學顯微鏡檢查，以檢測脂肪積聚。結果如表1所示，積聚的脂肪所觀察的染色密度被表示依據標識從"+++++"表示最大染色密度到"+"表示最小染色密度，"n.d."表明沒被檢測的實驗。表l:脂肪細胞內的脂肪積聚<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>(表內文字Notreatment=未處理；PMF-containingcomposition=含PMF的組合物；nobiletin=川皮苷；auranetin=酸橙黃酮)這些結果證實在抑制脂肪細胞發育和/或脂肪細胞內脂肪積聚方面，包含PMF的組合物是有效的。8.6.體內研究下面實施例證實引入包含PMF的組合物到動物膳食能有效地預防增重和因脂肪組織塊的減少而加速體重減少，而痩體重不會減少。本實施例所用的雄性C57BL6/J小鼠已被表現出變得是類似人的樣肥胖的、血糖過多的、胰島素過高的，是公認的人飲食導致的肥胖癥的動物模型。參見如Surwitetal.(1988)Diabetes37:1163-1167;Frederichetal.(1995)Nat.Med.1:1311-1314';Parekhetal.(1998)Metabolism47:1089-1896;El-Hasehimietal.(2000)J.Cliii.Invest.105:1827-1832;Linetal.(2000)mt.IObes.Relat.Metab.Disord.24:639—646。本實施例所用的包含PMF的組合物為如上面所述制備的70%0PE組合物。小鼠和飲食3周大的雄性C57BL6/J小鼠來源于杰克森實驗室。喂養標準飲食適應一周后，小鼠被隨即分成4組標準飲食組，標準飲食+70%0PE組，高脂肪飲食組，高脂肪飲食+70%(^￡組。標準飲食組被喂養研究飲食D12450B(10千卡％脂肪)(VanHeeketal.(1997)J.Cliii.Invest.99:385-90)。包含70%0PE的飲食通過研究飲食按配方生產，包含2g70%0PE/1.055kgs標準飲食和2g70%OPE/858g高脂肪飲食，分別地使70%0PE劑量與熱卡密度相配。在溫控房間、14/10小時光黑循環的條件下，小鼠3只一籠被詞養。小鼠每周相同時間稱重，同時每籠食物消耗被檢測。小鼠在2個階段體重增加，在第一個12周內大的體重增加，隨之幾周縮小的體重增加(WinzellandAhren(2004)Diabetes53S叩pi.3:S215_S219)。因此，這些試驗在第一個高體重增加階段進行，以最大化觀察到處理組和未處理組間顯著的差異。去脂肪體重和％體脂肪通過PiXImus雙能X-線吸收儀(DEXA)系統(GEHealthcare,Waukesha,WI)測試每實驗組5只小鼠，分析去脂肪體重和體脂肪百分比。飲食處理16或24周時，檢測小鼠。對于PiXImus檢測，每組5只小鼠采用2.5g鬼阿佛丁(0.01微升/克體重)，依照廠商說明進行檢測。這種方法基于掃描區域組織導致的低能和高能X射線的微分衰減。能量衰減相關于組織密度，通過檢測器和關聯軟件，這種信息被用于結合組織校準影像，以評定機體組分。脂肪塊主要由脂肪組織構成。去脂肪體(Leanmass)主要由骨骼肌、血液和骨，以及器官、腱、軟骨和體液組成。飲食處理后，動物通過異氟醚吸入麻醉。動物被頸脫位法處死，然后腹股溝、附睪、腹膜后的脂肪墊被分割出并稱重。腸系膜的脂肪庫樣品也被收集。稱重后，如上所述從這些組織里抽提RNA。依照廠商說明書，采用Brukermini-specTD陋R分析儀(BrukerOptics,Billerica,MA)，對轉換飲食組的小鼠進行尸檢。結果為了研究食物消耗，12-18只小鼠的組以3只一籠為單獨組，每周測量每籠老鼠食物消耗量。小鼠被喂養標準飲食(SD)、標準飲食加包含PMF組合物(SD70y。OPE)、高脂肪飲食(HFD)或高脂肪飲食加包含PMF組合物(HFD70M0PE)。如上所述按配方制備飲食。熱卡消耗檢測表明SD組和SD70%0PE組間熱卡攝取不存在顯著差異(Figure5)。因此，70%0PE自身不會通過不適口性或通過對動物的不良作用導致厭食。HFD組和SD組間存在較高的熱卡攝取趨勢，但不具有統計學意義。因此，標準飲食和高脂肪飲食里7(m0PE的添加不會導致任何顯著的厭食。如圖6所示，在7周齡時HFD組和SD組間體重增加的顯著差異被表現岀來(p〈0.05)并延續到整個研究過程。在5周齡時，HFD70%0PE組的小鼠與HFD組小鼠比較表現體重增加顯著減少(p〈0.05)(Figure6)。這種差異不是由于熱卡攝取的減少(Figure5)。這些結果表明包含PMF的組合物能阻止高脂肪飲食個體的體重增加。與HFD組小鼠比較，HFD70%0PE組小鼠的體重增加差異被研究確定是否HFD70%0PE組小鼠減少的體重增加歸功于在脂肪體重對去脂肪體重的減少。一組動物(n=5每組)的脂肪體重通過PIXImus掃描器雙能X-線吸收分析(DEXA)被檢測。每組被測的體脂肪百分比被提供在圖7。與HFD組小鼠比較，HFD70。/。0PE組小鼠的體脂肪百分比顯著地減少。HFD70%0PE組和SD組間體脂肪百分比不存在顯著性差異。因此，高脂肪飲食里70%OPE的添加阻止高脂肪飲食導致的體脂肪百分比增加。這些結果表明包含PMF的組合物通過阻止脂肪積聚大大地抑制了歸因于高脂肪飲食的體重增加。雖然體重不存在顯著性差異，在體脂肪百分比方面，SD70。/。OPE組動物與SD組動物比較(Figure6)的存在小且顯著性減少(Figure7)。這些結果符合包含PMF的組合物促進個體去脂肪體重的進展的可能性。為了分析70%0PE對個別脂肪墊的效果，每組2只動物被處死，然后腹股溝、附睪、腹膜后的脂肪墊被分割出并稱重，以評價任何差異。結果見圖8。雖然每組數量不足多以能夠進行統計分析，但圖象表明HFD70%0PE組動物里脂肪墊重量與HFD組動物比較極大減小，與HFDWG0201,SD，andSD70%OPE組間差異小，這與體重和PIXImus檢測一致。血糖參數已表明在某些情況下不能擴展脂肪體重的個體會發展成為II型糖尿病。參見Danforth(2000)Nat.Genet.26:13。然而下述結果表明食用富含PMF的組合物的食物的個體沒有表現出更可能地發展成為糖尿病。為了檢測本實施例所用的小鼠發展成為II型糖尿病的可能性，進行HFD70%0PE組動物肝臟大體檢査，在外觀的脂肪變形方面與被認為存在明顯脂肪營養障礙癥狀的HFD組動物比較，沒有表現出任何增加。另外，小鼠的血糖狀態被檢測，采用拜耳Ascencia血糖測量儀檢測小鼠禁食血糖水平和采用拜耳DCA2000+HbAlc分析儀(BayerHealthCare，Tarrytown，NY)測量糖基化血紅蛋白(HbAlc)。所有檢測均在禁食后進行，所有樣品通過尾靜脈采血獲得。在SD組和HFD組間，沒有觀察到禁食血糖水平間的顯著性差異(Figure9A)。在SD70%OPE組和HFD70%0PE組間，禁食血糖水平間存在顯著性差異。既然血糖水平僅能反映動物當時血糖狀況的一種快照，HbAlc糖化需要被檢測。糖基化血紅蛋白的數量，作為占整個血紅蛋白百分比，直接涉及前面2個月期間平均血糖濃度。就HbAlc檢測而言，除了顯著減少HbAlc的標注飲食加70%0PE給喂養的動物外，在組間任一動物間不存在顯著性差異(Figure9B)。這表明僅與標準飲食比較，70%0PE可以事實上導致長期血糖控制的改善。飲食轉換在大約19周齡時，評估飲食轉換的插入(Bushetal.(2006)Endocrine29:375-382)。標準飲食組的小鼠被改為標準飲食+70y。0PE，反之亦然。同樣，高脂肪飲食組的小鼠被改為高脂肪飲食+7(^OPE，反之亦然。在本實施例里，小鼠持續保持飲食19周，然后被喂養不同的飲食8周。如上所述，測量食物消耗量和體重。在起初的19周期間，SD組和SD7(E0PE組在千卡消耗或體重增加方面沒有顯著地差異，2組轉換飲食也沒有表現出效果。然而當HDF組小鼠轉換為HFD70%OPE和HFD70WPE組小鼠轉換為HFD時，觀察到顯著性差異。HFD70%0PE變為HFD的轉換具有小鼠體重的效果與HFD組小鼠比較是統計學上難以分辨的(Figure10)。相反地，相對HDF組和HFD70%0PE組，HFD組小鼠喂養HFD70y。0PE的轉換(HFD變為HFD70%0PE)導致顯著的體重減少(Figure10)。因此，這些數據表明70%0PE不僅能阻止高脂肪飲食消費導致的體重增加，而且能逆轉高脂肪飲食飼養的動物的體重增加，甚至它們繼續消費高脂肪飲食的時候。按上面所述的操作采用PiXImus雙能X-線吸收儀(DEXA)系統檢測去脂肪體重和體脂肪百分比，對動物進行檢測以確定體重改變與脂肪體重百分比變化是否一致。轉換為HFD的HFD70%0PE組小鼠表現脂肪體重百分比增加，而轉換為HFD70%0PE的HDF組小鼠表現脂肪體重百分比適度減少(圖11)。HFD變為HFD70柳PE組里可見3種脂肪墊的減少和HFD70%0PE變為HFD組里可見3種脂肪墊的增加，動物各部脂肪墊檢測確認了PiXImus檢測里所見結果(圖12)。總而言之，這種數據表明上下文里高脂肪飲食包含添加PMF的組合物導致體重增加的顯著性減少。此外，對于飲食導致的肥胖癥，成體動物服用包含PMF的組合物，可導致體重顯著的減少。阻止體重增加和促進體重減少可能歸功于脂肪組織體重的減少，不伴隨去脂肪體重的減少。重要地，脂肪的減少不伴隨任何糖尿病跡象或血糖調控的損失。也需指出的，從包含PMF高脂肪飲食轉換為不含PMF高脂肪飲食的小鼠體重增加類似于喂養不含PMF高脂肪飲食的個體，這表明包含PMF的組合物在重量阻止或減少方面的效果可通過從飲食中除去包含PMF的組合物而被逆轉。本文所引用的所有參考文獻以參考文獻整體形式合并于本文，就相同范圍而言，每篇出版物或專利或專利申請可特別地、個別地以參考文獻整體形式合并以滿足所有目的。如本
技術領域：
技術人員所熟知的，在不脫離本發明的精神和范圍下，許多本發明的改進和變化可被獲得。本文所描述的特定的實施方式僅作為例子方式被提供，進而僅被附加的權利要求的術語所限定的本發明可延伸至與被授權的權利要求等同的范圍。權利要求1.一種控制個體內脂肪積聚的方法，該方法包含給予個體有效量的一種組合物，該組合物包括含至少干重約30％(w/w)-75％(w/w)的多甲氧基化黃酮組分的橙皮提取物，從而控制個體內脂肪積聚。2.根據權利要求l所述方法，其特征在于所述組合物包含至少干重約40X(w/w)—75X(w/w)的PMF組分。3.—種控制個體內脂肪積聚的方法，該方法包含給予個體有效劑量一組合物，該組合物包含PMF組分和非PMF組分，其特征在于所述PMF組包括至少下列之一5,6,7,3'，4，-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5,6，7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6,7，8，4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6，7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6，8，3',4'-四甲氧基黃酮；5，7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮；5,7,8，4'-四甲氧基黃酮;3，5,6，7，8,3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6,7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮;5-羥基-6，7，8，4，-四甲氧基黃酮;5,6,7,4，-四甲氧基黃酮;7-羥基-3,5，6,8,3',4'-六甲氧基黃酮；或7-羥基-3，5,6,3',4'-五甲氧基黃酮，從而控制個體內脂肪積聚。4.根據權利要求3所述方法，其特征在于個體內一個或多個脂肪細胞里的脂肪積聚被控制。5.根據權利要求4所述方法，其特征在于脂肪形成被減少。6.根據權利要求4所述方法，其特征在于成熟脂肪細胞里的脂肪積聚被減少。7.根據權利要求3所述方法，其特征在于所述組合物包含干重約40%U/w)—75%(w/w)的PMF組分。8.根據權利要求7所述方法，其特征在于權利要求l所述組合物是口服給予個體。9.根據權利要求8所述方法，其特征在于所述組合物處于干劑形式。10.根據權利要求8所述方法，其特征在于所述組合物處于液體形式。11.根據權利要求8所述方法，其特征在于所述個體為人。12.根據權利要求11所述方法，其特征在于每天將約50mg—2000mg化合物被給予個體。13.根據權利要求12所述方法，其特征在于所述組合物被給予每天一次為時3天一約30天。14.根據權利要求2所述方法，其特征在于所述PMF組分至少包含2種PMF，該PMF選自(5,6,7,3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);(5，6，7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素);(5，6，7，8，4，-五甲氧基黃酮(桔皮素)；(5-羥基-6，7,8，3，，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；(5-羥基-7,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；(5,7-雙羥基-6，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；(5，7，8,3，,4，-五甲氧基黃酮；(5，7，8,4'-四甲氧基黃酮；(3，5，6，7，8,3，,4'-七甲氧基黃酮;(5-羥基-3，6，7，8，3',4'-六甲氧基黃酮；(5-羥基-6,7,8,4，-四甲氧基黃酮；(5，6，7，4，-四甲氧基黃酮;(7-羥基-3，5，6，8，3，，4'-六甲氧基黃酮；和(7-羥基-3,5，6，3，，4'-五甲氧基黃酮。15.根據權利要求2所述方法，其特征在于所述PMF組分包含:5'6，7，3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；(5，6,7，8，3,，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；(5，6，7,8，4，-五甲氧基黃酮(桔皮素)；(5-羥基-6,7,8,3'，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；(5-羥基-7,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；(5，7-雙羥基-6,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；(5，7,8，3，，4，-五甲氧基黃酮;(5，7,8，4'-四甲氧基黃酮;(3，5，6,7,8，3，，4，-七甲氧基黃酮;(5-羥基-3,6,7,8,3'，4'-六甲氧基黃酮；(5-羥基-6,7,8'4，-四甲氧基黃酮;(5,6,7,4，-四甲氧基黃酮；(7-羥基-3，5，6，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；和(7_羥基-3，5，6,3，，4'-五甲氧基黃酮。16.根據權利要求2所述方法，其特征在于所述PMF組分由5，6，7，3，，4，-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；(5,6，7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5,6,7,8,4，-五甲氧基黃酮(桔皮素);5-羥基-6,7,8,3，，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7,8,3'，4'-四甲氧基黃酮5，7-雙羥基-6,8,3'，4，-四甲氧基黃酮；5，7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮；5，7，8，4'-四甲氧基黃酮；3，5，6，7，8，3，，4'-七甲氧基黃酮；、5-羥基-3,6，7,8,3'，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8,4'-四甲氧基黃酮；5,6,7,4，-四甲氧基黃酮；、7-羥基-3,5，6,8，3',4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3，5，6，3',4'-五甲氧基黃酮組成。17.—種控制有需要的個體的反彈性體重增加的方法，該方法包含給予有需要的個體有效量包含PMF組分的組合物，其特征在于所述PMF組分至少包含1種PMF，該PMF選自、5,6，7，3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)、5，6，7,8，3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素);、5，6,7,8,4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；、5-羥基-6,7,8,3'，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素)；、5-羥基_7，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；、5,7-雙羥基-6,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；、5,7,8,3，,4'-五甲氧基黃酮；、5，7，8，4'-四甲氧基黃酮;、3、，5,6，7，8,3，，4'-七甲氧基黃酮；、5-羥基-3，6,7，8，3'，4'-六甲氧基黃酮；、5-羥基-6，7，8,4，-四甲氧基黃酮；、5，6，7，4'-四甲氧基黃酮；、7-羥基-3，5，6,8,3',4'-六甲氧基黃酮；和、7-羥基-3,5,6，3'，4'-五甲氧基黃酮，以此阻止反彈性體重增加。18.根據權利要求17所述方法，其特征在于所述個體為已通過限制熱卡飲食而減肥的人。19.根據權利要求17所述方法，其特征在于所述組合物包含干重約30%(w/w)75%(w/w)的PMF組分。20.根據權利要求17所述方法，其特征在于所述PMF組分至少包含2種PMF，該PMF選自、5,6,7,3，，4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；、5，6，7,8,3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；、5，6，7,8，4，-五甲氧基黃酮(桔皮素);、5-羥基-6,7,8,3，，4'-五甲氧基黃酮(酸橙素);、5-羥基_7，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；、5，7-雙羥基-6,8,3',4'-四甲氧基黃酮；、5，7，8，3，，4'-五甲氧基黃酮；、5,7,8，4'-四甲氧基黃酮;、3，5，6，7，8,3，，4'-七甲氧基黃酮；、5-羥基-3，6，7，8，3',4'-六甲氧基黃酮；、5-羥基-6，7，8,4'-四甲氧基黃酮；、5,6，7，4，-四甲氧基黃酮;、7-羥基-3,5，6，8，3'，4，-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3,5，6,3，，4，-五甲氧基黃酮。21.根據權利要求17所述方法，其特征在于所述PMF組分包含5'6，7,3,，4，-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮):5，6，7,8，3，，4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6，7，8,4，-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6,7，8，3',4'-五甲氧基黃酮(酸橙素);5-羥基-7，8，3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6,8,3',4'-四甲氧基黃酮；5，7，8，3',4'-五甲氧基黃酮；5，7，8，4'-四甲氧基黃酮;3，5，6，7，8,3，，4，-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6,7，8，3，，4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6,7，8，4'-四甲氧基黃酮；5，6，7，4，-四甲氧基黃酮；7-羥基-3，5，6,8，3',4'-六甲氧基黃酮和7-羥基-3，5,6,3，，4'-五甲氧基黃酮。22.根據權利要求2所述方法，其特征在于所述PMF組分由5,6,7,3，,4'-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮);5，6'7,8，3，,4'-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6,7,8,4'-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6,7，8，3，，4，-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7，8，3',4'-四甲氧基黃酮；5,7-雙羥基-6,8,3'，4'-四甲氧基黃酮；5，7，8，3，,4'-五甲氧基黃酮；5,7,8，4'-四甲氧基黃酮；3，5，6，7，8，3，，4，-七甲氧基黃酮;5-羥基-3,6,7,8，3',4'-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8,4'-四甲氧基黃酮；5,6,7，4，-四甲氧基黃酮；7-羥基_3,5，6,8,3',4'-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3,5，6,3',4'-五甲氧基黃酮組成。23.—種個體減肥、控制體重、阻止反彈性體重增加的方法，該方法包含給予該個體有效量的包含干重約30%(w/w)75。/。(w/w)的多甲氧基化黃酮組分的組合物。24.根據權利要求23所述方法，其特征在于所述組合物以日劑量服用l周到8周左右。25.—種增加個體瘦體重或肌肉體重的方法，該方法包含給予該個體有效量的組合物以有效減少個體內脂肪積聚，其特征在于該組合物包含干重約30%(w/w)75M(w/w)的多甲氧基化黃酮組分，從而增加個體瘦體重或肌肉體重。26.—種減少個體腰圍的方法，該方法包含給該予個體有效量的組合物，該組合物包含干重約30%(w/w)75%(w/w)的多甲氧基化黃酮組分。27.—種增加個體代謝率的方法，該方法包含給予該個體有效量的組合物，該組合物包含干重約30%O/w)75%(w/w)的多甲氧基化黃酮組分。28.—種阻止脂肪細胞內脂肪積聚的方法，該方法包含使脂肪細胞與包含多甲氧基化黃酮組分的組合物接觸。29.根據權利要求28所述的方法，其特征在于這種接觸發生在體外。全文摘要本發明提供用包含多甲氧基化黃酮組分的組合物控制脂肪細胞內脂肪積聚的方法，該作粉含有至少一種以下化合物5，6，7，3′，4′-五甲氧基黃酮(甜橙黃酮)；5，6，7，8，3′，4′-六甲氧基黃酮(川陳皮素)；5，6，7，8，4′-五甲氧基黃酮(桔皮素)；5-羥基-6，7，8，3′，4′-五甲氧基黃酮(酸橙素)；5-羥基-7，8，3′，4′-四甲氧基黃酮；5，7-雙羥基-6，8，3′，4′-四甲氧基黃酮；5，7，8，3′，4′-五甲氧基黃酮；5，7，8，4′-四甲氧基黃酮；3，5，6，7，8，3′，4′-七甲氧基黃酮；5-羥基-3，6，7，8，3′，4′-六甲氧基黃酮；5-羥基-6，7，8，4′-四甲氧基黃酮；5，6，7，4′-四甲氧基黃酮；7-羥基-3，5，6，8，3′，4′-六甲氧基黃酮；和7-羥基-3，5，6，3′，4′-五甲氧基黃酮。在一些實施方式中，提供了防止已經接受減肥的個體的體重反彈的方法。文檔編號A61K36/00GK101257911SQ200680030844公開日2008年9月3日申請日期2006年8月22日優先權日2005年8月23日發明者大衛·埃文斯(已死亡),斯拉維克·杜申克維申請人:維爾金有限公司