專利名稱：一種增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液及使用方法
技術領域：
本發明涉及一種增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液及其使用方法，屬疫苗免疫增強劑領域。
背景技術：
豬痕(slassicalswinefever, CFS)以出血和發熱為主要特征，呈急性或慢性經過，是一種對豬危害性極大的傳染病，被國際獸疫局(OfficeofInternationaldesE' pizo oties, 0ΙΕ)列為A類動物傳染病。在世界許多國家和地區，傳統疫苗接種是控制豬瘟的重要手段。目前使用的弱毒疫苗主要是中國豬瘟兔化弱毒疫苗、日本GPE疫苗和法國的 Thireval疫苗。我國的豬瘟兔化弱毒疫苗性能穩定、安全、免疫效果好，且無殘留能力，是國際公認的唯一安全有效的弱毒疫苗，亦是國內唯一應用的弱毒疫苗。生產實踐中，使用豬瘟疫苗免疫時，一般使用生理鹽水或注射用水做疫苗稀釋液。如果使用一種能夠增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液是生產和科學發展的需要。
黃芪多糖經過大量的科學實驗證明對機體特異性免疫與非特異性免疫都有著廣泛的影響！中華人民共和國藥典規定中藥黃苗(Radix A stragali, RA)為豆科黃苗屬植(Genus A stragal.)蒙古黃苗(A stragalusmembranaeeus (Fisch. )Bge. var. mongholicus (Bg-e. ) Hsiao)或膜莢黃苗(A stragalus memb-rallaceus (Fisch. )Bge.)的干燥根，在我國主要分布于東北和華北，在傳統醫學中有著廣泛的應用。中醫認為其性甘， 微溫，歸脾、肺經，具有補氣升陽、益衛固表、托毒生肌、利水退腫之功效。近年來的研究發現黃芪含有多種生物活性成分，如多糖、皂甙、黃酮、氨基酸、微量元素、核黃素、葉酸、香豆素、 有機酸、膽堿等，其中最主要的活性成分是多糖、皂甙、黃酮類、氨基酸和微量元素。其中以黃芪多糖(APS)的研究為多。大量的科學實驗證明APS對機體特異性免疫與非特異性免疫有廣泛的影響。其具有促進免疫調節、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射、抗衰老、抗寄生蟲等多種生物活性，對疾病預防和保健都具有明顯的促進和增強作用。
那么，黃芪多糖能不能做為豬瘟疫苗稀釋液與豬瘟兔化弱毒疫苗一起使用？黃芪多糖有抗病毒作用，對豬瘟兔化弱毒疫苗有沒有抗病毒作用？能不能應用其免疫增強作用來增強豬瘟兔化弱毒疫苗的免疫效果？本發明證明，黃芪多糖注射液是一種能增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液。發明內容
本發明用市售的1 %黃芪多糖注射液(農業部獸藥質量標準)做為豬瘟兔化弱毒疫苗(脾淋或細胞苗)的稀釋液，稀釋疫苗，每只兔、每頭豬注射1%的黃芪多糖注射液1 毫升，結果表明，黃芪多糖通過增強機體的免疫功能可以增強豬瘟疫苗的細胞免疫、體液免疫和粘膜免疫，能夠增強豬瘟疫苗的免疫效果，是一種能增強豬瘟疫苗免疫效果的疫苗稀釋液。使用方法是用1 %黃芪多糖注射液按豬瘟疫苗瓶簽標注頭份稀釋豬瘟兔化弱毒疫苗(脾淋或細胞苗)，稀釋成每頭份I毫升，每頭豬肌肉注射I毫升。該稀釋液具有特異性與非特異性增強機體免疫反應的功能，具有效果顯著、易于生產、成本低廉、使用方便等特點。 市售的I %黃芪多糖注射液做為增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液是本發明人新發現的新用途。
實施例一
選擇健康的無豬瘟抗體的2. 5公斤的青紫藍肉兔50只，隨機分為5組，每組10只， 一組注射用I %黃芪多糖注射液稀釋的豬瘟兔化弱毒疫苗(脾淋)，每只I毫升；一組注射用I %黃芪多糖注射液稀釋的豬瘟兔化弱毒疫苗(細胞)，每只I毫升；一組注射用生理鹽水稀釋的豬瘟兔化弱毒疫苗(脾淋)，每只I毫升；一組注射用生理鹽水稀釋的豬瘟兔化弱毒疫苗(細胞)，每只I毫升；空白對照組不做任何處理；分別于免疫后7、14、21天檢測各組的淋巴轉化試驗、細胞因子、免疫抗體，結果分別見表1、表2、表3如下
表1.1 %黃芪多糖注射液對豬瘟兔化弱毒疫苗脾淋苗和細胞苗免疫兔的淋巴轉化試驗結果
570nm疫苗細胞苗無均值土標準差稀釋液成分1%黃芪多糖注射液生理鹽水無分組I組2組3組(空白對照組)ConA7dO.2900±0·00341a0. 2467±0. 00327bcO.2358±0.00232c14dO.2978±0.00214a0. 2452±0. 00319dO.2415±0.00289e21dO.2747±0.00398a0. 1698±0. 00703dO.1793±0.00310dLPS7dO.2220±0.00261a0. 1940±0. 00190cO.2035±0.00289b14dO.2265±0.00226a0. 2027±0. 00294bO.2043±0.00330b不加分裂原21dO.2360±0·00310a0. 1568±0. 01085cO.1440±0.00673d7dO.1857±0·00395a0. 1445±0. 00265eO.1560±0·00141d14dO.1998±0.00275a0. 1768±0. 00299cO.1705±0.00191d21dO.1910±0.00216a0. 1243±0. 00236dO.1313±0.00222c脾淋苗無1%黃芪多糖注射液生理鹽水無4組5組3組(空白對照組)ConA7dO.2978±0.00194a0. 2553±0· 00273cO.2358±0.00232d14dO.3073±0·00175aO. 2548±0. 00293dO.2415±0.00289e21dO.2838±0.00519aO. 2003±0. 01411dO.1793±0.00310eLPS7dO.2297±0.00273aO. 1913±0. 00137dO.2035±0.00289b14dO.2363±0·00294aO. 2035±0. 00409bO.2043±0.00330b不加分裂原21dO.2333±0.00388aO. 1363±0· 00606eO.1440±0.00673d7dO.1863±0·00250aO. 1623±0. 00171cO.1560±0·00141d14dO.2065±0.00173aO. 1695±0. 00265dO.1705±0.00191d21dO.1950±0.00365aO. 1245±0. 00714eO.1313±0.00222d
從表I可看出，在ConA誘導的淋巴細胞轉化實驗中，第7、14、21天時淋巴細胞活性均是1%黃芪多糖注射液組 > 生理鹽水組 >完全空白對照組，并且各組之間都差異顯著 (P < O. 05)。
在LPS誘導的淋巴細胞轉化實驗中，第7、14、21天時黃芪多糖注射液組的細胞活性也均高于其它兩組并且差異顯著(P < O. 05)。
說明I %黃芪多糖稀釋液可明顯的促進免疫兔的淋巴細胞轉化，從而增強豬瘟兔化弱毒疫苗脾淋苗和細胞苗的免疫效果。
表2. 1%黃芪多糖稀釋液對豬瘟兔化弱毒疫苗脾淋苗和細胞苗的免疫兔細胞因子試驗結果
450nm土差值準-2/L 均標比叩疫苗稀釋液成分細胞苗 1%黃芪多糖注射液生理鹽水空白對照分組I組2組3組7d73. 7736±0. 99257a57. 1474±1· 05861c22. 6457±0·99257e14d72. 8125±0. 91510a53. 4954±1. 23074c23. 7990±0.94163d21d68. 1995±1. 31304a37. 1576±0· 85240d24. 2795±1.58111e28d56. 1864±0. 96105a37. 4459±0. 80023c25. 7211±1. 21564d
權利要求
1.一種增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液的使用方法，其特征在于，所述的稀釋液為I %黃芪多糖注射液，使用該稀釋液稀釋豬瘟兔化弱毒疫苗，稀釋成每頭份I毫升。
2.根據權利要求1所述的使用方法，其特征在于，所述的豬瘟兔化弱毒疫苗為脾淋或細胞苗。
3.根據權利要求2所述的使用方法，其特征在于，I%黃芪多糖稀釋液明顯的促進免疫豬的淋巴細胞轉化，從而增強豬瘟兔化弱毒疫苗的免疫效果。
4.根據權利要求2所述的使用方法，其特征在于，I%黃芪多糖稀釋液明顯的促進免疫豬的免疫球蛋白的產生，從而增強豬瘟兔化弱毒疫苗的體液免疫效果。
全文摘要
本發明公開了一種增強豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的疫苗稀釋液的使用方法，所述的稀釋液為1％黃芪多糖注射液，使用該稀釋液稀釋豬瘟兔化弱毒疫苗，稀釋成每頭份1毫升，可明顯的促進免疫豬的淋巴細胞轉化，和免疫豬的免疫球蛋白的產生，從而增強豬瘟兔化弱毒疫苗的免疫效果。
文檔編號A61K39/39GK102988980SQ201110270469
公開日2013年3月27日 申請日期2011年9月14日 優先權日2011年9月14日
發明者沈志強, 朱輝 申請人:山東綠都生物科技有限公司