專利名稱：干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及抗病毒藥物的組合物及其在制備治療病毒性肺炎藥物中的應用。
背景技術：
病毒性肺炎是一種嬰幼兒時期的常見病，嚴重危害嬰幼兒的生命健康。據不完全統計，超過90%的嬰幼兒在2歲以前感染過病毒性肺炎，其中80%以上病例在1歲以內，發病高峰年齡為2-6個月，1-6個月可見較重病例。嬰幼兒因感染病毒性肺炎造成的死亡在發達國家為0.5% _2.0%，在發展中國家可達7%，在我國更是嬰幼兒死亡的首要原因。此外，病毒性肺炎的傳染性和再感染性很強，有報道表明家庭成員間可發生相繼感染，已感染嬰幼兒在10年內再感染發生率高達65%。引起病毒性肺炎的病毒主要是腺病毒(adenovirus，ADV)和呼吸道合胞病毒 (respiratory syncytial virus, RSV)，其次是、流感病毒(influenza virus, IFV)禾口副、流
(parainfluenza virus, PIV), #^ ! ^^! (cytomegalovirus, CMV) 疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、腸道病毒(enterovirus，EV)、人類偏肺病毒(hMPV) 等。由于這些病毒極易發生變異，加之在病毒感染后容易誘發進一步的細菌感染，從而給患兒造成混合感染和并發癥，因此嬰幼兒病毒性肺炎很難實現全面的特異防治，臨床上缺乏有效的藥物治療。化學藥物是目前治療病毒性肺炎的最主要藥物，原因是臨床使用時間最長，可迅速清除感染病毒；但化學藥物治療病毒性肺炎的缺點是停藥后病情容易反彈，不能調節和提高患兒機體免疫力對抗病毒，且在長期使用過程中容易產生耐藥性。目前臨床上治療病毒性肺炎的化學藥物主要有利巴韋林、更昔洛韋、奧司他韋、阿糖腺苷、金剛烷胺等。例如美國專利US 5，290, 540公開了利巴韋林用于治療病毒性肺炎的方法。中藥對病毒性肺炎的治療在近年的研究使用日益廣泛，這源于中藥藥性的溫和持久，并兼具免疫調節作用。但中藥治療病毒性肺炎周期長，且中藥在很大程度上并不適宜于嬰幼兒使用。另外中藥治療的長期安全性問題也是一個不容忽視的問題。目前有報道臨床研究用于病毒性肺炎治療的中藥主要有大青葉、板藍根、銀花、連翹、射干、黃芩、黃連、麻黃、苦杏仁等。例如中國專利CN 03131642. 5公開了一種治療小兒病毒性肺炎的清肺口服液制劑，其由麻黃、生石膏、苦杏仁、葶藶子、桑白皮、前胡、僵蠶、丹參、虎杖、拳參等中草藥組成。又如中國專利CN 02138175. 5公開了一種治療小兒病毒性肺炎的藥物組合物，其由麻黃、苦杏仁、石膏、甘草、前胡、僵蠶、丹參、虎杖、拳參、葶藶子、桑白皮十一味中藥組成。伴隨著生物技術藥物的迅猛發展，近年來越來越多的研究關注生物技術藥物對病毒性肺炎的治療，其中使用的生物技術藥物包括干擾素、白細胞介素、人血丙種球蛋白、胸腺肽、特異性抗病毒抗體等，尤其以干擾素使用的報道最多。生物技術藥物，尤其是干擾素用于病毒性肺炎的治療，作用持久，可調節和提高患兒機體免疫力對抗病毒，不易產生耐藥性，安全性更高。例如中國專利CN03147580.9公開了一種治療病毒性肺炎的重組人干擾素 α噴霧劑，其由重組人干擾素α原液配以適當的保護劑、粘膜吸收促進劑、抑菌劑等制成，pH 值在 5. 0-8. 0。但是由于前述患兒在感染病毒性肺炎后容易進一步誘發細菌性感染，從而給患兒造成混合感染和并發癥，因此單獨使用一種藥物治療嬰幼兒病毒性肺炎的臨床效果并不理想，產生了聯合用藥或兩種以上藥物有效成分的藥物組合物用于病毒性肺炎的治療。例如 《中國實用醫藥》2009年3月第4卷第9期144-145頁發表的文章“干擾素聯合利巴韋林治療小兒病毒性肺炎30例療效觀察”報道了干擾素聯合利巴韋林治療小兒病毒性肺炎的療效，表明聯合用藥組治療有效率為96. 7%，而單獨使用利巴韋林的對照組的有效率只有 76. 6%，兩者具有統計學上的顯著性差異。但聯合用藥或組合物用藥用于病毒性肺炎的研究目前還不夠系統，且研究種類還較少，因此研究成果還不適于在臨床上的規模化推廣應用。在治療病毒性肺炎的藥物遞送系統方面，霧化吸入劑是一種近年來在臨床上發展起來的新的給藥劑型。所謂霧化吸入劑，是指將藥液經過霧化變成藥霧，經吸入達呼吸系統靶部位起治療作用的劑型。霧化吸入劑的給藥必須借助一定的霧化吸入裝置，包括壓縮霧化器、超聲霧化器等。由于霧化吸入劑給藥后不經過吸收可直接作用于呼吸系統病變部位， 從而相比其他劑型有明顯更高的生物利用度與藥效，因此霧化吸入劑已逐漸成為臨床上治療小兒病毒性肺炎的首選劑型。此外，硫酸沙丁胺醇是一種臨床上治療肺部疾病的常見藥物，已有大量文獻報道硫酸沙丁胺醇用于嬰幼兒肺炎治療，例如《山西醫藥雜志》2006年12月第35卷第12期1108 頁發表的文章“硫酸沙丁胺醇與酮替酚聯合治療支氣管肺炎療效觀察”報道了硫酸沙丁胺醇聯合酮替酚治療小兒支氣管肺炎的療效，有效率可達65%。
發明內容
本發明的首要目的是提供一種干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑，以用于嬰幼兒病毒性肺炎的治療，進一步提高治療效果。在基礎的實施方案中，本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸沙丁胺醇與適宜量的可藥用輔料。霧化吸入劑的制備可選擇本領域技術人員公知的方法，甚至是與注射液相類似的方法。但無論霧化吸入劑的組成，還是霧化吸入劑的制備均要充分考慮干擾素α與硫酸沙丁胺醇的穩定性，尤其是干擾素α的熱穩定性、PH穩定性和硫酸沙丁胺醇的化學穩定性。例如，輔料中應含有有利于干擾素α與硫酸沙丁胺醇穩定的緩沖溶液體系，這樣的緩沖溶液體系的PH應該在5. 0-8. 0之間，這樣的緩沖溶液體系包括但不局限于磷酸鹽緩沖溶液體系、枸櫞酸鹽緩沖溶液體系；應含有干擾素α活性保護劑，以防止干擾素α活性在長期儲存過程中降低或喪失，這樣的保護劑包括但不局限于各種氨基酸、白蛋白和多元醇類物質，例如白蛋白、甘露醇、海藻糖、右旋糖酐。另外輔料中還優選含有滲透壓調節劑， 以將溶液的滲透壓調節到與身體內基本等滲，這樣的滲透壓調節劑包括但不局限于NaCl、 甘露醇；優選含有防止干擾素α、硫酸沙丁胺醇和其他輔料沉淀和吸附的促溶劑，這樣的促溶劑包括但不局限于吐溫-80;優選含有防止藥物制劑染菌的防腐劑，這樣的防腐劑包括但不局限于苯扎氯銨、尼泊金酯、苯甲醇等。在霧化吸入劑的制備過程中，優選將難溶性輔料先用更加適宜的方法溶解后再和已經溶解的干擾素α、硫酸沙丁胺醇及其他輔料混合。制備過程中應快速混合，注意避免 ΡΗ、溫度等的急劇變化，從而引起藥物活性成分干擾素α、硫酸沙丁胺醇的生物失活和/或化學降解。由于在藥物活性成分干擾素α、硫酸沙丁胺醇和輔料混合后，藥物活性成分之間， 輔料之間，以及每一藥物活性成分和輔料之間有可能會發生相互作用，引起藥物活性成分的生物失活和/或化學降解，從而降低霧化吸入劑的臨床使用效果，甚至給霧化吸入劑的臨床使用帶來安全性問題，所以需要對混合得到的霧化吸入劑進行必要的檢測，以確認這樣的生物失活和/或化學降解不存在或很少存在。所述的霧化吸入劑的必要的檢測手段包括但不局限于外觀檢測(觀察干擾素α、硫酸沙丁胺醇和輔料混合后是否有顏色的變化、 氣體的出現和/或沉淀的產生)、ρΗ檢測、干擾素α生物活性檢測、干擾素α含量檢測、干擾素α分子量檢測、干擾素α N末端序列檢測、干擾素α C末端序列檢測、干擾素α氨基酸組成分析檢測、硫酸沙丁胺醇含量檢測、硫酸沙丁胺醇純度檢測等。優選進行干擾素α 活性檢測、干擾素α分子量檢測、硫酸沙丁胺醇純度和含量檢測。干擾素α活性檢測優選采用《中國藥典2010版(三部)》規定的標準方法。干擾素α分子量檢測應采用質譜法而不是電泳法，因為質譜法可以檢測到干擾素α氨基酸序列上的微小變化(干擾素α序列上幾個氨基酸的降解或替換就會導致干擾素α分子量的變化，從而可被質譜檢測檢測到)，而電泳法的靈敏度則達不到。硫酸沙丁胺醇純度/含量檢測優選采用《中國藥典2010版(二部)》規定的標準反相HPLC法，因為這樣的方法可以保證檢出硫酸沙丁胺醇可能的降解產物，也可使硫酸沙丁胺醇與輔料在檢測中能充分分離，從而防止輔料對硫酸沙丁胺醇含量檢測的影響。為了確定某一保留時間的色譜峰是硫酸沙丁胺醇降解產物峰還是可溶性輔料成分峰，可以在相同的色譜條件下上各可溶性輔料對照品，通過保留時間比對進行確定。根據本領域技術人員公知常識，在采用HPLC法對硫酸沙丁胺醇進行含量檢測時， 需要在HPLC填料柱上分別上同體積不同濃度的硫酸沙丁胺醇對照品或同濃度不同體積的硫酸沙丁胺醇對照品以繪制工作曲線。在上述各種檢測中，如果需要進行溶解處理，但應采用溫和的條件防止溶解過程中干擾素α、硫酸沙丁胺醇生物失活和/或化學降解；為了消除可能存在的沉淀物對檢測的影響，需要對沉淀物進行過濾或離心處理；為了消除大分子干擾素α對小分子硫酸沙丁胺醇純度/含量檢測的影響，可以用超濾法除去溶液中的干擾素α ；為了消除小分子可溶性物質對干擾素α檢測的影響，可以用超濾、透析等方法除去溶液中的小分子物質。在一種優選的實施方案中，本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑單次給藥劑量中含有2. 5-30 μ g的干擾素α與0. 048-0. 192mg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料。在一種優選的實施方案中，本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑單次給藥劑量中含有10-20 μ g的干擾素α與0. 096-0. IMmg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料。在一種優選的實施方案中，本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑中的干擾素α是干擾素ah、干擾素2b和干擾素a Ib中的一種或以任意比例混合的幾種。在一種優選的實施方案中，本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑中的干擾素α是干擾素α lb。本發明的另一個目的是提供干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑在制備治療病毒性肺炎藥物中的應用。利用本發明的霧化吸入劑治療病毒性肺炎，可較單獨使用干擾素α或硫酸沙丁胺醇治療病毒性肺炎取得明顯更好的治療效果。
圖1是硫酸沙丁胺醇對照品上DIKMA Platisil C18反相高效液相色譜柱 (4. 6X250mm)后獲得的色譜圖。
具體實施例方式通過如下的實施例對本發明的實施作進一步說明，但本發明的實施方式并不局限于如下的實施例。實施例1 干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑的制備按如下表1的方法制備干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑。其中“安福隆”(商品名)為天津華立達生物工程有限公司生產的規格為50 μ g/ml/支的重組人干擾素α 2b注射液；“因特芬”(商品名)為沈陽三生制藥有限責任公司生產的規格為50μ g/ ml/支的重組人干擾素ah注射液；“運德素”(商品名)為北京三元基因工程有限公司生產的規格為50 μ g/ml/支的重組人干擾素a Ib注射液，“硫酸沙丁胺醇注射液”為江蘇永大藥業有限公司生產，規格為0. 48mg/2ml/支；“PBS”為含有0. 15mol/L NaCl的25mmol/L 磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(PH7. 0)。以上各商品名在后續實施例中如無特別指出，含義與本實施例中的含義相同。表1干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑的制備
權利要求
1.干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑，其特征是所述的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸沙丁胺醇與適宜量的可藥用輔料。
2.根據權利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是單次給藥劑量中含有2.5-30 μ g的干擾素α，0. 048-0. 192mg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料。
3.根據權利要求2所述的霧化吸入劑，其特征是單次給藥劑量中含有10-20μ g的干擾素α，0. 096-0. IMmg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料。
4.根據權利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含干擾素α活性保護劑，選自白蛋白、甘露醇、海藻糖、右旋糖酐中的一種或幾種的組合。
5.根據權利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含滲透壓調節劑，選自NaCl、甘露醇中的一種或兩種的組合。
6.根據權利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含防腐劑，選自苯扎氯銨、尼泊金酯、苯甲醇中的一種或幾種的組合。
7.根據權利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的干擾素α是干擾素ah、干擾素2b和干擾素a Ib中的一種或以任意比例混合的幾種。
8.根據權利要求7所述的霧化吸入劑，其特征是所述的干擾素α是干擾素alb。
9.根據權利要求1-8之一所述的霧化吸入劑在制備治療病毒性肺炎藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬于抗病毒藥物的組合物領域，涉及干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑。所述的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸沙丁胺醇與適宜量的可藥用輔料；優選單次給藥劑量中含有2.5-30μg的干擾素α，0.048-0.192mg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料；更優選單次給藥劑量中含有10-20μg的干擾素α，0.096-0.144mg的硫酸沙丁胺醇，以及適宜量的可藥用輔料。用本發明的干擾素α與硫酸沙丁胺醇的霧化吸入劑治療病毒性肺炎，可較單獨使用干擾素α或硫酸沙丁胺醇治療明顯提高療效。
文檔編號A61P31/14GK102430112SQ20111040738
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月8日 優先權日2011年12月8日
發明者劉金毅, 周敏毅, 宋文進, 徐晨, 李潔, 程永慶 申請人:北京三元基因工程有限公司, 北京畢艾歐科技發展有限責任公司