大分子磷脂酰甘油納米脂質體、制備方法及應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體、制備方法及應用，屬于脂質體的制備及應用技術。所述的磷脂酰甘油納米脂質體是用磷脂酰甘油殼聚糖作為主膜材來代替磷脂制備具有脂質雙層膜結構的囊泡。磷脂酰甘油殼聚糖的特征為重均分子量大于2000，可溶于氯仿、乙醇等有機溶劑，并含有羧基或氨基。制備方法為脂質體的常用制備方法薄膜分散法和反向蒸發法。該類脂質體表面可連接多種靶向制劑，可同時和分別包載水溶性、油溶性或雙親性物質，包括藥物、蛋白、基因、營養物質、維生素、磁性顆粒和量子點等。該種方法具有包封率高、操作簡便、適用性強、成本低的優點，包衣后的大分子脂質體粒徑分布均勻，可在10-5000nm的范圍內進行調節，體系穩定，緩釋功能強。
【專利說明】大分子磷脂酰甘油納米脂質體、制備方法及應用
【技術領域】[0001]本發明涉及一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體的制備和應用。屬于脂質體的制備及應用技術。
【背景技術】[0002]脂質體作為藥物載體是臨床應用較早，發展最為成熟的一類新型靶向制劑；它是由脂雙分子層組成的顆粒，可介導基因穿過細胞膜，又是一種優良的基因和藥物載體。脂質體應用非常廣泛，制備工藝簡單、方法多樣，其粒子大小處于納米級的介觀范圍，有許多獨特的物理、化學性質，粒徑還可根據需要進行控制；可用于納米粒子的制備、臨床檢驗和診斷、催化反應的控制、模擬膜研究及在體內外將基因或其它物質向細胞內傳遞等。[0003]但是目前的小分子脂質體技術依然存在如物理化學穩定性差，囊泡易發生融合聚集，藥物易泄漏；不易進行表面修飾等缺點。利用高分子物質替代磷脂所制備的高分子脂質體可提高脂質體的物理化學穩定性，其不僅具備小分子脂質體的脂質雙層膜結構，且制備方法簡單，穩定性高，易進行表面修飾。但是陽離子高分子脂質體仍然存在不少缺點，如細胞毒性偏大、正電性偏高所導致的鹽溶液中的不穩定特性等，因此有必要開發一種更加穩定、低毒性的高分子脂質體系統。大分子磷脂酰甘油納米脂質體則屬于中性脂質體的范疇，具有低毒性、高穩定性的優點。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體，它具有脂質體的優點，同時具有高分子物質特有的多功能和穩定性，可滿足上述應用對脂質體的要求。[0005]本發明為一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征在于所述的大分子磷脂酰甘油納米脂質體是用雙親性磷脂酰甘油殼聚糖作為主膜材來代替合成磷脂，小分子磷脂為穩定劑所制備的具有脂質雙層膜結構的囊泡。[0006]本發明中用于制備大分子磷脂酰甘油納米脂質體的磷脂酰甘油殼聚糖的具體特征為:重均分子量大于2000，可溶于極性有機溶劑氯仿或二氯甲烷，并含有羧基或氨基。[0007]本發明中的小分子磷脂包括膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺(DOPE)、3i3- [N_(N’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]膽固醇、卵磷脂、磷脂(PC、PE、PS、P1、PG)、二硬脂酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一種或2-3種，優選為膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺或3β- [Ν-(Ν’，Ν’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]膽固醇。[0008]本發明提供的大分子磷脂酰甘油納米脂質體的制備方法為用于制備脂質體的所有方法，包括薄膜分散法、反向蒸發法、復乳法、離心法、pH梯度法、注入法和混溶法。[0009]其中薄膜分散法和反向蒸發法的基本步驟為:先將磷脂酰甘油殼聚糖和小分子磷脂及油溶性物質共溶于氯仿或其它有機溶劑中，混勻得溶液I ;然后配置含有水溶性物質的水溶液II。薄膜分散法為:將溶液I通入氮氣并除去有機溶劑使成薄膜；用水溶液II超聲使脂質薄膜水化；反向蒸發法為:將溶液I與水溶液II共混超聲乳化，再除去有機溶劑。最后全部采用柱過濾法、離心法或透析法進行純化。
[0010]具體大分子磷脂酰甘油納米脂質體的制備流程如下:
[0011](a)先制備磷脂酰甘油殼聚糖:取IOOmg磷脂酰甘油(PG)溶于50mL DMSO中，共混于pH=6的硼酸緩沖液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸鋅作為催化劑，再加入組織交聯劑Denacol EX521 (質量濃度1%_50%)溶液10ml，攪拌反應24小時后，萃取收集反應產物環氧化物修飾的PG ;將環氧化物修飾的PG與氧羧甲基殼聚糖在pH=6硼酸緩沖液中再進行反應24小時，透析48小時后凍干得磷脂酰甘油殼聚糖。
[0012](b)將磷脂酰甘油殼聚糖和小分子磷脂及油溶性物質共溶于氯仿或其他有機溶劑中，混勻；
[0013](C)將步驟b)中得到的混合溶液通入氮氣并除去有機溶劑使成薄膜，然后加入含有水溶性物質的水溶液使脂質水化；或將含有水溶性物質的水溶液與步驟b)得到的混合溶液共混超聲乳化，再除去有機溶劑。
[0014]本發明所述的水溶性、油溶性或雙親性物質包括藥物、蛋白、抗體、基因、維生素、磁性顆粒、量子點、SiO2、磷酸鈣無機顆粒，其中優選為抗腫瘤藥物紫杉醇、順鉬、阿霉素，RB基因和p53基因，維生素C，Fe304磁性納米顆粒，CdSe量子點，SiO2納米球。
[0015]本發明中制備的大分子磷脂酰甘油納米脂質體的粒徑分布均勻，可在10_5000nm的范圍內進行調節，分為單層大分子磷脂酰甘油納米脂質體，粒徑在IO-1OOOnm之間；多層大分子磷脂酰甘油納米脂質體，粒徑小于5000nm ;和多囊大分子磷脂酰甘油納米脂質體，粒徑小于5000nm。大分子磷脂酰甘油納米脂質體具有脂質雙層膜結構，磷脂酰甘油殼聚糖為膜的主體，小分子磷脂膽固醇鑲嵌其中起穩定作用，其中水溶性物質被包于水相中，油溶性物質分布于雙分子膜內，兩親性物質插入雙分子膜。且大分子磷脂酰甘油納米脂質體在水溶液中具有很好的物理和 化學穩定性，表現在大分子磷脂酰甘油納米脂質體的水溶液經冷凍和80°C的高溫后結構不會發生變化。大分子磷脂酰甘油納米脂質體的Zeta電位可達50.0mV0
[0016]本發明中制備的載有長春新堿的大分子磷脂酰甘油納米脂質體對長春新堿的載藥率可達14.8%，包封率在90.0%以上，在Tri s-HCl (pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能，緩釋時間在兩周以上，突釋現象不明顯。
[0017]本發明中制備的磁性大分子磷脂酰甘油納米脂質體在水溶液中具有很好的分散性，幾乎不發生團聚現象，粒徑可達到IOOnm以下，且分布均勻，高聚物脂質體中的磁性粒子保持原Fe3O4的晶型結構，比飽和磁化強度可達40.0emu/g,具有超順磁性，可滿足磁靶向性的需要；磁性長春新堿大分子磷脂酰甘油納米脂質體的包封率可達94.0%，在Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能。
[0018]本發明中制備的量子點標記的大分子磷脂酰甘油納米脂質體在水溶液中分散性好，粒徑可達到IOOnm以下，分布均勻，被包裹的量子點依然保持很高的熒光特性，不會發生熒光淬滅現象，且體系穩定，4°C下可保存6個月以上。
[0019]本發明中的大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征是所述的制備方法是對大分子磷脂酰甘油納米脂質體進行表面修飾或先制備含活性成分的前體物質再進行組裝；所用的修飾劑為聚乙二醇、EGFR抗體、葉酸、三苯氧胺、轉鐵蛋白、甲胎蛋白、表皮生長因子EGF，血管內皮生長因子VEGF，“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸”三肽序列RGD，成纖維細胞生長因子tbFGF,以及單克隆抗體曲妥珠單抗Trastuzumab,西妥昔單抗Cetuximab中的一種或2種以上。所制備的EGFR單克隆抗體介導的大分子磷脂酰甘油納米脂質體在PBS緩沖溶液中可穩定存在，并可保持EGFR單克隆抗體的活性。[0020]本發明中所述的大分子磷脂酰甘油納米脂質體在基因和藥物載體、臨床診斷治療方面的應用。[0021]與現有產品和技術相比，本發明的特點在于:[0022]1.整個制備過程簡單易行，條件要求不高，適合于工業化大生產要求。[0023]2.使用磷脂酰甘油殼聚糖為一種多功能的殼聚糖衍生物。其分子量在2000以上，可根據需要選擇不同的分子量。[0024]3.大分子磷脂酰甘油納米脂質體表面含有羧基和氨基等官能團，不用進行表面改性就可以連接多種靶向物質，省去了傳統脂質體必須用含羧基或氨基等制劑進行修飾才能連接靶向物質的過程。[0025]4.大分子磷脂酰甘油納米脂質體的粒徑可達IOOnm以下，并可根據需要通過不同的制備方法來控制粒徑，整個體系的穩定性較高，耐酸堿和高溫；載藥大分子磷脂酰甘油納米脂質體制備簡單，包封率和載藥率高，緩控釋功能良好，藥物滲漏較少。[0026]5.大分子磷脂酰甘油納米脂質體的實用性強，可包裹不同的水溶、油溶和雙親性物質，并可同時包載兩種或兩種以上的物質，包載后的大分子磷脂酰甘油納米脂質體粒徑分布均勻，穩定性高，且能發揮所包載物質的功能。【具體實施方式】[0027]下面的實施例中將對本發明作進一步的闡述，但本發明不限于此。[0028]實施例1:磷脂酰甘油殼聚糖的制備[0029]取100mg磷脂酰甘油(PG)溶于50mL DMSO中，共混于pH=6的硼酸緩沖液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸鋅作為催化劑，再加入組織交聯劑Denacol EX521 (質量濃度1%_50%)溶液10ml，攪拌反應24小時后，萃取收集反應產物環氧化物修飾的PG ;將環氧化物修飾的PG與氧羧甲基殼聚糖在pH=6硼酸緩沖液中再進行反應24小時，透析48小時后凍干得磷脂酸甘油殼聚糖。[0030]實施例2:本實施例探討采用反向蒸發法時磷脂酰甘油殼聚糖和膽固醇的不同配比對大分子磷脂酰甘油納米脂質體粒徑產生的影響。[0031]將不同配比的磷脂酰甘油殼聚糖(重均分子量為2萬)和膽固醇共溶于二氯甲烷中，混勻得溶液I ;準備去離子水溶液II，其中溶液I和溶液II的比例為1:2 ;將兩種溶液混合后，充分超聲乳化，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾除盡二氯甲烷得大分子磷脂酰甘油納米脂質體溶液。由表1可見，調整磷脂酰甘油殼聚糖和膽固醇的質量配比可以得到不同粒徑大小的大分子磷脂酰甘油納米脂質體，所得的大分子磷脂酰甘油納米脂質體在水溶液中的粒徑大小分布也都比較均勻。[0032]實施例3:本實施例為使用薄膜分散法，利用大分子磷脂酰甘油納米脂質體包載水溶性物質的探討。[0033]稱取磷脂酰甘油殼聚糖(重均分子量為2000) 15mg，膽固醇12mg，溶于3ml 二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，然后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發完全，然后室溫真空干燥24h;稱取3.0mg長春新堿溶于5ml PBS(pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使長春新堿充分溶解得水溶液II ;然后將上述5.0ml長春新堿溶液II加入茄形瓶中，在超聲的條件讓脂質薄膜充分水化，超聲IOmin后，過凝膠分離柱分離游離的藥物得載長春新堿的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。使用此方法制備的長春新堿大分子磷脂酰甘油納米脂質體包封率可達90.0%以上，且在Tris-HCl (pH=7.4)緩沖溶液中具有良好的緩控釋功能。
[0034]用類似方法也可分別制得包載其它水溶性物質的大分子磷脂酰甘油納米脂質體，只須將需要的水溶性物質溶于相應的水溶液II既可。
[0035]實施例4:本實施例為使用反向蒸發法，利用大分子磷脂酰甘油納米脂質體包載水溶性物質的探討。
[0036]稱取磷脂酰甘油殼聚糖(重均分子量為10萬)15mg，膽固醇12mg，溶于3ml 二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I ;稱取3.011^牛血清白蛋白(BSA)溶于5ml PBS (pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使BSA充分溶解得水溶液II ;然后將上述兩種溶液I和II共混乳化，超聲lOmin，待形成穩定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發完全，過凝膠分離柱分離未包裹的BSA得載BSA的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。該方法所得大分子磷脂酰甘油納米脂質體包封率也可在90%以上，而且粒徑較小，可在150nm以下。
[0037]用類似方法也可分別制得包載其它水溶性物質的大分子磷脂酰甘油納米脂質體，只須將需要的水溶性物質溶于相應的水溶液II既可。實施例5:本實施例為使用大分子磷脂酰甘油納米脂質體包載油溶性物質的探討。 [0038]稱取磷脂酰甘油殼聚糖15mg，膽固醇12mg和3.0mg脂溶性維生素E共溶于3ml 二氯甲烷中，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發干凈，然后室溫真空干燥24h后再用5.0mlPBS (pH=7.4)緩沖溶液超聲水化；或將二氯甲烷溶液與5.0mlPBS (pH=7.4)緩沖溶液共混乳化，超聲lOmin，待形成穩定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發完全；過凝膠分離柱分離游離的藥物得載維生素E的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。所得維生素E大分子磷脂酰甘油納米脂質體包封率可在80%以上，粒徑可控，并具有緩釋效果。
[0039]用類似方法也可分別制得包載其它油溶性物質的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0040]實施例6:本實施例為使用大分子磷脂酰甘油納米脂質體包載兩種或兩種以上物質的探討。
[0041]稱取磷脂酰甘油殼聚糖15mg，膽固醇12mg和3.0mg紫杉醇共溶于3ml 二氯甲烷中，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發完全，然后室溫真空干燥24h ;稱取3.0mg阿霉素溶于5ml PBS (pH=7.4)緩沖溶液中，搖勻使阿霉素充分溶解；然后將上述5.0ml阿霉素溶液加入茄形瓶中，在超聲的條件讓含紫杉醇的脂質薄膜充分水化，超聲IOmin后，過凝膠分離柱分離游離的藥物得同載紫杉醇和阿霉素的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0042]用類似方法也可分別制得包載其它兩種或兩種以上藥物的大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其中油溶性藥物溶于油相中，水溶性藥物溶于水相中。
[0043]實施例7:本實施例為制備磁性大分子磷脂酰甘油納米脂質體的探討。[0044]稱取磷脂酰甘油殼聚糖15mg,膽固醇12mg, 2.5mg維生素E和2.5mg維生素C共溶于3.0ml 二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發完全，然后室溫真空干燥24h后再用溶有3.0mg 5-氟尿嘧啶和5.0mg水溶性磁粒子的5.0ml PBS (pH=8.0)緩沖溶液II超聲水化；或將溶液I與溶液II共混乳化，超聲lOmin，待形成穩定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發完全；過凝膠分離柱分離游離的藥物得同載維生素和5-氟尿嘧啶的磁性大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0045]用類似方法也可分別制得其他同載營養物質維生素和藥物的磁性大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0046]實施例8:本實施例為制備CdSe量子點標記的大分子磷脂酰甘油納米脂質體的探討。
[0047]稱取磷脂酰甘油殼聚糖15mg，膽固醇12mg共溶于3ml 二氯甲烷中，再加入含有0.5mg量子點的二氯甲烷溶液1ml，振蕩均勻，放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發完全，然后室溫真空干燥24h后再用5.0mlPBS(pH=7.4)緩沖溶液超聲水化；或將二氯甲烷溶液與5.0mlPBS (pH=7.4)緩沖溶液共混乳化，超聲lOmin，待形成穩定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發干凈；過凝膠分離柱分離后得量子點標記的大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0048]實施例9:本實施例提供使用其他小分子磷脂的實例。
[0049]稱取磷脂酰甘油殼聚糖(季銨鹽取代度為90.0%) 15.0mg，DOPE 12.0mg共溶于
3.0ml 二氯甲烷中，振蕩均勻得溶液I，放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾，并不時的通入氮氣，直至二氯甲烷揮發完全，然后室溫真空干燥24h后再用溶有3.0mg水溶性磁粒子的5.0mlPBS (pH=7.4)緩沖溶液II超聲水化IOmin ;或將溶液I溶液II共混乳化，超聲IOmin,待形成穩定的乳液后放入茄形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸餾至二氯甲烷揮發完全；過凝膠分離柱分離游離的藥物得磁性大分子磷脂酰甘油納米脂質體(殼聚糖十八烷基季銨鹽/DOPE)。該類脂質體的Zeta電位可達+40.0mV,表面可吸附基因，可作為一種高效的基因轉染試劑。
[0050]類似的可用其他小分子脂質代替DOPE制備其他大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0051]實施例10:本實施例提供使用除薄膜分散法和反向蒸發法外的其他方法制備大分子磷脂酰甘油納米脂質體的實例。
[0052]pH梯度法:取IOOmg磷脂酰甘油殼聚糖以及60mg膽固醇溶解于15ml乙醇中，減壓蒸發制備脂質膜后，假如硫酸銨溶液水化，制備空白大分子磷脂酰甘油納米脂質體。將探頭超聲過的空白大分子磷脂酰甘油納米脂質體依次通過0.8 μ m、0.65 μ m、0.45 μ m和
0.22 μ m的微孔濾膜，進行整粒。整粒后的大分子磷脂酰甘油納米脂質體裝入透析袋中，用150mmol/L NaCl溶液透析24h。透析后的空白脂質體中加入30mg鹽酸環丙沙星，然后置于水浴保溫，即得鹽酸環丙沙星大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0053]類似的可用制備傳統脂質體的復乳法、離心法、注入法和混溶法來獲得大分子磷脂酰甘油納米脂質體。
[0054]實施例11:大分子磷脂酰甘油納米脂質體的應用。
[0055]本實施例提供大分子磷脂酰甘油納米脂質體在基因和藥物載體、臨床診斷治療方面的應用。
[0056]本發明公開和揭示的大分子磷脂酰甘油納米脂質體、制備方法及應用，可通過借鑒本文公開內容。盡管本發明的一種海藻酸鈉免疫磁珠、制備方法及在免疫診斷方面的應用已通過較佳實施例進行了描述，但是本領域技術人員明顯能在不脫離本
【發明內容】
、精神和范圍內對本文所述的方法改動，更具體地說，所有相類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，他們都被視為包括在本發明精神、范圍和內容中。
【權利要求】
1.一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征在于，所述大分子脂質體是以磷脂酰甘油殼聚糖作為主膜材來代替合成磷脂，并以小分子脂質為穩定劑所制備的具有脂質雙層膜結構的囊泡。
2.如權利要求1所述大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征在于，磷脂酰甘油殼聚糖的具體特征為:重均分子量大于2000，可溶于極性有機溶劑氯仿或二氯甲烷，并含有羧基或氨基。
3.如權利要求1所述大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征在于，小分子磷脂包括膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺(DOPE)、3i3- [N-(N’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]膽固醇、卵磷脂、磷脂(PC、PE、PS、P1、PG)、二硬脂酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一種或2-3種，優選為膽固醇、二油酰脂酰乙醇胺或3β- [Ν-(Ν’，N’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]膽固醇。
4.如權利要求1所述大分子磷脂酰甘油納米脂質體，其特征在于，所述的水溶性、油溶性或雙親性物質包括藥物、蛋白、抗體、基因、維生素、磁性顆粒、量子點、SiO2、磷酸鈣無機顆粒，其中優選為抗腫瘤藥物紫杉醇、順鉬、阿霉素，RB基因和ρ53基因，維生素C，Fe304磁性納米顆粒，CdSe量子點，SiO2納米球。
5.一種制備如權利要求書I所述大分子磷脂酰甘油納米脂質體的方法，包括以下步驟步驟為: (a)先制備磷脂酰甘油殼聚糖:取IOOmg磷脂酰甘油(PG)溶于50mLDMSO中，共混于pH=6的硼酸緩沖液50mL后，加入4.0mg四氟硼酸鋅作為催化劑，再加入組織交聯劑DenacolEX521 (質量濃度1%-50% )溶液10ml，攪拌反應24小時后，萃取收集反應產物環氧化物修飾的PG ;將環氧化物修飾的PG與氧羧甲基殼聚糖在pH=6硼酸緩沖液中再進行反應24小時，透析48小時后凍干得磷脂酰甘油殼聚糖。 (b)將磷脂酰甘油殼聚糖和小分子磷脂及油溶性物質共溶于氯仿或其他有機溶劑中，混勻； (C)將步驟b)中得到的混合溶液通入氮氣并除去有機溶劑使成薄膜，然后加入含有水溶性物質的水溶液使脂質水化；或將含有水溶性物質的水溶液與步驟b)得到的混合溶液共混超聲乳化，再除去有機溶劑。
6.如權利要求5所述的一種大分子磷脂酰甘油納米脂質體的制備方法，其特征在于，所述的制備方法是對大分子磷脂酰甘油納米脂質體進行表面修飾或先制備含活性成分的前體物質再進行組裝；所用的修飾劑為聚乙二醇、EGFR抗體、葉酸、三苯氧胺、轉鐵蛋白、甲胎蛋白、表皮生長因子EGF，血管內皮生長因子VEGF，“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸”三肽序列RGD,成纖維細胞生長因子tbFGF,以及單克隆抗體曲妥珠單抗Trastuzumab,西妥昔單抗Cetuximab中的一種或2種以上。
7.—種如權利要求1-4所述的大分子磷脂酰甘油納米脂質體或依據如權利要求5~6方法制備的大分子磷脂酰甘油納米脂質體的應用，其特征在于，在基因和藥物載體及其制造或臨床診斷治療方面的應用。
【文檔編號】A61K47/24GK103565744SQ201210262424
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年7月26日 優先權日:2012年7月26日
【發明者】王桂榮, 李國黨 申請人:上海晟納實業有限公司