一種氧化苦參堿主動靶向脂質體的制備方法
【專利摘要】本發明屬于醫藥【技術領域】，本發明公開了一種氧化苦參堿主動靶向脂質體的制備方法，本發明采用pH梯度法制備主動靶向氧化苦參堿脂質體，確定制備氧化苦參堿脂質體的最佳處方為：藥脂比為1:10、磷脂與膽固醇的比例為3:1外加10%mol的Lac-PE、外水相pH值為6.8、孵育溫度為60℃，在最佳處方條件下，平均包封率為55.48％。本發明的方法制備的氧化苦參堿主動靶向脂質體比較穩定。主動靶向脂質體的體外釋藥實驗表明氧化苦參堿經糖基化脂質體包裹后具有緩釋效果。透射電鏡觀察本發明的方法制備的氧化苦參堿主動靶向脂質體為小單室脂質體，平均粒徑為80nm，符合脂質體要求。體外溶出實驗表明氧化苦參堿經脂質體包裹后具有一定的緩釋性。
【專利說明】一種氧化苦參堿主動靶向脂質體的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及醫藥【技術領域】，尤其涉及一種氧化苦參堿主動靶向脂質體的制備方法。
【背景技術】
[0002]氧化苦參堿(Oxymatrine.0M.Fig.1)是從中藥苦豆子或苦參根中提取的喹諾里西啶類生物堿，無色骰子狀結晶(丙酮)。熔點208°C，亦有報道熔點207~208°C (分解)。旋光度+47.7° (乙醇)。易溶于水，有強吸水性，水溶液呈強堿性，難溶于乙醚。含I分子結晶水的氧化苦參堿熔點77~78V。氧化苦參堿存在于豆科植物苦參(SophorafIavescensAit.)的根，廣豆根(S.subprostratachunetT.Chen)的根中。藥理學研究表明氧化苦參堿具有顯著的抗癌活性；對實驗動物具有抗心律失常、升高白細胞、平喘作用；具有抗衰老、抗潰瘍、保肝等作用。研究證明它能抑制乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(HBV-DNA)轉染的2.2.15細胞分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)，有顯著的抗乙型肝炎病毒作用，是目前治療急、慢性乙型病毒肝炎的常用藥物。以往用藥為單純的肌肉注射、靜脈滴注或者口服治療，療效較肯定。但以往常用的苦參堿制劑在體內吸收分布廣泛，半衰期短，對肝臟的靶向性低，有一定副作用等缺點。
[0003]
【權利要求】
1.一種氧化苦參堿主動靶向脂質體的制備方法，其特征在于:所述方法的具體步驟如下: (1)將磷脂酰乙醇胺50mg溶解于4ml氯仿-甲醇中，然后加入13ml碳酸氫鈉緩沖液，在40°C條件下用旋轉蒸發器除去有機溶劑，加入乳糖500mg及硼氫化鈉250mg徹底混勻，在25°C恒溫箱中溫育400h ;將反應液裝入透析袋，磁力攪拌下室溫透析3d，用硅酸柱純化，洗脫液為氯仿-甲醇的梯度配比液最后用甲醇洗脫，收集3:7所得洗脫液，即為糖脂溶液，經冰凍干燥得白色粉末，低溫冰箱保存備用； (2)在20mL無水乙醇中加入膽固醇、磷脂和糖脂溶液，然后攪拌使其溶解，旋轉減壓蒸發除去乙醇，在瓶壁內形成均勻的脂質薄膜，繼續抽干IOmin,磷脂膜緩緩加入0.05mol/L的檸檬酸緩沖液10mL，水浴60°C旋轉洗膜lOmin，隨后室溫磁力攪拌lh，冰浴超聲5min，0.2 μ m濾膜過濾兩次，形成空白脂質體； (3)量取2mL空白脂質體，依次加入含氧化苦參堿的磷酸緩沖液0.5mL，lmol/L的Na2HPO4溶液0.7mL，振搖下依次加入，水浴50°C孵育20min，即得氧化苦參堿主動靶向脂質體。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，氯仿與甲醇的體積比為2:1。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，碳酸氫鈉緩沖液的濃度為0.2mol/l, pH 為 9.0。
4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，氯仿-甲醇的梯度配比為9:1、7:3、5:5、3:7。
5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，膽固醇和磷脂的摩爾比為1:4。
6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，糖脂溶液的加入量為膽固醇和磷脂總摩爾量的10%。
7.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，旋轉減壓蒸發是在60°C水浴中進行。
【文檔編號】A61K9/127GK103877023SQ201410103795
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月20日 優先權日:2014年3月20日
【發明者】尚京川, 張夢, 胡茂華, 王蘭, 馬赟 申請人:重慶醫科大學