專利名稱：：苯甲醇卡尼酯化合物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及藥物化學領域，更具體地，涉及苯曱醇卡尼酯化合物。技術背景左旋卡尼汀衍生物的研究開展于上世紀50年代，主要是圍繞卡尼汀的生物活性，模仿輔酶A,制備各種酰化卡尼汀。1980年以來，隨著卡尼汀在人體內作用機制.的深入研究，一系列卡尼汀轉運酶被發現，卡尼汀及其衍生物的研究隨之深入，其作用領域不斷擴展，卡尼汀衍生物的藥用價值日益突出，目前已經在臨床上使用的包括乙酰卡尼汀、丙酰卡尼汀、檸檬酰卡尼汀等，其中乙酰卡尼汀、丙酰卡尼汀已經在歐洲上市。乙酰左旋卡尼汀在神經保護活性方面優于左旋卡尼汀，目前用于治療和年齡相關的類膽堿功能不足，例如神經元纖維化疾病(癡呆癥)及外周神經疾病。對慢性腎病、糖尿病人也有一定的療效。丙酰左旋卡尼汀主要用于慢性心衰和外周血管疾病。其療效均優于左旋卡尼汀。但這些卡尼汀衍生物由于特殊的化學結構，具有極強的引濕性，且它們在水溶液中還存在很強的水解傾向，給制劑的研究開發帶來了極大的不便，目前上市的品種僅限于片劑、膠嚢、凍干粉針等少數劑型，且制劑難度較大。本發明合成了一系列酰基卡尼汀的酯類，即酰基卡尼汀的前藥，很大程度上改善了其引濕性，相應增加了其穩定性，并可延長在體內的作用時間，具有很好的研究前景。
發明內容本發明提供了下式l化合物R其中，R為C1-20烴基，該烴基中的一個或多個碳原子可被氮、氧或.硫原子替代，并且R任選被一個或多個卣素、羥基、氨基、巰基、硝基、氧基、羧基或氰基取代；X—為藥學上可接受的抗衡離子，該離子可以為一價、二價或三價離子，化學領域技術人員已知當X—表示二價離子時，該抗衡離子與川穹醇卡尼酯母體化合物的摩爾比為1:2,當X—表示三價離子時，該抗衡離子與川芎醇卡尼酯母體化合物的摩爾比為1:3,例示性的抗衡離子比如無機離子如氯離子、溴離子、碘離子、硫酸氫根、.硫酸根、磷酸根等，比如有機離子如天冬氨酸根、檸檬酸根、酒石酸根、富馬酸根、甘油磷酸根、乳酸根、粘酸根、馬來酸根、乳清酸根、草酸根、煙酸根、三氯乙酸根、三氟乙酸根、甲磺酸根、帕莫酸根等。在本發明的優選實施方案中，式1化合物中*所示碳原子為R構型。在本發明的優選實施方案中，式I化合物中的X—表示氯離子。本發明還提供了下面的具體化合物氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-乙酰氧基-N，N,N-三甲基-l-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丙酰氧基-N,N，N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丁酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-異丁酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-戊酰氧基-N，N，N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-異戊酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(11)-己酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-笨曱氧曱酰基-2-(R)-辛酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-油酰氧基-N，N，N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(R》肉桂酰氧基-N，N,N-三甲基-l-丙銨。本發明另一方面提供了上述化合物的制備方法，以左旋卡尼汀為原料,其雍基與酰氯(RCOC1)反應形成l.旨，所得產物與草酰氯反應從而使得卡尼汀的羧基轉化為酰氯，再與苯曱醇反應成酯，從而得到終產物。反應流程如下J(3)Titlecompound(4)通過常規的改換酸根的方式，比如將所得產物與堿混合，除去鹽，然后弄與酸混合的方式，即可得到X—為其它抗衡離子的化合物。根據合成化學的一般理論可知，在上述制備流程中，手性中心不會發生消旋化，即，采用R構型原料(左旋卡尼汀)將得到R構型的終產物，通過圓二色譜和/或CD鐠也證明了i一結果。本文所述"烴基"具有化學領域上的通用含義，即，由碳原子和氬原子組成的基團，包括烷基、鏈烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基等。具體實施方式實施例1肉桂酰氯的制備取肉桂酸29.6g(0.2mol)加入氯化亞砜100ml(0.84mol),攪拌溶解，加熱回流4h，蒸除過量的氯化亞砜，得黃色固體，為肉桂酰氯，直接用于下一步反應。鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀的制備取鹽酸左卡尼汀30.06g(0.125mol)加入CF3COOH100ml,攪拌溶解，O"C分次加入上部所得肉桂酰氯，滴畢升溫至45~50°C,保溫反應20小時。反應完畢取出冷卻至室溫，加入丙酮800ml,攪拌2小時，過濾，濾液中加入乙醚1000ml,攪拌至有白色沉淀析出，放入水箱冷藏12小時。取出后，攪拌1小時，過濾，干燥，得白色固體36.30g,即鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀，收率76%鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀酰氯的制備取鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀26.4g(0.09mol)加入二氯曱烷100ml,攪拌溶解，O'C分次15ml(0.12mol)草酰氯，滴畢升溫至45~50°C，保溫反應4小時。蒸除溶劑，得白色固體，即鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀酰氯直接用于下步反應。鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯曱酯的制備將所得鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀溶于100ml無水DMSO中，加入20ml(0.18mol)苯曱醇，逐漸升溫直50。C,TLC監測反應完全，冷卻至室溫，加入乙醚80ml，攪拌2小時，有白色沉淀析出，過濾，干燥，得白色固體21.80g,即鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯甲酯，收率58%。、精制取鹽酸氯化肉桂酰左卡尼汀苯曱酯8.36g(0.02mol)溶于25ml95。/。乙醇中，加入25ml乙酸乙酯，50ml乙醚，冷藏24小時，得無色結晶。M.p:90~920CiHNMR(300Hz,D7O):2.71-2.76(2H,m,-CH2COO-);2.98(9H,S,(CH^N-);3.58(2H,d,d,-NCH2-)二4.79(2H,s,-￡I^C6H5);5.60(lH,m,-NCH2￡H-);6.05(lH,d，-CH=CHCOO-):6.05(lH,d,-CH=￡HCOO-);6.84-7.00(5H,d，-CH^sii^);7.10-7.4(5H,d,-CHHCH^Hs)IR(KBrplate):3067，3027(yCH),1729，1695(yc=o),1669,1628(yc=c)，1504,1588(Yat-c),I486，1431(SCH2,cH3)，1208(vc.N),681,695,723,758,917(aromaticring).ESI-MS(m/z):436.2[M十H]十.實施例2根據實施例1相似的方法，以乙酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH3的式l化合物。iH畫R(300Hz,D，O):2.01(3H.s,CH2COO-):2.62-2.65(;2H,m,-CH2COO-):3.12(9H,S,(CH^N-);3.58(2H,d,d,-NCH2-):4.56(2H,s,-CH2C6Hs):5.53nH,m,-NCH7CH-);7.35-7.39(5H,d,-CH2G邁5)IR(KBrplate):3013C/ch),1733(yoo)1478，1411(Scm,CH3),1215(vc.N),709，726,768，934(aromaticring).ESI掘(m/z):294.4[M+H]+.實施例3根據實施例1相似的方法，以丙酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH2CHb的式I化合物。NMR(300Hz，D70):1.00-1.05(3H,t,CH2CHCOO-):2.5l-2.58(2H,m,-CH3CH2COO-):3.03-3.08(2H.m,-CH2COO-);3.19(9H,S'(CH^N-):3.58(2H,d，d,-NCHr);4.49(2H,s,-CH2C6HQ;5.01(lH,m,-NCH2￡H-);7.25-7.30(5H,d，-CH^gH^)IR(KBrplate):3061,2926(怖)，1725(》0)，1479,1403(Sch2,ch3)，1177(v。N),727，768，876,933(aromaticring).ESI-MS(m/z):308.7[M+H]+.實施例4根據實施例1相似的方法，以丁酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH2CH2CH3的式I4匕合物。iHNMR(300Hz,D2O):0.75-0.81(3H，t,￡^CH2-);1.40-1.47(2H,m，-CH3￡Mr);2.18-2.22(2H.m,-CH，CH2COO-):3.14-3.27(2H,m,-CHCH2COO-):3.05(9H，S，(￡Ha)2N-);3.58(2H.d,d,-NCH2-):5.10(2H,s,-CH2C6HO:5.57(lH,m,-NCH7CH-):7.3l7.37(5H,d,陽CH2e邁》IR(KBrplate):2966(yCH)，1739(》。)，1690(yc=c),1504,1588(yat-c),1483，1456(Scm,ch3),1173(vc-n),681，699，752，968(aromaticring).ESI-MS(m/z):322.4[M+H]+.實施例5根據實施例1相似的方法，以異丁酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH(CH3)2的式I4t合物。力NMR(300Hz,D7O):0.97-1.09(6H,m,(CH2)2CH-);2，46-2.51(lH,m,(CHACH-);2.75-2.78(2H,m,-CH2COO-):2.83(9H,S,(CH^3N-):3.56(2H,d,d,-NCH2-):5.12(2H,s,-e￡bC6H5);5.59(lH,m,-NCH2￡Ji-);7.32-7.38(5H，d,-CH^^IR(KBrplate):3229,2971(YcH)，1732(yoo)，"80,1391(5ch2,ch3),1179(vc.N),700,718，755,799,935(aromaticring).ESI-MS(m/z):422.6[M+H]+.實施例6根據實施例1相似的方法，以戊酰氯代替肉桂酰氯，'制備得到R為CH2CH2CH2CH3的式I4匕合物。&NMR(300Hz，D，O):0.77-0.80(3H,t,CH2CH");0.88-0.93(2H,m,-CH3CHr):1.45-1.47(2H,m,-CH7CH2CH7-):2.54-2.62(2H、m，-CH7CH2COO-):3.04-3.07(2H,m,-CHCH2COO-);3.13(9H,S,(eH^N-);3.58(2H，d,d,-N涯-);5.08(2H,s，-涯C6H5);5.55(lH,m,-NCH2eH-);7.34(5H，d，-CH2￡,IR(KBrplate):3020,2959(yCH),1732(yc=0),1480,1455(SCH2，CH3),1173(vc.N)，616,700,753,936(aromaticring).ESI-MS(m/z):337.4[M+H]+.實施例7根據實施例1相似的方法，以異戊酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH2CH(CH3)2的式I化合物。&NMR(300Hz，D2O):0.78-0.87(6H,m,(eH^CH-);2.15-2.19(lH,m,(CH3)2￡H-);2.77-2.84(2H,m,-CH2COOCH-);3.10-3.15(2H,m,-CH2COOCH7-);3.07(9H,S,(CH^N-):3.56-3.76(2H,d,d,-NCHr):5.11(2H,s,-CH2C6Hs);5.59(lH,m,-NCHCH-):7.34-7.38(5H,d,-CH^HJIR(KBrplate):3020,2957(yCH),1736,1704(》。)，1488,1412(SCH2,CH3),1181(vC-N)，665,699，752，880，938(aromaticring).ESI-MS(m/z):336.5[M+H]+.實施例8根據實施例1相似的方法，以己酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH2CH2CH2CH2CH3的式I訐匕合物。!HNMR(300Hz,D2O):0.62-0.64(3H,t￡ifcCH2-);0.96-1.02(4H，m,-CH3ei^Q^-);1.98-2.07(2H,m,-CH2CH，COO-);2.53-2.62(2H,m,-CH7CH2COO-):3.07-3.12(2H,m,-CHCH2C0O-);3.04(9H,S,(QH^N-);3.56(2H，d,d,陽N幽國);4"0(2H，s,-QH2C6H5);5.50-5.57(lH，m,-NCH2￡H-);7.29-7.31(5H,d，-CH2￡6H5)IR(KBrplate):3014,2957(YcH),1734(Yc=o),1480，1413(SCH2，CH3),1174(vc.N),700,727，768,935(aromaticring).ESI-MS(m/z):350.4[M+H]+.實施例9根據實施例1相似的方法，以辛酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為CH2(CH2)5CH3的式I化合物。M.p:122-125°CNMR(300Hz，D2O):0.76-0.78(3H、t,CH3CH-);l.08-1.24(8H,tn,-CH"CH2)r):2.35-2.40(2H,m,-￡H2CH2COO-);2.75-2.78(2H,m，-CH2￡H2COO-);3.10-3.16(2H,ni,-CHNCH2￡H-);7.33-7.39(5H，d，墨CH2g邁^)IR(KBrplate):3017，2927(yCH)，1735,1698(yc=0)，1646(Yc=c)，1482,1416(5CH2,CH3),1174(vc.N),666,726,880，938(aromaticring).ESI國MS(m/z):378.6[M+H]+.實施例10根據實施例1相似的方法，以油酰氯代替肉桂酰氯，制備得到R為(CH2)7CH=CH(CH2)7CH3的式I4b合物。HNMR(300Hz,D2O):0.86-0.90(3H,t￡^CH2-);1.18-1.42(20H,m,-fCH^CH7CHCHCH"CH2)^1.68<;4H,tn,-CH2CHCHCH2-);2.22-2.29(2H,m,-CH2CH7COO-):2.75-2.80(2H,m,-CH2CH2COO-);3.03-3.10(2H,m,CHCH2COO-、:3.24(9H,s,(C叫N-、二3.87(2H,d,d，-N￡H2-);5.10(2H，s,-￡i^C6H5);5.51-5.62(lH,m,-NCH2￡H-);6.43(lH,d,-￡H=CH-);6.87(lH,d，-CH=CH-):7.27-7.36(5H,d,-CH2￡gHs)IR(KBrplate):3034,3028(yCH)，1735,1688(yc=o),1479,1468(SCH2,CH3),1184(vc.N),705,712,753,799,914(aromaticring).ESI國MS(m/z):552.7[M+H]+.實施例11加速穩定性實驗精密量取丙酰卡尼汀與實例3化合物約50mg各三份，置2ml的量瓶中，分別加注射用水至刻度，于溫度40。C土2。C、相對濕度75%±5%條件下放置3個月，分別于O、1、2、3月取樣用高效液相測定各項指標。丙酰卡尼汀與實例3化合物加速試驗結果(RH75%,40°C)批號時間(月)性狀澄明度有關物質含量(°/。)丙酰卡尼汀實例3化合物01230123無色澄明溶液合格1.1898.82無色澄明溶液合格4.5195.45無色澄明溶液合格5.7594.25無色澄明溶液合格7.1592.85無色澄明溶液合格1.4198.59無色澄明溶液合格1.6798.33無色澄明溶液合格1.5398.47無色澄明溶液合格1.9598.15實例3化合物在水溶液中的穩定性明顯高于丙酰卡尼汀。實施例12引濕性實驗精密量取丙酰卡尼汀與實例3化合物約50mg各三份，置2ml的量瓶中，于溫度"。C土2。C、相對濕度35%±5%條件下放置，24小時后，觀察，丙酰卡尼汀已變為澄清水溶液，實例3化合物只略微有吸潮現象.比較本發明實例3化合物與丙酰卡尼汀比較引濕性明顯低于丙酰卡尼汀實施例12神經細胞保護實驗損傷模型CoCb造成的缺氧損傷細月包活力測定方法MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)法試驗步驟1、取對數生長期的PC12(pheochromocytoma)細胞，胰酶消化后接種到6孔板中，細胞密度約為5x1()S個/ml，培養條件為DMEM補加10%馬血清和5%胎牛血清；2、待細胞貼壁以后，加入2^J肝微粒體酶和終濃度為10mg/l的樣品(實施例中的化合物)，樣品溶劑為DMSO，儲備液濃度為10g/l;3、4小時后加入，終濃度為500,300,或200pM的CoCl2,繼續孵育12-16小時。采用MTT法測定川芎參系列衍生物對CoCl2造成的PC12細胞缺氧損傷的保護作用。在各種處理的PC12細胞中加入溶液，使其終濃度達到0.5mg/mL37。C下孵育2-4小時。終止孵育后，吸去上清，加入DMSO(pH4.7),溶解活細胞中的曱臜顆粒。用酶標儀在570nm波長下測定光密度值OD570，參考波長為630nm(吸光值表示為OD63o)。活性試驗結果見下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>結果表明本發明化合物在肝微粒體酶作用下能發揮卡尼汀、乙酰卡尼汀的作用。權利要求1、下式化合物其中，R為C1-20烴基，該烴基中的一個或多個碳原子可被氮、氧或硫原子替代，并且R任選被一個或多個鹵素、羥基、氨基、巰基、硝基、氧基、羧基或氰基取代；X-為氯離子、溴離子、碘離子、硫酸氫根、硫酸根、磷酸根、天冬氨酸根、檸檬酸根、酒石酸根、富馬酸根、甘油磷酸根、乳酸根、粘酸根、馬來酸根、乳清酸根、草酸根、煙酸根、三氯乙酸根、三氟乙酸根、甲磺酸根或帕莫酸根。2、根據權利要求1所述的化合物，其中*所示碳原子為R構型。3、根據權利要求1所述的化合物，其中X-為氯離子。4、根據權利要求1所述的化合物，其為氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)，乙酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(11)-丙酰氧基-N，N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-丁酰氧基-N,N,N-三甲基-l-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-異丁酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-戊酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-異戊酰氧基-N，N,N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧甲酰基-2-(R》己酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯甲氧曱酰基-2-(R)-辛酰氧基-N,N,N-三曱基-l-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(R)-油酰氧基-N,N，N-三曱基-1-丙銨氯化3-苯曱氧曱酰基-2-(11)-肉桂酰氧基-N,N,N-三曱基-1-丙銨。5、權利要求1所述化合物的制備方法，其特征在于，以卡尼汀為原料，其羥基與式RCOCl的酰氯反應形成酯，所得產物與草酰氯反應從而使得卡尼汀的羧基轉化為酰氯,再與苯曱醇反應成酯，從而得到所需產物，其中R的含義如權利要求1所述。6、根據權利要求1所述的化合物在制備用于神經細胞保護和治療心腦血管疾病藥物中的用途。全文摘要本發明公開了一類苯甲醇卡尼酯化合物，其具有較低的引濕性和較好的穩定性，為全新結構的卡尼汀的前藥。文檔編號C07C229/00GK101219963SQ20081001421公開日2008年7月16日申請日期2008年1月28日優先權日2008年1月28日發明者波馮,崔美蘭,張志華,徐文方,徐桂英,麗王,翟海民,貢肖巍,趙雪坤申請人:山東大學;山東齊都藥業有限公司