具有腫瘤誘導分化作用的類維甲酸衍生物及其藥物組合物與用途的制作方法

專利名稱：：具有腫瘤誘導分化作用的類維甲酸衍生物及其藥物組合物與用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種新的類維甲酸衍生物及其藥學上可接受的鹽，本發明還涉及所述維甲酸衍生物及其藥學上可接受的鹽的制備方法和用途，以及由其制成的藥物組合物，屬于化學和醫藥領域。
背景技術：
：癌癥嚴重威脅著人類的生命。據世界衛生組織統計，全世界每年死于癌癥的患者約500萬，因此癌癥的預防與治療任務十分艱巨。藥物治療是癌癥治療的三大療法之一。傳統化學藥物治療惡性腫瘤主要以直接或間接殺傷腫瘤細胞為目的，對正常細胞也有一定程度的殺傷力，毒副作用明顯，加之腫瘤細胞耐藥性的存在，大大限制了該類細胞毒藥物的療效和應用。自從1971年Friend等發現小鼠紅白血病細胞可以貝二甲亞砜誘導分化合成血紅蛋白以來，人們開始逐漸認識到惡性細胞可以應用分化誘導劑使之"逆轉"，向正常細胞回歸，引起學者們的興趣和重視。隨著腫瘤發病學的深入研究，誘導分化療法成為腫瘤治療學的新突破。誘導分化(inductionofdifferentiation)是指惡性腫瘤細胞在體內外分化誘導劑作用下，向正常或接近正常細胞方向分化逆轉的現象。其著重點不在于直接殺滅腫瘤而是將腫瘤細胞"改邪歸正"，最終治愈腫瘤。有效的分化誘導劑的發現將改變以往殺傷腫瘤細胞為主的治療模式，而形成以控制、調整其生物學行為為主的新療法，最終實現腫瘤的治愈。尤其是近20多年來，隨著腫瘤分子生物學及其技術的長足發展，科學家在誘導惡性腫瘤細胞分化的藥物研究領域取得了豐碩的成果，目前已發現具有分化作用的化合物達百種以上，其中相當一部分已進入I期、II期臨床試驗，少數如維甲酸已作為分化誘導劑用于臨床腫瘤治療和預防，顯示出一定療效，因此分化誘導劑的研究和應用為腫瘤藥物及其藥理學研究開辟了一條廣闊的途徑。維甲酸及其類似物(retinoids)是一類維生素A衍生物,包括維甲酸、維胺酸、維胺酯和天然維生素A等,約有4000多種。維甲酸類化合物廣泛應用于治療多種皮膚病如角化性皮膚病、光老化皮膚病等,但其最引人注目的作用是預防及治療一些惡性腫瘤,包括乳腺癌、皮膚癌、宮頸癌、白血病等。科研人員對該類化合物中的全反式維甲酸和9-順式維甲酸進行了廣泛、深入的研究。它們他們通過參與調節細胞的增殖和分化，具有抗角化、抗增生、促進表皮細胞正常分化的作用，并能通過抑制鳥氨酸脫氫酶的活性干擾腫瘤的發生，可直接抑制皮脂合成和皮脂腺細胞的增殖，以減少皮脂分泌。由蕾，嚴煌林，維甲酸類化合物及其受體與銀屑病研究進展；醫學綜述2007，13(06)，466—467。自1988年，上海維甲酸協作組首先使用全反式維甲酸(all-tmnsretinoicacid，ATRA)誘導分化治療人急性早幼粒細胞白血病，獲得顯著療效，五年臨床總結顯示完全緩解率為86%。目前,全反式維甲酸已經用于急性早幼粒細胞白血病、口腔白斑等惡性腫瘤的治療，已成為治療白血病的首選藥物之一E雨sTR，KayeSB.BrJCancer，1999,80(l-2):l隱9。9-順式維甲酸的療效和全反式維甲酸相當而副作用更小,很有希望成為臨床藥物.常見的維甲酸類化合物結構式分別如下<image>imageseeoriginaldocumentpage9</image>Femretinide芬維A胺但是維甲酸隨著其應用日益廣泛,ATRA引起的不良反應時有發生,主要不良反應如下l皮膚、粘膜損害；2消化系統的不良反應如惡心、嘔吐、納差、上腹飽脹等消化道反應發生率較高；3神經系統的不良反應，在ATRA治療過程中,患者常出現頭痛、視神經乳頭水腫、腦脊液壓力升高；4骨骼、關節、肌肉不良反應，ATRA引起的骨骼、關節、肌肉疼痛較為常見；5白細胞計數增多，國外報道，ATRA治療APL過程中白細胞增多癥發生率高達30%左右；6維甲酸綜合征(RA-RS)，RA-RS是ATRA治療APL的主要危險,主要表現為發熱及呼吸困難,其它癥狀和體征包括體重增加、肢體遠端水腫、胸水或心包積液以及發作性低血壓，胸片見肺間質浸潤，此外，ATRA還可引起腕管綜合征、嚴重的心臟損害、高血脂和高血胺血癥等不良反應趙環宇；全反式維甲酸的不良反應；中國藥學雜志199833(7):440-441，大大限制了藥物的應用，同時快速發展的耐藥與高復發率仍是影響長期療效的兩大障礙，隨著臨床進一步應用，發現其可形成耐藥性并使復發患者難以再次獲得緩解。因此需要改進藥物的療效和拓寬藥物的臨床應用范圍，同時降低藥物的不良反應。因此國內外對維甲酸類的藥物的結構展開大量的結構修飾工作。徐世平等為改善維甲類化合物的性能設計合成了一系列維甲酸衍生物(藥學學報(1981)，16(9),678-86)，其中維胺酯(RI)和維胺酸(RII)在抗致癌等方面效果良好，而且毒性較低，適合癌化學預防，治療癌前病變。杜從之等比較了維胺酯(RI)和維胺酸(RII)及維甲酸，抗癬靈和保膚靈等維甲酸類化合物的毒性，發現維胺酯(RI)和維胺酸(RII)毒性較低，表明其適合于治療癌前病變的應用(藥學學報17:333—337(1982))。申請號為97116602.1的發明專利公開了一種維甲酰香豆素類化合物及其制備方法和含該化合物的藥物組合物。國外也有大量有關維甲類研究方面的報道，如異維甲酸，阿維A酸作為皮膚用藥已經上市。對維甲酸的末端極性基團結構改造主要集中在末端羧基的氧酰化，氮酰化。如KyokoNakagawa-Goto等將維甲酸同紫杉烷縮合產物用于增強藥物療效(KyokoNakagawa-Goto，KojiYamada,etal，Antitumoragents.258.Synthesesandevaluationofdietaryantioxidant~taxoidconjugatesasnovelcytotoxicagents,Bioorganic&MedicinalChemistryLetters17(2007)5204~5209).GholamH.Hakimelahi等利用能和腫瘤細胞表面抗原特異性結合的單克隆抗體作為載體,將(3—內酰胺酶轉運到腫瘤細胞后,服用維甲酸前藥(將全反式維甲酸連接到頭孢菌素的C-3位上獲得的化合物)，使其在腫瘤細胞被(3-內酰胺酶催化,釋放C-3位的藥效基團,從而達到選擇性殺滅腫瘤細胞的作用。體外試驗發現,化合物(5)和P-內酰胺酶合用,抑制乳腺癌腫瘤細胞MCF7增殖能力明顯強于化合物(5)(HakimelahiGH，LyTW,YuSF,etal.Designandsynthesisofacephalosporin-retinoicacidprodrugactivatedbyamonoclonalantibody-(3-lactamaseconjugate[J].BioorgMedChem,2001,9(8):2139-2147)。StefanoManfredini等將維甲酸與Ara-A,Ara-C，3(2H)-Furanone，共價縮合，其中部分化合物具有很強的細胞生長抑制作用(StefanoManfredini,DanieleSimoni,RobertoFerroni,etal，RetinoicAcidConjugatesasPotentialAntitumorAgents:SynthesisandBiologicalActivityofConjugateswithAra-A,Ara-C,3(2H)-Fura謹e，andAnilineMustardMoieties,J.Med.Chem.1997，40,3851-38)，但是這些結構改造均是同相關的藥物進行拼合，同時發揮藥物作用，由于是兩種藥物拼合，存在在分子量大，穩定性，以及與藥物作用靶點不明確等缺陷，其作為藥物應用可能不大。因此應選用小分子化合物作為末端羧基酰化的底物。美國專利US4190594公開了系列維甲酸的酯化和酰胺化，用于防治紫外線照射引起的損傷，其中的化合物芬維A胺(Fenretiiiide，4-HPR)，被用于多種皮膚病的治療，同時目前正在作為用于預防和治療多個腫瘤的藥物進行評價(Soo-JongUM,aYoun-JaKWON，etal，SynthesisandBiologicalActivityofNovelRetinamideandRetinoateDerivatives,Chem.Pharm.Bull.52(5)501-506(2004)。芬維A胺(Fenretinide,4-HPR)是RAR-卩，RAR-Y的選擇性激動劑，近年研究發現芬維A胺與傳統的維甲酸類化合物不同，其誘導分化作用較弱，而促進腫瘤細胞凋亡較強，且毒性遠較其它維甲酸類化合物低，可長期使用，且耐藥性發生率低，并可單獨或合用其它化療藥物抗腫瘤。近年來國外的一11些研究顯示芬維A胺對多種實體瘤均有直接的抑制作用，并已進入了臨床試驗，但其抗腫瘤作用機制尚未完全明了。目前研究認為芬維A胺可能機制包括:抑制腫瘤細胞增殖、促進分化、引發凋亡，并影響其他信號傳導途徑，芬維A胺誘導凋亡的生化途徑十分復雜，已報道同時有維甲酸RA受體依賴型和維甲酸RA受體非依賴型，后者包括促進活性氧簇(ROS)及神經酞胺的產生等。此外，還有抑制血管生成、抑制HIV、抗風濕、治療銀屑病等作用。因此芬維A胺成為目前研究的熱點之一。但是4-HPR在臨床應用時，其主要的缺點生物利用度低，研究表明，當病人服用劑量為200mg/日的時，其血漿血藥濃度低于lpM，而體內需要產生細胞調亡的有效濃度需要lOlpM，因此需要加大給藥劑量或者合成具有更好臨床效果的衍生物。在最近合成的一些衍生物中包括對苯胺結構進行羥基化，羧基化，或者甲氧基取代等等，但是這些衍生物中，部分化合物顯示出較好的生物活性。(CliffordJ.L.,SabichiA.L.,ZouC.,YangX.,SteeleV.E.,KelloffG.J.，LotanR.,LippmanS.M.，CancerEpidemiol.BiomarkersPrev.，10,391—395(2001);SunS.Y.,YueP.,KelloffG.J.，SteeleV.E.，LippmanS.M.，HongW.K.,LotanR.，CancerEpidemiol.BiomarkersPrev.,10，595~601(2001).Soo-JongUM等對4-HPR的結構進行了修飾,得到的一系列化合物均具有較高的細胞毒性和更好的水溶性。主要方法是將具有抗癌活性的丁酸鈉通過對氨基酚連接到維甲酸上，生成維甲酸氨基苯酚丁酸酯(4-BPRE)。分子藥理實驗結果表明，該化合物兼具丁酸鈉和維甲酸雙重抗腫瘤活性(UmSJ,KwonYJ,HanHS,etal.Synthesisandbiologicalactivityofnovelretinamideandretinoatederivatives[J].ChemPharmBull,2004,52(5):501-506;UmSJ,HanHS,KwonYJ，etal.Invitroantitumorpotentialof4-BPRE,abutyrylaminophenylesterofretinoicacid:roleofthebutyrylgroup[J].OncolRep，2004，11(3):719-726)。
發明內容本發明的目的在于提供一種結構新穎的類維甲酸衍生物。本發明技術方案如下本發明所述化合物，具有下式(I)所示的類維甲酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(I)或者式(I)所示的類維甲酸衍生物的異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽；其中，Ri代表式(n)或者式(in)所示的結構，R2代表式(iv)所示的結構；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>表示連接位置；其中R3R7相互間相同或者不同，各自獨立地選自氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級烷氨基、取代或未取代的低級垸巰基、取代或未取代的低級垸磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環垸基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；IVRu'相互間相同或者不同，各自獨立地選自氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級垸氨基、取代或未取代的低級烷巰基、取代或未取代的低級烷磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；R9R13相互間相同或者不同，各自獨立地選自鹵代烷基、鹵代烷氧基、氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級烷氨基、取代或未取代的低級烷巰基、取代或未取代的低級垸磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環垸基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；Z為O、S或者NR14，其中R14選自氫、取代或者未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的脂環垸基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基；條件是R9R13中至少之一為鹵代垸基或者鹵代烷氧基。作為優選，上述所述的類維甲酸衍生物，其中，R3和R7相同或者不同，分別是取代或未取代的低級烷基，R4和R6相同或者不同，分別選自氫、取代或未取代的低級垸基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、硝基、氨基、低級烷基取代氨基、取代或未取代的氮雜環基，R5為取代或未取代的低級烷氧基，所述的低級是指含15個碳原子，取代時取代基選自硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。最優選地，上述所述的類維甲酸衍生物，其中，R3，R7，R4是甲基時，R5是甲氧基，R6是氫。作為優選，上述所述的類維甲酸衍生物，其中，R/和R/相同或者不同，分別是取代或未取代的低級垸基，R/R,。'相同或者不同，分別選自氫、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級垸氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、硝基、氨基、低級烷基取代氨基、取代或未取代的氮雜環基，R8'為氫、取代或未取代的低級垸基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級垸氧基，所述的低級是指含15個碳原子，取代時取代基選自硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。其中，最優選上述所述的類維甲酸衍生物，其中R/、R/均是甲基，R5'R,。'均是氫，Ru'為甲基。作為優選，上述所述的類維甲酸衍生物，其中，R9、RIO、Rll、R12、R13相同或者不同，分別獨立地選自三氟甲基、三氟甲氧基、氫、鹵素、羥基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、羧酸、羧酸酯、酰胺、腈基、硝基、氨基、取代或未取代的低級烷基取代氨基、氮雜環基，條件是R9、RIO、Rll、R12、R13中之一為三氟甲基或者三氟甲氧基。其中，所述術語"鹵素"，包括氟、氯、溴和碘。其中，所述的"低級"，是指含18個碳原子，優選含15個碳原子。其中，所述的基團可以含取代基，也可以不含取代基。取代時，取代基沒有特別限制，可以包含l個或者更多個取代基，優選取代基選自硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基等。本領域的技術人員將會理解，式(I)化合物可能含有手性中心。當式(I)化合物中含有手性中心時，它可以存在對映異構體形式。式(I)所示結構的純旋光異構體、對映體混合物、非對映體混合物、外消旋混合物及其上述化合物藥學上可接受的鹽、溶劑合物等，都屬于本發明的范圍。本發明化合物還可以存在各種多晶型，例如無定形形式和結晶性型。本發明化合物的所有晶型都包括在本發明的范圍內。作為優選地，本發明涉及如下所述的類維甲酸衍生物，其為(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-2-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；或者(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-2-三氟甲基苯基)-酰胺。本發明所述的式(I)類維甲酸衍生物，可以以維甲酸或依曲替酸(Etretin)為原料，通過下列步驟制備A、維甲酸或依曲替酸與三氯化磷反應后，然后與相應的芳香胺衍生物或苯酚衍生物反應制得；B、維甲酸或阿維A酸與相應的芳香胺衍生物或苯酚衍生物，在N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)條件下反應制得相應衍生物；C、維甲酸或阿維A酸與相應的芳香胺衍生物或苯酚衍生物，在N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)對甲苯磺酸鹽條件下反應制得相應衍生物。上述制備方法可用下列反應圖簡單表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>200810110794.1說明書第12/42頁ch3ch3o^^"^^^^^、。hDCC/DMAP-或DCC/DMAP.PTSAH3C、,CH3Rl=ch3h3c.h3c<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>7b本發明的類維甲酸衍生物是未見報道的新化合物，其類似物的合成方法報道很多，主要是酰氯法，DCC，DCC/DMAP等方法，這些方法均可以合成本發明中的新化合物。進一步地，本發明合成制得如下化合物，其都為本發明具體實施化合物:分子式C28H33F302分子量458.56C28H30F3NO2Mol.Wt.:469.54C28H31F304Mol.Wt.:488.54C28H34F3NOMol.Wt.:457.57C28H31F3N20Mol.Wt.:468.55H3CCH39H39H39C28H32F3NO3Mo.Wt.:487.55C28H33F3O3Mol.Wt.:474.56C28H3lF305Mol.Wt.:504.54C28H34F3NO2Mol.Wt.:473.57C28H3lF3N202Mol.Wt.:484.55C28H32F3N04Mol.Wt.:503.55<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>C29H3lF303Mol.Wt.:484.55C29H28F3N03Mol.Wt.:495.53C29H29F3O5Mol.Wt.:514.53C29H32F3N02Mol.Wt.:483.57C29H29F3N202Mol.Wt.:494.55C29H30F3NO4Mol.Wt.:513.55C29H33F304Mol.Wt.:502.57CH3H3OC29H29F306Mol.Wt.:530.53C29H32F3NO3Mol.Wt.:499.56C29H29F3N203Mol.Wt.:510.55C29H30F3NO5Mol.Wt.:529.55C28H3()F3N03Mol.Wt:485.54C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54H7N、C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54上述所述的新的類維甲酸衍生物，可以是它們的中性形式，當其具有堿性時，也可以和無機酸或有機酸加成形成相應的鹽使用，對藥物中所能用的酸包括有鹽酸，溴化氫，萘二磺酸(1，5),磷酸，硝酸，硫酸，草酸，酒石酸，乳酸，水楊酸，苯甲酸，甲酸，乙酸，丙酸，戊酸，二乙基乙酸，丙二酸，琥珀酸，富馬酸，丁二酸，庚二酸，己二酸，馬來酸，蘋果酸，氨基磺酸，苯丙酸，葡糖酸，抗壞血酸，異煙酸，甲磺酸，對甲苯磺酸，檸檬酸，以及氨基酸。所述的化合物可和多摩爾的酸加成形成鹽，這些多摩爾的酸可以是單一的也可以是組合的，這主要根據需要相應的溶劑或稀釋的情況來決定，這些加成的鹽可以通過陰離子交換等方法而轉為中性形式。作為本發明另一發明目的，提供一種藥物組合物，其包含治療有效量的上述所述的類維甲酸衍生物或其異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽作為有效成分，以25及藥學上可接受的輔料。所述的藥學上可接受的輔料，包括相應的醫藥上準許應用的賦形劑，粘合劑，緩釋劑，穩定劑，香料，調味劑，色素；所述的劑型是片劑或膠囊，或者針劑、凍干粉針劑。本發明另一發明目的是提供所述化合物的應用。所述的類維甲酸衍生物或其異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽在制備藥物的應用，其中所述的藥物具有能夠:預防或治療血液系統腫瘤，如急性白血病，慢性白血病，多發性骨髓瘤，淋巴瘤等；預防和治療實體腫瘤，如肝癌，直腸癌，乳腺癌，食道癌等；預防和治療皮膚病，如銀屑病，痤瘡等皮膚病。圖l:A549細胞形態學變化A:CONTROLC:乙醇E:芬維A胺(乙醇)G:3a-01(DMSO)I:3a-02(DMSO)K:4a-02(DMSO)藥10ug/ml三天)B:DMSOD:芬維A胺(DMSO)F:6a-02(DMSO)H:6a-01(DMSO)J:2a-03(乙醇)圖2:HepG2細胞形態學變化(加藥10ug/ml三天)A:CONTROLB:DMSOC:乙醇D:芬維A胺(DMSO)E:芬維A胺(乙醇)F:6a-02(DMSO)G:3a-01(DMSO)H:6a-01(DMSO)I:3a-02(DMSO)J:2a-03(乙醇)K:4a-02(DMSO)圖3:維甲酸衍生物處理NB4細胞72h形態學變化A,B:空白對照組NB4細胞C:6a-025(ug/ml)D:4a-025(yg/ml)E:4a-015(>g/ml)F:2a-035(ug/ml)H:芬維A胺5(>g/ml)G:3a-025(>g/ml)圖4:維甲酸衍生物處理K562細胞72h形態學變化A:空白對照組K562細胞B:6a-025(ug/ml)C:6a-015(>g/ml)D:4a-025(iig/ml)E:5a-025(yg/ml)F:4a-015(ug/ml)G:2a-035(ug/ml)I:芬維A胺5(>g/ml)H:3a-0250g/ml)J:2a-015(>g/ml)圖5:各組NB4細胞表面CD1lb表達的流式檢測結果柱形圖具體實施例方式以下包括的具體的實施例用于說明制備方法，并不對本公開內容作任何限制。所用試劑及中間體或者可由商業提供，或者可由有機合成領域那些技術嫻熟人員根據標準文獻方法容易地制備。本領域那些技術熟練人員可知還有其他制備本發明化合物的方法。實施例1(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯(2a隱01)室溫條件下，加入維甲酸0.5g，二氯甲垸10ml攪拌，加入4一三氟甲基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，然后滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，加畢后，為黃色透明液體，室溫攪拌20小時，反應完成，用飽和氯化銨溶液中止反應，二氯甲垸萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮后，柱層析(流動相石油醚60—90)，用乙醇重結晶得0.23g黃色固體。mpll8.5-120.4。C'麗MR(CDCl3),S(ppm):L04(s,6H);1.72(s,3H);.00(s,3H);2.41(s,3H);1.47十1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.98(s，lH);6.15-6.39(m，4H);7.11(m，lH);7,66(d,lH);7.24(s,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.06;14.26;19.29;21.83;29.05;33.22;34.36;39.71;116.45;129.37;129.50;130.41;132.59;134.55;137.20;137.76;140.94;156.71;164.85;122.35;127.59;153.51;127.59-128.71(q);122.11-123.52(q)高分辨MS:m/z:444.2271(理論值444.2276)分子式C27H3,F302實施例2(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯(2a-02)操作方法同實施例2，將對三氟甲基苯酚換為間三氟甲基苯酚，柱層析(流動相石油醚60—90'C)，得黃色油狀物0.21g'HNMR(CDCl3)，5(ppm):1.04(s,6H);1.72(s,3H);2.00(s,3H);2.41(s，3H);1.47+1.62(t,4H);2,02(m,2H);5.98(s,lH);6.15-6.39(m,4H);7.08(m，lH);7.50(m，lH);7.41(s,lH);7.25(m,lH)13CNMR(CDC13)，S(ppm):13.04;14.24;19.29;21.82;29.04;33.22;34.36;39.70;116.45;129.38;129.46;130.18;132.56;134.57;137.22;137.75;140.89;156.65;164.97;119.18;122.28;125.51;130.18;131.74;137.39;151.03高分辨MS:m/z:444.2278(理論值444.2276)分子式C27H31F302實施例3(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基環己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯(2a-03)操作方法同實施例2，將對三氟甲基苯酚換為鄰三氟甲基苯酚，柱層析(流動相石油醚60—90。C)，用乙醇重結晶得0.18g黃色固體，mp93.8-95。C!HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s,6H);1.73(s,3H);2.03(s,3H);2.40(s，3H);1.47+1.62(t，4H);2.05(m，2H);6.02(s,lH);6.15-6.41(m,4H);7.10(m，lH);7.68(d,lH);7.57(t,lH);7.26-7.34(m,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.06;14.24;19.31;21.84;29.06;33.23;34.37;39.72;116.28;129.40;129.44;130.37;132.54;134.66;137.26;137.77;140.82;156.75;164.78;148.52;133.06;130.22;126.88;125.57;124.43高分辨MS:m/z:444.2275(理論值444.2276)分子式C27H31F30228實施例4(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2，4,6，8-壬四烯酸(4-三氟甲基苯基)-酰胺(3a-01)反應瓶中，加入維甲酸0.5g,甲苯5ml，然后滴加入三氯化磷O.llml，然后于室溫條件下攪拌3小時，將該溶液滴加入冷卻條件下對三氟甲基苯胺0.18ml和5ml吡啶的溶液中，加畢后于冷卻條件下攪拌反應5小時，再于室溫攪拌過夜，然后將反應液傾入碎冰中，用濃鹽酸調節PH=1，用乙酸乙酯萃取三次，有機層用飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，用乙醇重結晶，得亮黃色產物0.3g，mpl86.1-187.6。C'HNMR(CDCl,),5(ppm):1.03(s,6H);1.72(s,3H);2.01(s,3H);2.43(s,3H);1.46+1.63(t,4H);2.02(m,2H);5.79(s,lH);6.12-6.30(m，4H);7.03(m,lH);7.55(d，lH);7.68(d,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.01;13.90;19.31;21.82;29.04;33.21;34.36;39.71;120.48;128.98;129.45;130.18;131.23;134.98;137.27;137.80;139.95;152.13;165.34;119.26;126.33;141.50高分辨MS:m/z:443.2444(理論值443.2436)分子式C27H32F3NO實施例5(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(3-三氟甲基苯基)-酰胺(3a-02)反應瓶中，加入維甲酸0.5g，間三氟甲基苯胺0.32g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)對甲本磺酸鹽0.56g，二氯甲烷5ml，冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入DCC0.4g，二氯甲烷溶液，反應液溶液變為橙紅色，加畢后于室溫條件下攪拌過夜，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲烷萃取，用水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，柱層析(石油醚60-9(TC)收集流分后，濃縮，用甲醇重結晶，得黃色固體200mg，mp89.7-92.5'C'HNMR(CDCl3),5(ppm):L03(s,6H);1.72(s,3H);2.01(s，3H);2.44(s,3H);1.47+1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.78(s,lH);6.15-6.30(m,4H);7.03(m,lH);7.72(d,lH);7.22(s,lH);7.33,7.45(m，lH);N-H7.88(s,lH)I3CNMR(CDC13)，S(ppm):13.00;13.88;19.31;21.82;29.04;33.21;34.36;39.71;116.47;129.49;129.53;130.15;131.11;135.06;137.29;137.81;139.84;151.92;165.39;138.95;128.90;125.33;122.63(d);120.50;131.29(q)高分辨MS:m/z:443,2437(理論值443.2436)分子式C27H32F3NO實施例6(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯(4a-01)室溫條件下，加入維甲酸0.18g,4-氨基-3-三氟甲基苯酚0.1g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.09g,二氯甲烷10ml攪拌，然后滴加入N，N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.15g和二氯甲烷的溶液，為黃色透明液體，室溫攪拌20小時，反應完成，用飽和氯化銨溶液中止反應，二氯甲垸萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮后，柱層析(流動相石油醚60—卯。C:乙酸乙酯40:1),收集流分后，濃縮，用甲醇重結晶得0.09g黃色固體。mpll9.7-121.2°C'HNMR(CDCl3),5(ppm):0.96(s，6H);1.65(s,3H);1.95(s,3H);2.32(s,3H);1.40+1.56(t,4H);1.97(m，2H);5.88(s,lH);6.07-6.30(m,4H);7.00(m，lH);7.12(d，)；7.01(s,);6.65(d,);4.03(s,2H)NH2高分辨MS:m/z:459.2379(理論值459.2385)分子式C27H32F3N02實施例7(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯(4a-02)室溫條件下，加入維甲酸0.5g，4-氨基-2-三氟甲基苯酚0.32g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g,二氯甲垸10ml攪拌，然后滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，為黃色透明液體，攪拌過夜，反應完成，用飽和氯化銨溶液中止反應，二氯甲烷萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮后，柱層析(流動相石油醚60—9(TC:乙酸乙酯2:1)，收集流分后，濃縮，用石油醚(60—9(TC)重結晶得0.21g黃色固體。mp89.7-91.3。C'HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s，6H);1.72(s，3H);2.02(s,3H);2.39(s,3H);1.46+1.63(t，4H);2.03(m,2H);5.99(s,lH);6.14-6.39(m,4H);7.08(m，H);7.02(m,);6.91(d，lH);6.82(t,lH)nCNMR(CDCl3)，S(ppm):13.03;14.16;19.30;21.83;29.05;33.21;34.36;39.71;118.63;129.21;129.48;130.29;130.20;134.81;137.28;137.76;140.52;156.02;165.55;112.54;112.58;116.69;125.45;139.81;144.12;123.34高分辨MS:m/z:459.2378(理論值459.2385)分子式C27H32F3N02實施例8(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯(5a-01)室溫條件下，加入維甲酸0.5g,對三氟甲氧基苯酚0，4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g,二氯甲烷10ml攪拌，然后滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，為黃色透明液體，室溫攪拌20小時，反應完成，用飽和氯化銨溶液中止反應，二氯甲烷萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮后，柱層析(流動相石油醚60—9(TC)，收集流分后，濃縮，用乙醇重結晶得0.11g黃色固體。mp88.3-90.6。C'HNMR(CDCl3)，S(ppm):1.04(s,6H);1.72(s,3H);2.03(s，3H);2.41(s,3H);1.47+1.62(t，4H);2.02(m,2H);5.98(s，lH);6.15-6.39(m,4H);7.06(m,lH);7.24(d,lH);7.14(d,lH)UCNMR(CDC13)，5(ppm):13.04;14.21;19.29;21.82;29,04;33.21;34.35;39.70;116.65;129.40;129.40;130.37;132.42;134.62;137.22;137.75;140.79;156.36;165.19;149.18;146.38;123.17;122.06;122.90(q)高分辨MS:m/z:460,2219(理論值:460.2225)分子式C27H31F303實施例9(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯(5a-02)操作同實施例9，柱層析(流動相石油醚60—90)，得黃色油狀物'HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s,6H);1.72(s，3H);2.03(s,3H);2.41(s,3H);1.47+1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.59(s，lH);6.15-6.39(m,4H);7，04(m,lH);7.41(t,lH);7.04-7.lO(m，lH)13CNMR(CDC13)，S(卯m):13.06;14.25;19.30;21.83;29.05;33.23;34.37;39.71;116.55;129.40;130.44;130.39;132.50;134.61;137.22;137.77;140.85;156.55;164.90;151.66;149.66;130.20;120.45;117.83;115.19;U6.89(q)高分辨MS:m/z:460.2221(理論值460.2225)分子式C27H3,F303實施例lO(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6a-01)反應瓶中，加入維甲酸0.5g，對三氟甲氧基苯胺0.35g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)對甲苯磺酸鹽0.56g，二氯甲烷5ml，冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g，二氯甲垸溶液，反應液溶液變為橙紅色，加畢后于室溫條件下攪拌過夜，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲烷萃取，用水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，柱層析(石油醚60-9(TC)收集流分后，濃縮，用甲醇重結晶，得黃色固體0.05g，mpl72.5-174.5'C'HNMR(CDCl3),S(ppm):0.96(s,6H);1.64(s,3H);1.94(s，3H);2.35(s，3H);1.40+1.55(t，4H);1.95(m,2H);5.70(s,lH);6.05-6.23(m,4H);6.95(m,lH);7.51(d,lH);7.11(d,lH);N-H7,09(s,lH),3CNMR(CDC13)，5(ppm):13.01;13.86;19.32;21.83;29.05;33.21;34.37;39.72;121.83;128.86;129.50;130.13;130.97;135.11;137.32;137.82;139.74;151.59;165.14;120.64;120.86;137.04高分辨MS:m/z:459.2379(理論值459.2385)分子式C27H32F3N02實施例ll(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6a-02)操作同實施例11，柱層析(石油醚60—9(TC)，用甲醇重結晶，得黃色固體0.09g,mpl39.2-14(TC'HNMR(CDCl3),5(ppm):0.96(s,6H);1.65(s,3H);1.94(s,3H);2.36(s，3H);1.40+1.56(t,4H);1.95(m，2H);5.70(s,lH);6.05-6.23(m,4H);6.95(m，lH);7.22-7.29(m,lH);6.86-6.88(m,lH);N-H7.10(s，lH)I3CNMR(CDC13)，5(ppm):13.02;13.88;19.32;21.83;29.05;33,22;34,37;39.72;120.53;128.89;129.50;130.14;130.09;135.07;137.31;137.82;139.83;151.89;165.15;112.51;116.13;117.64;119.08;121.06;130.02;149.7232高分辨MS:m/z:459.2377(理論值459.2385)分子式C27H32F3N02實施例12(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺(7a-01)反應瓶中，加入維甲酸0.5g,甲苯5ml，然后滴加入三氯化磷O.llml，然后于室溫條件下攪拌3小時，將該溶液滴加入冷卻條件下的4-羥基-3-三氟甲基苯胺0.17g和5ml吡啶的溶液中，加畢后于冷卻條件下攪拌反應5小時，再于室溫攪拌過夜，然后將反應液傾入碎冰中，用濃鹽酸調節PH=1，用乙酸乙酯萃取三次，有機層用飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-90。C:乙酸乙酯=10:1)，收率流分，濃縮后，得黃色產物0.08g實施例13(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-2-三氟甲基苯基)-酰胺(7a-02)操作同實施例13，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯=10:1)，收率流分，濃縮后，得黃色產物0.12g實施例14(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯(2b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.53g，間三氟甲基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.4g，二氯甲烷5ml,冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，攪拌反應4h，，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲垸萃取，用飽和氯化鈉水容易洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，用乙醇重結晶，得黃色固體0.62g，mpl21.5-123.rC'HNMR(CDCl3),8(ppm):7.48(cUH);7.4他1H);732(mJH);7.14(d41H);6.76(dJH);6.71(sJH);6.42(cUH);6.29(dJH);622(sJH);6.00(sJH);3.82(s^3H);243(s3H);23(s3H);2.24(諷；2.15(s3H);2.13(s3H)'3CNMR(CDC13)，S(ppm):164.72;156.48;156.37;151.02;140.47;138.07;136.02;135.11;134.02;132.31;132.09;131.76;130.18;129.90;129.80;129.28;125.50;122.90;122.35;119.18;116.78;110.10;55.60;21.49;17.54;14.26;13.11;11.92高分辨MS:m/z:470.2076(理論值470.2069)分子式C28H29F303實施例15(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯(2b-02)操作同實施例15，用乙醇重結晶二次，得黃色固體0.25g，mpll7.7-121.2。C'HNMR(CDCl3)，8(ppm):7.70(cUH);7.68(UH);7.36(dJH);7.32(1UH);7.14(q^lH);6.T7(cUH);6.73felH);6.46(cUH);6.31(dJH);624^1H);6.05(sJH);3.84(s3H);2.44(s3H);2.33(s3H);226(s3H);215(s3H);2.11(s3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):164.72;156.57;156.36;148.49;140.38;138.11;136.03;135.18;134.03;132.88;132.29;130.23;129.83;129.20;126.92;126.88;125.59;124.70;124.49;;123.36;123.05;122.88;121.78;116.60;110.10;55.61;21.50;17.54;14.23;13.11;11.92高分辨MS:m/z:470.2073(理論值470.2069)分子式C28H29F303實施例16(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯(2b-03)操作同實施例15，用乙酸乙酯重結晶，得黃色固體570mg，mpl62.5-164.7。C'HNMR(CDCl3),6(ppm):7.68(d^2H);728(UH);726(sJH);7.16(q^lH);6.78(dJH);6.63(sJH);6.45(dJH);628(OH);6.,H);3.84(s3H);2.45(諷；233(諷；227(s3H);2.16(s3H);2.06(s3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):164.78;156.53;156.37;153.49;140.50;138.05;136.00;135.07;134.01;132.34;130.16;129.78;129.31;126.73;122.89;122.33;116.77;110.09;55.58;21,48;17.53;14.25;13.10;11.91高分辨MS:m/z:470.2065(理論值:470.2069)分子式C28H29F303實施例17(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(3b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯lOml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室溫條件下攪拌2小時，將該溶液滴加入冷卻條件下的間三氟甲基苯胺0.25g和6ml吡啶的溶液中，加畢后室溫攪拌反應5小時，然后將反應液傾入碎冰中，，用二氯甲烷萃取三次，有機層用飽和碳酸氫鈉洗滌，水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-卯。C:乙酸乙酯二15:1)，收率流分，濃縮后，得用甲醇重結晶，得黃色產物0.1g，mpl88.6-l卯.7。C'HNMR(CDCl3),6(ppm):7.88(sJH);7.74(dJH);7.43ftlH);7.35(cUH);725(sJH);7.06(4IH);6.72(cUH);6.6CKMH);6.33(dJH);622(q^2H);5.79(sJH);3.82(s3H);2.45(s3H);2.30(s3H);22《s3H);2.15(s3H);2.10(s3H)13CNMR(CDC13)，5(ppm):165.22;164.69;156.31;151.83;149.87;139.44;138.90;138.41;138.17;135.60;132.13;131.33;130.91;130.31;129.93;129.55;128.73;128.43;122.87;120.76;118.90;116.47;110.14;55.63;21.49;17.54;13.89;13.07;11.91高分辨MS:m/z:469.2234(理論值:469.2229)分子式C28H3。F3N02實施例18(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺(3b-02)反應瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室溫條件下攪拌2小時，將該溶液滴加入冷卻條件下的鄰三氟甲基苯胺0.25g和6ml吡啶的溶液中，加畢后室溫攪拌反應5小時，然后將反應液傾入碎冰中，用二氯甲烷萃取三次，有機層用飽和碳酸氫鈉洗滌，水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-901::乙酸乙酯=20:1)，收率流分，濃縮后，得用甲醇重結晶，得黃色產物0.18g,mpl65.5-166.5t:'HNMR(CDCl3)，5(ppm):8.26(d,lH)，7.54(d，lH);7.48(t,lH);7.36(s,lH);7.13(t，lH);6.98(q,lH);6.65(d，lH);6.53(s,lH);6.29(d,lH);6.15(q,2H);5.22(s,lH);3.75(s,3H);2.37(s,3H);2.23(s，3H);2.21(s,3H);2.08(s，3H);2.05(s,3H)I3CNMR(CDC13)，5(ppm):165.08;156.31;151.85;139.39;138.22;135.65;134.01;132.85;130.90;130.36;129.95;128.70;126.10;124.10;122.86;120.92;110.09;55.63;21.50;17.55;13.90;13.07;11.93高分辨MS:m/z:469.2236(理論值469.2229)分子式C28H3。F3N02實施例19(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯(4b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.53g，4-氨基-3-三氟甲基苯酚0.28g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，二氯甲烷5ml,冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，攪拌反應4h,，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲烷萃取，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，柱層析(石油醚60—9(TC:乙酸乙酯20:1)用乙醇重結晶，得黃色固體60mg，mpl66.7-168.6。C!HNMR(CDCl3)，S(ppm):7.22(d，lH);7.12(m,lH);7.09(d,lH);6.79(d,lH);6.72(s，lH);6.62(d，lH);6.43(d，lH);6.30(s，lH);6.26(d，lH);5.98(s,lH);3.84(s，3H);2.43(s,3H);2.32(s，3H);2.26(s,3H);2.14(s,3H);2.11(s,3H)'3CNMR(CDC13)，S(ppm):165.59;156.35;155.84;148.49;140.21;138.10;136.03;135.36;134.94;134.02;132.01;130.23;129.83;129.12;126.68;122.88;120.00;118.77;117.13;110.10;55.61;21.49;17.53;14.20;13.10;11.92高分辨MS:m/z:485.2176(理論值485.2178)分子式C2SH3。F3N03實施例20(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯(4b-02)反應瓶中，加入依曲替酸0.53g，4-氨基-2-三氟甲基苯酚0.28g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，二氯甲烷5ml,冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入N，N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，攪拌反應4h,，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲烷萃取，用飽和氯化鈉水容易洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，柱層析(石油醚60—90:乙酸乙酯20:1)用乙醇重結晶，得黃色固體60mg，mpll8.7-123.8"C'HNMR(CDCl3),5(ppm):7.39(d,lH);7.26(m,lH);7.12(m,lH);6.75(d，lH);6.61(d，lH);6.43(d,lH);6.30(s,lH);6.26(d，lH);6.01(s,lH);3.82(s,3H);2.42(s,3H);2.31(s,3H);2.25(s,3H);2.14(s,3H);2.09(s，3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):165.62;156.35;155.93;144.11;140.15;139.81;138.14;136.03;135.33;134.03;132.02;130.28;129.88;129.06;125.43;122.88;121.07;118.67;116.98;112.05;110.10;55.63;21.49;17.54;14.19;13.09;11.92高分辨MS:m/z:485.2177(理論值485.2178)分子式C28H3。F3N03實施例21(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯(5b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.53g，對三氟甲氧基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.4g，二氯甲烷5ml,冰浴條件下攪拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二環己基碳二亞胺(DCC)0.4g，二氯甲垸溶液，攪拌反應4h,，用飽和氯化銨溶液中止反應，用二氯甲烷萃取，用飽和氯化鈉水容易洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后，用乙醇重結晶，得黃色固體0.67g，mpl45.0-147.9。C'HNMR(CDCl3)，S(ppm):7.26(s,lH);7.24(s,lH);7.19-7.11(m,3H);6.77(d,lH);6.63(s,lH);6.40(d,lH);6.27(t,2H);6.01(s,lH);3,84(s,3H);2.44(s,3H);2.33(s,3H);2.26(s,3H);2.17(s，3H);2.15(s,3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):165.14;156.37;156.17;149.17;146.40;140.36;138.07;136.01;135.15;134.01;132.17;130.19;129.80;129.23;123.16;122.89;122.06;116.97;110.10:55.59;21,48;17.53;14.21;13.09;11.91高分辨MS:m/z:486.2015(理論值:486.2018)分子式C2SH29F304實施例22(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯(5b-02)操作同實施例22,然后柱層析(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯100:1)，用乙醇/乙酸乙酯重結晶，得黃色固體330mg，mpl25.6-126.7。C37'麗MR(CDCl3),5(ppm):7.43(t，lH);7.24(s,lH);7.10-7.06(m,3H);6.78(d，lH);6.63(s,lH);6.44(d,lH);6.31(t，2H);6.00(s,lH);3.84(s，3H);2.45(s,3H);2.33(s,3H);2.26(s,3H);2.17(s,3H);2.15(s，3H)I3CNMR(CDC13)，S(ppm):164.84:156.37;151.65;149.66;140.42;138.09;136.03;135.14;134.03;132.25;130.19;129.82;129.25;122.91;120.44;117.85;116.88;115.19;110,11;55.62;21.50;17.55;14.26;13.12;11.93高分辨MS:m/z:486,2014(理論值:486.2018)分子式C28H29F304實施例23(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.5g，甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室溫條件下攪拌2小時，將該溶液滴加入冷卻條件下的間三氟甲氧基苯胺0.27g和6ml吡啶的溶液中，加畢后室溫攪拌反應5小時，然后將反應液傾入碎冰中，，用二氯甲烷萃取三次，有機層用飽和碳酸氫鈉洗滌，水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-90。C:乙酸乙酯二20:1)，收率流分，濃縮后，得用甲醇重結晶，得黃色產物0.20g.'HNMR(CDCl3),S(ppm):7.64(s,lH);7.38(d,lH);7.31(t,lH);7.21(s,lH);7.06(q,lH);6.97(d，lH);6.73(d,lH);6.62(s,lH);6.34(d,lH);6.23(q,2H);5.80(s,lH);3.83(s,3H);2.46(s，3H);2.32(s,3H);2.25(s,3H);2.17(s,3H);2.13(s,3H)實施例24(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-02)操作同實施例23.實施例25(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-03)操作同實施例23.實施例26(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺(7b-01)反應瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室溫條件下攪拌2小時，將該溶液滴加入冷卻條件下的4-羥基-3-三氟甲基苯基胺0.27g和6ml吡啶的溶液中，加畢后室溫攪拌反應5小時，然后將反應液傾入碎冰中，，用二氯甲垸萃取三次，有機層用飽和碳酸氫鈉洗滌，水洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮至干，柱層析(硅膠柱100-200目)，流動相(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯二5:1)，收率流分，濃縮后，得用甲醇重結晶，得黃色產物0.20g.實施例27(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(4-羥基-2—三氟甲基苯基)-酰胺(7b_02)操作同實施例26.實施例28類維甲酸衍生物對肺癌細胞A549，HepG2生物活性測定1材料與方法1.1試劑維甲酸衍生物12種由安徽醫科大學藥學院合成，用二甲基亞砜(DMSO)與無水乙醇配制成終濃度為lug/ml，10ug/ml，分裝后于-20。C保存。使用時避光，DMSO的終濃度<0.1%。MTT購自Sigma公司。CoulterDNA檢測試劑盒由安徽省立醫院中心實驗室饋贈。AFP、Y-GT由解放軍105醫院檢驗科提供。細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒購自Beyotime公司。1.2細胞培養人肝癌A549，HepG2細胞由本實驗室保存，細胞生長條件DMEM(GIBICO公司)培養液加入10%小牛血清(血清購杭州四季青生物公司)培養于37'C、5%C02、飽和濕度的細胞培養箱中。1.3細胞生長和增殖實驗采用MTT法。取對數生長期細胞以5xlOVL細胞濃度種于96孔培養板，200pl/孔，待貼壁，次日棄去原液加入培養液，按其濃度分lug/ml、、5ug/ml、10ug/ml及空白對照組、細胞對照組、溶劑對照組(1%。的DMSO及無水乙醇)共17組，孵育3d后加入20)^1/孔MTT(5g39/L)37'C溫育4h，小心棄去原液，控干，加入200nl/孔DMSO溶解結晶物，振蕩10min，于570nm測定OD值。每濃度設5個復孔，每組取3次實驗的平均值，根據各組中各孔吸光度平均值(OD)，按照如下公式計算細胞生長的抑制率抑制率％=(對照孔OD57。-試驗孔OD訓)/對照孔OD57。x100%。重復三次。第二次實驗取最高濃度1(Vmol/L分別以1，2，3，7天培養，重復三次。1.4流式細胞術檢測細胞周期和凋亡收集處于對數生長期的A549細胞，調整細胞密度為8xl07/L，接種于六孔板中，37'C、5%C02培養箱培養，待細胞貼壁后棄去培養液，加入含有相應濃度藥物的培養液，分10嗎/ml加藥組，10嗎/ml芬維A胺組及細胞對照組、溶劑對照組(196。的DMSO及無水乙醇)共ll組，3d后常規消化收集各組細胞并吹打成單細胞懸液，冷PBS洗2次后，用10(V1PBS重懸，按CoulterDNA檢測試劑盒加入固定破膜劑和PI染液，室溫避光反應30min后上機檢測，每個標本檢測10000個細胞，重復計數3次，資料由Analysis軟件分析G。-G,、S、G2-M期比例和凋亡細胞比例。1.5A549,H印G2細胞形態學觀察10嗎/ml芬維A胺衍生物作用細胞瓶中細胞三天，三天后光鏡下觀察細胞形態變化并攝片，并設10嗎/ml芬維A胺對照組及細胞對照組、溶劑對照組。1.6分化指標的檢測將培養的A549細胞隨機分為6種10嗎/ml加藥組和細胞對照組、溶劑對照組(DMSO,乙醇)以及10pg/ml芬維A胺對照組(共1組)。對照組和加藥組均培養三天，收集加藥組和對照組細胞培養液各3管，培養液經4000r/min離心5min后，取上清，采用酶動力學法和CEA測定試劑盒測CEA含量。2結果2.1lug/ml、、5ug/ml、10ug/ml對A549增殖的影響見表l。表l對A549增殖的影響會HSOD值("±s)抑制率6a-02(D)3a-01(D)1.614士0.1460.1351.580±0.0960.1541.498±0.280.1971.517±0.1000.1871.357±0.1590.273ggulOug/ml1.296±0.1920.3056a-01(D)1ug/ml1.637士0.1460.1235ug/ml1.613±0.1200.1361Oug/ml1.362士0.0770.2703a-02(D)lug/ml1.551±0.0830.1695ug/ml1.510±0.1930.1911Oug/ml0.939±0.0400.4972a-02(D)lug/ml1.735±0.0480.0705ug/ml1.621±0.0700.1311Oug/ml1.580±0.2070.1445a-02(D)lug/ml1.843±0.1790.0125ug/ml1.817±0.1420.0271Oug/ml1.689±0.1540.0952a-01(乙醇)1ug/ml1.878±0.158-0.0065ug/ml1,487±0.1750.2031Oug/ml1.458土0.0660.2192a-03(乙醇)lug/ml1.639±0.1150.1225ug/ml1.555±0.1620.1671Oug/ml1.382±0.1330.2605a-01(乙醇)lug/ml1.962±0.225-0.0515ug/ml1.754±0.1380.060Oug/ml1.732±0.3170.0724a-02(D)lug/ml1.644土0.2720.1195ug/ml1.618±0.0870.1331Oug/ml1.026±0.0.0690.4504a-01(D)lug/ml2.020±0.317-0.0835ug/ml1.979±0.138-0.0601Oug/ml1.808±0.1430.031對照組1.866±0.073DMSO1.830±0.0990.019乙醇1.805±0.0860.033芬維A胺(DMSO)1.724±0.0800.076芬維A胺(乙醇)1.710士0.0560.083由上表可以看出每種衍生物對肺癌細胞均有不同程度的抑制作用。隨后選取了六種作用比較明顯的又按時間梯度重復了三次MTT，濃度為10ug/ml，結果見表2。表2對A549增殖的影響組別時間OD值(x±.O抑制率6a-02(l)Id0.774±0.0300.156(1Oug/ml)2d1.065±0.0450.2723d0.408±0.0280.5617d0.666±0.0490.6793a-01(2)Id0.680±0.0550.258(1Oug/ml)2d1.042±0.0460.2883d0.623±0.0060.3287d1.325±0.0280.3616a-01(3)Id0.646±0.0190.296(10ug/ml)2d0.卯9±0.0650.3783d0.567±0.0570.3897d1.243±0.0240.4013a-02(4)Id0.617±0.0720.327(lOug/ml)2d0.703±0.0250.5193d0.229±0細0.7537d0.106±0.0350.9492a-03(8)Id0.902±0.0550.016(lOug/ml)2d1.066±0.0150.2713d0.635±0.0330.3157d1.393±0.0430.3284a-02(ll)Id0.815±0.045O.川(lOug/ml)2d1.176±0.0210.1963d0.720±0.0250.2237d1.144±0.1500.448CEIXId0.917±0駕0.0002d1.463±0馬O扁3d0.927±0.045O扁7d2.074±0.053O細DMSOId0.913±0.0390.0042d1.289±0扁0.1193d0.832±0.0490.1027d1.821±0.1440.122乙醇Id0.902±0.0370.0172d1.442±0.0300,0143d0.916±0.0270.0127d2.041±0.1150.016芬維A胺(DMSO)Id0.883±0.0620.0372d1.360±0.0520.0703d0.845±0.0340.0897d1.835±0.0300.115芬維A胺(乙醇)Id0.887±0.0570.0332d1.333±0.0460.0893d0.836±0.0340.0997d1.851±0.0300.108可以看出六種藥物對于肺癌細胞的抑制作用均較好。2.2lug/ml、、5ug/ml、lOug/ml對HepG2增殖的影響見表3。表3對HepG2增殖的影響組別濃度OD值(i:±■、')抑制率6a-02lml1.38±0.620.185/ml1.16±0.380.3110/ml0.84±0.310.503a-01lug/ml1.13±0.160.335ug/mlU3±0,450.33lOug/ml0.86±0.130.496a-01lug/ml0.97±0.290.425ug/ml0.89±0.140.47421Oug/ml0.89±0.300.473a-02lug/ml1.19±0.500.305ug/ml0.92±0.270.451Oug/ml0.94±0.410.452a-02(乙醇)1ug/ml1.19±0.520.295ug/ml1.13土0.460.331Oug/ml0.94±0.490.455a-02(乙醇)菱1.27±0.440.255ug/ml1.13土0.470.331Oug/ml1.11±0.610.352a-01(乙醇)1ug/ml1.38±0.560.185ug/ml1.31±0.570.231Oug/ml1.30±0.550.242a-031ug/ml1.32±0.500.225ug/ml1.32±0.560.231Oug/ml0.98±0.190.425a-01(乙醇)lug/ml1.57±0.390.075ug/ml1.51±0.300.111Oug/ml1.49±0.230,124a-021ug/ml1.50±0.240.115ug/ml1.32±0.500.221Oug/ml0.86±0.130.494a-01lug/ml1.72±0.44-0.0095ug/ml1.63±0.360.041Oug/ml1.57±0,300.07對照組1.70±0.51DMSO1.45±0.420.14乙醇1.56±0.400.08芬維A胺(DMSO)1.27±0.250.25芬維A胺(乙醇)1.28±0.210.24由上表可以看出每種衍生物對肝癌細胞均有不同程度的抑制作用。隨后選取了六種作用比較明顯的又按時間梯度重復了三次MTT，濃度為1Oug/ml，結果見表4。表4對HepG2增殖的影響組別時間OD值(.s.±.、')抑制率6a-02(l)*Id1.60±0.190.07(1Oug/ml)2d.14±0.090.323d0.81土0.120.347d0.49±0.320.633a-01(2)Id1.52±0.130.12(1Oug/ml)2d0.71±0.020.423d0.77±0.030.547d0.30土0.080.776a-01(3)Id1,28±0.070,06(1Oug/ml)2d1.55±0.110.103d1.24±0.180.267d0.62±0.130.5043±0.070.17(10ug/ml)2d0.81±0.120,523d0.55±0.030.557d0.32±0.120.762a-03(8)Id1.6U0.140.07(lOug/ml)2d1.55±0.090.083d.24±0.090.097d0.79±0.080.364a-02(ll)*Id1.53±0.270.1(lOug/ml)2d1.36±0.130,203d0.74±0.080.467d0.70±0.050.48CEIXId1.78±0.07/2d1.70±0.12/3d1.24±0.13/7d1.37±0.07/DMSOId1.70±0.120.042d1.68土0.070.013d1.09±0.070.27d1.25±0.〗90.08乙醇Id1.68士0.070.052d1,67±0.050.013d1.19±0.070.037d1.31±0.090.04芬維A胺(DMSO)Id1.61士0.160.092d1.37±0.070.193d1.07±0.200.137dU7土0.060.14芬維A胺(乙醇)Id1.67±0.050.052d1.3I±0.090.223d1.06±0.090.14最后我們又選取了3天作為后續實驗的作用時間，MTT重復兩次結果見表5。表5對HepG2增殖的影響組別濃度OD值(x±.n')抑制率*表示與細胞對照組比較有統計學意義2.167±0.2050細1.849±0.0720.1461.938±0.1230.1051.469±0扁0.322*1.422±0.1230.343*1.125±0.1460.480*0.978±0.0720.548*1.163±0.1020.463*1.33U0.0670.385*1.847±0.0910.468*1,409±0細0,349*對照組DMSO乙醇芬維A胺(DMSO)芬維A胺(乙醇)6a-02(DMSO)3a-01(DMSO)6a-01(DMSO)3a-02(DMSO)2a-03(DMSO)4a-02(乙醇)Oug/mlmmmmmuooooo可以看出六種藥物對于肝癌細胞的抑制作用均較好。2.3對A549細胞CEA分泌量的影響結果如表6所示，選取六種ATRA衍生物(同前)進行實驗，10ug/ml藥物濃度作用三天，然后取上清進行檢測，六種藥物對于CEA分泌量均有影響。表6對A549細胞CEA分泌量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>2.4對HepG2細胞Y-GT比活性及AFP分泌量的影響如表7所示，ATRA衍生物中3a-01，6a-01，4a-02對于肝癌細胞HepG2的AFP分泌量影響均具有統計學意義，六種藥物對于r-GT分泌量均有影響。表7對HepG2細胞y-GT比活性及AFP分泌量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>與對照組比較'尸<0.052.5對于A549細胞細胞周期及凋亡的影響見表8從表8可以看出，六種藥物中3a-02對于A549細胞凋亡的影響最大。表8對于A549細胞細胞周期及凋亡的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>溶劑對照(DMSO)66.325.72.665.83溶劑對照(乙醇)67.922.92.926.47芬維A胺(DMSO)47.222.22.0929.3芬維A胺(乙醇)59.324.52.6314.0l(6a-02)70.019.01.719.792(3a-01)55,624.92.4117.63(6a-01)40.127.92.3430.54(3a-02)35.123.61.6240.98(2a-03)45.725.81.0128.9144.129.41,9023.92.6對于HepG2細胞細胞周期及凋亡的影響見表9。從表9可以看出，六種藥物中4a-02對于HepG2細胞凋亡的影響最大。表9對于HepG2細胞細胞周期及凋亡的影響組別G0-G1(%)S(%)G2-M(%)凋亡率(％)細胞對照68.817,85.907.68溶劑對照(DMSO)69.719.82.808.00溶劑對照(乙醇)67.722.54.665.38芬維A胺(DMSO)67.319.87.645.71芬維A胺(乙醇)60.024.15.6910.6l(6a-02)57.525.42.6115.7*2(3a-01)56.324.84.1416.5*3(6a-01)57.426.75.3011.14(3a-02)40.327.92.7130.2*8(2a-03)57.325.53.4016.3*ll(4a-02)30.928.53.2038.1*與正常組比較'P'<0.0052.7A549細胞形態學變化(加藥10ug/ml三天)見圖l。2.8HepG2細胞凋亡Hoechst33258染色結果見圖2。實施例29、類維甲酸衍生物對白血病細胞株K562，NB4生物活性測定材料1.細胞株K562細胞株，購于中科院上海細胞庫。NB4細胞株，為安徽醫科大學第一附屬醫院血液內科實驗室饋贈。2.試劑芬維A胺，維甲酸衍生物:由本實驗室自己合成。胎牛血清:杭州四季青生物工程材料有限公司RPM11640培養粉Gibco公司。46瑞式染色液弘慈醫學化驗所。碘化丙啶(propidiumIodide,PI):Sigma公司。RNaseA:Sigma公司。熒光標記單抗:包括抗人CDllb/PE,抗體，及相應同型對照抗體(IgGl/PE,均購自Coulter—Immunotech(Paris,France)3.儀器(302培養箱SHELLAB超凈臺蘇州凈化SW-CJ-1F型單人雙面凈化臺離心機Sigma3-16K流式細胞儀EPICSXL-MCL油鏡COICXSZ-H實驗方法1.制劑維甲酸衍生物和芬維A胺用無水乙醇配制成濃度為10mg/mL,儲存液，-20°C避光保存。2.細胞培養NB4細胞、K562細胞以2X10Vml的起始濃度接種于含10。/。胎牛血清(FBS):100u/ml青霉素，100Lg/ml鏈霉素禾B2mmol/L谷胺酸氨的RPMI1640培養液中懸浮培養(37'C,5。/。C02)。每2—3天換液。3.細胞形態學觀察上述細胞經維甲酸衍生物和芬維A胺(5mg/ml)作用72h后收集，離心后細胞涂片，自然干燥，用瑞士藍染色。油鏡下觀察細胞形態4.細胞周期分析上述細胞經維甲酸衍生物和芬維A胺(5mg/Ml)作用72h后，收集約106細胞，PBS清洗兩次，經70%冷乙醇固定24小時以上后，再用PBS清洗兩次，隨后，加入碘化丙啶5ug/ml染色，經流式細胞儀檢測后，所得資料再經muti-cycle軟件分析處理。5.流式細胞儀檢測細胞分化抗原NB4細胞在維甲酸衍生物和芬維A胺(5mg/Ml)作用72h后，取1x106細胞，PBS清洗兩次.加入熒光標記的抗人CDllb/PE抗體和相應的同型對照抗體，于室溫反應30分鐘.PBS清洗一次。用流式細胞儀檢測。6.結果6.1.維甲酸衍生物對白血病細胞誘導分化的形態學變化油鏡下觀察顯示，加入維甲酸衍生物處理后NB4細胞的形態均有不同程度的改變，表現為胞體變小，核/漿比例減小，胞漿內顆粒增多，核變小且明顯凹陷扭曲，細胞形態似中、晚幼粒細胞(圖3，圖4)6.2.維甲酸衍生物對白血病細胞株細胞周期的影響FCM分析顯示，維甲酸衍生物作用后Gl期分布高于空白對照組，而S期分布低于空白對照組。(表9，表IO)表9維甲酸衍生物對NB4細胞周期的影響GroupGl%S%G2%空白對照47.0151.461.536a-0275.4719.015.526a-0138.2459.062.704a-0252.5939.737.685a-0260.0635.034.914a-0159.1533.787.072a-0365.7228.745.543a-0245.8351.302.875a-0159.2835.744.98芬維A胺63.2533.724.03表10維甲酸衍生物對K562細胞周期的影響GroupGl%S%G2%空白對照32.460.86.86a-0232,256.810.96a-0134.256.49.44a-0233.155.411.55a-0238.254.27.74a-0139.153.96.92a-0345.147.37.63a-0239.754,26.05a-0132.655.012.52a-0235.454.69.9芬維A胺33.557.59.02a-0136.151.412.56.3.維甲酸衍生物對NB4細胞表面分化抗原CDllb的影響不同的維甲酸衍生物處理72h，NB4細胞CDllb表達與對照組相比明顯增高。隨著CDllb表達量的增加，說明NB4細胞向成熟粒細胞方向分化(圖5)。已經根據優選實施例對本發明作了描述。應當理解的是前面的描述和實施例僅僅為了舉例說明本發明而已。在不偏離本發明的精神和范圍的前提下，本領域技術人員可以設計出本發明的多種替換方案和改進方案，其均應被理解為在本發明的保護范圍之內。權利要求1.具有下式(I)所示的類維甲酸衍生物或者式(I)所示的類維甲酸衍生物的異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽；其中，R1代表式(II)或者式(III)所示的結構，R2代表式(IV)所示的結構；id="icf0003"file="A2008101107940002C3.tif"wi="11"he="2"top="158"left="31"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>表示連接位置；其中R3～R7相互間相同或者不同，各自獨立地選自氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級烷氨基、取代或未取代的低級烷巰基、取代或未取代的低級烷磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；R3’～R11’相互間相同或者不同，各自獨立地選自氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級烷氨基、取代或未取代的低級烷巰基、取代或未取代的低級烷磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；R9～R13相互間相同或者不同，各自獨立地選自鹵代烷基、鹵代烷氧基、氫、硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級烷氨基、取代或未取代的低級烷巰基、取代或未取代的低級烷磺基、取代或未取代的低級烷酰胺基、取代或未取代的低級脂烯氧基、取代或未取代的低級脂炔氧基、取代或未取代的脂環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的雜芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的雜芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的雜芳氨基、取代或未取代的芳巰基、取代或未取代的雜芳巰基；Z為O、S或者NR14，其中R14選自氫、取代或者未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級炔基、取代或未取代的脂環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基；條件是R9～R13中至少之一為鹵代烷基或者鹵代烷氧基。2、如權利要求l所述的類維甲酸衍生物，其中，R3和R7相同或者不同，分別是取代或未取代的低級烷基，R4和R6相同或者不同，分別選自氫、取代或未取代的低級垸基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、硝基、氨基、低級垸基取代氨基、取代或未取代的氮雜環基，R5為取代或未取代的低級垸氧基，所述的低級是指含15個碳原子，取代時取代基選自硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。3、如權利要求2所述的類維甲酸衍生物，其中，R3，R7，R4是甲基時，R5是甲氧基，R6是氫。4、如權利要求1—3所述的類維甲酸衍生物，其中，IV和IV相同或者不同，分別是取代或未取代的低級烷基，IVR,。'相同或者不同，分別選自氫、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、硝基、氨基、低級烷基取代氨基、取代或未取代的氮雜環基，R,r為氫、取代或未取代的低級烷基、取代或未取代的低級烯基、取代或未取代的低級烷氧基，所述的低級是指含15個碳原子，取代時取代基選自硝基、鹵素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羥基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。5、如權利要求4所述的類維甲酸衍生物，其中IV、R/均是甲基，IVR,。'均是氫，R,，'為甲基。6、如權利要求l一5所述的類維甲酸衍生物，其中，R9、RIO、Rll、R12、R13相同或者不同，分別獨立地選自三氟甲基、三氟甲氧基、氫、鹵素、羥基、取代或未取代的低級垸基、取代或未取代的低級烷氧基、取代或未取代的低級脂烯氧基、羧酸、羧酸酯、酰胺、腈基、硝基、氨基、取代或未取代的低級垸基取代氨基、氮雜環基，條件是R9、RIO、Rll、R12、R13中之一為三氟甲基或者三氟甲氧基。7、如上述權利要求任一項所述的類維甲酸衍生物，其為鹽的形式，所述的鹽包括但不限于鹽酸鹽，氫溴酸鹽，萘二磺酸鹽,磷酸鹽，硝酸鹽，硫酸鹽，草酸鹽，酒石酸鹽，乳酸鹽，水楊酸鹽，苯甲酸鹽，甲酸鹽，乙酸鹽，丙酸鹽，戊酸鹽，二乙基乙酸鹽，丙二酸鹽，琥珀酸鹽，富馬酸鹽，丁二酸鹽，庚二酸鹽，己二酸鹽，馬來酸鹽，蘋果酸鹽，氨基磺酸鹽，苯丙酸鹽，葡糖酸鹽，抗壞血酸鹽，異煙酸鹽，甲磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽，檸檬酸鹽，或者氨基酸鹽。8、如權利要求l所述的類維甲酸衍生物，其為(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4，6，8-壬四烯酸胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸酰胺；4-三氟甲基苯酯；3-三氟甲基苯酯；2-三氟甲基苯酯；(4-三氟甲基苯基)-酰(3-三氟甲基苯基)-酰4-氨基-3-三氟甲基苯4-氨基-2-三氟甲基苯4-三氟甲氧基苯酯；3-三氟甲氧基苯酯；(4-三氟甲氧基苯基)-(3-三氟甲氧基苯基)-(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基環己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羥基-2-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6，8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(4-羥基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羥基-2-三氟甲基苯基)-酰胺。9、一種藥物組合物，其包含治療有效量的權利要求1一8任一項所述的類維甲酸衍生物或其異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽作為有效成分，以及藥學上可接受的輔料。10、權利要求1一8任一項所述的類維甲酸衍生物或其異構體、對映體、消旋體、非對映體混合物、外消旋混合物、溶劑化物、多晶型物或藥學上可接受的鹽在制備藥物的應用，其中所述的藥物具有能夠預防或治療血液系統腫瘤，如急性白血病，慢性白血病，多發性骨髓瘤，淋巴瘤等；預防和治療實體腫瘤，如肝癌，直腸癌，乳腺癌，食道癌等；預防和治療皮膚病，如銀屑病，痤疫等皮膚病。全文摘要本發明涉及一類具有腫瘤誘導分化作用的類維甲酸衍生物及其藥物組合物與用途。本發明化合物能夠預防或治療血液系統腫瘤，如急性白血病，慢性白血病，多發性骨髓瘤，淋巴瘤等；預防和治療實體腫瘤，如肝癌，直腸癌，乳腺癌，食道癌等；預防和治療皮膚病，如銀屑病，痤瘡等皮膚病。文檔編號C07C403/20GK101591280SQ20081011079公開日2009年12月2日申請日期2008年5月30日優先權日2008年5月30日發明者吳繁榮,俊李,淵汪,娟沈,石靜波,阮晶晶,陳飛虎申請人:安徽醫科大學;安徽省新星藥物開發有限責任公司