一種天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備及其抗腫瘤的應用的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種具有抗腫瘤活性和靶向性的天然活性藥物-多糖靶向復合物。這類偶聯物通過化學接枝將天然活性藥物引入多糖骨架上，與具有靶向傳遞能力的配體—二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-茴香酰胺物理混合，形成天然活性藥物-多糖靶向復合物，在水中可以自組裝形成納米膠束，其特征包括：1)具有靶向傳遞能力，提高制劑的腫瘤轉運效率，減少不良反應，增加患者的耐受性；2)疏水基團形成的疏水內核可以物理包裹抗腫瘤藥物，顯著改善抗腫瘤藥物的水溶性；3)通過化學偶聯及物理包裹抗腫瘤藥物，可以實現腫瘤聯合治療的效果，降低毒副作用。本發明制備方法簡單，容易操作，產率較高，容易實現工業化。
【專利說明】一種天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備及其抗腫瘤的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物制劑領域，涉及一種天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備方法及其在抗腫瘤中的應用。
【背景技術】
[0002]在當今全球范圍內，癌癥已成為嚴重威脅人類健康的多發病與常見病。世界衛生組織指出，目前癌癥每年在全球奪取700多萬人的生命，而且這一數字還會繼續上升。因此，對于癌癥的治療和研究刻不容緩，是新世紀人類急需解決的難題。
[0003]天然活性藥物由于具有來源廣泛，生物活性高，毒副作用少等特點，已成為近年來人們研究的熱點。其生物活性主要包括:抗炎、抗氧化、降血脂、降血壓、抗腫瘤、抗病毒等。其中，其抗腫瘤的作用一直是專家和學者研究的熱點。例如:藤黃酸是藤黃科植物所分泌的干燥樹脂的有效成分之一，為光譜抗腫瘤藥，對多種腫瘤表現出較強的抗腫瘤活性，并且在有效劑量范圍內的毒性較小，能選擇性的殺死癌細胞，而對正常的造血系統和免疫功能無明顯影響。有研究表明藤黃酸對人肝癌細胞株SMMC-7721和QGY-7701的增殖有明顯的劑量依賴性抑制作用，而對正常人肝癌細胞株L-02作用相對較弱。姜黃素是從姜黃中提取的活性成分，具有廣泛的藥理作用，利用酚羥基捕捉自由基，對輻射藥物性肝損傷、氧化損傷起保護作用；通過調節細胞周期、誘導細胞凋亡、調控基因表達起抗腫瘤作用。熊果酸是五環三萜類化合物，廣泛分布于自然界中，具有抗氧化、抗炎、保肝、降血脂等作用。近年來發現，熊果酸能夠抑制多種惡性腫瘤細胞的生長。研究表明，熊果酸對腫瘤細胞的增殖有良好的抑制作用。同時熊果酸能夠誘導腫瘤細胞發生凋亡。但是，大多數天然活性藥物難溶于水，生物利用度低，大大限制了其制劑應用。
[0004]多糖是所有生命有機體的重要組成部分，在控制細胞分裂，誘導細胞分化以及維持生命體正常代謝方面有著重要的意義。此外，由于多糖具有良好的生物相容性和生物可降解性，主鏈結構由于存在大量的活性基團(如羧基和氨基等)易于化學修飾而改善其理化性質等優點，被越來越多的修飾成兩親性多糖偶聯物。例如，透明質酸是一種由葡萄醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖的雙糖單位反復交替連接構成的線性大分子粘多糖，具有良好的生物相容性、生物可降解性、高粘彈性，并且能與細胞表面某些特異性受體專一性結合，因此，經透明質酸改造的藥物載體具有良好的生物相容性、靶向性、緩釋性以及高載藥量等優勢。肝素及其衍生物是由葡萄糖胺，L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替組成酸性粘多糖硫酸酯，具有良好的水溶性，因其結構上含有大量的羥基和羧基，易于進行結構修飾。
[0005] 天然活性藥物-多糖偶聯物是指把小分子藥物通過共價鍵連接在多糖上，作為側基的一部分。其主要優勢在于:對實體瘤具有傾向性沉積作用，即EPR效應；延長藥物在血液的循環時間，避免網狀內皮系統的吞噬；改善疏水性藥物可溶性等。
[0006]隨著分子生物學技術的提高，以及從細胞受體和增殖調控的分子水平對腫瘤發病機制的進一步認識，人們開始進行以細胞受體等為靶點的靶向治療研究。σ受體是熟知的膜結合蛋白，對精神安定劑具有高親和性。這些受體表達在正常的組織，例如肝臟，內分泌腺，腎臟，肺，生殖腺，中樞神經系統和卵巢。在一系列人體腫瘤組織過度表達σ受體，例如黑色素瘤，非小型細胞肺癌，神經源性乳腺腫瘤，以及前列腺腫瘤。苯甲酰胺表現出對σ受體的良好的親和力。天然活性藥物-多糖靶向復合物是利用具有靶向性的配體修飾而成的，使得被修飾得到的天然活性藥物-多糖靶向復合物能夠與細胞產生特異性地結合，增加其轉運效率，降低毒副作用。
[0007]天然活性藥物-多糖靶向復合物可以在水溶液中自組裝，形成內部疏水外部親水的膠束結構，其疏水性的內核可以裝載疏水性的藥物，由此增加被包載的疏水性藥物的溶解度。通過化學偶聯以及物理包裹抗腫瘤藥物，可以達到共同治療的效果，提高療效。因此，天然活性藥物-多糖靶向復合物不僅可以單獨用作制備高分子藥物，還可以作為藥學活性或藥理活性分子的載體。
【發明內容】
[0008]本發明的目的在于提供一種天然活性藥物-多糖靶向復合物，通過化學偶聯的方法，將具有抗腫瘤活性的天然活性藥物接枝到多糖的骨架上，形成天然活性藥物-多糖兩親性偶聯物，在水中自組裝成聚合物膠束，再通過物理混合的方法，將所形成的聚合物膠束與σ受體靶向的茴香酰胺衍生物一二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-茴香酰胺(DSPE-PEG-AA)錨合，形成天然活性藥物-多糖靶向復合物聚合物膠束。由于DSPE-PEG-AA具有靶向σ受體的作用，因此可以使偶聯物能夠與細胞發生特異性地結合，增加藥物的腫瘤轉運效率，減少藥物的毒副作用，增加患者的耐受性。
[0009]本發明的另一個目的是提供上述天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備方法。
[0010]本發明的還有一個目的是提供上述天然活性藥物-多糖靶向復合物在抗腫瘤中的應用。`
[0011]為了達到上述目的，本發明提供一種天然活性藥物-多糖靶向復合物，該復合物是在多糖的羧基或經過衍生化的羧基上，通過化學偶聯的方法，接枝天然活性藥物，形成兩親性天然活性藥物-多糖偶聯物，在水中自組裝形成聚合物膠束。通過物理混合的方法，結合DSPE-PEG-AA，形成天然活性藥物-多糖靶向聚合物膠束。該聚合物膠束大大改善了天然活性藥物的穩定性和溶解性，增加了其主動靶向傳遞特性，增加了活性藥物的生物利用度，通過化學偶聯和物理包裹抗腫瘤藥物，大大減少了藥物的毒副作用，增加患者的耐受性。
[0012]所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，其中多糖選自低分子量肝素、脫硫酸化肝素、未分級肝素、透明質酸、海藻酸、軟骨素、多硫酸化軟骨素、羧甲基殼聚糖、羧乙基殼聚糖、季銨化羧甲基殼聚糖、N-辛基-0，N-羧甲基殼聚糖、羧甲基葡聚糖或羧甲基香菇多糖。
[0013]所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，其中天然活性藥物，選自萜類物質熊果酸、甘草次酸、齊墩果酸和雷公藤甲素，酚類物質和厚樸酚和姜黃素，黃酮類物質藤黃酸和黃芩素以及蒽醌類物質大黃酸和白藜蘆醇。
[0014]所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備方法，根據天然活性藥物的結構不同，包括下列兩個方法:
[0015]1.天然活性藥物的結構中含有羧基的[0016]①工藝1:天然活性藥物溶于適當溶劑中，以二環己基碳二亞胺(DDC)和羥基琥珀酰亞胺(NHS)為活化劑，采用二胺類為連接臂，通過酰胺反應，得到氨基化的天然活性藥物。
[0017]工藝I1:部分萜類物質通過氧化反應，將羥基氧化成羰基，所形成的3-羰基的熊果酸與鹽酸羥胺溶解于吡啶中，反應生成白色固體，該白色固體與氰基硼氫化鈉(NaBH3CN)，乙酸鈉(CH3COONa)和三氯化鈦(TiCl3)溶解于甲醇中，反應生成氨基化的天然活性藥物。
[0018]②將多糖溶于反應溶劑中，以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDC)為活化劑，通過酰胺反應將天然活性藥物接枝到多糖骨架上。
[0019]③工藝1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，將dspe-peg-aa溶液滴加入天然活性藥物-多糖兩親性偶聯物溶液中，室溫攪拌，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物。
[0020]工藝I1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與DSPE-PEG-AA按1: 50~50:1比例混合，用蒸餾水溶解，室溫攪拌，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物。
[0021]2.天然活性藥物的結構中不含有羧基的
[0022]①將多糖溶于反應溶劑中，以4- 二甲氨基吡啶(DMAP)為催化劑，1_乙基_(3_ 二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDC)為脫水劑，先將多糖上的羧基活化后，將天然活性藥物溶于適當溶劑，通過酯化反應， 將天然活性藥物接枝到多糖上。
[0023]②工藝1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，將dspe-peg-aa溶液滴加入天然活性藥物一多糖偶聯物溶液中，室溫攪拌，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物。
[0024]工藝I1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與DSPE-PEG-AA按1: 50~50:1比例混合，用蒸餾水溶解，室溫攪拌，得天然活性藥物-多糖靶向復合物。
[0025]所述的制備方法I和2，其中適當溶劑選自四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、或四氫呋喃與N，N-二甲基甲酰胺、或四氫呋喃與二甲基亞砜的混合物；所述的反應溶劑選自為水、或甲酰胺、或N，N-二甲基甲酰胺與水、或甲酰胺與水、或者甲酰胺與四氫呋喃、或者甲酰胺與N，N- 二甲基甲酰胺的混合溶劑。
[0026]所述的制備方法1，其中連接臂選自對苯二胺、胱胺或碳原子數2~12的亞烷基二胺。
[0027]所述的制備方法I的步驟①中的工藝II，其中部分萜類物質包括熊果酸，齊墩果酸和甘草次酸。
[0028]所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，可單獨用作制備高分子藥物，也可用作制備包載疏水性藥學活性或藥理活性分子的藥物；所制備的高分子藥物或包載疏水性藥學活性或藥理活性分子的藥物為注射劑、片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、口服溶液劑、貼劑、搽劑、洗劑、凝膠劑、涂劑、軟膏劑、噴霧劑、氣霧劑或鼻用制劑。
[0029]所述的藥學活性或者藥理活性分子選自紫杉烷類、喜樹堿類、長春新堿類、葸醌類、鬼白毒素類、阿霉素類或維A酸類抗腫瘤藥物。
[0030]所述的載抗腫瘤藥物的天然活性藥物-多糖靶向復合物，可以用作注射、口服、外用或粘膜給藥。其中注射給藥優選注射劑、凍干粉針、口服給藥優選片劑、膠囊劑、丸劑、糖漿劑、顆粒劑、口服溶液劑，外用給藥優選貼劑、搽劑、洗劑、凝膠劑、涂劑、軟膏劑、粘膜給藥優選噴霧劑、氣霧劑、鼻用制劑。
[0031]該天然活性藥物-多糖靶向復合物制成載藥納米膠束的方法操作步驟如下:天然活性藥物-多糖靶向復合物與水按重量比為3~50: 1000的比例溶解，得到天然活性藥物-多糖納米膠束；將治療有效量的難溶或微溶于水的抗腫瘤藥物用藥學上可接受的溶劑溶解，與所述的天然活性藥物-多糖納米膠束混合后，經超聲或高壓均質處理，溶液用透析法或超濾法或柱分離法除去有機溶劑小分子得到粒徑為10~1000nm的納米膠束，得到的納米膠束可直接應用，也可通過冷凍干燥或噴霧干燥制成固體制劑復溶后再利用。
[0032]具體方案如下:
[0033]在含羧基或經衍生化形成含羧基的多糖分子鏈上引入具有抗腫瘤作用的天然活性藥物，使其具有兩親性，在水介質中可自組裝成納米膠束，相對疏水的天然活性藥物集聚成內核，多糖分子親水鏈形成高度親水性外殼，具有提高抗腫瘤活性、穩定膠束、有效躲避生物體內皮網狀系統。通過物理混合DSPE-PEG-AA，形成天然活性藥物-多糖靶向復合物，能夠定向于腫瘤細胞，實現藥物的靶向傳遞。因此，該天然活性藥物-多糖靶向復合物是一類優良的藥物載體，尤其對于難溶性抗腫瘤藥物。該天然活性藥物-多糖靶向復合物作為藥物載體，粒徑在10~1000nm可控，表面光滑，均勻度好，在分散性好，載藥量高。該天然活性藥物-多糖靶向復合物可用于注射、口服、外用或粘膜給藥。
[0034]所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的合成以及膠束的具體制備方法如下:
[0035]一、天然活性藥物-多糖偶聯物的合成
[0036](I)天然活性藥物的結構中含有羧基的
[0037]①工藝1:天然活`性藥物溶于適當的有機溶劑，以二環己基碳二亞胺和羥基琥珀酰亞胺為活化劑，控制反應I條件至反應完全，抽濾，濾液用適當溶劑I沉淀，抽濾得沉淀物，真空干燥，得天然活性藥物的活性中間酯；將天然活性藥物的中間酯與二胺類連接臂按適當摩爾比例溶于N，N- 二甲基甲酰胺中，將亞烷基二胺緩慢滴加到天然活性藥物的活性中間酯的溶液中，控制反應2至完全，用適當溶劑2沉淀，沉淀物分別進行酸洗，水洗，抽濾得沉淀物，真空干燥，得氨基化的天然活性藥物。
[0038]工藝II:A.部分萜類物質用二氯甲烷溶解，一定溫度下逐步滴入溶解有氧化劑的溶液中，室溫攪拌一定時間。反應液經過濾、洗滌、水洗、干燥、過濾、濃縮后，硅膠柱層析洗脫、濃縮，得固體。
[0039]B.將反應A得到的固體和鹽酸羥胺溶解于吡啶中，一定溫度下回流一定時間。待反應液冷卻至室溫后，蒸餾水洗滌、過濾、水洗、干燥，得固體。
[0040]C.將反應B得到的固體與氰基硼氫化鈉和乙酸鈉，溶解于甲醇中，氮氣保護下反應。冰浴條件下，緩慢滴加三氯化鈦溶液，室溫攪拌一定時間。將所得的渾濁液，加入適量的蒸餾水，旋去甲醇，調節溶液PH至中性，用二氯甲烷萃取，有機層水洗、干燥、過濾、濾液濃縮。用甲醇、二氯甲烷和石油醚的混合溶劑重結晶，得固體，即氨基化的天然活性藥物。
[0041]合成路線如下:
[0042]
【權利要求】
1.一種天然活性藥物-多糖靶向復合物，其特征在于該天然活性藥物-多糖靶向復合物是通過下列方法制備得到的:將具有抗腫瘤活性的天然活性藥物通過化學偶聯的方法接枝到多糖的骨架上，與具有靶向傳遞能力的配體一二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-茴香酰胺(dspe-peg-aa)物理混合，形成天然活性藥物-多糖靶向復合物。
2.根據權利要求1所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，其特征在于:所述的天然活性藥物選自萜類物質熊果酸、甘草次酸、齊墩果酸和雷公藤甲素，酚類物質和厚樸酚和姜黃素，黃酮類物質藤黃酸和黃芩素，以及葸醌類物質大黃酸和白藜蘆醇；所述的多糖選自低分子量肝素、脫硫酸化肝素、未分級肝素、透明質酸、海藻酸、軟骨素、多硫酸化軟骨素、羧甲基殼聚糖、羧乙基殼聚糖、季銨化羧甲基殼聚糖、N-辛基-O，N-羧甲基殼聚糖、羧甲基葡聚糖或羧甲基香菇多糖。
3.根據權利要求1所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，其特征在于該天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備包括如下步驟: (1)天然活性藥物的結構中含有羧基的 ①工藝1:天然活性藥物溶于適當的有機溶劑，以二環己基碳二亞胺和羥基琥珀酰亞胺為活化劑，控制反應I條件至反應完全，抽濾，濾液用適當溶劑I沉淀，抽濾得沉淀物，真空干燥，得天然活性藥物的活性中間酯；將天然活性藥物的中間酯與二胺類連接臂按適當摩爾比例溶于N，N-二甲基甲酰胺中，將二胺類連接臂緩慢滴加到天然活性藥物的活性中間酯的溶液中，控制反應2至完全，用適當溶劑2沉淀，沉淀物分別進行酸洗，水洗，抽濾得沉淀物，真空干燥，得氨基化的天然活性藥物； 工藝II:A.部分萜類物質用二氯甲烷溶解，一定溫度下逐步滴入溶解有氧化劑的溶液中，室溫攪拌一定時間。反應液經過濾，洗滌 ，水洗，干燥，過濾，濃縮后，硅膠柱層析洗脫，濃縮，得固體； B.將反應A得到的白色固體和鹽酸羥胺溶解于吡啶中，一定溫度下回流一定時間。待反應液冷卻至室溫后，蒸餾水洗滌，過濾，水洗，干燥，得固體； C.將反應B得到的固體與氰基硼氫化鈉和乙酸鈉，溶解于甲醇中，氮氣保護下反應。冰浴條件下，緩慢滴加三氯化鈦溶液，室溫攪拌一定時間。將所得的渾濁液，加入適量的蒸餾水，旋去甲醇，調節溶液PH至中性，用二氯甲烷萃取，有機層水洗，干燥，過濾，濾液濃縮，用甲醇、二氯甲烷和石油醚的混合溶劑重結晶，得固體，即氨基化的天然活性藥物； ②將多糖分子溶于反應溶劑，在氮氣保護下，以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺為活化劑，加入氨基化的天然活性藥物，控制反應至反應完全，反應結束后，用適當溶劑沉淀，過濾得到沉淀物，復溶，超聲，透析，冷凍干燥，即得天然活性藥物-多糖偶聯物； ③工藝1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，將DSPE-PEG-AA溶液緩慢滴加入天然活性藥物-多糖偶聯物溶液中，室溫攪拌反應一定時間，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物； 工藝I1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與DSPE-PEG-AA按1: 50~50:1比例混合，用蒸餾水溶解，室溫攪拌一定時間，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物； (2)天然活性藥物的結構中不含有羧基的 ①將多糖溶于反應溶劑中，以4- 二甲氨基吡啶為催化劑，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺為脫水劑，在氮氣保護下，將天然多糖上的羧基活化；將天然活性藥物溶于適當的溶劑，緩慢滴加到多糖溶液中，控制反應至完全，待反應結束，用適當溶劑沉淀，過濾得沉淀物，復溶，超聲，透析，冷凍干燥，即得天然活性藥物-多糖偶聯物； ②工藝1:將天然活性藥物-多糖兩親性偶聯物與水按重量比為3~50: 1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA與水按重量比為I~50: 1000的比例溶解，將DSPE-PEG-AA溶液滴緩慢滴加入天然活性藥物-天然多糖兩親性偶聯物溶液中，室溫攪拌反應一定時間，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物； 工藝I1:將天然活性藥物-多糖偶聯物與DSPE-PEG-AA按1: 50~50:1比例混合，用蒸餾水溶解，室溫攪拌一定時間，得到天然活性藥物-多糖靶向復合物。
4.根據權利要求3所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備，其中反應(I)的步驟①中的工藝I的特征在于: 所述的適當的有機溶劑選自四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、或四氫呋喃與N，N-二甲基甲酰胺、或四氫呋喃與二甲基亞砜的混合物； 所述的控制反應I條件為氮氣保護下，冰浴反應0.2~2h，升至室溫，反應6~72h ； 所述的沉淀溶劑I為正己烷； 所述的二胺類連接臂選自對苯二胺、胱胺或碳原子數為2~12的亞烷基二胺； 所述的天然活性藥物的中間酯與亞烷基二胺按適當摩爾比例為5: I~80: I ； 所述的控制反應2條件為反應滴速在每滴間隔2~30秒；反應溫度為0~40°C;二胺類滴加完之后，再反應3~12h ·; 所述的沉淀溶劑2為飽和氯化鈉； 所述的酸洗溶劑為lmol / L稀HCl，水洗溶劑為超純水或蒸餾水。
5.根據權利要求3所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備，其中反應(I)的步驟①中的工藝II的特征在于: 所述的部分萜類物質包括熊果酸、齊墩果酸和甘草次酸； 所述的反應A中，氧化反應的氧化劑為氯鉻酸吡啶，溶劑為二氯甲烷，或者氧化反應的氧化劑為瓊斯試劑，溶劑為二氯甲烷-丙酮；所述的溫度控制為-10~30°C;所述的室溫攪拌時間為0.5~IOh ； 所述的反應B中，溫度控制為80~150°C ;所述的回流時間為2~24h ; 所述的反應C中，室溫攪拌時間為2~36h。
6.根據權利要求3所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備，其中反應(I)的步驟②和步驟③的特征在于: 所述的步驟②中，反應溶劑選自為水、或甲酰胺、或N，N-二甲基甲酰胺與水、或甲酰胺與水、或者甲酰胺與四氫呋喃、或者甲酰胺與N，N-二甲基甲酰胺的混合溶劑；所述的控制反應為先加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺活化劑反應0.2~2h后，再加入氨基化的天然活性藥物，室溫反應6~72h ;所述的沉淀溶劑為冰丙酮、冰乙醚、冰乙醇或冰乙酸乙酯；所述的透析時間為0.5~3d ; 所述的步驟③的工藝I和工藝II中，室溫攪拌反應時間均為10~60min ；
7.根據權利要求3所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的制備，其中反應(2)中的特征在于:所述的步驟①中，反應溶劑為甲酰胺、或者甲酰胺與四氫呋喃、或者甲酰胺與N，N-二甲基甲酰胺的混合溶劑；所述的多糖、催化劑、脫水劑的摩爾比為1: 0.2~0.5: 3~20;所述的溶解天然活性藥物的適當溶劑為四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、或四氫呋喃與N，N- 二甲基甲酰胺、或四氫呋喃與二甲基亞砜的混合物；所述的控制反應為按上述摩爾比加入催化劑和活化劑，反應0.2~2h后，加入天然活性藥物，控制反應滴速為每滴間隔2~30秒，滴加完后再室溫反應6~72h ;所述的適當沉淀溶劑為冰丙酮、冰乙醚、冰乙醇或冰乙酸乙酯；所述的透析時間為0.5~3d ; 所述的步驟②的工藝I和工藝II中，室溫攪拌一定時間為10~60min，優選為45min。
8.權利要求1所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物，其特征在于其可以單獨用作制備高分子藥物，或者用作制備包載疏水性藥學活性或藥理活性分子的藥物；所制備的高分子藥物或包載疏水性藥學活性或藥理活性分子的藥物為注射劑、片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、口服溶液劑、貼劑、搽劑、洗劑、凝膠劑、涂劑、軟膏劑、噴霧劑、氣霧劑或鼻用制劑。
9.根據權利要求8所述的天然活性藥物-多糖靶向復合物的應用，其特征在于所述的藥學活性或藥理活性分子選自:紫杉烷類、喜樹堿類、長春新堿類、葸醌類、鬼白毒素類、阿霉素類或維A酸類抗腫瘤藥物。
10.根據權利要求9的要求，其特征在于天然活性藥物-多糖靶向復合物制備載藥納米膠束的方法包括如下步驟:天然活性藥物-多糖與水按重量比為3~50: 1000的比例溶解，得到天然活性藥物-多糖納米膠束；將治療有效量的難溶或微溶于水的抗腫瘤藥物用藥學上可接受的溶劑溶解，與所述的天然活性藥物-多糖納米膠束混合后，經超聲或高壓均質處理，溶液用透析法或超濾法或柱分離法除去有機溶劑小分子得到粒徑為10~1000nm的納米膠束,得到的納米膠束可直接應用，也可通過冷凍干燥或噴霧干燥制成固體制劑復溶后再利用。
【文檔編號】C08B37/02GK103705940SQ201310742883
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月30日 優先權日:2013年12月30日
【發明者】姚靜, 李園珂, 周建平 申請人:中國藥科大學