一種雞蛋膜蛋白多肽的生產方法及其應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及能用于保健品、食品、醫藥、洗漱品及化妝品的蛋白多肽生產領域，尤其是一種能用于保健品、食品、醫藥、洗漱品及化妝品領域的雞蛋膜蛋白多肽的生產方法及其應用。
【背景技術】
[0002]雞蛋殼作為人類生活的副產品大量存在，其內附著的雞蛋殼膜尤其容易造成極大的污染環境。雞蛋膜含有多種蛋白質(含量在90%左右)如:膠原蛋白(1、V、X型)、骨橋蛋白、白蛋白、唾液蛋白等，還含有硫酸軟骨素、透明質酸、N?乙酰氨基葡萄糖半乳糖、葡萄糖醛酸等，主要用于治療和緩解關節痛等，是美容、保健品、化妝品、日化洗滌等上等原料。雞蛋膜蛋白在重金屬離子選擇性吸附材料、人造皮膚或皮膚治療用敷料材料、酶固定載體、細胞黏附生長基質或藥物可控緩釋材料等方面具有廣泛的應用前景。
[0003]但是，雞蛋膜不易大規模的從雞蛋殼中分離出，目前還沒有關于從雞蛋膜生產多肽表面活性劑的報導。同時，雞蛋膜含有大量的交聯鍵而難以溶解，但是過強的不合適的處理條件會導致多肽過分降解，產品難于分離提純。這些特性限制了雞蛋膜的生產和應用。
[0004]盡管現有技術對蛋白質的酶解過程機理已經相當了解，出于不同原材料限制、不同產品的要求，新的處理過程往往需要專門開發出來以滿足技術和經濟要求。如:
1、于淑娟等(齊齊哈爾輕工學院學報，1994，10 (30):30?35)用酸酶法水解玉米蛋白質制備復合氨基酸，即經酸作用后再加蛋白酶進行水解，此法可減少酸法和酶法兩種方法的弊端，使產品中的氨基酸種類較齊全、含量較高、具有很強的溶解度和乳化能力，在提高產品的利用率的同時，減少污染物的排放。
[0005]2、王翠華等人(蛋白質類發泡劑的合成及其泡沫穩定性[J].南京工業大學學報，2006，28 (4):92?96)采用牛蹄角為主要蛋白質原料，在適量氫氧化鈣和少量NaHS03存在的條件下水解，成功的合成蛋白質型泡沫混凝土用發泡劑。
[0006]3、盧珍華等(木瓜蛋白酶水解綠豆蛋白制備可溶性肽的研究[J]。食品科技，2005，11:56?58)研究木瓜蛋白酶對綠豆蛋白的水解作用。酶解的最佳條件為酶濃度8%(E/S質量比)，底物濃度7% (綠豆蛋白與水的比)，反應溫度65°C，反應時間3h，pH6.5，此工作開辟了植物蛋白新來源。
[0007]4、鄧乾春等(白果活性蛋白的酶法水解及抗氧化活性研究[J]。農業工程學報，2005,21 (11):155?159)研究了酶法水解制備白果肽段的方法及其抗氧化活性的變化，通過單因素分析、正交試驗以及對試驗結果的分析，確定了堿性蛋白酶水解白果活性蛋白的最佳水解條件為底物濃度為1%，pH值8.5，水解溫度45°C，酶濃度7000U.g?\反應時間6h。通過研究發現白果肽段的生物活性明顯提高，為白果深加工研究及其新產品的開發打下了基礎。
[0008]^^Pushkar Singh Bora (Funct1nal properties of native and succinylatedlentil (lens culiaris)globulins [J].Food Chemistry，2002，77: 171 ?176)研究了琥珀酰化后的和未酰化所得到的小扁豆球蛋白的性能，其中酰化后的小扁豆球蛋白的等電點從4.5變化到3.5，提高了在pH大于4時的可溶性，親水性，粘度有100%的提高，乳化性和乳化穩定性也有很大的提高，起泡性稍有降低。
[0009]6、馮光炷等人(復合氨基酸月桂醇脂的合成機性能[J]。鄭州工程學院學報，2003, 24 (4):42?45)研究了以菜籽柏水解得到的復合氨基酸濃縮液為原料，與月桂醇酯化制得復合氨基酸月桂醇酯，確定了合成反應的最佳條件是月桂醇與復合氨基酸的摩爾比為1:2，甲苯作帶水劑(反應溫度110?122°C)，反應時間為4h，催化劑&H2S04的量為復合氨基酸的8%，少量的聚乙二醇(PEG600)作相轉移催化劑，制得的產品具有良好的泡沫穩定性，而且刺激性小、毒性低、降解性能好和降解產物毒性低等優良特性。
[0010]上述的這些例子清楚地說明每一類型的多肽產品常常有其相應的原料，相應的加工條件及工藝過程，也就是說，當前已經報導的蛋白多肽生產方法都不適用于從雞蛋膜批量生產多肽或多肽表面活性劑。除受原料性能限制之外，現有技術在產品質量控制、可操作性、能源耗費、特別是實現規模化、環境友好生產等方面都存在問題。
【發明內容】
[0011]本發明所要解決的技術問題是提供一種雞蛋膜蛋白多肽的生產方法及其應用，可以解決從雞蛋膜批量生產蛋白多肽的問題，生產的多肽產品蛋白質含量高；應用領域廣，能應用于保健品、食品、醫藥、洗漱品及化妝品領域。
[0012]為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是:一種雞蛋膜蛋白多肽的生產方法，該方法由以下步驟組成:
1)將洗凈滅菌的鮮雞蛋殼壓碎，烘干后將雞蛋膜從殼膜混合物中分離出來；
2)將步驟1)分離的雞蛋膜粉碎至40目以上得雞蛋膜碎片及粉，去除其中的雞蛋殼；
3)配制胃蛋白酶溶液，蛋白酶濃度為600?800U/L；
4)將步驟2)制得的雞蛋膜碎片及粉與步驟3)制得的蛋白酶溶液在溫度35?45°C下按固液比1:3混合，pH值控制在3?5恒溫攪拌2?3小時制得混合料；
5)將步驟4)制得的混合料pH值調至8?10;
6)向混合料中加入質量濃度為0.15%堿性蛋白酶，pH值控制在8?10恒溫攪拌2?3小時得混合料；
7)向步驟6)制得的混合料中緩慢加入NaOH溶液，使得混合料中的NaOH的質量濃度為1?5%，在溫度45?90°C下攪拌3?4小時，靜置；
8)取步驟7)的上清液，用稀鹽酸調節pH值到7?11制得膜蛋白液；
9)將步驟8)所得的膜蛋白液，初濾、除雜，經脫鹽、濃縮和干燥后，得到雞蛋膜蛋白多肽。
[0013]優選的，步驟9)的初濾、除雜是采用膜孔徑為300k的膜，去除生物大分子及不容物，取其濾過液。
[0014]優選的，步驟9)膜過濾得到的濾過液采用膜孔徑為lk的膜脫鹽、濃縮，將濃縮液在溫度180°C以下噴霧干燥得到雞蛋膜蛋白多肽。
[0015]優選的，步驟9)的脫鹽是用純凈水洗脫膜蛋白液至pH值為7 ;干燥為膜過濾后濃縮液180°C以下噴霧干燥或冷凍干燥。
[0016]步驟1)中采用人工篩選的方式分離雞蛋膜。
[0017]步驟2)中采用人工篩選的方式去除其中的雞蛋殼。
[0018]步驟5)中，將步驟4)制得的混合料pH值調至9，步驟6)中，恒溫攪拌時的pH值為9。
[0019]步驟7)中，加入NaOH溶液后，混合料中的NaOH的質量濃度為1?5%。
[0020]步驟8)中，制得的膜蛋白液的體積為原上清液的1.5?5倍。
[0021 ] 一種化妝品，該化妝品包含有0.0lwt%?20wt%的雞蛋膜蛋白多肽。
[0022]優選的，雞蛋膜蛋白多肽含量為0.lwt%?10wt%。
[0023]優選的，雞蛋膜蛋白多肽含量為0.lwt%?5wt%。
[0024]一種日化洗滌用品，該日化洗滌用品包含有0.0lwt%?5wt%的雞蛋膜蛋白多肽。
[0025]優選的，雞蛋膜蛋白多肽含量為0.lwt%?2wt%。
[0026]優選的，雞蛋膜蛋白多肽含量為0.lwt%?3wt%。
[0027]與現有技術相比，本發明利用酶的高效性、專一性特點，對通常手段難降解的雞蛋膜，在特定的溫度和PH范圍內進行高效生物降解，對降解的雞蛋膜采用膜分離進行濃縮和純化，實施規模化工業生產雞蛋膜蛋白多肽。
[0028]本發明由于操作步驟以及條件簡單，可規模化生產雞蛋膜蛋白多肽，能耗低同時不污染環境，采用此生產工藝生產的蛋白多肽成分在水溶液中的表面張力在30mN/m，通過改變操作條件，蛋白多肽的性能可得到調節控制。
[0029]本發明首次報導了這些可規模化生產的蛋白多肽的主要表面和界面特征。這些雞蛋膜多肽制成的表面活性劑是現時已知的蛋白質和多肽中降低表面張力能力最強的，在與傳統形成的混合系統能進一步降低表面張力，這些混合系統能形成非常穩定的泡沫和乳化液，其相對穩定性可通過多肽類型及混合體系組成進行調節。
[0030]作為天然蛋白多肽產品，配合采用的綠色生物降解及溫和的膜分離提純生產過程，利用雞蛋膜生產所得到的蛋白多肽制成的蛋白多肽表面活性劑可替代從石油原料所生產的傳統表面活性物質(表面活性劑和表面活性聚合物或他們的混合物)，用于改進現有產品或復合新產品。天然多肽制成的表面活性劑對皮膚和毛發的作用溫和，有較強的親和力和潤濕效果，而且無毒、無刺激性，在洗滌的同時還能利于皮膚或毛發對多肽的吸收，特別適合皮膚過敏者及嬰兒使用(李異，朱海洋，李華山，等。N-脂肪酰基谷氨酸系表面活性劑在日用化學品中的應用[J].日用化學品科學，2003，26 (4):20-23)。
[0031]本研究工作顯示，雞蛋膜蛋白多肽在和少量的其他表面活性劑協調作用時具有更好的洗滌能力，純天然雞蛋膜蛋白多肽無毒、易于生物降解和吸收，符合人類綠色環保的要求。雞蛋膜蛋白多肽在生物醫藥、藥學、生物材料、化妝品和保健食品等中享有廣闊的應用前景
本發明生產的多肽產品蛋白質含量高(蛋白質含量大于80%)，應用領域廣，能應用于保健品、食品、醫藥、洗漱品及化妝品領域；質量濃度為0.05?25%該雞蛋白多肽在水溶液中的表面張力為29?35mN/m，使用極少量該雞蛋膜多肽與其他離子表面活性劑配合使用，可以更好的降低水溶液的表面張力，降低其他活性劑的使用量。
【附圖說明】
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