一種半乳糖酯修飾的中西藥共載口服肝靶向微乳遞送系統的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及半乳糖酯修飾的中西藥共載口服肝靶向微乳遞送系統及該微乳系統 在抗肝癌方面的應用，該系統以有抗腫瘤作用的中藥油類及多糖類組分替代常規的油相及 乳化劑輔料的微乳系統包埋難溶性抗腫瘤化療藥物，并采用半乳糖酯作為肝靶向配體進行 修飾。
【背景技術】
[0002] 中藥納米遞藥系統是當前中藥制劑現代化發展的熱點研究領域。微乳作為納米遞 藥系統的一種，由乳化劑、助乳化劑、油相自組裝形成，可以顯著增溶難溶性中藥組分，促其 口服吸收，并具有被動肝靶向的作用。采用肝靶向配體修飾微乳，可以極大地提高微乳主動 肝靶向的效果，從而提高微乳抗肝癌的療效。此外，從中藥中尋找具有藥用輔料類似作用的 活性組分作為功能輔料構建抗腫瘤微乳系統，可以達到增溶難溶性組分、提高藥物生物利 用度、大幅降低常規輔料用量的目的，解決微乳制備工藝中，需要引入過多的藥用輔料，可 能會帶來潛在的毒性問題。
[0003] 在肝細胞的表面表達有去唾液酸糖蛋白受體ASGPR，能夠特異性識別含有半乳糖 殘基的配體，結合形成配體受體復合物，定向轉運到肝細胞內。半乳糖酯是一種天然的非 離子型表面活性劑，具有明顯的兩親性，結構中存在半乳糖單元的羥基和半乳糖酰基，具有 親水性，可以和肝細胞表面去唾液酸糖蛋白受體ASGPR特異性識別結合形成配體受體復合 物，定向轉運到肝細胞內，從而實現增強肝靶向效果。此外半乳糖酯的酯鏈為親脂性基團， 能和微乳的親脂性部分整合，增強微乳的穩定性。通過在微乳表面進行肝靶向的修飾，實現 被動靶向的微乳載體主動靶向再修飾，對增強藥物的特異性、提高療效、減少對其他組織器 官損傷具有重要意義。
[0004]中藥多糖是從中藥中提取獲得的有一定親水性的大分子聚合物，具有明顯的兩親 性和獨特的藥理活性。現代藥理學研究發現其能夠參與機體的生理代謝過程，具有增強免 疫、抗腫瘤、降血糖等生物活性。同時，其復雜的化學結構與鏈構象使得某些中藥多糖具有 水溶性好、生物粘附強、分子柔性與強度好等優點，可以應用于藥劑學領域。然而，目前對中 藥植物多糖的研究大多只關注其藥理活性，其獨特的理化性質目前尚未被藥劑學領域充分 關注。我們的研究發現，薏苡仁、靈芝等多糖除了具有較好的抗腫瘤作用，其還具備有一定 的類似表面活性劑的功能，可作為功能性輔料參與構建微乳載藥系統，增強微乳增溶能力， 減少表面活性劑的用量。
[0005] 薏苡仁油、莪術油、亞麻籽油、荊芥油、白術油、鴉膽子油等是從中藥中提取出來的 油類組分，同樣具有較好的抗腫瘤活性，如薏苡仁油已用于臨床抗腫瘤治療，如肝癌的治 療，其市售制劑為康萊特@注射液。鴉膽子油臨床用于肺癌、消化道腫瘤的治療，其市售制 劑有鴉膽子油注射液。我們的研究發現，中藥油類組分如薏苡仁油等，可以作為微乳的油相 使用，同樣可作為功能性輔料參與構建微乳載藥系統，從而降低常規微乳制劑的輔料用量。
[0006]以有藥理活性的中藥油類及多糖類組分替代常規的油相及乳化劑輔料構建的微 乳載體，還可以包埋難溶性抗腫瘤化療藥物，如紫杉醇、多烯紫杉醇、阿霉素、環孢素A、替尼 泊甙、羥基喜樹堿、喜樹堿、長春新堿、依托泊甙等。這種聯用方式可以發揮中西藥協同抗肝 癌作用，降低西藥帶來的免疫抑制等毒副作用。
[0007] 綜上，本發明以中藥的油類作為微乳的油相，中藥多糖替代部分常規乳化劑，構建 微乳載體包埋難溶性抗腫瘤化療藥物，并采用半乳糖酯進行修飾，所構建的微乳口服遞送 系統具有輔料用量少、載藥量高、增溶難溶性組分、提高腫瘤靶向性、中西藥協同抗腫瘤等 優勢。
【發明內容】
[0008] 本發明以具有抗腫瘤作用的中藥多糖類和中藥油類組分作為功能性輔料，構建微 乳載體，包埋難溶性抗腫瘤藥物，并采用半乳糖酯進行修飾。
[0009] 本發明的目的之一是提供一種半乳糖酯修飾的中西藥共載口服肝靶向微乳遞送 系統，該微乳遞送系統由中藥油類組分、中藥多糖類組分、半乳糖酯片段、西藥抗腫瘤化療 藥物、乳化劑、助乳化劑與水組成。
[0010] 所述的中藥油類組分選自薏苡仁油、莪術油、亞麻籽油、荊芥油、白術油、鴉膽子油 中的一種或幾種；所述的中藥多糖類組分選自靈芝多糖、薏苡仁多糖、香菇多糖、黃芪多糖、 枸杞多糖中的一種或幾種；所述的抗腫瘤化療藥物選自順鉑、環磷酰胺、紫杉醇、阿霉素、依 托泊甙、長春新堿或氟尿嘧啶中的一種或幾種。
[0011] 所述的半乳糖酯與微乳的整合原理為疏水鍵作用力：硬脂酰半乳糖酯、辛酰半 乳糖酯、丁酰半乳糖酯或乙酰半乳糖酯，及不同飽和鏈長的半乳糖酯；堆積，有： 4- (6 ' -半乳糖）-1-芐基丁二酰酯、4- (6 ' -半乳糖）-1- (2 ' -甲基芐基）丁二酰酯、4- (6 ' -半 乳糖-甲基芐基）丁二酰酯4-半乳糖-1-芐基丁二酰酯等類似含有芳環結構的； 氫鍵作用力，有：聚賴氨酸半乳糖酯、聚精氨酸乳糖酯及含有較多氫鍵供體（受體）聚合物 的半乳糖酯結構；范德華力，有：聚乙二醇半乳糖酯、聚氧乙烯半乳糖酯、聚乙烯醇半乳糖 酯等類似結構。這些不同的半乳糖酯片段根據與微乳不同的整合原理包埋與之匹配度更高 的抗腫瘤藥物。使得抗腫瘤西藥和中藥微乳、腫瘤靶向配體三者之間結合更加緊密。
[0012] 所述的中藥油類組分、中藥多糖類組分、西藥抗腫瘤化療藥物、半乳糖酯、乳化劑、 助乳化劑與水七者之間的重量比是100:60~120:4~16:0. 25~0. 75:50~75:15~ 25:200 ~500。
[0013] 優選地，所述微乳遞送系統的中藥油類組分為薏苡仁油；中藥多糖類組分為薏苡 仁多糖；抗腫瘤化療藥為長春新堿；所述的半乳糖酯是基于疏水作用力整合原理的辛酰半 乳糖酯；所述的乳化劑為RH40 ;所述的助乳化劑為PEG400,其中薏苡仁油、薏苡仁多糖、長 春新堿、辛酰半乳糖酯的比例為：300~400:50~150:2~10:30~50。
[0014] 本發明的目的之二是提供上述半乳糖酯修飾的中西藥共載口服肝靶向微乳遞送 系統的制備方法：將中藥油類組分與抗腫瘤化療藥物充分混勻后，再加入乳化劑、助乳化劑 以及半乳糖脂片段攪拌至勻質狀態，最后以多糖水溶液勻速滴入的方式制備微乳，具體包 括下列步驟：
[0015] 1)取乳化劑組分與半乳糖酯加入至助乳化劑中，室溫磁力攪拌2_4h至完全混勻， 備用；
[0016] 2)取中藥油類組分及抗腫瘤化療藥物加入至上述制備的混合體系中，室溫磁力攪 拌2-4h直至混勻，備用；
[0017] 3)將中藥多糖組分加入水相中形成中藥多糖水溶液，然后將中藥多糖水溶液恒 速、緩慢并定量的滴入上述制備混合體系中，并不斷勻速攪拌體系，直至出現透亮澄明的體 系。
[0018] 最優處方制備方案：（本專利中所用的薏苡仁油（及其他中藥油類）純度均大于 75%、薏苡仁多糖（及其他多糖）純度均大于70% )
[0019] 1)取150mg聚氧乙稀蓖麻油（RH40)與32mg辛酰半乳糖酯加入至50mg聚乙二醇 400 (PEG400)中，室溫磁力攪拌2-4h至完全混勻，備用；
[0020] 2)取200mg薏該仁油及3mg長春新堿加入至上述制備的混合體系中，室溫磁力攪 拌2_4h直至混勻，備用；
[0021] 3)將240mg薏苡仁多糖混入水相形成薏苡仁多糖水溶液，然后將薏苡仁多糖水溶 液恒速、緩慢并定量的滴入上述制備混合體系中，并不斷勻速攪拌體系，直至出現帶乳光的 透亮澄明體系。
[0022] 本發明的目的之三是提供半乳糖酯修飾的中西藥共載口服肝靶向微乳遞送系統 在抗肝癌中的應用。
[0023] 本發明的優勢在于：其一實現了口服藥物的肝靶向，增強了藥物的組織特異性、提 高了療效、減少對其他組織器官損傷；其二，不但可用于難溶性組分（中藥油類、難溶性抗 腫瘤藥物）的增溶，控制藥物釋放，而且可以在水中形成納米級乳劑；其三使得微乳藥用組 分（中藥油類、多糖、難溶性抗腫瘤藥物）憑借納米乳的體內吸收特性，顯著增強口服吸收 利用度；其四，大幅度減少了常規輔料（如：藥用油相輔料、藥用表面活性劑輔料等）的用 量，大幅提高載藥量，減少體內潛在的毒性；其五，體現了中西醫聯合用藥協同發揮抗腫瘤 療效的作用。
[0024] 本發明創新點在于：設計合成了多種肝靶向修飾的半乳糖酯片段，根據與微乳的 整合原理可分為：疏水鍵作用力，有：硬脂酰半乳糖酯、辛酰半乳糖酯、丁酰半乳糖酯或乙 酰半乳糖酯，及不同飽和鏈長的半乳糖酯。
【附圖說明】
[0025] 圖1pH變化對包埋長春新堿的辛酰半乳糖酯修飾的微乳粒徑和多分散系數的影 響。
[0026] 圖 2(上）各制劑熒光攝取對比：A(FreeFITC)B(FITC-mixture)C(FITC/ VCR-C-MEs)D(FITC/VCR-Gal-C-MEs);(下）流式定量攝取情況，**p〈0.01vsFITC-Mixture; ##p<0.OlvsFITC/VCR-C-MEs〇
[0027] 圖 3(上）各制劑熒光攝取對比：A(FreeFITC)B(FITC-mixture)C(FITC/ VCR-C-MEs)D(FITC/VCR-Gal-C-MEs);(下）流式定量攝取情況，**p〈0.OlvsFITC-Mixture; ##p<0.OlvsFITC/VCR-C-MEs〇<