釋放出介孔孔道內的負載分子。
[0047] 本發明還提供一種試劑盒，該試劑盒含有本發明的經苯基測酸醋功能化的介孔 氧化娃納米粒子和可與苯基測酸醋連接的表面功能化的納米粒子。
[0048] 在一個具體實施例中，試劑盒中所述經苯基測酸醋功能化的介孔氧化娃納米粒子 與所述可與苯基測酸醋連接的表面功能化的納米粒子分別保存在不同的容器中。
[0049] 在一個具體實施例中，試劑盒還可含有適于制備本發明負載有預裝載物的基于介 孔氧化娃納米粒子的控制釋放納米系統的其它試劑。
[0050] 本發明還提供權利要求1 - 5中任一項所述的納米粒子或權利要求6所述的控制 釋放系統在制備用于控制釋放給藥的藥物或診斷試劑或診斷試劑盒中的用途。
[0051] 本發明還涉及一種治療方法，該方法包括給予需要的對象治療有效量的本發明含 功能活性成分的納米粒子或控制釋放系統。
[0052] 本發明還涉及一種檢測或診斷方法，該方法包括給予檢測或診斷對象本發明含功 能活性成分的納米粒子或控制釋放系統，其中，所述功能活性成分適用于檢測或診斷。
【附圖說明】
[0053] 圖1顯示W介孔氧化娃納米粒子為載體，基于苯基測酸醋與底物之間的可逆性結 合原理設計的控制釋放系統示意圖。
[0054] 圖2顯示的是堵孔劑納米粒子一表面功能化的硫化儘鋒納米粒的掃描電鏡圖。
[00巧]圖3顯示的是堵孔劑納米粒子一表面功能化的氧化鋒納米粒透射電鏡圖。
[0056] 圖4顯示的是尺寸在170nm左右的介孔氧化娃納米粒子透射電鏡圖。
[0057] 圖5顯示的是尺寸在300nm左右的介孔氧化娃納米粒子透射電鏡圖。
[0058] 圖6顯示的是堵孔劑氧化鋒納米粒子經琉基丙酸修飾前后的紅外光譜圖。
[0059] 圖7顯示的是納米粒子NP5-1的釋放曲線圖和NP6-1在不同果糖（底物）濃度下 的控制釋放曲線圖。
[0060] 圖8顯示的是納米粒子NP6-1在不同葡萄糖（底物）濃度下的控制釋放曲線圖。
[0061] 圖9顯示的是納米粒子NP6-2在在不同葡萄糖（底物）濃度下的控制釋放曲線圖。
[0062] 圖10顯示的是一種納米粒子NP6在人體血糖濃度范圍內不同葡萄糖（底物）濃 度下的控制釋放曲線圖。
【具體實施方式】
[0063] 本發明中，烷基可W是C1-C12支鏈或支鏈烷基，例如C1-6烷基、C1-4烷基等；帰 基指C2-C6帰基；快基指C2-C6快基；烷氧基可W是C1-C12烷氧基，例如C1-C6烷氧基、 C1-C4烷氧基等。
[0064] 四嗦類結構包括但不限于1，2, 3, 4-四嗦基和1，2, 4, 5-四嗦基。
[0065] 因素包括F、C1、化和I。
[0066] 吸電子基團取代基可選自；硝基、氯基、因素、駿基、快基、帰基。
[0067] 供電子基團取代基可選自；烷基，仲胺、伯胺、叔胺、居基、烷氧基。
[0068] 本發明基于介孔氧化娃納米粒子的控制釋放納米系統含有經苯基測酸醋功能化 的介孔氧化娃和可與苯基測酸醋連接的表面功能化的納米粒子作為堵孔劑。
[0069] 本發明中，介孔氧化娃納米粒子可W是本領域周知的各種具有生物相容性或不具 有生物相容性的介孔氧化娃納米粒子，優選為具有生物相容性介孔氧化娃納米粒子。其粒 徑在90-350nm之間，孔徑在5-20nm之間。通常采用水熱法制備該介孔氧化娃納米粒子，例 如使用陽離子表面活性劑十六烷基H甲基對甲苯礙酸倭（CTATos)作為模板劑，同時輔W 小分子有機胺，如H己醇胺等，使其在適當條件下與正娃酸己醋反應，形成本發明的介孔氧 化娃納米粒子。因此，在優選實施例中，適用于本發明的介孔氧化娃納米粒子是陽離子表面 活性劑與正娃酸己醋，同時輔W小分子有機胺的反應產物，更優選的是CTATos與正娃酸己 醋，同時輔WH己醇胺的反應產物。如本申請實施例7所示，CTATos、正娃酸己醋、H己醇胺 可在例如純水中在8(TC左右反應2小時左右，可獲得本發明的介孔氧化娃納米粒子。也可 采用正娃酸甲醋、正娃酸丙醋等替換正娃酸己醋。
[0070]可通過控制反應的條件等來控制介孔氧化娃納米粒子的粒徑和孔徑。對本發明 的介孔氧化娃納米粒子的孔徑限制在5-20皿之間，可W是5-10皿，10-25皿，10-15皿不 等。而與之對應的納米粒子粒徑在90-350nm范圍內，可W是IOO-ISOnm(如圖4所示）， 100-300nm，200-300nm(如圖5所示）等。孔徑和粒徑無對應的限制，例如IOO-ISOnm粒徑 對應的介孔尺寸可W是5-lOnm，也可W是8-12nm;200-300對應的尺寸可W為5-lOnm，也 可W是l〇-20nm等。
[0071] 適用于本發明的苯基測酸醋是指用于對介孔氧化娃納米粒子表面進行功能化的 小分子化合物，該化合物能與堵孔劑納米粒子表面功能化基團結合。
[0072] 苯基測酸醋化合物可通過接頭分子而連接到介孔氧化娃納米粒子上。送類接頭分 子通常是包含H烷氧基娃焼部分的分子，例如作為示例性的例子，3-異氯酸醋基丙基H己 氧基娃焼。一個具體實施例中，所述接頭部分是3-異氯酸醋基丙基H己氧基娃焼。
[0073] 適用于本發明的苯基測酸醋具備W下特征：
[0074] 其結構如下所示：
[007引其中，Di= 0，1，2,3,4或5恥=1或2;21，22,23和24各自獨立為任意基團，可 相同，也可不同，如可W是氨原子，烷基，因素，或各種吸電子基團取代基和供電子基團取代 基等；L為連接苯環和Y的接頭基團；X選自氨基、居基、駿基、礙酸基、琉基、帰基、快基、疊 氮基、四嗦類結構、因素、阱、環氧基、異氯酸醋基、異硫氯酸醋基；Y選自氨基、居基、駿基、 礙酸基、琉基、帰基、快基、疊氮基、四嗦類結構、因素、阱、環氧基、異氯酸醋基和異硫氯酸醋 基；其中，Zi,Z2,Z3,Z4和L與苯測酸醋在苯環上的相對位置沒有限制，即L可處于苯測酸醋 的間位或對位或鄰位。
[0077]在一【具體實施方式】中，所述的控制釋放納米粒子或系統中的苯基測酸醋可選自W下結構，并W其中H個為例對其結構做出示范說明：
基；Y基團為胺基；Zi，Z2,Z3,Z4為氨原子
[0083] 用于本發明的堵孔劑可W是各種與介孔尺寸相匹配的納米粒子，如可W是氧化鋒 納米粒子，硫化鋒納米粒子（如圖3所示），硫化鋒-氧化鋒核殼納米粒子，硫化儘鋒納米粒 子（如圖2所示），砸化領，四氧化H鐵，納米金等。送些納米粒子可通過與苯基測酸醋結合 從而有效地堵住介孔氧化娃納米粒子的介孔口，阻止內載物的釋放；同時該納米粒子可作 為造影劑、光熱治療劑或生物體某些特殊元素的額外來源。
[0084] 用于本發明的納米粒子堵孔劑表面功能基團用來與苯基測酸醋相結合，其主要包 括但不限于；氨基、居基、駿基、礙酸基、琉基、帰基、快基、疊氮基、四嗦類結構、因素、阱、環 氧基、異氯酸醋基、異硫氯酸醋基等。如圖6所示表面琉基丙酸（MPA)修飾前后的的氧化鋒 納米粒子狂nON巧紅外光譜圖。在一個優選實施例中，堵孔劑表面上的功能基團為駿基。
[0085] 適用于本發明的底物可W是能與苯基測酸結合的各種底物，且其與苯基測酸的結 合力不小于與苯基測酸形成醋的1，2或1,3-二居基化合物的結合力，W使底物可W將苯基 測酸醋鍵斷開，從而釋放納米粒子堵孔劑，最終打開介孔孔道，釋放出內載物（如各種類型 膜島素、染料、藥物、指示劑或其他生物大分子等等）。
[0086] 優選的是，所使用的底物是具有生物相容性的。例如，所述底物本身就是人體或動 物體自身所攜帶的，例如血液中天然存在的（如葡萄糖，兒茶酪類），或者人為給予的（例如 果糖、其他各類單糖或多糖等）。
[0087] 因此，為了使本發明的控制釋放納米粒子具有生物相容性，可對介孔氧化娃和堵 孔劑納米粒子表面做進一步修飾，W增加其生物安全性。如在其外表面包載一層PEG材料， pH響應醫用高分子材料或其他生物可降解材料。
[0088] 本發明可通過調節苯基測酸醋的結構構建不同的納米系統，W實現對不同濃度范 圍底物的響應。例如；選用針對血糖濃度范圍響應的苯基測酸醋結構，構建基于介孔氧化娃 的納米系統，可W實現根據血糖濃度變化而實時控制釋放內載物（如圖10所示膜島素的 控制釋放）。
[0089] 因此，基于本發明中不同結構苯基測酸醋對應的介孔氧化娃納米粒子的控制釋放 系統，在實際應用中，可W使用其中的一種，也可W兩種或兩種W上同時使用，W實現在不 同階段對不同底物濃度的響應，最終達到控制內載物的釋放速度和釋放量。兩種或兩種W 上同時使用時，其使用比例根據實際條件可進行調節。
[0090] 本發明的控制釋放納米粒子可W是W干燥固體粉末的形式存在，也可W溶液的形 式存在，也可W裝載于其他材料或植入式器件中。本發明包括含有本發明所述控制釋放納 米粒子的控制釋放系統。應理解，本發明的控制釋放系統是指能夠控制活性分子例如膜島 素的釋放的一種產品。該系統可W是簡單的僅含有本發明控釋納米粒子的產品，也可W是 含有本發明控釋納米粒子和其他成分例如藥學上可接受的載體或賦形劑的一種組合物或 混合物。本領域技術人員能根據該組合物的用途來選用適當的藥學上可接受的載體或賦形 劑。
[0091] 本發明的控制釋放納米系統用于控制功能活性成分的釋放。因此，可用于本發明 的控釋納米粒子或系統的功能活性分子包括各種用途的功能活性分子，例如，蛋白和核酸 等生物大分子，抗腫瘤藥物和英光探針等小分子化合物，W及尺寸小于介孔尺寸的各種功 能性量子點或納米粒子用于治療目的的各種生物大分子。蛋白可W是各種可用于治療或診 斷用途的酶和抗體；核酸可W是例如可用于基因治療的各種功能性核酸，如siRNA。優選功 能活性成分是膜島素，包括但不限于膜島素單體，膜島素的二聚體、六聚體或其其他聚集形 式，改性膜島素，標記膜島素或其他膜島素替代物。。本發明控釋納米粒子所負載的分子也 可W是上述功能活性成分的任一組合，W用于診斷或治療相同或不同的疾病或癥狀。
[0092] 本發明可用于控制釋放的基于介孔氧化娃的納米粒子可通過W下步驟制備：