，冷凍干燥，得黃色固體粉末。零下35C冰箱保存。 陽12引 連施例6
[013U 在250血圓底燒瓶中加入十六烷基H甲基漠化倭（口'48,5.46邑，15臟01)，對甲苯 礙酸一水合物化85g，15mmol)和IOOmL無水甲醇，加熱至回流，磁力攬拌。24小時后停止 反應，旋除溶劑，紅外干燥，得黃色固體。
[0134] 在500血H口燒瓶中加入十六烷基H甲基對甲苯礙酸倭（3. 84g)，H己醇胺 (0. 69g)和超純水200血。機械攬拌，加熱升溫至8(TC。溫度穩定1小時后，快速加入正娃 酸己醋（29. 20g)，同時設定機械攬拌速度為1200r/min。兩小時后停止加熱和攬拌，趁熱抽 濾，濾餅用大量的去離子水洗涂。所得固體產物IOOC干燥20小時，得到9. 16g白色固體粉 末NP1，于紅外烘箱保存。
[0137] 在1000血H口燒瓶中加入上述制備的NPl(3.OOg)，27血37 %的濃鹽酸和480血無 水甲醇。加熱至回流。24小時后停止反應。趁熱抽濾，濾餅依次用大量的甲醇、去離子水洗 涂。所得濾餅于IOOC干燥8小時，得到固體粉末NP2,于紅外烘箱保存。
[0140] 在IOOmLH口圓底燒瓶中加入上述制備的NP2 (1.OOg)，3-異氯酸醋基丙基H己氧 基娃焼（7. 40g)和50血甲苯。氮氣保護，加熱至回流。24小時后停止反應，趁熱抽濾，濾餅 依次用大量的甲苯、己臘和丙麗洗涂，得到白色固體粉末NP3,于紅外干燥箱保存。由元素分 析結果計算可得，NP3表面小分子接枝量為1.llmmol/g(根據介孔氧化娃接枝娃焼化試劑 前后N的含量變化計算得到）。
[0143]在50mL圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP3 (300mg)，4-居甲基苯測酸甘油 醋（624mg，3mmol)，0. 3血的H己胺，5滴N，N-二甲基甲醜胺和15血甲苯。室溫密閉反應， 磁力攬拌。12小時候停止反應，抽濾，濾餅依次用大量的己臘、丙麗、去離子水、丙麗洗涂。 所得濾餅紅外烘箱干燥，保存，得白色固體粉末NP4-1。
[0144] 連施例11
[0146] 在50血圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP4-1 (200mg)，經標記的膜島素 (lOOmg，門TC-Insulin)和15血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)。冰浴避光磁力攬拌。24小時 后，取出2mL反應液，離必分離，棄去上清液（無色），所得固體冷凍干燥得黃色粉末NP5-1。
[0147] 取表面駿基功能化的氧化鋒巧Omg)，加2mL磯酸鹽緩沖液（抑=7. 40)溶解，加入 4-二甲氨基化巧值MAP，36mg，0. 3mmol)和1-己基-(3-二甲基氨基丙基）碳醜二亞胺鹽 酸鹽巧0(：1，384111旨，2臟〇1)。然后將混合液逐滴加入到上述反應體系中。室溫避光，磁力攬 拌。24小時后停止反應，離必分離，棄去上清液（綠色），用磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)洗 涂H次。所得固體冷凍干燥，得到黃色固體粉末NP6-1。
[014引連施例12
[0149] 取H個小燒杯A、B、C，分別加入5mL磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，然后向A中加入 IOmg上述制備的介孔氧化娃納米粒子NP5-LB和C中加入IOmg上述制備的介孔氧化娃納 米粒子NP6-1。超聲使其均勻分散。沒浸泡20分鐘后離必，連續測定上清液的紫外吸收強度 變化。由圖7所示，60分鐘內A中NP5-1負載的膜島素基本釋放完畢。B和C中的NP6-1在 4小時后釋放量達到穩定，此后C中NP6-1不再釋放膜島素。而4小時后向B中加入IOOmM 的果糖，對應的上清液中膜島素含量相對C中出現較快的釋放（20分鐘內釋放完畢）從而 達到新的平衡。第5小時后再次加入IOOmM的果糖，B中上清液中的紫外吸收繼續升高，說 明介孔氧化娃的部分介孔被打開。同時A和C中上清液的紫外吸收基本無變化，說明無膜 島素繼續釋放。第6小時繼續加入IOOmM的果糖，B中上清液的紫外吸收變化與前兩次變化 基本一致。第7小時再次向B中加入500ml的果糖，對應上清液中紫外吸收相對加入IOOmM 時增強較大。W上說明，基于介孔氧化娃的膜島素控制釋放系統可W實現對膜島素良好的 裝載，并具有"零提前釋放"W及基于果糖濃度變化而變化的性質。 陽150] 連施例13
[0151] 取兩個小燒杯A和B，分別加入5血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，分別向其中加 入IOmg上述制備的介孔氧化娃納米粒子NP6-1。超聲使其均勻分散。沒浸泡20分鐘后離 必，連續測定上清液的紫外吸收強度變化。由圖8所示，5小時后A和B中的NP6-1釋放量 達到穩定。而此時向A中加入IOOmM的葡萄糖，對應的上清液中膜島素的紫外吸收相對于 B中沒有明顯的變化。第6小時后繼續向A中加入500ml的葡萄糖，此時A相對于B中的 上清液膜島素紫外吸收有微弱的增加，但很快達到新的平衡。第7小時后再次向A中加入 1000 mM的葡萄糖，繼續測定上清液中膜島素的紫外吸收，可W看到加入葡萄糖后，紫外吸收 相對500ml時增加顯著，并且很快達到新的平衡。但吸收增強但明顯弱于基于果糖的響應。 送與葡萄糖相對于果糖和苯基測酸具有更弱的結合能力相一致，因此，打開介孔需要較高 的濃度，且響應較低。
[0152] W上說明，基于介孔氧化娃的膜島素控制釋放系統可W實現對膜島素良好的裝 載，并具有"零提前釋放"W及基于單糖濃度變化而變化的性質。
[015引連施例14
[015引在50血圓底燒瓶中加入4-氣-3-甲醜基苯測酸化08mg，4mmol)，加入四氨巧喃和 無水甲醇各15mU冰浴下攬拌。然后稱取測氨化鋼巧08mg，24mmol)每個兩小時分H次加 入到W上反應體系中。六小時后停止反應，加入飽和氯化倭水溶液渾滅反應，用稀鹽酸調節 抑至2。己酸己醋巧0mLx3)萃取，合并有機層，無水硫酸鎮干燥，得黃色固體巧68mg，產率 92. 2%)。iHNMR(400MHz，DMS0-d6) :5 (ppm)7. 59(d，J= 8. 0Hz，lH)，7. 48(s，lH)，7. 45(d， J= 8.0Hz，IH) ,4.55 (s，lH)。
[0158] 在50血H口圓底燒瓶中加入4-氣-3-居甲基苯測酸巧68mg，3. 4mmol)，甘油 (370mg，4mmol)，無水硫酸鋼（3. 0g，20mmol)和20血無水四氨巧喃，室溫機械攬拌。24小 時后停止反應，抽濾，濾液旋干，柱層析分離（EA/PE= 1/1，v/v)，得淡黃色液體。MS巧I)m/ Z實測值為226. 0814,理論值為226. 0813。
[OW] 在50血圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP3 (300mg)，實施例15所得 3-氣-4-居甲基苯測酸甘油醋，0. 5血的H己胺，2mLN,N-二甲基甲醜胺和15血甲苯。室溫 密閉反應，磁力攬拌。12小時候停止反應，抽濾，濾餅依次用大量的己臘、丙麗、去離子水、丙 麗洗涂。所得濾餅紅外烘箱干燥，保存，得白色固體粉末NP4-2。
[016引連施例17[0163]
[0164] 在50血圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP4-2(150mg)，膜島素（75mg)，和 12血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)。冰浴磁力攬拌。24小時后，取出2血反應液，離必分離， 棄去上清液，所得固體冷凍干燥得白色粉末NP5-2。
[0165] 取表面駿基功能化的氧化鋒巧Omg)，加2mL磯酸鹽緩沖液（抑=7. 40)溶解，加入 4-二甲氨基化巧值MAP，36mg，0. 3mmol)和1-己基-(3-二甲基氨基丙基）碳醜二亞胺鹽酸 鹽巧0(：1，384111旨，2111111〇1)。然后將混合液逐滴加入到上述反應體系中。磁力攬拌。24小時 后停止反應，離必分離，棄去上清液，用磯酸鹽緩沖液（pH= 7.40)洗涂H次。所得固體冷 凍干燥，得到白色固體粉末NP6-2。
[016引連施例18
[0167] 取H個小燒杯A、B、C，分別加入5mL磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，然后向A中加入 IOmg上述制備的介孔氧化娃納米粒子NP5-2，B和C中加入IOmg上述制備的介孔氧化娃納 米粒子NP6-2。超聲使其均勻分散。沒浸泡20分鐘后離必，連續測定上清液的紫外吸收強 度變化。60分鐘內A中NP5-2負載的膜島素基本釋放完畢。B和C中的NP6-2在4小時后 釋放量達到穩定，此后C中NP6-2不再釋放膜島素。而4小時后向B中加入IOOmM的果糖， 對應的上清液中膜島素含量相對C中出現較快的釋放（20分鐘內釋放完畢）從而達到新的 平衡。第5小時后再次加入IOOmM的果糖，B中上清液中的紫外吸收繼續升高，說明介孔氧 化娃的部分介孔被打開。同時A和C中上清液的紫外吸收基本無變化，說明無膜島素繼續 釋放。第6小時繼續加入IOOmM的果糖，B中上清液的紫外吸收變化與前兩次變化基本一 致。第7小時再次向B中加入500ml的果糖，對應上清液中紫外吸收相對加入IOOmM時增 強較大。W上說明，基于不同刺激響應結構的介孔氧化娃膜島素控制釋放系統均可W實現 對膜島素良好的裝載，并具有"零提前釋放"W及基于果糖濃度變化而變化的性質。 陽16引 連施例19
[0169] 取兩個小燒杯A和B，分別加入5血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，分別向其中加入 IOmg上述制備的介孔氧化娃納米粒子NP6-2。超聲使其均勻分散。沒浸泡20分鐘后離必， 連續測定上清液的紫外吸收強度變化。一段時間后A和B中的NP6-2釋放量達到穩定。而 此時向A中加入IOOmM的葡萄糖，對應的上清液中膜島素的紫外吸收相對于B中變化不明 顯。然后繼續向A中加入500ml的葡萄糖，此時A相對于B中的上清液膜島素紫外吸收一 定程度的增加，但很快達到新的平衡。然后再次向A中加入1000 mM的葡萄糖，繼續測定上 清液中膜島素的紫外吸收，可W看到加入葡萄糖后，紫外吸收相對500ml時增加顯著，同時 很快達到新的平衡。與前面NP6-1控制釋放特性類似，其吸收增強但明顯弱于基于果糖的 響應。送與葡萄糖相對于果糖和苯基測酸具有更弱的結合能力相一致，因此，打開介孔需要 較高的濃度，且響應較低。
[0170] 連施例20
[0171]
[0172] 在50ml圓底H口燒瓶中加