入鄰甲醜基苯測酸巧00mg，3. 33mmol)，間氨基予臘 (432mg，3. 66mmol)，20ml甲醇，在氮氣保護下室溫攬拌。4小時后，冰浴條件下分批加入測 氨化鋼化30mg，16.65mmol)。2小時后加入1血水，停止反應。減壓蒸傭除去溶劑，用水和 己酸己醋進行萃取，得有機層，旋干。加入二氯甲焼，過量的間氨基予臘易溶于二氯甲焼而 產物不易溶，抽濾，得白色固體031。
[017引 1hNMR(400MHz，DMSO-de) 5 (ppm)9. 79(s，1田，7. 94-7. 88(m，3H) ,7. 52-7. 45(m， 3H)，7. 32-7. 34 (m，2H)，4. 57 (s，2H)，I. 99 (s，IH)。
[0176] 在50ml圓底H口燒瓶中加入化合物031，30血無水THF，室溫下攬拌溶解。冰浴 條件下加入^4化4(340111旨，9臟〇1)。24小時之后加入1血水，340祉30%化地溶液，加入 無水硫酸鎮，過濾，得有機相，旋干。加蒸傭水重結晶，得白色固體032。iHNMR(400MHz， DMSO-de) ;5(ppm)9. 27(s，lH)，7. 85(d，J= 7. 2Hz，lH)，7. 51-7. 42(m，4H)，7. 31(m，lH), 7. 21 (t，J= 8.OHz，IH)，6. 88 (d，J= 7. 2Hz，IH)，4. 53 (s，2H)，3. 71 (s，2H)。"CNMRQOOMHz， DMSO-dg) ： 5 (ppm) 148. 5,146. 8,145. 4,144. 6,130. 0,129. 5,128. 4,126. 2,122. 3,119.I, 116. 1,115.9,52. 6,46.0。
[0179] 在50血H口圓底燒瓶中加入化合物032(512. 2mg，2mmol)，甘油（220mg， 2. 4mmol)，無水硫酸鋼（1. 70g，12mmol)和15血四氨巧喃，室溫磁力攬拌。24小時后停止反 應，抽濾，四氨巧喃洗涂濾餅，合并有機層，旋干。柱層析（EA/MeOH= 30/1，v/v)分離得蹤 褐色粘稠液體。MS巧I)m/z實測值為312. 1640,理論值為312. 1645。 陽180]連施例23
[0182]在50血圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP3(300mg)，實施例23所得033， 0. 5血的H己胺，2mLN，N-二甲基甲醜胺和15血甲苯。室溫密閉反應，磁力攬拌。12小時 候停止反應，抽濾，濾餅依次用大量的己臘、丙麗、去離子水、丙麗洗涂。所得濾餅紅外烘箱 干燥，保存，得白色固體粉末NP4-3。
[0185] 在50血圓底燒瓶中加入上述制備的納米粒子NP4-3(150mg)，膜島素（75mg)，和 12血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)。冰浴磁力攬拌。24小時后，取出2血反應液，離必分離， 棄去上清液，所得固體冷凍干燥得白色粉末NP5-3。
[0186] 取表面駿基功能化的氧化鋒巧Omg)，加2mL磯酸鹽緩沖液（抑=7. 40)溶解，加入 4-二甲氨基化巧值MAP，36mg，0. 3mmol)和1-己基-(3-二甲基氨基丙基）碳醜二亞胺鹽酸 鹽巧0(：1，384111旨，2111111〇1)。然后將混合液逐滴加入到上述反應體系中。磁力攬拌。24小時 后停止反應，離必分離，棄去上清液，用磯酸鹽緩沖液（pH= 7.40)洗涂H次。所得固體冷 凍干燥，得到白色固體粉末NP6-3。 陽187] 連施例25
[0188] 取H個小燒杯A、B、C，分別加入5mL磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，然后向A中加入 IOmg介孔氧化娃納米粒子NP5,B和C中加入IOmg介孔氧化娃納米粒子NP6。超聲使其均 勻分散。沒浸泡20分鐘后離必，連續測定上清液的紫外吸收強度變化。60分鐘內A中NP5 負載的膜島素基本釋放完畢。B和C中的NP6在4小時后釋放量達到穩定，此后C中NP6不 再釋放膜島素。而4小時后向B中加入IOmM的果糖，對應的上清液中膜島素含量相對C中 出現較快的釋放（20分鐘內釋放完畢）從而達到新的平衡。第5小時后再次加入IOmM的果 糖，B中上清液中的紫外吸收繼續升高，說明介孔氧化娃的部分介孔被打開。同時A和C中 上清液的紫外吸收基本無變化，說明無膜島素繼續釋放。第6小時繼續加入IOmM的果糖，B 中上清液的紫外吸收變化與前兩次變化基本一致。第7小時再次向B中加入50mM的果糖， 對應上清液中紫外吸收相對加入IOOmM時增強較大。W上說明，基于介孔氧化娃的膜島素 控制釋放系統可W實現對膜島素良好的裝載，并具有"零提前釋放"W及基于果糖濃度變化 而變化的性質。
[018引 連施例26
[0190] 取兩個小燒杯A和B，分別加入5血磯酸鹽緩沖液（pH= 7. 40)，分別向其中加入 IOmg介孔氧化娃納米粒子NP6。超聲使其均勻分散。沒浸泡20分鐘后離必，連續測定上清 液的紫外吸收強度變化。一段時間后A和B中的NP6釋放量達到穩定。而此時向A中加入 IOmM的葡萄糖，此時A相對于B中的上清液膜島素紫外吸收有明顯的增加，但很快達到新的 平衡。然后再次向A中加入50mM的葡萄糖，繼續測定上清液中膜島素的紫外吸收，可W看 到加入葡萄糖后，紫外吸收相對IOmM時增加顯著，并且很快達到新的平衡。在響應的時間 內，B內的紫外吸收幾乎沒有變化，表示溶液體系中膜島素不再釋放，即實現在無底物刺激 下的"零提前釋放"。
[0191] 由W上結果可W看出，不同結構的刺激響應基團對同一底物響應濃度范圍不同， 同一結構的刺激響應基團對不同底物具有不同的響應特性。因此，本發明可W實現基于不 同底物不同濃度的控制釋放。在實際應用中，技術人員可W根據實際需要選擇合適結構的 刺激響應基團和劑量。
[0192] 雖然W具體實施例的方式描述了本發明，但應理解，本發明的范圍并不限于上述 【具體實施方式】。在不偏離本發明精神和范圍的情況下，本領域技術人員可對本發明做出各 種修改和變動，送些修改和變動都在本發明的范圍之內。
【主權項】
1. 一種基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子，其特征在于，所述納米粒子含 有經苯基硼酸酯功能化的介孔氧化硅納米粒子和可與苯基硼酸酯結合的表面功能化的納 米粒子堵孔劑。2. 如權利要求1所述的基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子，其特征在于， 所述的可用于控制釋放的納米粒子還含有功能活性成分，所述功能活性成分選自蛋白和核 酸等生物大分子，抗腫瘤藥物和熒光探針等小分子化合物，以及尺寸小于介孔尺寸的各種 功能性量子點或納米粒子。3. 如權利要求1-2中任一項所述的基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子，其 特征在于，所述苯基硼酸酯選自下式（1)或（2):式中， Ii1 = 0,1，2,3,4 或 5 ; n2 = 1 或 2 ; Z1, Z2, Z3和Z4各自獨立選自吸電子基團取代基或供電子基團取代基，如氫，C1-C6烷基 和鹵素； L不存在，或是連接苯環和Y的接頭基團； X選自氨^、羥基、竣基、橫酸基、疏基、烯基、炔基、置氣基、四嚷類結構、鹵素、餅、環氧 基、異氰酸酯基和異硫氰酸酯基；和 Y選自氨S、羥基、竣基、橫酸基、疏基、烯基、炔基、置氣基、四嚷類結構、鹵素、餅、環氧 基、異氰酸酯基和異硫氰酸酯基。4. 如權利要求1-3中任一項所述的基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子，其 特征在于，所述堵孔劑為尺寸在3-25nm的量子點或納米粒子，由選自氧化鋅、硫化鋅、硫化 鎘、硒化鎘、四氧化三鐵和/或納米金的材料制成；且所述堵孔劑表面經功能化修飾，包含 可與苯基硼酸酯類化合物結構中的X或Y基團反應的選自下組的官能化基團：氨基、羥基、 竣基、橫酸基、疏基、烯基、炔基、置氣基、四嚷類結構、鹵素、餅、環氧基、異氛酸醋基和異硫 氰酸酯基。5. 如權利要求1-4中任一項所述的基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子，其 特征在于，所述經苯基硼酸酯功能化的介孔氧化硅納米粒子包含如下式Ι、Π 和III所示的 結構，其中，MSN指介孔氧化硅納米粒子：6. -種基于介孔氧化硅納米粒子的控制釋放系統，其特征在于，所述控制釋放系統含 有權利要求1-4中任一項所述的納米粒子。7. -種制備權利要求1-4中任一項所述的基于介孔氧化硅的納米粒子的方法，其特征 在于，所述方法包括以下步驟： (al)用苯基硼酸酯處理表面經硅烷化試劑功能化的介孔氧化硅納米粒子，進行再次功 能化； (a2)將步驟（al)所得的介孔氧化硅納米粒子分散在含有功能活性分子的溶劑中，使 所述介孔氧化硅納米粒子裝載所述功能活性分子；和 (a3)將表面官能化的納米粒子堵孔劑加到步驟（a2)的反應溶液中，在允許堵孔劑將 介孔堵上的條件下進行反應，從而得到所述基于介孔氧化硅的納米粒子。8. 如權利要求6-7中任一項所述的方法，其特征在于，所述溶劑選自甲苯、二甲基甲酰 胺、二氯甲烷、乙醇、甲醇、水、基于水溶液的各種緩沖液中的一種或它們的混合物。9. 一種試劑盒，該試劑盒含有分裝在不同容器中的經苯基硼酸酯功能化的介孔氧化硅 納米粒子和可與苯基硼酸酯連接的表面功能化的納米粒子。10. 權利要求1 一 5中任一項所述的納米粒子或權利要求6所述的控制釋放系統在制 備用于控制釋放給藥的藥物或診斷試劑或診斷試劑盒中的用途。
【專利摘要】本發明涉及一種基于介孔氧化硅納米粒子的控制釋放系統及其制備方法，具體涉及基于介孔氧化硅的可用于控制釋放的納米粒子、含有該納米粒子的控制釋放系統、該納米粒子的制備方法及試劑盒。本發明的納米粒子含有經苯基硼酸酯功能化的介孔氧化硅納米粒子和可與苯基硼酸酯結合的表面功能化的納米粒子堵孔劑。在無底物存在下，本發明的納米氧化硅體系可達到“零提前釋放”；當加入底物后，被納米粒子封堵的介孔孔道被打開，從而實現內載物的控制釋放。本發明方法材料合成簡單，結構可調，可以實現對不同底物、不同濃度的響應。
【IPC分類】A61K47/24, A61K49/00, A61K47/04
【公開號】CN105169398
【申請號】
【發明人】朱維平, 黑明陽, 李玉杰, 徐玉芳, 錢旭紅
【申請人】華東理工大學
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2014年6月12日