[0143] 表2化合物對急性心肌梗死的治療效果
[0144]
[0145] 與梗死組相比，1Ρ〈0· 05 ;2Ρ>(λ 05 ;3Ρ>(λ 05 ;4Ρ〈(λ 001 ;5Ρ〈(λ 001 ;
[0146] *Ρ〈0· 05 ;#Ρ>0· 05
[0147] 3.炎癥指標的檢測：治療組和對照組血清炎癥因子的變化結果匯總見表3。創傷 后3h血漿TNF- a、IL-1、IL-6達到峰值。在再灌注前給予化合物a或b可阻斷TNF- α、 IL-1、IL-6水平的升高，幾乎近正常水平。Z-VAD-FMK僅降低IL-1，尼可地爾僅降低TNF，不 能降低其它炎癥介質。以上結果表明本發明的化合物能明顯有效抑制心肌損傷后的炎癥反 應，具有廣譜的抗炎作用。
[0148] 表3化合物對急性心肌梗死面積和炎癥因子的影響
[0149]
[0150] 與梗死組相比，1Ρ〈0· 05 ;2Ρ>(λ 05 ;3Ρ>(λ 05 ;4Ρ〈(λ 001 ;5Ρ〈(λ 001 ;
[0151] *Ρ〈0· 05 ;#Ρ>0· 05 ;**Ρ〈0· 05 ;##Ρ〈0· 05
[0152] 4.與細胞存活和死亡相關蛋白的變化：化合物a和b均能有效地抑制死亡蛋白和 炎癥蛋白的表達，同時增加有保護功能的蛋白的表達；丁酸鈉輕度增加 Hsp70、MTl的表達。 心肌組織P53、iNOS、Hsp70、C0X2以及Metallothionein(MTl)表達的變化情況如圖5。
[0153] 5. Caspase-3活性的變化：心肌細胞凋亡的檢測用末端標記法，Caspase-3活性測 定用Western Blots，用抗PARP的抗體測定PARP被切割的情況，結果如圖6所示，本發明的 化合物能強效抑制Caspase-3的活性。
[0154] 6.抗氧化指標的變化：心肌組織MDA含量、SOD、GSH-Px活性測定結果顯示，化合 物a和b均能顯著增強S0D和GSH-Px的活性，化合物a或b增強S0D和GSH-Px的活性明 顯優于陽性對照藥物以及葉酸與丁酸鈉的組合應用。化合物a和b均能顯著降低MDA的含 量。說明化合物a或b具有強抗氧化功能，其結果如表4所示。
[0155] 表4心肌組織SOD、GSH-Px、MDA水平的變化
[0156]
[0157] 與梗死組相比，1Ρ〈0· 05 ;2Ρ>(λ 05 ;3Ρ>(λ 05 ;4Ρ〈0· 001 ;5Ρ〈0· 001
[0158] 7.化合物b劑量依賴性地保護缺血再灌注引起的心肌損傷：高劑量的化合物b在 再灌注前給藥，幾乎可以完全恢復左室射血分數，心肌梗死面積減少近5倍。對應的高濃度 的葉酸（9mg/kg)加上高濃度的丁酸鈉（112mg/kg)僅能使心肌梗死面積減少20%，結果如 表5所示。
[0159] 表5化合物b劑量依賴性的心臟保護
[0160]
[0161] 與梗死組相比，1Ρ>0· 05 ;2Ρ>0· 05 ;3Ρ〈0· 001 ;4Ρ〈0· 001
[0162] 8.在再灌注3小時后給予化合物b仍然能有效保護心肌損傷：在再灌注3小時 后給予高劑量的化合物b仍然能有效保護心肌損傷，使梗死面積減少40%左右，尼可地爾、 Caspase抑制劑（Z-VAD-FMK)在再灌注前能有效保護心肌損傷，在再灌注3小時后給藥則沒 有保護作用，因此本發明的化合物有重要的臨床應用價值，結果如表6所示。
[0163] 表6化合物對急性心肌梗死的治療效果
[0164]
[0165] 與梗死組相比，1Ρ>0· 05 ;2Ρ>0· 05 ;3Ρ〈0· 001
[0166] 試驗例9實驗小鼠半數致死量LD5。測定
[0167] 本發明人還測定了實驗小鼠的半數致死量LD5。。具體來說，本發明人選擇了 10只 體重為20克左右的Swiss小鼠，分為五組，每組小鼠各自一次性經腹腔注射5種不同劑量 的本發明化合物b的DMS0溶液，所采用的五種注射量分別為1 lmg、33mg、100mg、300mg和 900mg。記錄半數小鼠死亡時所用的劑量并基于小鼠的體重進行換算。該實驗測得小鼠的 半數致死量為470-520mg/kg。
[0168] 綜上所述，本發明提供的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、水合物、溶劑化物或 代謝中間體具有超強的抗細胞凋亡、抗炎及抗氧化損傷的功效，可以用于治療重要器官損 傷。動物實驗顯示，對于心肌梗死而言，即使在疾病發作后的幾小時內給藥，本發明的化合 物仍能有效地抑制器官的損傷，因此特別適合于治療窗口狹窄的器官急性損傷疾病，如心 肌梗死、腦中風等的治療。我們還注意到，本發明的化合物保護心肌梗死的效果要明顯優于 目前最有效的藥物，因此是絕佳的急救藥品。同時，本發明化合物的制備工藝簡單，容易實 現工業化大規模生產。
[0169] 總之，以上對本發明【具體實施方式】的描述并不限制本發明，本領域技術人員可以 根據本發明作出各種改變或變形，只要不脫離本發明的精神，均應屬于本發明所附權利要 求的范圍。
【主權項】
1. 一種通式I表示的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑化物或代謝中間 體，其中，Rl選自=0,-畑2, -OH，或者-畑2或-OH取代的C 1 4直鏈或支鏈烷基； R2不存在或選自-H，Cl 4直鏈或支鏈烷基；-CH0,或者-CHO取代的C 1 4直鏈或支鏈燒 基； R3選自-H，Cl 4直鏈或支鏈烷基，或者-OH ; n為0-13的正整數。2. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑化物或代謝 中間體，其特征在于： Rl選自=0,-畑2,或者-OH ; R2不存在或選自-H，-邸3或者-C冊； R3選自-扎-邸3,或者-OH; 優選地，n 為 0、1、2、3、4、5或13。3. 根據權利要求1或2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑化物或 代謝中間體，其特征在于：所述化合物由通式2表示，其中，RU R2和R3的定義同權利要求1或2 ; 優選地，所述化合物選自W下由化學式a-e所表示的化合物，更優選地，所述的化合物選自由W下化學式a-c所表示的化合物，再優選地，所述的化合物選自由W下化學式a或b所表示的化合物，最優選地，所述的化合物選自由W下化學式b所表示的化合物，4. 一種用于預防和/或治療器官損傷的藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量 的根據權利要求1至3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑化 物或代謝中間體。5. 根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還包含其它用于 預防和/或治療器官損傷的藥物； 優選地，所述其它用于預防和/或治療器官損傷的藥物選自肝素、水賠素、阿加曲班、 華法林、普巧卡利或鄉沙坦中的一種或多種。6. 根據權利要求4或5所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物還包含藥學上 可接受的輔料；優選地，所述藥學上可接受的輔料選自大豆油、橄攬油、中鏈甘油=醋、大豆 憐脂、憐脂酷膽堿、聚乙二醇硬脂酸醋或聚氧乙締山梨糖醇酢脂肪酸醋中的一種或多種； 優選地，所述化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑化物或代謝中間體與藥 學上可接受的輔料的質量比為1 :1〇~90,優選為1 :15~50,更優選為1 :17~30,最優選 為 1 :20 ~25 ; 優選地，所述藥物組合物為溶液、混懸液、乳液、片劑、丸劑或植入物。7. 根據權利要求1-3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑 化物或代謝中間體在制備用于預防和/或治療器官損傷的藥物中的用途。8. 根據權利要求7所述的用途，其特征在于，所述器官損傷選自屯、肌梗死、腦中風、急 性腎功能衰竭、重癥肝炎、出血壞死性膜腺炎、急性肺損傷、骨髓急性損傷、急性壞死性腸 炎、急性放射性損傷、敗血癥或放化療所致的器官損傷、多器官功能衰竭、風濕、肝衰、類風 濕、骨關節炎、呼吸窘迫綜合征、同型半脫胺酸血癥、經皮冠脈介入治療（PCI)的并發癥或 巨幼紅細胞性貧血中的一種或多種。9. 根據權利要求1-3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、醋、水合物、溶劑 化物或代謝中間體的制備方法，該制備方法包括W下步驟： 通式3表示的化合物與Cs W脂肪酸氯甲醋，例如下酸氯甲醋在堿存在下、在有機溶劑中 反應生成通式1表示的化合物，10. 根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述堿為=乙胺；優選地，所述有機 溶劑為二甲基甲酯胺。
【專利摘要】本發明提供一種用于預防和治療器官損傷的化合物及其制備方法和用途，所述化合物為通式1表示的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、水合物、溶劑化物或代謝中間體，其中，R1選自＝O，-NH2，-OH，或者-NH2或-OH取代的C1-4直鏈或支鏈烷基；R2不存在或選自-H，C1-4直鏈或支鏈烷基，-CHO，或者-CHO取代的C1-4直鏈或支鏈烷基；R3選自-H，C1-4直鏈或支鏈烷基，或者-OH；n為0-13的正整數。本發明提供的化合物衍生自葉酸，作用于多靶點，全方位抑制不同的器官損傷傳導通路，可用來制備預防和/或治療各種原因導致器官損傷的藥物。
【IPC分類】A61P19/02, A61P1/16, A61P31/04, A61P11/00, A61K31/519, A61P9/10, C07D475/04, A61P7/06, A61P1/00, A61P13/12, A61P29/00, A61P1/18
【公開號】CN105646493
【申請號】
【發明人】李玉明, 周欣, 冉瑞瓊
【申請人】李玉明, 冉瑞瓊
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2014年12月8日