anine B對Jurkat細胞周期G2/M期抑制率為69.05%，比其空白對照組提高了5倍； 對Raji細胞周期G2/M期抑制率為31.93%，比其空白對照組提高了3倍;對K562細胞周期G2/ Μ期抑制率為34.26%，比其空白對照組提高了近3倍。其主要作用機制是通過抑制惡性淋巴 細胞的G2/M期，進而抑制其細胞增殖與生長，最終將引起惡性淋巴細胞凋亡。
[0093]因此，天然產物Hirtellanine Β及其衍生物可用于制備治療腫瘤藥物。
[0094]本發明所述藥物是由天然產物Hirtellanine B作為活性成分與藥用輔料組成的 藥物組合物。
[0095]本發明所述藥物是由天然產物Hirtellanine B的衍生物作為活性成分與藥用輔 料組成的藥物組合物。
[0096]所述作為藥物組合物活性成分的衍生物選自化合物1~14中的任一個化合物。 [0097]本發明提供的天然產物Hirtellanine B的制備方法原料易得，反應收率高，操作 合理，宜于工業化生產。本發明Hirtellanine B及其衍生物可用于制備治療腫瘤藥物，有較 大的臨床應用價值。
【附圖說明】
[0098]圖1: Jukata細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分析(空白組）
[0099] 圖2:2 · 5ug/mlHirtellanine B處理后Jukata細胞的細胞周期分布的流式細胞儀 分析
[0100] 圖3:1 ·25ug/mlHirtellanine B處理后Jukata細胞的細胞周期分布的流式細胞儀 分析
[0101 ] 圖4:0.63ug/mlHirtellanine B處理后Jukata細胞的細胞周期分布的流式細胞儀 分析
[0102]圖5: Raj i細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分析(空白組）
[0103] 圖6:2.5耶/1111!1化丨611&1^116 8處理后1^」丨細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分 析
[0104] 圖7:1.25呢/1111!1化丨611&1^116 8處理后1^"細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分 析
[0105] 圖8:0.63呢/1111把^611&1^1^8處理后1^"細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分 析
[0106] 圖9: K562細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分析(空白組）
[0107] 圖10:2.5ug/mlHirtellanine B處理后K562細胞的細胞周期分布的流式細胞儀分 析
[0108] 圖11:1.25耶/!111把^611&11丨116 8處理后1(562細胞的細胞周期分布的流式細胞儀 分析
[0109] 圖12:0.63ug/mlHirtellanine B處理后K562細胞的細胞周期分布的流式細胞儀 分析
[011 0] 注:圖譜中橫坐標為DNA含量，縱坐標為細胞數
[0111] 圖例：圖譜中染色部分依次為：
[0112] _DNA 合成前期(G0/G1 期）
[0113] 固DNA合成后期/細胞分裂期(G2/M期）
[0114] _DNA 合成期（S期）
【具體實施方式】
[0115] 本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體 的操作過程，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。
[0116] 說明：以下實施例中，所述室溫為20°C，濃縮是在32°C減壓條件下進行的，干燥是 用無水硫酸鈉室溫進行的，柱層析使用的硅膠為200-300目，洗脫液為乙酸乙酯和石油醚的 混合液，二者體積比例為1.0~3.0:1.0~10.0。
[0117] 實施例1化合物a(5,7_二羥基色酮)的制備
[0118] 5.58克2,4,6-三羥基苯乙酮溶于5〇毫升〇1^0小'-二甲基甲酰胺）中，然后在室 溫，攪拌下50分鐘內慢慢加入15.2毫升三氟化硼乙醚復合物(從國藥集團購買，使用前重蒸 過），隨后加入含有6.95毫升的甲磺酰氯的15毫升DMF溶液。反應混合物在90°C攪拌3小時， 然后冷卻至室溫，在強烈攪拌下慢慢倒入120毫升冰水中，過濾，水洗得到6.8克深黃色固體 粗產物。濾液通過乙酸乙酯萃取三次，每次100毫升，合并萃取物經柱層析純化得到4.82克 (90 · 3 % )黃色固體化合物a。熔點：255°C (降解）；咕 NMR(400MHz，Acetone-d6)δρρπι: 12 · 76 (s，lH)，8.07(d，J = 6.0Hz，lH)，6.39(s，lH)，6.26(s，lH)，6.23(d，J = 6.0Hz，lH);IR(film) vmax:3084,3005,2930,2878,2741，2629,1647,1616,1612,1553,1499,1466,1425,1369， 1313,1234,1188,1167,1117,1032,978;ESI-MS m/zl79.1([M+l] +，100%)。
[0119] 實施例2化合物b (7-( 1，1 -二甲基-2-丙炔氧基)-5-羥基色酮)的制備
[0120] 1.08克中間體a溶于50毫升丙酮中，然后加入2.51克碳酸鉀，2.52克碘化鉀，12毫 克催化劑碘化亞銅，通入氬氣后，加入0.71毫升3-氯-3-甲基-1-丁炔。隨后反應混合物回流 3小時，冷卻后減壓去除丙酮溶劑，加40毫升水溶解固體，乙酸乙酯萃取三次，每次50毫升， 合并萃取物濃縮后干燥后經柱層析得到1.41克(95.2%)黃色固體產物化合物b。熔點：112 ~ΙΠΓ; 1!!匪R(400MHz，CDCl3)Sppm: 12.47(s，lH)，7.75(d，J = 6.0Hz，lH)，6.77(d，J = 2.0Hz，lH)，6.69(d，J = 2.0Hz，lH)，6.22(d，J = 5.6Hz，lH)，2.68(s，lH)，1.72(s，6H);ESI-MS m/z245.2([M+l] + a〇0%)〇
[0121] 實施例3化合物c (5-羥基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)的制備
[0122] 508毫克中間體b溶于40毫升鄰二甲苯后加入480毫克氫化鈉(60 %分散于固體油 中），然后此懸濁液于130°C反應20小時，冷卻至室溫，加入30毫升冰水溶解，分離有機層，水 層用1N稀鹽酸中和至pH=5,隨后乙酸乙酯萃取三次，每次30毫升，合并萃取物，食鹽水洗 滌。在干燥濃縮后，粗產物經柱層析純化得到498毫克(98.0 % )黃色固體產物c。熔點：139~ 141°C JH 匪R(400MHz，CDC13)S卯m: 12.86(s，lH)，7.70(d，J = 6.0Hz，lH)，6.71(d，J = 10.0Hz，lH)，6.31(s，lH)，6.19(d，J = 5.6Hz，lH)，5.62(d，J=10.0Hz，lH)，1.46(s，6H);13C 匪R(100MHz，CDCl3)Sppm:155.62，128.49，115.58，111.45,59.33,28.55;IR(film)v max: 3441，3070,2976,2926,1655,1628,1574,1481，1423,1396,1313,1290,1254,1165,1115， 1074,839,833,777,702,633,530,505;ESI-MS m/z 245.2([M+1] +，100%)。
[0123] 實施例4化合物d( 5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)的制備
[0124] 488毫克化合物c溶于50毫升丙酮中，加入3.79克碳酸鉀。在冰水浴中攪拌10分鐘 后，在5分鐘內滴加1.33毫升硫酸二甲酯。隨后通入氬氣，加熱回流3小時，冷卻至室溫，加入 30毫升水后，繼續攪拌20分鐘，減壓消除丙酮溶劑，乙酸乙酯萃取三次，每次30毫升，合并萃 取物濃縮干燥后經柱層析純化得到492毫克(95.2% )淡黃色固體產物化合物d。熔點：96~ 98°C;1HMMR(400MHz，CDC13)Spp m:7.55(d，J = 6.0Hz，lH)，6.62(d，J=10.0Hz，lH)，6.47 (s，lH)，6.05(d，J = 6.0Hz，lH)，5.63(d，J=10.0Hz，lH)，3.78(s，3H);1.35(s，6H); 13C NMR (100ΜΗζ，ΟΧη3)δρρπι:176·33，158·97，158·26，155·37，153·27，153·08，131·02，116·06， 113.98，113.62，113.34，100.98,95.70,62.89,28.46 ;IR(film)vmax:3447,3074,2978， 2941，2845,1661，1639,1603,1558,1466,1433,1400,1354,1283,1252,1157,1119,1097， 1067，1024,947，897,845,831，798,714,526，484;HRMS(ESI+):Calcd.For Ci5Hi5〇4([M+l ]+ )，259·0965，Found:259·0970。
[0125] 實施例5化合物e (3-碘-5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)的制備
[0126] 320毫克化合物d溶于30毫升甲醇中，然后加入2毫升哌啶，隨后反應液回流2小時。 冷卻后減壓蒸餾除去甲醇溶劑及多余的哌啶給出黃色油狀物。加入40毫升二氯甲烷溶解， 然后分別加入196毫克吡啶和含788毫克碘的二氯甲烷(10毫升)溶液。室溫攪拌過夜后加入 30毫升飽和亞硫酸鈉水溶液，攪拌10分鐘，分離有機層，水層用二氯甲烷萃取三次，每次30 毫升，合并萃取物，水洗，干燥，濃縮。粗產物經柱層析純化得到無色油狀物產品，隨后經放 置過夜固化為白色固體產物化合物e 424毫克（89.1%)。熔點：121~NMR (400MHz，CDCl3)Sppm:8.03(s，lH)，6.65(d，J=10.0Hz，lH)，6.51(s，lH)，5.68(d，J = 6·0Ηζ，1Η)，3.83(s，3H)，1.40(s，6H) ;13C NMR(100MHz，CDCl3)Sppm:171·15,158.61， 156.08,155.35,131.70,115.93,113.93,111.02,100.73,89.04,78.21,63.13,28.68；IR (film) vmax: 3421，2943，2849，1643，1603，1466，1427,1350,1275,1217,1123,1051，947， 879，839,769,681，552;HRMS(ESI +):Calcd.For Ci5Hi4l〇4([M+l]+)，384.9931，Found: 384.9938。
[0127] 實施例6化合物f(2_咪唑-5-甲氧基-8,8_二甲基-8H-吡喃[3,2_g]色酮)的制備
[0128] 285毫克化合物e，249毫克咪唑，1.02克碳酸鉀溶于12毫升DMF中，反應液于80°C下 反應2小時，反應液冷卻后倒入冰水中，攪拌5分鐘，靜置0.5小時，有銀灰色固體析出，過濾 后，濾液經乙酸乙酯萃取三次，每次25毫升，干燥、濃縮后得粗產物，粗產物經柱層析純化得 230毫克化合物汽95.8%)。熔點：191~192°(： ;1!1匪1?(40010^，4〇6切116-(16)3??111:8.42(8， lH)，7.82(s，lH)，7.19(s，lH)，6.83(s，lH)，6.74(d，J=10.0Hz，lH)，6.41(s，lH)，5.92(d，J =10·4Ηζ，1Η)，3.86(s，3H)，1.47(s，6H);13C 匪R(100MHz，Acetone-d6)Sppm:176.11， 171.94,158.76,157.37,155.93,152.62,135.90,131.96,131.68,116.93,116.12,114.28， 101.36,97.78,78.52,62.77,28.41；IR(film)vmax:3454,3119,3065,2980,1655,1597, 1464，1412，1288,1120,864,646 ;HRMS(ESI + ) :Calcd.For CisHi7N2〇4([M+l] +