水平在肝臟中注射后1小時顯著上升，并 在隨后的24小時內逐漸回歸到正常水平。同一時間段內觀測血漿、T細胞和肺組織內 anti-MHC- I -SiRNA的變化，anti-MHC- I -SiRNA的表達水平在注射后1小時均顯著上 升，并在隨后的24小時內逐漸回歸到正常水平。
[0045] 圖2顯示了與對照組注射anti-MHC- I -SiRNA(陽性對照組）和陰性對照組（注 射生理鹽水）相比，實驗組（注射anti-MHC- I -SiRNA載體）的MHC的表達水平顯著降低， 從而說明anti-MHC- I -SiRNA可抑制MHC- I的mRNA表達水平。
[0046] 圖3顯示了移植術后大鼠注射特異性anti-M肥-I -SiRNA,血清、肝臟、T細胞、肺 組織中anti-MHC- I -SiRNA的表達水平。從圖3可W看出，anti-MHC- I -SiRNA的表達 水平在肝臟中注射后1小時顯著上升，并在隨后的24小時內逐漸回歸到正常水平。同一時 間段內觀測血漿、T細胞和肺組織內anti-MHC- I -SiRNA的變化，anti-MHC- I -SiRNA的 表達水平在注射后1小時均顯著上升，并在隨后的24小時內逐漸回歸到正常水平。
[0047] 圖4顯示了與對照組利用注射anti-MHC- I -SiRNA(陽性對照組）和陰性對照組 (注射生理鹽水）相比，實驗組（注射anti-MHC- I -SiRNA載體）的MHC- I的表達水平顯 著降低，從而說明anti-MHC- I -SiRNA可抑制MHC- I的mRNA表達水平。
【具體實施方式】
[0048] 本發明人經過廣泛而深入的研究，首次意外地發現，降低離體或在體的移植供體 器官中的非匹配的組織相容性抗原基因，能夠有效地降低供體的免疫原性，從而有效地改 善供受體之間的免疫排斥反應。實驗證明，組織相容性抗原的SiRNA可W通過血液循環或 預處理，有效地進入待移植供體器官和/或組織中，并高效地抑制組織相容性抗原高表達 的基因，而對移植受體施用含有SiRNA的組合物，也能夠同樣有效地降低與移植供體的免 疫排斥，因此，本發明打破了現有的僅W非特異性的免疫抑制劑來降低免疫排斥的常規，有 望開發為一種新的、副作用更少的對抗移植免疫排斥問題的新方法。在此基礎上，完成了本 發明。
[004引同種移植排斥反應
[0050] 針對同種異體細胞、組織或器官移植通常會引起宿主免疫排斥反應，本質上是一 種針對特異性抑制抗原（主要是HLA抗原）的特異性免疫應答。介導同種移植排斥反應的 抗原包括；主要組織相容性抗原（MHA)，次要組織相容性抗原（mHA)，其他組織相容性抗原。 其中，其他組織相容性抗原包括ABO抗原系統和組織特異性抗原。特異性HLA抗體是引起 同種移植排斥反應的重要原因。
[0051] 主要組織相容性復合物（major histocompatibility complex, M肥）
[0052] 如本文所用，術語"MHC"、"主要組織相容性復合物"、"主要組織相容性抗原"、"MHC 基因或其蛋白"均可互換使用，均指存在于大部分脊椎動物基因組中的與免疫系統密切相 關的主要組織相容性復合物基因或其蛋白。其中，人類的主要組織相容性復合物稱為"HLA" 或"HLA基因或其蛋白"。
[0053] 其中，術語"非匹配組織相容性抗原"指的是移植配對的供受體之間不能相匹配的 主要組織相容性復合物，通常，所述非匹配組織相容性抗原的判斷與臨床上不符合移植標 準的非匹配組織相容性抗原判斷原則相同。
[0054] 人的主要組織相容性復合物稱為HLA基因復合體。主要組織相容性復合物共分成 兩類；第一型：主要組織相容性復合物class I (MHC I)位于一般細胞表面上，可W提供一 般細胞內的一些狀況，比如該細胞遭受病毒感染，則相病毒外膜碎片之氨基酸鏈（peptide) 透過MHC提示在細胞外側，可W供殺手T細胞等辨化W進行撲殺。第二型；主要組織相容 性復合物class II (MHC II)只位于抗原提呈細胞上，如巨瞻細胞等。送類提供則是細胞 外部的情況，像是組織中有細菌侵入，則巨瞻細胞進行吞食后，把細菌碎片利用MHC提示給 輔助T細胞，啟動免疫反應。
[0055] 主要組織相容性復合物抗原最初是作為移植抗原而被發現的，是引起移植排斥的 主要抗原系統。送種抗原不合，即可引起受體的免疫應答，排斥移植的供體組織。主要組織 相容性復合物分子在免疫應答過程中參與抗原識別。I類和II類分子是引起同種異體移植 排斥反應的主要抗原，供者與受者主要組織相容性復合物的相似程度直接反映兩者的相容 性；供-受者間的主要組織相容性復合物相似性越高，移植成功的可能性越大。為了降低移 植排斥反應，延長移植物的存活時間，移植前的重要工作就是通過HLA檢測的方法進行組 織配型，選擇HLA抗原與受者盡量相同的供者；在移植后發生排斥反應時進行恰當的免疫 抑制。
[0056] 人類白細胞抗原化uman Leuko巧te Antigen, HLA)
[0057] 人類的主要組織相容性復合物稱為"HLA"或"HLA基因或其蛋白"，即MHC當來源 于人時，所述的主要組織相容性復合物稱為人類白細胞抗原（HLA)。
[0058] HLA又稱移植抗原。人類白細胞抗原（Human Leuko巧te Antigen, HLA)是位于人 類第6號染色體短臂上組緊密連鎖的基因群，是人體中最具有態性的遺傳系統，由四類基 因組成，即I類基因、II類基因和III類基因，可W作為遺傳單位或單倍型而遺傳給下一代， 屬共顯性等位基因。IV型分子可能是一些分化抗原，只存在于淋己細胞、某些細胞毒性T細 胞和白細胞中。
[0059] 人類白細胞抗原（HLA)系統是機體免疫系統的重要組成部分，在機體的抗原呈遞 和免疫應答中發揮重要作用。HLA基因與人類多疾病的發生、發展和預后密切相關。
[0060] 人類的I類基因位點命名為HLA-A、HLA-B、HLA-C，分布于所有的組織細胞上，為 細胞膜上的移植抗原，是引起移植后排斥反應發生的主要抗原。II類基因則命名為HLA-D， HLA-D又分為HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP等亞區，主要分布于免疫細胞上，它們可W作為免疫 細胞間識別標記而誘發免疫應答和調節免疫細胞間的相互作用，在免疫應答反應中發揮重 要作用。III類基因區位于HLA-IJI類基因區之間，由一些與補體和某些炎癥因子編碼相關 的基因組成。送些基因在機體的免疫及機體對外界環境的適應性方面均有重要作用。
[0061] 臨床實踐表明，同種異體移植（除同卵雙生子外）的排斥是成功率的最大障礙。 HLA配型直接影響器官移植排斥反應；HLA可作為某些疾病的遺傳標志；HLA是人體對疾病 易感的主要免疫遺傳學成分。HLA作用主要為祀功能和識別功能。HLA I類抗原分布于所 有有核細胞。送些抗原可被外來物質例如某種病毒或化學物質加W改變，當送些基因產物 被改變之后，便成為自身免疫原，成為免疫排除的祀子。抗原經巨瞻細胞處理后，抗原信息 傳遞給T輔助細胞，后者再將信息傳給B細胞，使B細胞進而分化生成專一抗體。在送個過 程中，T輔助細胞不僅識別致敏巨瞻細胞上的抗原，同時也要識別巨瞻細胞是否與其本身的 HLA II類抗原相一致。
[006? 移植物
[0063] 在本發明中，術語"移植物"、"組織和/或器官"、"待移植物"可互換使用，均指在 體或離體的可用于移植的組織和/或器官。可用于本發明的移植物沒有特別限制，只要是 符合目前醫療要求、可W進行移植的任何組織和/或器官，例如肝臟、腎臟、肺、必臟等器官 或其他組織。
[0064] 降低組織和/或器官移植免疫排斥的方法
[0065] 本發明提供了對離體或在體的待移植器官進行處理從而降低其免疫原性并改善 移植過程中的免疫排斥問題。
[0066] 通常，在進行移植供受體配對時，需對兩者的主要組織相容性抗原的匹配程度進 行檢測，當獲得了非匹配的主要組織相容性抗原時，篩選出其中表達量較高的抗原并采用 常規方法針對送些抗原（或其編碼序列）設計抑制劑。優選地，可針對送些抗原的編碼序 列設計降低供體器官和組織的非匹配的主要組織相容性復合物核酸序列，例如siRNA、反義 核酸等，優選地，所述的SiRNA如SEQ ID NO. :4-5(小鼠），9-10、12-13、和15-16(人）中任 一所示。
[0067] 當獲得了針對非匹配主要組織相容性復合物的抗原抑制劑（如SiRNA)后，就可將 其按照常規方法制備成藥物組合物，并施用于待移植手術的供體或受體。
[0068] 優選地，本發明方法可W在移植供體維持正常血液循環時進行，例如在維持生命 期間的提供移植物對象（即供體）體內施用（例如注射）所述的藥物組合物，從而降低供 體體內非匹配主要組織相容性復合物的表達量，一般施用可在術前1周時維持進行，并當 確定MHC表達量降低到與對照組（如移植供體用藥前的MHC基礎值）體內MHC的表達量相 比，MHC的表達顯著降低后，進行移植手術。此外，為了達到更好的抑制免疫排斥的效果，優 選可對接受移植的對象（即受體）施用同樣的藥物組合物。本發明的實驗證明，在手術前對 移植供體或受體施用（如注射）本發明藥物組合物，均可W通過血循環有效地將抑制劑輸 送到祀器官，并有效降低非匹配組織相容性抗原的免疫原性；而術后繼續施用本發明的藥 物組合物，也能夠有效地維持送種降低免疫排斥反應的效果，且不產生其他額外的副作用。
[0069] 此外，對離體的移植物也可W通過預處理的方法進行對待移植組織和/或器官免 疫原性的降低，例如，可采用本發明藥物組合物對待移植物進行浸泡、沖洗、灌注等