一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法
【專利摘要】本發明公開了一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法，其特征在于：用MS培養基+復合卡拉膠+α-萘乙酸鈉配制適宜馬鈴薯組培苗生長的培養基，將經過預培養的脫毒組培苗置于本發明的固體培養基中培養12天，脫毒馬鈴薯組培苗根莖健壯，煉苗移栽成活率高。與現有馬鈴薯組培苗培養基相比，本發明培養基具有成本低、經濟效益好的優點。
【專利說明】一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于植物栽培培養【技術領域】，尤其涉及一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法 。
【背景技術】
[0002]通過馬鈴薯原原種脫毒可以有效提供產量和改善品質，從而馬鈴薯原原種脫毒技術受到越來越廣泛的應用。然而，馬鈴薯脫毒原原種薯必須采用組織培養的方法才能得到，目前，馬鈴薯組織培養技術采用的培養基投資成本高，嚴重影響了經濟效益，主要是合成培養基成分中必須添加植物生長必需的各種元素，尤其是價格昂貴的微量元素，造成了脫毒馬鈴薯原原種薯生產成本過高而不能廣泛應用。同時，馬鈴薯脫毒組培苗分化培養后直接煉苗移栽，組培苗的健壯程度及品質優劣嚴重影響栽培的成活率及馬鈴薯的品質。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在于:提供一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法，采用MS培養基+復合卡拉膠+ α -萘乙酸鈉配制適宜馬鈴薯組培苗生長的培養基，實現馬鈴薯脫毒組培苗快速生長、根莖健壯、生命力強的目的。
[0004]為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下:
[0005]一、一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養基，其特征在于:馬鈴薯脫毒組培用培養基組成包括:
[0006]復合卡拉膠:100~120g/L ；
[0007]大量元素=NH4NO3LO ~1.2g/L、KNO3L 3 ~1.5g/L、CaCl2.4Η200.3 ~0.35g/L、MgSO4.7H200.2 ~0.25g/L、KH2PO40.1 ~0.12g/L ；
[0008]微量元素:ΚΙ0.2 ~0.25mg/L、H3BO3L O ~1.5mg/L、MnSO4.4Η205.5 ~6.0mg/L、ZnSO4.4Η202.0 ~2.5mg/L、Na2MoO4.2Η200.04 ~0.05mg/L、CuSO4.5Η200.008 ~0.01mg/L、CoCl2.6Η200.008 ~0.01mg/L、FeSO4.7Η209.5 ~10.0mg/L、CrCl3.6Η200.009 ~0.01mg/L ；
[0009]生長調節劑:α-萘乙酸鈉7.5mg/L;
[0010]有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24~25mg/L ；
[0011]其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
[0012]所述的復合卡拉膠由40%雞糞和60%卡拉膠復合而成，其中，所述的卡拉膠為I型卡拉膠，復合卡拉膠的制作方法是:(1)回收的雞糞高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35% ； (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
[0013]二、馬鈴薯脫毒組培用培養基的制備方法，具體步驟如下:
[0014]1、稱取除復合卡拉膠以外的培養基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；
[0015]2、將步驟I所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；
[0016]3、分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節培養基pH值為5.8~6.0 ;
[0017]4、將制備的培養基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發明固體培養基。
[0018]三、馬鈴薯脫毒組培苗培養方法:[0019]馬鈴薯脫毒組培苗預培養:將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行培養，其中，控制溫度為25~27°C，光照控制2000~30001x，光照時長15小時，經過15~18天的培養后，然后轉入所述的培養基中進行培養；
[0020]馬鈴薯脫毒組培苗培養基復壯培養:經過預培養的馬鈴薯脫毒組培苗放入所述的密封的培養基中進行培養，其中，接種密度為20~30%，培養基溫度控制:晝溫20~25V最適宜，夜溫10~12°C ;空氣相對濕度控制50~70% ;日光照15~17小時，光照強度為2000~30001x。經過12天復壯培養，馬鈴薯脫毒組培苗生長健壯，生命力強。
[0021]與現有馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法相比，本發明培養的馬鈴薯脫毒組培苗長勢良好，根莖健壯，生命力頑強；本發明采用回收雞糞代替部分營養元素，降低了投資成本，提高經濟效益，同時實現了經濟循環利用；采用卡拉膠代替瓊脂，成本低且組培苗長勢更優，生長速度更快；配方中添加CrCl3.6H20，促進組培苗生長；采用α -萘乙酸鈉為生長調節劑，增強組培苗抗旱能力，同時使組培苗健壯優異。
【具體實施方式】
[0022]為了說明本發明的的技術方案，下面結合具體實例做進一步說明。
[0023]實施例1
[0024]1、馬鈴薯脫毒組培用培養基組成包括:
[0025]復合卡拉膠:100g/L ;
[0026]大量元素:ΝΗ4Ν031.0g/L、KNO3L 3g/L、CaCl2.4Η200.3g/L、MgSO4.7Η200.2g/L、KH2PO40.lg/L ；
[0027]微量元素:ΚΙ0.2mg/L、H3BO3L Omg/L、MnSO4.4H205.5mg/L、ZnSO4.4H202.0mg/L、Na2MoO4.2H200.04mg/L、CuSO4.5H200.008mg/L、CoCl2.6H200.008mg/L、FeSO4.7H209.5mg/L、CrCl3.6H200.009mg/L ；
[0028]生長調節劑:α -萘乙酸鈉7.5mg/L ；
[0029]有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24mg/L ；
[0030]其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
[0031]制作復合卡拉膠:(1)回收的雞糞經高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35%; (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
[0032]2、馬鈴薯脫毒組培用培養基的制備方法，具體步驟如下:
[0033](I)稱取除復合卡拉膠以外的培養基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；[0034](2)將步驟(1)所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；
[0035](3)分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節培養基pH值為5.8~6.0 ;
[0036](4)將制備的培養基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發明固體培養基。
[0037]3、馬鈴薯脫毒組培苗培養方法:
[0038]馬鈴薯脫毒組培苗預培養:將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行培養，其中，控制溫度為25~27°C，光照控制2000~3000Ix，光照時長15小時，經過15~18天的培養后，然后轉入所述的培養基中進行培養；
[0039]馬鈴薯脫毒組培苗培養基復壯培養:經過預培養的馬鈴薯脫毒組培苗放入所述的密封的固體培養基中進行培養，其中，接種密度為20~30%，培養基溫度控制:晝溫20~25°C最適宜，夜溫10~12°C;空氣相對濕度控制50~70%;日光照15~17小時，光照強度為2000~30001χ。經過12天復壯培養，馬鈴薯脫毒組培苗生長健壯，生命力強，即可進行煉苗移栽。
`[0040]采用本發明提供的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法培養后，以3天為期限測定組培苗的株高、葉片數、根數、根長、莖粗、苗鮮重、葉色。
[0041]隨機抽選20株組培苗進行測定，測定其各項指標，平均結果見下表1:
[0042]
【權利要求】
1.一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法，其特征在于:將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行預培養，溫度控制為25~27°C，光照控制2000~30001x，光照時長15小時，經過15~18天的預培養后，馬鈴薯脫毒組培苗放入密封的培養基中進行培養，接種密度為20~30%，培養基溫度控制:晝溫20~25°C最適宜，夜溫10~12V’空氣相對濕度控制50~70%，日光照15~17小時，光照強度為2000~30001x，培養12天。
2.一種根據權利要求1所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養基，其特征在于:所述的培養基組分為: 復合卡拉膠:100~120g/L ； 大量元素:NH4NO31.0 ~1.2g/L、KNO3L 3 ~1.5g/L、CaCl2.4Η200.3 ~0.35g/L、MgSO4.7H200.2 ~0.25g/L、KH2PO40.1 ~0.12g/L ； 微量元素:ΚΙ0.2 ~0.25mg/L、H3BO3L O ~1.5mg/L、MnSO4.4Η205.5 ~6.0mg/L、ZnSO4.4Η202.0 ~2.5mg/L、Na2MoO4.2Η200.04 ~0.05mg/L、CuSO4.5Η200.008 ~0.01mg/L、CoCl2.6Η200.008 ~0.01mg/L、FeSO4.7Η209.5 ~10.0mg/L、CrCl3.6Η200.009 ~0.01mg/L ； 生長調節劑:α -萘乙酸鈉7.5mg/L ； 有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24~25mg/L ； 其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
3.如權利要求2所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養基的制備方法，其特征在于:馬鈴薯脫毒組培用培養基的制備方法如下:(1)稱取除復合卡拉膠以外的培養基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；(2)將步驟I所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；(3)分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節培養基pH值為5.8~6.0 ; (4)將制備的培養基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發明固體培養基。
4.如權利要求2所述的一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養基，其特征在于:所述的復合卡拉膠由40%雞糞和60%卡拉膠復合而成，優選的卡拉膠為I型卡拉膠。
5.如權利要求3所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用培養基的制備方法，其特征在于:所述的復合卡拉膠的制作方法是:(1)回收的雞糞高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35% ; (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
【文檔編號】A01H4/00GK103518624SQ201310528666
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月31日 優先權日:2013年10月31日
【發明者】李愷, 屠建章, 張才強, 吳成秀, 火有仁 申請人:定西市凱凱生態園植物快繁有限公司