專利名稱：與植物種子大小相關的蛋白及其編碼基因與應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種與植物種子大小相關的蛋白及其編碼基因與應用。
背景技術：
水稻的粒型和粒重是水稻品質和產量的主要決定因素。最初發現的矮稈突變體 dl (dwarf 1)的種子相對野生型顯著變小，其千粒重約是野生型的40%。利用圖位克隆方法(map-based cloning strategy)和序列測定，發現Dl編碼G蛋白α亞基，其突變體表型是因該基因有833堿基缺失而造成的隱性突變。表明G蛋白α亞基調控了種子的外形， 特別是種子長短的變化。近年來又成功克隆到一個位于水稻第3號染色體著絲粒附近、控制米粒長度/粒重的主效QTL，來源于明恢63中該基因的等位基因在川7的背景下會導致粒長增加1. 80mm-3. 87mm，千粒重增加1. 50g-15. 6g。利用川7和明恢63構建的近等基因系，將該QTL/基因(GS3)精細定在7. 9kb的物理區間內。對GW2的研究表明，GW2作為一個新的E3泛素連接酶可能參與降解促進細胞分裂的蛋白，從而調控水稻穎殼大小、控制粒重以及產量，在突變體g 2中谷殼的寬度、粒重以及產量都得到了增加。2008年又克隆了一個編碼細胞壁蔗糖酶的水稻種子灌漿相關基因GIF1，突變體在形態和結實率上表現正常， 但灌漿程度比野生型低、籽粒淀粉粒排列松散、堊白度高，最終的粒重比野生型低對％、直鏈淀粉和支鏈淀粉含量也明顯比野生型低。
發明內容
本發明的一個目的是提供一種與植株種子粒型和/或粒重相關的蛋白及其編碼基因。本發明提供的蛋白質，名稱為0sFBK12，來源于水稻(Oryza sativa L. cv ZhonghualO)，是如下1)或2)的蛋白質1)由序列表中的序列2的氨基酸殘基序列組成的蛋白質；2)將序列表中的序列2氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關由1)衍生的蛋白質。上述序列表中的序列2由431個氨基酸殘基組成。所述一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加是指不超過10個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。所述蛋白(0sFBK12)的編碼基因也屬于本發明的保護范圍。所述蛋白(0sFBK12)的編碼基因為如下1)_5)中任一所述的DNA分子1)序列表中序列1自5，末端第197-1492位核苷酸所示的DNA分子；2)序列表中序列1自5，末端第148-1589位核苷酸所示的DNA分子；3)序列表中序列1所示的DNA分子；4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關的DNA分子；5)與1)或2)或3)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有 98%或至少具有99%同源性且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關的DNA分子。上述序列表中的序列1由1899個核苷酸組成，其⑶S區為自5，末端第197-1492
位核苷酸。所述嚴格條件可為在0. IXSSPE(或0. 1XSSC)，0. 1% SDS的溶液中，在65°C下雜交并洗膜。含有所述編碼基因的重組載體、重組菌、轉基因細胞系或表達盒也是本發明保護的范圍。所述重組載體的啟動子為玉米泛素啟動子WDiPro。所述重組載體通過如下步驟獲得1)將用I^stI和BamHI酶切質粒KSP9得到的大小約為2. Okb的小片段插入 PUC19的PstI和BamH I識別位點間獲得中間載體pUC19+UbiPro ；再用SacI和EcoRI 酶切PBI221得到的小片段插入中間載體pUC19+UbiPro的McI和EcoRI識別位點間， 獲得中間載體pUC19+UbiPro+Noster ；再用EcoRI部分酶切和HindIII完全酶切中間載體pUC19+UbiPro+Noster得到的大小約為2. 3kb的片段插入pCAMBIA1301的EcoR I和 HindIII識別位點間，構成中間載體PUN1301 ；2)將0sFBK12蛋白的編碼基因插入中間載體pUN1301的KpnI和BamHI識別位點
間，獲得重組載體。擴增所述編碼基因全長或任一片段的引物對；所述引物對如下所示一條引物序列如序列表中序列3所示，另一條引物序列如序列表中序列4所示。本發明的另一個目的是提供一種培育種子粒型改良的轉基因植物的方法，是將所述的編碼基因導入目的植物得到種子粒型改良的轉基因植物。所述粒型改良為如下1) -3)中的至少一種1)所述轉基因植物的種子粒長大于所述目的植物；2)所述轉基因植物的種子粒寬大于所述目的植物；3)所述轉基因植物的種子的粒重大于所述目的植物。所述粒重為百粒重。所述編碼基因是通過所述重組載體導入所述目的植物中。所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物，所述單子葉植物優選為水稻，所述水稻的品種尤其優選為中花10號。本發明的實驗證明，將粳稻中花10號中克隆到的基因0sFBK12導入水稻中花十號獲得過過量表達0sFBK12基因的水稻，同樣將基因0sFBK12的正義、反義片段導入水稻中花十號獲得轉正義、反義0sFBK12水稻，發現過量表達0sFBK12基因的水稻和轉正義、反義 0sFBK12水稻在種子粒型和粒重上發生明顯的改變；過表達水稻的種子粒長、種子粒寬、種子的百粒重均大于所述目的植物。證實0sFBK12基因可以控制水稻粒型和粒重的變化，為將來育種提供基礎。
圖IRT-PCR方法擴增0sFBK12的全長cDNA圖2RT-PCR方法擴增0sFBK12的用于RNAi構建的部分cDNA圖3超表達載體的物理圖譜圖4RNAi載體構建部分示意5轉基因水稻的熒光實時定量PCR鑒定圖6轉基因水稻的表型觀察
具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。實施例1、轉OsFBK 12水稻的獲得l、0sFBK12 的克隆根據數據庫分析的結果設計引物，5'端引物；5' -CGG GAT CCT CAG MG AGC AGG AGGAA-3‘(下劃線序列為BamHI位點；序列3)，3'端引物5' -GGG GTA CCG CTA CGG AGCATC AGG A-3'(下劃線序列為KpnI位點；序列4)，提取水稻中花十號三葉期幼苗總RNA 為模板，采用RT-PCR方法擴增到1296bp片段。具體操作過程如下1)植物總RNA的提取選取三葉期水稻中花十號(Oryza sativa L. cv ZhonghualO)(李梅芳，水稻花培品種-中花10號，農業科技通訊，1998年第1期第沈頁。公眾可從中國科學院植物研究所獲得。)的幼苗IOOmg為材料，在液氮中研磨，將液氮中研碎的凍干粉轉入到含ImlTrizol試劑(Invitrogen)的1. 5ml離心管中，充分混勻；25°C放置 5分鐘；每管中加入0. 2ml新鮮氯仿，劇烈振搖15秒，25°C溫育2-3分鐘；12, OOOrpm, 4 離心15分鐘；把上清的水相0. 5ml轉移到一個新的1. 5ml離心管中，加0. 5ml異丙醇，室溫放置10分鐘使RNA沉淀；12，OOOrpm, 4°C，離心10分鐘；去上清，將RNA沉淀用Iml 75%乙醇清洗2次，超凈臺吹至半干；用50 μ lDEPC-ddH20重懸沉淀，60°C水浴10分鐘，以溶解RNA 沉淀。將此RNA溶液分裝后-70°C保存，備做反轉錄的模板。2) RT-PCR 取1 μ 1上述RNA溶液，用DEPC_ddH20稀釋100倍，利用600nm光吸收在分光光度計測定RNA濃度。參照RT-PCR試劑盒(!Iomega)說明書，根據RNA的定量結果， 取2 μ g上述RNA溶液，Wl.Oyg Oligo dT引物，用DEPC_ddH20補充至15 μ 1，混勻后70°C 變性5分鐘，冰浴5分鐘。短暫離心后，加入25 μ 1反轉錄混合物(5 μ 1 M-MLV5XReaction Buffer, 6 μ 1 dNTP Mixture (2. 5mM), 1 μ 1 M-MLV Reverse Transcriptase^. 5 μ 1 RNase Inhibitor, 12. 5 μ 1 DEPC_ddH20)。混勻后，42°C水浴1小時完成反轉錄過程；75°C水浴10 分鐘使反轉錄酶失活，得到含有第一鏈cDNA的混合物。取1 μ 1上述第一鏈cDNA作為PCR的模板，按以下體系進行進行PCR反應 0.2 μ ILA Taq (5U/μ 1) UO μ 1 2 X GC buffer, 1. 8μ 1 dNTPs,0. 5μ 1 5'端引物(10 μ M， 序列3)，0.5μ1 3'端引物(10μΜ，序列4)，加ddH20終體積20μ 1。引物序列如前，PCR 程序為94°C預變性3分鐘后進入PCR循環，循環參數為94°C 30秒變性一58°C 30秒復性 —720C 1分鐘延伸，30個循環后在72°C繼續合成10分鐘。擴增的PCR產物經過0.8%的瓊脂糖凝膠電泳分離，結果如圖1所示，從圖中可以看出，得到分子量大約1. 31Λ的條帶，用AxyPr印DNA凝膠回收試劑盒(AxygenBiosciences)回收該片斷得到20 μ 1回收產物。進行測序分析，結果為該PCR產物具有序列表中序列1的自5’末端第148-1589位核苷酸序列，序列1的CDS區為序列1自5’末端的第197-1492位核苷酸。該PCR產物的基因命名為0sFBK12，0sFBK12編碼的蛋白命名為 0sFBK12，該蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列2。2、表達載體pUN-FBK12的獲得1)含有 0sFBK12 的 cDNA 序列的載體 pTE_FBK12取3. 5μ 1上述PCR產物的回收產物，加入1μ l(3U/y 1)T4-DNA連接酶、5μ 1 2X 連接酶緩沖液、0. 5μ l(50mg/ml)pGEM-T fesy載體(Promega)4°C連接過夜，得到連接產物， 用連接產物轉化大腸桿菌DH5 α感受態細胞，經含羧芐青霉素的抗性平板篩選得到含有重組質粒大腸桿菌菌株。采用堿裂解法從該菌株中分離提取重組質粒，選用PGEM-T fesy載體上的T7和SP6啟動子序列為引物測序，測序結果為該重組質粒為將序列1的自5 ‘末端的第148-1589位核苷酸插入pGEM-T Easy載體得到，將該重組質粒命名為pTE_0sFBK12。2)、OsFBK 12超表達載體的構建第一步剪取約0. 2g玉米幼苗，置于液氮中研磨；然后加入800 μ L新配制的提取緩沖液(含 0. IM Tris-HCl ρΗ8· 0，50mM EDTA, 0. 5M NaCl，1 % SDS ^P 1 % β -巰基乙醇)， 劇烈振蕩使其全部懸浮；65°C水浴30分鐘，每5分鐘顛倒混勻一次；然后加入250 μ L預冷的5Μ乙酸鉀，立即顛倒混勻，冰浴5分鐘；加入等量酚/氯仿，抽提一次，12000rpm離心5分鐘；收集上清，加入0. 6倍體積的異丙醇沉淀DNA，室溫放置40分鐘；4°C 12000rpm離心15 分鐘，棄上清；沉淀用70%、100%乙醇各洗一次；干燥后，溶于20 μ L含100 μ g/mL RNaseA 的ddH20中，得到玉米基因組DNA。第二步取上述玉米基因組DNA溶液2μ L作為模板，在帶有HindIII識別位點的5 '引物(GGAAGCTTCTGCAGTGCAGCGTGACCCGG)和帶有BamHI識別位點的3 '引物 (CGGGATCCAAGTAACACCAAACAACAGGG)為引物，進行 PCR 擴增，PCR 反應條件為先 94°C 3 分鐘；再94°C 45秒，62°C 45秒，72°C 2分鐘，共35個循環，最后72°C 10分鐘。反應結束后， 對PCR產物進行0. 8%瓊脂糖凝膠電泳檢測，表明得到長度為1. 98kb的擴增片段，與預期結果相符，回收該PCR產物，再用限制性內切酶Hind III和BamHI雙酶切后回收，得到片段經測序，該PCR產物具有序列表中序列5自5’末端的第1-1986位核苷酸，為帶有粘性末端的玉米泛素啟動子⑴biPro)。(玉米泛素啟動子(WDiPro)也可以人工合成獲得。)第三步用限制性內切酶&ic I和EcoR I將Noster poly A終止序列從質粒載體 PBI 121(北京拜爾迪生物技術有限公司產品貨號MP-091)上切下，插入到載體pUC19 (北京百泰克生物技術有限公司目錄號DP7801)的Mc I和EcoR I識別位點間，得到重組載體,命名為pUC19-Noster。再用限制性內切酶HindIII和BamHI雙酶切pUC19_Noster，瓊脂糖凝膠電泳檢測后，回收線性化的載體大片段，并將該回收片段與第二步中獲得的帶有粘性末端的玉米泛素啟動子(WDiPro)相連，得到重組載體，命名為pUN19。第四步用限制性內切酶EcoRI部分酶切和HindIII完全酶切從第三步購建的重組載體PUN19切下包含W^iPro和Noster的長度約為2. 3kb的片段，將該片段克隆入質粒載體pCAMBIA1301(Center for the Application of Molecular Biology to International Agriclture, www. cambia. org)的EcoRI和HindIII位點處，得到重組載體，命名為 PUN1301。
3)表達載體pUN-FBK12的獲得用限制性內切酶KpnI和BamHI對B步驟獲得的質粒pUN1301進行雙酶切，酶切體系為質粒 10μ l、10x 酶切緩沖液 5μ 1、ΚρηΙ 1 μ 1 (10U/μ 1)、BamHI 0· 8 μ 1 (IOU/μ 1)，加 ddH20補充反應體系至50μ 1，37°C酶切4小時。用瓊脂糖凝膠電泳對酶切產物進行分離，用 AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒(Axygen Biosciences)回收線性化的pUN1301大片段，溶于 20 μ 1 ddH20 中。先用KpnI 酶對上述獲得pTE_0sFBK12進行部分酶切，酶切體系為質粒10 μ 1， 酶切緩沖液5 μ 1、KpnI 1 μ 1 (IOU/ μ 1)、加ddH20補充反應體系至50 μ 1，37°C酶切4個小時；再加入BamHI 0. 2 μ 1 (IOU/ μ 1)，37°C酶切20分鐘。用瓊脂糖凝膠電泳對酶切產物進行分離，用AxyPr印DNA凝膠回收試劑盒回收1300bp的0sFBK12 cDNA片段。將10 μ 1上述回收的1300bp的0sFBK12cDNA溶液、6 μ 1回收的載體pUN1301大片段溶液，與2 μ 1 (3U/ μ 1) T4DNA連接酶和2 μ 1 IOx連接酶緩沖液混和，16°C連接16小時， 得到的連接產物轉化大腸桿菌DH5 α感受態細胞，經含卡那霉素的抗性平板篩選得到陽性克隆。提取陽性克隆中的質粒進行測序鑒定，結果為該質粒為將序列表序列1的自5’末端第148-1589位核苷酸插入到載體pUN1301的KpnI和BamHI的識別位點間得到的，且啟動子玉米泛素啟動子⑴biPro)、基因和終止子的結構正確，將該質粒命名為pUN-FBK12，構建成功植物表達載體，該表達載體的物理圖譜示意圖如圖3所示。3、含有0sFBK12正、反義片段的RNAi載體pTCK_FBK12的獲得正反義片段的獲得設計分別含有酶切點的上游引物FBK12F(5' -GG GGT ACC ACTAGT AGT ATG ACA AGC AAA ACA-3，下劃線序列為KpnI-SpeI位點)以及含有酶切點的下游引物 FBKUR(5 ‘ -CG GGA TCC GAG CTC TCA GGA CTG AAG CAA TT-3，下劃線序列為 BamHHacI位點)，提取水稻中花十號(Oryza sativa L. cv Zhonghua 10)的幼苗的RNA 反轉錄獲得的第一鏈cDNA作為PCR的模板，按以下體系進行PCR反應0.2μ1 LA Taq, 10 μ 1 2XGC buffer, 1. 8μ 1 dNTP，0. 5 μ 1 上游引物 FBK12F (10 μ Μ)，0. 5 μ 1 下游引物卩81(1跗(101^)，加(1(1 20終體積2(^1。PCR程序為94°C預變性3分鐘，進入PCR循環，循環參數為94°C 30秒變性一580C 30秒復性一72°C 1分鐘延伸，30個循環后在72°C繼續合成10分鐘。用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產物進行分離，得到376bpPCR產物(圖幻，經過測序，該PCR產物具有序列表中序列1自5’末端的第1M2-1578位核苷酸。取10 μ 1上述 PCR產物通過Spel/Mcl雙酶切，獲得長度為354bp的正義0sFBK12片段；另取10 μ 1上述 PCR產物通過BamHl/Kpnl雙酶切，獲得長度為366bp的反義的0sFBK12片段，將獲得的正、 反義片段與RNAi載體的連接。具體方法如下以下關于質粒的提取、連接、對大腸桿菌的轉化以及陽性克隆的篩選均參照實驗2 中相應的方法。RNAi 載體的獲得用 Spel/SacI 酶切載體質粒 pTCK303(A Practical Vector for Efficient Knockdown of Gene Expression in Rice. Wang et al. ,2004, Plant Mol Biol Rep 22 :409_417，公眾可從中國科學院植物研究所獲得。)，用AxyPr印DNA凝膠回收試劑盒回收PTCK303載體片段。將上述獲得的正義的0sFBK12片段與上述回收的PTCK303載體片段連接，將連接產物轉化大腸桿菌得到轉化子，將轉化子提取的質粒經Spel/SacI雙酶切，獲得長度為3Mbp片段的質粒為含有0sFBK12正義片段的陽性質粒，命名為pTCK303-正義FBK12。將pTCK303_正義FBK12，再經BamHI/Kpnl雙酶切，將回收片段與上述獲得的反義的0sFBK12片段連接，將連接產物轉化大腸桿菌得到轉化子。提取轉化子的質粒為模板，用上游引物FBK12F1(5' -ATG ACA AGC AAA ACA-3')以及下游引物 FBK12R1(5' -TCA GGA CTG AAG CAA TT_3')為模板，按以下體系進行 PCR 反應0. 2 μ 1 LA Taq, 10 μ 1 2 X GC buffer, 1. 8μ 1 dNTP，0· 5 μ 1 上游引物 FBK12F1 (10 μ Μ)，0· 5 μ 1 下游引物FBK12R1 (10 μ Μ)，加ddH20終體積20 μ 1。PCR程序為94°C預變性3分鐘，進入PCR 循環，循環參數為94°C 30秒變性一580C 30秒復性一72°C 1分鐘延伸，30個循環后在72°C 繼續合成10分鐘。用瓊脂糖凝膠電泳對PCR產物進行分離，得到348bp的片段。提取轉化子的質粒，用限制性內切酶Mel和BamHI進行雙酶切，酶切體系為質粒 6 μ 1、IOx 酶切緩沖液 5 μ 1、SacI 1 μ l(10U/y 1)、BamHI 0. 8 μ l(10U/y 1)，加 ddH20 補充反應體系至50μ 1，37°C酶切4小時。用瓊脂糖凝膠電泳對酶切產物進行分離。得到1200bp 的片段。將上述PCR鑒定得到348bp的片段且酶切鑒定得到1200bp的片段的質粒為陽性質粒，命名為PTCK-FBK12。進一步測序驗證pTCK-FBK12，證實pTCK_FBK12的結構是在 PTCK303載體的Spel/SacI間插入序列表中的序列1自5’末端的第1M2-1578位核苷酸和在PTCK303載體的BamHI/Kpnl間插入序列表中的序列1自5’末端的第1M2-1578位核苷酸的反向互補序列。從該載體的部分結構示意圖(見圖4)可以看出，在該載體中0sFBK12 正、反義片段中間由500bp左右的水稻的內含子序列隔開。上述驗證結果表明，pTCK-FBK12為含有0sFBK12正、反義片段的RNAi載體。4、轉0sFBK12水稻的獲得遺傳轉化參照電激儀(EasyJecT Plus電激儀，英國EquiBio公司)操作指南，分別將上述獲得的載體PUN-FBK12和pTCK-FBK12分別用電擊法轉化農桿菌 EHA105 (Biovector Co. , LTD產品貨號Biovec-11)菌株，經含卡那霉素的抗性平板篩選分別得到的超表達工程菌和RNAi工程菌，將超表達工程菌提取質粒，經KpnI和BamHI 酶切得到1300bp片段的質粒，其對應的工程菌為陽性的超表達工程菌，命名為EHA105/ PUN-FBK12 ；將RNAi工程菌提取質粒，經&icl和BamHI酶切得到1200bp片段的質粒，其對應的工程菌為陽性RNAi工程菌，命名為EHA105/pTCK-FBK12。水稻陽性苗的篩選分化將上述獲得的EHA105/pUN-FBK12和EHA105/pTCK_FBK12 分別導入中花10號水稻(Oryza sativa L. cv Zhonghua 10)的愈傷組織，再分別將導入 EHA105/pUN-FBK12和EHA105/pTCK_FBK12的愈傷組織用含300mg/L頭孢霉素的無菌水洗滌 4-5遍，無菌濾紙吸干后轉至N6D2S1培養基上，篩選一代。兩周后，轉移至N6Dj2培養基上篩選二代O周/代)。取出經過3代篩選生長旺盛的抗性愈傷組織，轉移至預分化培養基上， 在分化培養箱(12小時光周期，白天，夜晚25°C )中培養7天；然后轉移至分化培養基上，在分化培養箱中培養至產生再生苗。再生的苗在生根壯苗培養基上生根壯苗。待小苗長至10厘米左右時，打開容器封口膜，煉苗2-3天，然后將小苗移入人工氣候室栽培，分別獲得15株TO代轉pUN-FBK12水稻(即轉0sFBK12水稻)和65株TO代轉pTCK_FBK12水稻(即轉正、反義OsFBK 12水稻)。表1水稻組織培養和轉化過程中使用的培養基及其成分
權利要求
1.一種蛋白質，是如下1)或幻的蛋白質1)由序列表中的序列2的氨基酸殘基序列組成的蛋白質；2)將序列表中的序列2氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關由1)衍生的蛋白質。
2.權利要求1所述蛋白質的編碼基因。
3.根據權利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述編碼基因為如下1)-5)中任一所述的DNA分子1)序列表中序列1自5’末端第197-1492位核苷酸所示的DNA分子；2)序列表中序列1自5’末端第148-1589位核苷酸所示的DNA分子；3)序列表中序列1所示的DNA分子；4)在嚴格條件下與1)或幻或幻限定的DNA序列雜交且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關的DNA分子；5)與1)或2)或3)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98% 或至少具有99%同源性且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關的DNA分子。
4.含有權利要求2或3所述編碼基因的重組載體、重組菌、轉基因細胞系或表達盒。
5.擴增權利要求2或3所述編碼基因全長或任一片段的引物對；所述引物對如下所示一條引物序列如序列表中序列3所示，另一條引物序列如序列表中序列4所示。
6.一種培育種子粒型改良的轉基因植物的方法，是將權利要求2或3所述的編碼基因導入目的植物得到種子粒型改良的轉基因植物。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述粒型改良為如下1)-3)中的至少一種1)所述轉基因植物的種子粒長大于所述目的植物；2)所述轉基因植物的種子粒寬大于所述目的植物；3)所述轉基因植物的種子的粒重大于所述目的植物。
8.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于所述粒重為百粒重。
9.根據權利要求6-8中任一所述的方法，其特征在于權利要求2或3所述編碼基因是通過權利要求4所述重組載體導入所述目的植物中。
10.根據權利要求6-9中任一所述的方法，其特征在于所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物，所述單子葉植物優選為水稻。
全文摘要
本發明公開了一種與植物種子大小相關的蛋白及其編碼基因與應用。本發明提供的蛋白質，是如下1)或2)的蛋白質1)由序列表中的序列2的氨基酸殘基序列組成的蛋白質；2)將序列表中的序列2氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物種子粒型或種子長或種子寬或種子重相關由1)衍生的蛋白質。本發明的實驗證明，將來OsFBK12導入水稻中獲得過表達水稻；過表達水稻的種子粒長、種子粒寬、種子的百粒重均大于所述目的植物。證實轉OsFBK12基因可以控制水稻粒型和粒重的變化，為將來育種提供基礎。
文檔編號C12N1/19GK102336824SQ201010239549
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月27日 優先權日2010年7月27日
發明者徐云遠, 種康, 陳娜, 陳苑 申請人:中國科學院植物研究所