板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為，將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。本發明首次發現板栗鞣花酸鞣質具有較強的抗氧化性，極強的還原力，特別適用于羥基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亞硝酸鹽的還原，另外，板栗鞣花酸鞣質對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物具有較強的抑菌活性。
【專利說明】板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及化學領域和微生物學領域，具體地說，涉及板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用。
【背景技術】
[0002]板栗(Castanea mollissima Blume)屬山毛棒科(Fagacene)植物，為落葉喬木。栗蓬是栗子的外刺苞，栗花為板栗雄花序，栗葉為板栗樹葉。眾多研究表明，栗蓬、栗花或栗葉中富含鞣花酸鞣質等植物多酚類物質。植物多酚是一類多羥基化合物，是一種天然的無毒的抗氧化劑，試驗表明其具有較強的清除自由基和抗氧化能力，并對大腸桿菌有抑制作用，具有一定的藥理作用。已經廣泛應用于食品、藥品和日用品。因此，對栗蓬、栗花或栗葉中鞣花酸鞣質進行制備，將其用于飼料工業原料、食品工業原料、化工業原料和醫藥產品，將具有廣闊的開發和應用前景；在使板栗廢棄物得到充分利用，減少環境污染的同時，也提高板栗的附加值，帶動農村經濟發展，對我國循環經濟的發展，建設資源節約型、環境友好型社會具有十分重要的意義。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用。
[0004]為了實現本發明目的，本發明首先提供板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用，其中，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。
[0005]本發明還提供板栗鞣花酸鞣質在制備還原劑中的應用，其中，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。
[0006]所述還原劑用于羥基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亞硝酸鹽的還原。
[0007]本發明進一步提供板栗鞣花酸鞣質在制備抑菌劑中的應用，其中，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。
[0008]所述抑菌劑用于抑制大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物。
[0009]具體地，上述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末(粉末粒度為20-40目，優選20目)中加入10?40mL乙醇水溶液，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，于40°C?50°C (優選40°C),40KHz超聲提取30?40min(優選30min)后，于50°C?80°C(優選50°C或80°C)進行2次水浴回流提取，每次提取0.5~1.5h(優選0.5h、lh或1.5h)，濃縮濾液于-50°C~_60°C(優選-50°C、_56°C或 _60°C)冷凍干燥 15-25h (優選 15h、20h 或 25h)。
[0010]其中，使用乙醇水溶液進行水浴回流，所述乙醇水溶液中乙醇的質量百分含量為5%~45%(優選15%、30%或45%)。優選使用與初始加入的乙醇水溶液等體積的乙醇水溶液進行水浴回流。
[0011]本發明具有以下優點:
[0012]本發明首次提供板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑、還原劑和抑菌劑中的用途，并首次發現板栗鞣花酸鞣質具有較強的抗氧化性，極強的還原力，特別適用于羥基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亞硝酸鹽的還原，另外，板栗鞣花酸鞣質對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物具有較強的抑菌活性。
[0013]我國是世界板栗生產大國，隨著板栗產量的持續增長和板栗加工產業的不斷發展，使得生產過程中栗蓬、栗花和栗葉等廢棄物急劇增加。對這些廢棄物的傳統處理方法通常為燃燒和自然堆棄腐爛，這不但給板栗栽培區域環境造成了不良的影響，同時也形成了資源浪費。板栗廢棄物栗花、栗蓬、栗葉鞣花酸鞣質在氧化劑和抗菌劑的開發中具有潛在的利用價值，將這些廢棄資源加以開發利用，使其變廢為寶，利用從板栗廢棄物中提取的天然抗氧化性物質，不僅可以延長食品的貯存期、貨架期，而且有助于保護環境，更有助于提高食品安全性，避免了化學防腐殺菌劑的濫用及危害。
[0014]本發明通過對板栗廢棄物加以充分利用，一方面減少環境污染，另一方面使其變廢為寶，提高板栗的附加值，帶動農村經濟發展。為推動我國循環經濟的發展，建設資源節約型、環境友好型社會具有十分重要的經濟價值和社會意義。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1為本發明實施例4中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物和VC的還原力比較結果。
[0016]圖2為本發明實施例4中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物與VC對.0H清除作用的比較結果。
[0017]圖3為本發明實施例4中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物與VC對O2- ?清除作用的比較結果。
[0018]圖4為本發明實施例4中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物與VC對DPPH ?清除作用的比較結果。
[0019]圖5為本發明實施例4中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物與VC對亞硝酸鹽清除作用的比較結果。
[0020]圖6A-圖6D為本發明實施例5中板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液的抑菌效果比較；其中，圖6A為大腸桿菌，圖6B為枯草芽孢桿菌，圖6C為米曲霉，圖6D為黑曲霉。
[0021]圖7為本發明實施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物水溶液處理土豆的防腐試驗結果。
[0022]圖8為本發明實施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物水溶液處理茄子的防腐試驗結果。[0023]圖9為本發明實施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物水溶液處理ii腐的防腐試驗結果。
[0024]圖10為本發明實施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物水溶液處理豬肉的防腐試驗結果。
[0025]圖11為板栗鞋花酸HPLC高效液相色譜色譜圖；其中，a為鞋花酸標準品16 U g/niL ；b為栗葉樣品；c為栗花樣品；d為栗包樣品；EA:鞋花酸。
【具體實施方式】
[0026]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段，所用原料均為市售商品。
[0027]實施例1板栗鞣花酸鞣質的制備
[0028]將板栗栗蓬、栗花或栗葉陰干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末(粉末粒度為20目)中加入乙醇質量百分含量為30%的乙醇水溶液30mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，于40°C，40KHz超聲提取30min后，于80°C進行2次水浴回流提取，每次提取lh，濃縮濾液于_56°C冷凍干燥20h。其中，每次回流使用乙醇質量百分含量為30%的乙醇水溶液30mL進行。
[0029]實施例2板栗鞣花酸鞣質的制備
[0030]將板栗栗蓬、栗花或栗葉陰干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末(粉末粒度為30目)中加入乙醇質量百分含量為15%的乙醇水溶液10mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，于45°C，40KHz超聲提取35min后，于60°C進行2次水浴回流提取，每次提取1.5h，濃縮濾液于-60°C冷凍干燥25h。其中，每次回流使用乙醇質量百分含量為15%的乙醇水溶液IOmL進行。
`[0031]實施例3板栗鞣花酸鞣質的制備
[0032]將板栗栗蓬、栗花或栗葉陰干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末(粉末粒度為20目)中加入乙醇質量百分含量為45%的乙醇水溶液40mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，于50°C，40KHz超聲提取40min后，于50°C進行2次水浴回流提取，每次提取0.5h，濃縮濾液于_50°C冷凍干燥15h。其中，每次回流使用乙醇質量百分含量為45%的乙醇水溶液40mL進行。
[0033]實施例4板栗鞣花酸鞣質抗氧化性的研究
[0034]1、還原力的測定
[0035]由于Fe2+比Fe3+更易被生物體吸收，而還原劑能夠將鐵氰化鉀還原成亞鐵氰化鉀，亞鐵氰化鉀再與Fe3+作用生成普魯士藍，在700nm波長測定其吸光度值，以檢測剩余的鐵氰化鉀，與標準液的差值越大表示其還原力越高。
[0036]K3 [Fe (CN) 6] +R —K4Fe (CN) 6
[0037]鐵氰化鉀亞鐵氰化鉀
[0038]K4Fe (CN) 6+FeCL3 — Fe4 [Fe (CN) 6] 3
[0039]亞鐵氰化鉀普魯士藍
[0040]取一定濃度板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液ImL (實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液)與2.5mL磷酸緩沖液(pH值6.6)混合后加入1%鐵氰化鉀2.5mL,混合后于50°C恒溫20min，然后加入10%三氯乙酸2.5mL充分混合后，于3000r/min離心IOmin,取上清液2.5mL加去離子水2.5mL和
0.1%三氯化鐵0.5mL，混合后靜置lOmin，在700nm測定吸光度，吸光度越高，還原力越強，以同樣濃度的VC做為對照。結果如圖1所示，不同濃度鞣花酸鞣質提取物都具有一定的還原作用，隨著濃度的增高，還原力也呈遞增趨勢。當濃度小于等于0.15mg/mL時，隨著濃度梯度的增加其還原力呈極顯著增加，當濃度大于0.15mg/mL時，還原力增加不顯著，并且其還原力高于同樣濃度的VC溶液。
[0041]2、.0H清除率的測定
[0042]羥基自由基(? OH)是最活潑、毒性最大的自由基，它可與活細胞中的任何分子發生反應，引發組織細胞病變，導致各種疾病發生和加速機體衰老，且反應速度非常快。該方法利用的是Feton反應的Fe (II )-H2O2體系產生的羥基自由基(^OH),羥基自由基具有很高的反應活性，存在時間短，若在反應體系中加入水楊酸就能有效地捕捉? 0H，并產生有色產物(紫色)，該產物在510nm處有強吸收，在反應體系中加入樣品抗氧化劑后，通過測定510nm處吸光度值的變化即可測定樣品清除活性氧羥自由基的能力。
[0043]取若干支比色管，加入9mmol/L FeSO4溶液lmL,9mmol/L水楊酸-乙醇溶液2mL,不同濃度的鞣花酸鞣質提取物溶液(實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬鞣花酸鞣質提取物溶液)2mL，最后加入8.8mmol/L H2O2溶液2mL啟動反應，于室溫下反應lh，離心，以去離子水調零，在510nm處測定樣品的吸光度A，按下式計算其清除率:
[0044]清除率S%= [A0- (A-A1) ] /A。X 100%
[0045]式中: [0046]Acr空白對照液的吸光度；以蒸餾水代替顯色劑的吸光度；
[0047]A-樣品組的吸光度；
[0048]A1-樣品溶液本身的吸光度，以蒸餾水代替顯色劑的吸光度。
[0049]結果如圖2所示，當濃度小于等于1.0Omg/mL時，鞋花酸鞋質對? OH的清除率均達到極顯著水平，濃度為1.0Omg/mL時，VC的清除率為77.07%,栗蓬為99.12%，栗花為99.62%，栗葉為99.36%鞣花酸鞣質對? OH的清除率顯著高于VC。
[0050]3、對02_ ?清除率的測定
[0051]采用鄰苯三酚氧化法測定。在堿性條件下，鄰苯三酚發生自氧化反應，生成超氧自由基(02_ ?)和中間產物，該中間產物在320nm波長下有一特征吸收峰，當加入樣品抗氧化劑時，鄰苯三酚自氧化過程受阻，02_ ?在生成時也受到抑制，溶液在320nm處吸收峰減弱，故通過測定吸收值變化可以推斷樣品對02_ ?的清除作用。
[0052]向5.6ml的50mmol/L的Tris-HCL緩沖溶液(pH值8.2)中分別加入0.2ml不同濃度的板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液(實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液)、VC溶液，于25°C保溫lOmin，然后加入
0.2mL, 25°C預溫的60mM的鄰苯三酚，總體積6mL，準確反應4min后，加入IOmoI/L鹽酸ImlL終止反應，在320nm處測定其吸光度值A，空白實驗以等量去離子水代替抗氧化劑溶液，測定其吸光度值Al，用Tris-HCL緩沖溶液5.6mLU0mol/LHCL0.2mL及抗氧化劑溶液0.2mL調零點A0，以扣除試樣本身顏色的影響，按下式計算清除率。
[0053]清除率S%= [A0- (A-A1) ] /AgX 100%[0054]結果如圖3所示，當濃度小于等于1.00mg/mL時，對02_ ?的清除率梯度間達到顯著水平，濃度大于1.0Omg/mL時，對02_ ?的清除率不顯著。當濃度為1.0Omg/mL時，VC對02_ ?的清除率達到48.21%，栗蓬的清除率為85.28%，栗花的清除率為90.33%，栗葉的清除率為88.13%，鞣花酸鞣質對02_ ?的清除率顯著高于VC。
[0055]4、對DPPH ?抑制率的測定
[0056]DPPH ?在有 機溶劑中由于苯環的共軛和位阻及硝基的吸電子作用是一種穩定的自由基，呈紫色，在517nm處有強吸收峰，在自由基清除劑存在時，DPPH ?與給出的氫相結合，孤電子被配對，使其顏色由紫色變為淡黃色，吸光度減少，反應結束后達到穩定，因此，可通過在此波長處吸光度的測定，檢測自由基的清除情況，來評價試驗樣品的抗氧化能力，大小由抑制率表示。
[0057]精密吸取不同質量濃度的板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液(實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液)0.2mL，加入5X 10_5mOl/L的DPPH ?溶液8mL，搖勻后放置30min，以樣品溶液作對照，測定517nm處的吸光度值A，同時測定樣品溶液在517nm處的吸光度值Atl, DPPH ?溶液在517nm處的吸光度值A1，按下式計算其抑制率:
[0058]抑制率S%= [A0- (A-A1) ] /A0 X 100%
[0059]A-樣品組與DPPH ?溶液混合后的吸光值；
[0060]A「樣品組的吸光值；
[0061]A0-DPPH ?溶液的吸光值。
[0062]結果如圖4所示，對DPPH ?有很好的清除作用，開始時隨著提取物用量的增大，提取物對DPPH ?的清除作用迅速增強。當濃度小于等于0.075mg/mL時，對DPPH ?的清除率梯度之間達到顯著水平，當濃度大于0.075mg/mL時，則不顯著。當提取物用量達到0.075mg/mL時，VC對DPPH ?的清除率為61.03%,栗蓬的清除率為90.96%，、栗花的清除率為92.47%，栗葉的清除率91.79%，鞣花酸鞣質對DPPH ?的清除率顯著高于VC。
[0063]5、對亞硝酸鹽清除率的測定
[0064]亞硝酸鹽與胺類化合物，在酸性條件下或細菌作用下容易形成亞硝胺類化合物，亞硝胺類化合物具有強烈的致癌作用。亞硝酸鹽在弱酸性條件下，與對氨基苯磺酸重氮化，再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色絡合物，紅色絡合物在544nm處有一強吸收峰，當加入樣品抗氧化劑時，重氮生成過程受阻，溶液在544nm處吸收峰減弱，故通過測定吸收值變化可以推斷樣品對亞硝酸鹽的清除作用。
[0065]
WO- + H2N-O-SO3H^ Nj-O-SO3H + H2O
對氨基苯磺酸重氮
t_偶合
N2-O-SO3H +鹽酸萘乙二胺 ^^絡合物(紅色)
重氮
[0066]取已知濃度的板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液(實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液)ImL于20mL的刻度試管中，加入5 u g/mL的NaNO2標準溶液1.5mL,加入檸檬酸-磷酸緩沖溶液(pH值3.0)
2.5mL,37°C下反應30min,立即加入0.4%對氨基苯磺酸溶液ImL,混合,精置3_5min后,力口A0.5mL0.2%鹽酸萘乙二胺溶液，加去離子水6mL，混勻，靜置15min，以5mL提取液為空白，在544nm處測定吸光度,按下式計算清除率:
[0067]清除率S%= [A。-(A-A1) ]/AtlX 100%
[0068]式中Atl-樣品組的吸光值；
[0069]A1-NO2-的溶液吸光度；
[0070]A-樣品組的吸光度。
[0071]結果如圖5所示，隨著提取物用量的增大，對亞硝酸鹽的清除率增加。當濃度小于等于1.00mg/mL時，各濃度梯度之間對亞硝酸鹽的清除率達到極顯著水平，當濃度大于1.0Omg/mL時，則不顯著。當濃度等于1.0Omg/mL時，VC對亞硝酸鹽的清除率為72.39%，栗蓬的清除率為92.00%，栗花的清除率為93.21%，栗葉的清除率為93.07%。
[0072]實施例5板栗鞣花酸鞣質抑菌性的研究
[0073]1、培養基、菌種活化及菌懸液的制備
[0074]營養肉汁瓊脂培養基:蛋白胨10g、牛肉膏3g、瓊脂15g、NaCL5g、蒸餾水1L，調pH值7。
[0075]Czapek' s 瓊脂培養基:蔗糖 30g、NaN033g、MgS04 *7H200.5g、KCL0.5g,K2HPO4L Og、FeSO4 *4H200.0lg、瓊脂15g、蒸餾水1L，調pH值6.0-6.5，121°C滅菌20min。將所有供測試
的菌種接入相應的試管斜面培養，每種接多支重復。細菌置37°C恒溫培養箱培養24h ;霉菌置25-28 °C恒溫培養箱培養24h。
[0076]細菌用營養肉汁瓊脂培養基，將供試菌種分別接種到裝有對應培養基的試管內，進行擴大培養。細菌在37°C培養24h。取活化好的菌種斜面，用無菌生理鹽水配制成I X IO6?10 X IO6CFU的細菌菌懸液，備用。
[0077]真菌用Czapek' s瓊脂培養基,將供試菌種分別斜面接種到Czapek' s瓊脂培養基中，在28°C培養72h，由于真菌生長方式為輻射狀生長，所以真菌抑菌可以從先制備好的真菌培養基中直接取菌片試驗。
[0078]2、抑菌試驗
[0079]抑菌實驗其流程如下:
[0080]制備濾紙片一滅菌一浸泡于不同濃度板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液(實施例1中濃縮濾液未經冷凍干燥即為板栗栗蓬、栗花或栗葉鞣花酸鞣質提取物溶液)—貼入帶菌平皿一測定MIC —與防腐劑比較一防腐試驗。
[0081]將吸水性強的濾紙用打孔器打成直徑10_的圓形小紙片，分裝于干凈的小培養皿中，干熱滅菌(160°C，2h)后，備用。將提取物溶于無菌水中，制備成質量分數為6%的溶液。用無菌鑷子將濾紙片放入以上溶液中，另取濾紙片放入苯甲酸鈉和無菌水中作對比空白試驗，分別記做CKl和CK2，均浸泡24h。
[0082]取制備好的細菌菌懸液0.2mL，滴入已經倒有相應固體培養基的平皿表面，用涂布器使其均勻分布在培養基的表面。取出后浙去多余的試液，用無菌鑷子夾取浸有上述3種液體的濾紙片，放入含菌平皿中，每皿3片。按上述相應條件培養，每種菌作2個重復實驗，量取抑菌圈直徑，取平均值。
[0083]測量方法:用三角尺分別測量每個抑菌圈兩個垂直方向的直徑大小，取其平均值。
[0084]將濾紙片分別浸入配制好的不同濃度的經微孔濾膜除菌供試溶液中24h，用無菌水二倍遞減稀釋法將供試提取物配制成濃度為6%、3%、1.5%、0.75%,0.375%,0.1875%、
0.09375%,0.0468%的板栗提物系列培養基，每一系列接種一種菌，每個濃度做三個重復，取出浙去多余試液，經紫外燈照射20min進行滅菌處理，再用無菌鑷子夾取浸有各種濃度的供試溶液的濾紙片，放入含菌平皿中，同一濃度每皿3片，每種菌種做2個重復實驗，量取抑菌圈直徑，取平均值。置于培養箱中，細菌在37°C下培養24h，霉菌30°C下培養72h，觀察生長現象。觀察結果是以無抑菌圈的最低溶液濃度為提取物或防腐劑的最低抑菌濃(MIC)。
[0085]觀察結果是以不長菌的最低提取物溶液濃度為該提取物或防腐劑的最低抑菌濃度(MIC)。
[0086]濾紙片法抑菌試驗結果顯示:CK1和提取液對供試菌均有少量抑菌效果，CK2無明顯抑囷效果，結果如表1和圖6所不。
[0087]表1抑菌圈直徑大小(mm)
[0088]
【權利要求】
1.板栗鞣花酸鞣質在制備抗氧化劑中的應用，其特征在于，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。
2.板栗鞣花酸鞣質在制備還原劑中的應用，其特征在于，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬粉末的乙醇水分散液，對所述乙醇水分散液進行超聲提取后再進行水浴回流提取，濃縮濾液經冷凍干燥即得板栗鞣花酸鞣質。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述還原劑用于羥基自由基、超氧自由基、DPPH自由基的清除以及亞硝酸鹽的還原。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述板栗鞣花酸鞣質的制備方法為:將板栗栗蓬、栗花或栗葉經干燥后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末中加入10?40mL乙醇水溶液，得到板栗栗蓬、栗花或栗葉粉末的乙醇水分散液，于40°C?50°C，40KHz超聲提取30?40min后，于50°C?80°C進行2次水浴回流提取，每次提取0.5?1.5h，濃縮濾液于_50°C?_60°C冷凍干燥15-25h ； 其中，使用乙醇水溶液進行水浴回流，所述乙醇水溶液中乙醇的質量百分含量為5%?45%。
【文檔編號】A23L3/3472GK103610212SQ201310654781
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年12月5日 優先權日:2013年12月5日
【發明者】秦嶺, 曹慶芹, 姜奕晨, 楊柳, 馮永慶, 張小琴, 成軍, 邢宇 申請人:北京農學院