專利名稱：一種防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，同時涉及該微生態制劑的制備方法，屬于獸藥技術領域。
背景技術：
大腸桿菌是健 康畜禽腸道中的常見菌，可分為致病性和非致病性兩大類。大腸桿菌病是一種條件性疾病，在衛生條件差、飼養管理不良的情況下、很容易造成此病的發生。大腸桿菌對環境的抵抗力很強，附著在糞便、土壤、雞舍的塵埃或孵化器的絨毛、碎蛋皮等的大腸桿菌能長期存活。各種年齡的雞(包括肉用仔雞)都可感染大腸桿菌病，發病率和死亡率受各種因素影響有所不同。不良的飼養管理、應激或并發其它病原感染都可成為大腸桿菌病的誘因。在雛雞和青年雞多呈急性敗血癥，而成年雞多呈亞急性氣囊炎和多發性漿膜炎。本病感染途徑有經蛋傳染、呼吸道傳染和經口傳染。因此說雞大腸桿菌病已嚴重影響雞群成活率及雞群質量，給養殖業造成巨大的經濟損失.然而現在主要采用抗菌藥物進行預防和治療雞大腸桿菌病，但抗生素使用不當或濫用，往往達不到控制該病的目的，還常常導致藥物殘留和耐菌株的出現，治療效果差。CN101947270公開了一種治療雞白痢的氣霧劑，采用黃連、黃柏、大黃、板藍根、甘草、黃芪配伍成中藥，通過提取、活性炭脫色、加入輔料和拋射劑制成氣霧劑。對雞的白痢疾病具有很好的治療效果，但是在治療過程中會對雞產生一定的耐藥性，從而在多次使用后會影響其治療效果。
發明內容
本發明的目的是提供一種防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，降低雞對藥物的耐藥性。為了實現以上目的，本發明所防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑采用的技術方案是一種防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，是由中藥的提取液加入雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液密閉厭氧發酵而成，其中所述中藥采用如下重量份的組分黃連50 200份、黃柏50 200份、大黃50 100份、黃芩50 200份、板藍根50 200份、甘草50 100份。所述中藥米用如下重量份的組分黃連180份、黃柏160份、大黃70份、黃岑100份、板藍根130份、甘草60份。所述混合菌液是由群落總數為0. 5 I. OX 108CFU/ml的雙歧桿菌液和枯草芽孢桿菌液混合而成。本發明的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑采用如下方法制備I)按照配方量取黃連、黃柏、大黃、板藍根、甘草加水煎煮提取，得到提取液A ;2)按照配方量取黃芩加水煎煮提取，得到提取液B ；3)合并提取液A和提取液B濃縮成清膏，加入活性炭靜置，過濾得到濾液；
4)向步驟3)得到的濾液中加入雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液，于30°C 37°C密閉厭氧發酵36 72小時，得到防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑。步驟I)中具體的煎煮提取方法為將黃連、黃柏、大黃、板藍根、甘草分三次煎煮，每次加入該5種中藥總藥重量5 9倍的水，第一次煎煮2小時，第二、第三次分別煎煮I小時，合并三次煎煮液，過濾、濃縮得到提取液A ;步驟2)中具體的煎煮提取方法為將黃芩分三次煎煮，每次加入黃芩重量5 9倍的水，第一次煎煮2小時,第二、第三次分別煎煮I小時，合并三次煎煮液，過濾、濃縮至黃芩重量的5 10倍，調節pH值為I 2，保持50 60°C溫度I 2h，靜置16 24h得到沉淀，將沉淀用水和70%乙醇洗滌收集洗液，得到提取液B。 步驟3)中清膏為50 80°C相對密度為11 I. 3。本發明的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，采用雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液發酵處理后，提高了配伍中藥的藥物活性，在保證了具有很好療效的前提下，降低了藥物對雞所產生的耐藥性，在多次用藥后依然能夠得到很好的治療效果。本發明防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，具有清熱瀉火、消炎止痢的功效，而且可以維持腸道菌群平衡，抑制致病菌生長，提高機體免疫力。用藥方便，安全、無毒、無藥殘、不易產生耐藥性、高效。
具體實施例方式實施例I本實施例的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，是由中藥的提取液加入0. 5 0. 6X 108CFU/ml的雙歧桿菌液和枯草芽孢桿菌菌液密閉厭氧發酵而成，中藥采用如下重量份的組分黃連50克、黃柏200克、大黃50克、板藍根200克、甘草100克、黃芩50克。具體的制備方法如下I)根據上述配方量分別稱取黃連50克、黃柏200克、大黃50克、板藍根200克、甘草100克，加入5味中藥總重量5倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮濾液，得5種中藥的提取液A ；2)稱取黃芩50克，加入黃芩重量5倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮至黃芩重量的6倍，調節濃縮液的pH值至I 2，經50°C保溫2小時，再靜置16h得沉淀，將沉淀用水和70%乙醇洗滌收集洗液，得到提取液B ;3)合并提取液A與提取液B，濃縮至60°C相對密度為11的清膏，調pH值至6. 5，靜置，濾過，向濾液中加入I %的活性炭，攪拌均勻后靜置30min后抽濾，得濾液C ；4)取群落總數為0. 5 0. 6X 108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液3ml，加入濾液C中，于37°C密閉厭氧發酵72小時，得到防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑。其中雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液可以采用雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌種采用常規方法培養而成，即采用斜面菌種分別進行斜面菌種培養，將每種斜面培養產生的懸浮液分別擴大培養，培養至對數生長期0. 5 0. 6X 108CFU/ml時止，或者采用市售產品混合而成。實施例2
本實施例的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，是由中藥的提取液加入0. 7 0. 8X 108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液密閉厭氧發酵而成，中藥采用如下重量份的組分黃連180克、黃柏160克、大黃70克、板藍根130克、甘草60克、黃芩100克。具體的制備方法如下I)根據上述配方量分別稱取黃連180克、黃柏160克、大黃70克、板藍根130克、甘草60克，加入5味中藥總重量6倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮濾液，得5種中藥的提取液A ；
2)稱取黃芩100克，加入黃芩重量6倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮至黃芩重量的8倍，調節濃縮液的pH值至I 2，經55°C保溫I. 5小時，再靜置20h得沉淀，將沉淀用水和70%乙醇洗滌收集洗液，得到提取液B ；3)合并提取液A與提取液B，濃縮至80°C相對密度為I. 2的清膏，調pH值至6. 5，靜置，濾過，向濾液中加入I %的活性炭，攪拌均勻后靜置30min后抽濾，得濾液C ；4)取群落總數為0. 7 0. 8 X 108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液3ml加入濾液C中，于34°C密閉厭氧發酵56小時，得到防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑。其中雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液可以采用雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌種采用常規方法培養而成，即采用斜面菌種分別進行斜面菌種培養，將每種斜面培養產生的懸浮液分別擴大培養，培養至對數生長期0. 7 0. 8X 108CFU/ml時止，或者采用市售產品混合而成。實施例3本實施例的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，是由中藥的提取液加入0. 9 I. OX 108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液密閉厭氧發酵而成，中藥采用如下重量份的組分黃連200克、黃柏50克、大黃100克、板藍根50克、甘草50克、黃芩200克。具體的制備方法如下I)根據上述配方量分別稱取黃連200克、黃柏50克、大黃100克、板藍根50克、甘草50克，加入5味中藥總重量9倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮濾液，得5種中藥的提取液A ；2)稱取黃芩200克，加入黃芩重量7倍的水，煎煮三次，第一次2h，后面兩次各lh，合并三次煎液，濾過，濃縮至黃芩重量的10倍，調節濃縮液的pH值至I 2，經60°C保溫I小時，再靜置24h得沉淀，將沉淀用水和70%乙醇洗滌收集洗液，得到提取液B ;3)合并提取液A與提取液B，濃縮至50°C相對密度為I. 3的清膏，調pH值至6. 5，靜置，濾過，向濾液中加入I %的活性炭，攪拌均勻后靜置30min后抽濾，得濾液C ；4)取群落總數為0. 9 I. 0 X 108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液3ml加入濾液C中，于30°C密閉厭氧發酵36小時，得到防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑。其中雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液可以采用雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌種采用常規方法培養而成，即采用斜面菌種分別進行斜面菌種培養，將每種斜面培養產生的懸浮液分別擴大培養，培養至對數生長期0. 9 I. OX 108CFU/ml時止，或者采用市售產品混合而成。下面以具體實驗說明本發明的藥效I材料和方法
11試驗藥品本發明的中藥微生物制劑。對照藥物黃連50克、黃柏200克、大黃50克、板藍根200克、甘草100克、黃芩100克制備而成的中藥液體制劑。I. 2試驗動物14 21日齡的雞。I. 3試驗設計隨機選擇500只雞，并進行大腸桿菌攻毒。待雞群發病后，平均分為5個小組。試驗組一飲水給藥本發明實施例I的制劑，試驗組二飲水給藥本發明實施例2的制劑，試驗組三飲水給藥本發明實施例3的制劑，試驗組四飲水給藥對照藥物，試驗組五只飲水。14試驗方法
前四組連續給藥一周后繼續進行大腸桿菌攻毒，連續大腸桿菌攻毒和給藥3次共三周。第五組，自由飲水。每天觀察患雞的臨床變化、治愈、好轉、死亡等情況，并進行記錄。I. 5療效判斷標準治愈率試驗結束后，病雞癥狀消失，精神轉好，食欲增長，完全恢復正常的雞占該組雞的比例。有效率試驗結束后，雞病癥狀、精神、食欲明顯好轉的雞占該組雞的比例。無效率試驗期間出現癥狀，試驗結束后仍不見癥狀消失的雞占該組雞的比例。I. 6臨床試驗結果見表I所示表I臨床試驗結果
權利要求
1.一種防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，其特征在于是由中藥的提取液加入雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液密閉厭氧發酵而成，其中所述中藥采用如下重量份的組分黃連50 200份、黃柏50 200份、大黃50 100份、黃芩50 200份、板藍根50 200份、甘草50 100份。
2.根據權利要求I所述的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，其特征在于所述中藥采用如下重量份的組分黃連180份、黃柏160份、大黃70份、黃芩100份、板藍根130份、甘草60份。
3.根據權利要求I所述的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，其特征在于所述混合菌液是由群落總數為O. 5 I. OX 108CFU/ml的雙歧桿菌液和枯草芽孢桿菌液混合而成。
4.一種如權利要求I所述防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑的制備方法，其特征在于其步驟如下 1)按照配方量取黃連、黃柏、大黃、板藍根、甘草加水煎煮提取，得到提取液A; 2)按照配方量取黃芩加水煎煮提取，得到提取液B; 3)合并提取液A和提取液B濃縮成清膏，加入活性炭靜置，過濾得到濾液； 4)向步驟3)得到的濾液中加入雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液，于30°C 37°C密閉厭氧發酵36 72小時，得到防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟I)中具體的煎煮提取方法為將黃連、黃柏、大黃、板藍根、甘草分三次煎煮，每次加入該5種中藥總藥重量5 9倍的水，第一次煎煮2小時，第二、第三次分別煎煮I小時，合并三次煎煮液，過濾、濃縮得到提取液A 。
6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟2)中具體的煎煮提取方法為將黃芩分三次煎煮，每次加入黃芩重量5 9倍的水，第一次煎煮2小時，第二、第三次分別煎煮I小時，合并三次煎煮液，過濾、濃縮至黃芩重量的5 10倍，調節pH值為I 2，保持50 60°C溫度I 2h，靜置16 24h得到沉淀，將沉淀用水和70%乙醇洗滌收集洗液，得到提取液B。
7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于步驟3)中清膏為50 80°C相對密度為I. I I. 3。
全文摘要
本發明公開了一種防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑及其制備方法，其中防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑是由中藥的提取液加入群落總數為0.5～1.0×108CFU/ml的雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌液密閉厭氧發酵而成，其中所述中藥采用如下重量份的組分黃連50～200份、黃柏50～200份、大黃50～100份、黃芩50～200份、板藍根50～200份、甘草50～100份。本發明的防治雞大腸桿菌疾病的中藥微生態制劑，采用雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌菌液發酵處理后，提高了配伍中藥的藥物活性，在保證了具有很好療效的前提下，降低了藥物對雞所產生的耐藥性，在多次用藥后依然能夠得到很好的治療效果。
文檔編號A61P31/04GK102614288SQ201110458999
公開日2012年8月1日 申請日期2011年12月31日 優先權日2011年12月31日
發明者吳紅云, 李鳳娟, 李建正 申請人:鄭州后羿制藥有限公司