一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成：茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8-12%、白術8-12%、黨參8-12%、板藍根8-12%。經臨床魚病防治試驗及安全性評價顯示其對鯽魚細菌性敗血癥安全有效。
【專利說明】一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑
【技術領域】
[0001]本發明涉及中藥制劑，具體涉及一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑。
【背景技術】
[0002]隨著水產養殖集約化程度的提高，養殖水環境的逐漸惡化，病害問題已經越來越嚴重，特別是由細菌感染引起的傳染性疾病表現得尤為突出，其中細菌性敗血癥是目前發病率最高、造成損失最大的疾病。細菌性敗血癥俗稱暴發性出血病，是由溫和氣單胞菌等細菌感染引起。魚類細菌性敗血癥是危害水產養殖的主要疾病之一，用中草藥防治魚病具有價廉、綠色、環保、無藥物殘留等優點，符合無公害水產養殖的要求。目前用中草藥防治水產動物細菌性敗血癥的研究大多是體外抑菌試驗及藥敏試驗，只有陳學年等人做了中草藥生藥粉末藥餌防治鯽魚敗血病的試驗。對于中草藥提取物添加制成藥餌對魚病的防治試驗還未見報道。
[0003]所以進行了中草藥復方提取液添加藥餌對鯽魚細菌性敗血癥的防治試驗，為水產養殖生產提供防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，已經是一個值得研究的問題。
【發明內容】
[0004]為了克服上述現有技術存在的不足，本發明提供了一種利用多味中草藥防治鯽魚細菌性敗血癥中草藥提取復方制劑。
[0005]本發明的目的是這樣實現的:
一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8_12%、白術8_12%、黨參8_12%、板藍根8-12% ；
包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術10%、黨參10%、板藍根10%。
[0006]積極有益效果:本發明公開了一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，該制劑由茵陳、地錦草、大黃、黃芩、白術、黨參、板藍根等七味中藥原料組成。經臨床魚病防治試驗及安全性評價顯示其對鯽魚細菌性敗血癥安全有效。
[0007]說明書附圖
圖1為血清谷丙轉氨酶測定結果圖；
圖2為血清谷草轉氨酶測定結果圖；
圖3為血清膽固醇測定結果圖；
圖4為血清甘油三酯測定結果圖；
圖5為血清總蛋白測定結果圖；
圖6為血清白蛋白測定結果圖；
圖7為血清球蛋白測定 結果圖；
圖8為血清白球比測定結果圖；圖9為血清肌酐測定結果圖；
圖10為血清尿素氮測定結果圖；
圖11為血清尿酸測定結果圖；
圖12為血清膽紅素測定結果圖；
圖13為血清肌酸磷酸激酶測定結果圖；
圖14為血液紅細胞變化規律示意圖；
圖15為血液白細胞變化規律示意圖；
圖16為血液血紅蛋白變化規律示意圖；
圖17為白細胞中的淋巴細胞變化規律示意圖；
圖18為對照組血液中的粒細胞比例示意圖。
【具體實施方式】
[0008]下面結合具體實施例對本發明做進一步的說明:
一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8_12%、白術8_12%、黨參8_12%、板藍根8-12% ； 包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術10%、黨參10%、板藍根10%。
[0009]復方中藥制劑防治鯽魚細菌性敗血癥的機理是:1.抗炎。復方提取液的總黃酮有效成分能夠通過抑制可誘導的一氧化氮合酶，減少毛細血管內皮細胞釋放一氧化氮，調節花生四烯酸(AA)的代謝，抑制前列腺素E2 (PGE2)和白三烯(LTC4)的合成，其中以黃芩素和黃芩甙作用最強，而且存在量效關系。炎癥組織中前列腺素E2 (PGE2)和白三烯(LTC4)等炎性介質成分減少后，毛細血管通透性下降，白細胞游出減少，蛋白滲出亦隨之減少，導致炎癥反應減輕，組織腫脹程度下降。2.殺菌解毒。復方中的黃酮類、蒽醌類和有機酸類等有效成分具有強烈的抑菌作用，對消除細菌毒素對組織的損傷具有很好的效果。細菌內毒素可以引起發熱、可誘發氧衍生自由基引起脂質過氧化損傷，造成亞細胞及組織損害，造成器官損傷代謝失調，可引起血微循環障礙導致彌散性血管內凝血(DIC)現象等。黃芩具有清熱解毒作用，通過降低腦脊液環磷酸腺苷(cAMP)含量而拮抗細菌內毒素致熱活性，鄧則明證實黃芩的抗自由基作用是通過提高線粒體、溶酶體等內源性超氧化物歧化酶、琥珀酸脫氫酶等酶的活性而加速清除的，地錦草所含的黃酮類有效成分也具有清除和抑制羥基自由基的作用，黃芩和地錦草還具有止血、改善血管微循環，直接破壞內毒素的作用。
[0010]實驗如下:
1.材料和方法
1.1試驗材料
1.1.1試驗魚健康鯽魚，規格一致，尾重35±lg。
[0011]1.1.2試驗用菌液試驗用致病菌為溫和氣單胞菌5b^ria),菌種由本校微生物實驗室提供。
[0012]1.1.3藥餌用乙醇回流提取法提取中草藥復方的總有效成分，按照0%、0.5%、2%、生藥2%的添加量制作成藥餌。[0013]1.1.4養殖池普通玻璃缸，ImX0.4mX0.6m,保證24小時充氧，水溫13_15°C，每天換水1/3。
[0014]試驗方法
1.2.1試驗設計試驗采用隨機區組設計，選取細菌濃度梯度(0.5億/毫升和I億/毫升)和藥餌濃度(0、0.5%、2%及生藥2%)兩個因素及不同的水平，并且設空白對照組。具體分組見表1。試驗前鯽魚先暫養2周，接著投喂藥餌I周，然后注射不同濃度的溫和氣單胞菌病原菌進行人工感染。試驗養殖條件按照常規方法進行。
[0015]1.2.2藥餌防治率記錄發病后每天記錄各試驗組死魚尾數，連續記錄一周。死亡率結果采用方差分析和t檢驗。
[0016]1.2.3血液生化指標測定注射后第4天，第15天取注射細菌濃度0.5億/毫升，藥餌濃度0%、0.5%、2%、生藥、對照5組試驗魚，每組取6-9條魚采血(3-4ml)，加入抗凝劑，注意不要溶血，用日本產7020血液自動生化分析儀檢測血液生化指標。各組養殖條件及取血盡量保持一致。
[0017]1.2.4血液生理指標測定按照常規方法在注射后第4天，第9天，第15天，第21天，第27天對5組每組取魚采血進行紅細胞、白細胞計數，白細胞分類計數，血紅蛋白測定。
[0018]1.2.5中草藥的急性毒性試驗先經過預備試驗，每尾鯽魚胸腔注射0.1ml復方中草藥液，找出使鯽魚全部存活的最大濃度(Dm)和全部死亡的最小濃度(Dn)，再在這兩個濃度之間按照等對數間距設兩個濃度，試驗設一次重復。
[0019].結果 2.1不同細菌濃度和藥餌添加量時各組的死亡率
經過t檢驗，在0.5億/毫升及在I億/毫升菌液濃度下，藥餌組2%和生藥組與O %藥餌組之間差異顯著，藥餌0.5%與0%藥餌組差異不顯著，藥餌2%和生藥組之間不顯著。
[0020]表1不同藥餌濃度和不同細菌濃度時的死亡情況
【權利要求】
1.一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，其特征在于，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18_22%、黃芩8_12%、白術8_12%、黨參8-12%、板藍根8-12%。
2.根據權利要求1所述的 一種防治鯽魚細菌性敗血癥的中藥復方制劑，其特征在于，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術10%、黨參10%、板藍根10%。
【文檔編號】A61P31/04GK103585288SQ201310528009
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年10月31日 優先權日:2013年10月31日
【發明者】田海軍, 倫峰, 林偉, 彭新亮, 吳紅梅 申請人:信陽農業高等專科學校, 田海軍