一種中藥野菊提取物及其制備方法、藥物組合物和用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種中藥野菊提取物及其制備方法，包含該野菊 提取物的藥物組合物和用途。
【背景技術】
[0002] 靜脈曲張已成為危害人民生命健康的常見疾病，重壓、缺少運動、口服避孕藥、懷 孕、更年期、肥胖、衰老、遺傳等因素都可導致靜脈曲張。靜脈曲張可導致痔瘡的發生，痔瘡 是由于直腸下端粘膜下和肛管或肛緣皮下的靜脈曲張、擴大造成的，是一種常見疾病，其發 病率約為25-40%，五十歲以上老年人的發病率為60-70%。當病人患痔瘡時，會出現便血、 痔塊脫落、疼痛、瘙癢等癥狀，給患者的生活帶來很大的不便和痛苦。下肢靜脈曲張也是最 為常見的靜脈曲張疾病，人群患病率高達約5-30%。主要臨床表現包括下肢淺表靜脈發生 擴張、延長、彎曲成團狀；患者有腿部沉重、乏力、酸脹、刺痛、麻木感、水腫、瘙癢感，久立或 行走后癥狀加重；疾病后期可出現淺表靜脈血栓硬結形成、靜脈性潰瘍（俗稱"老爛腿"）。 部分患者出現患處血管破裂急性出血，或慢性皮膚潰瘍經久不愈，截肢乃至危及生命。
[0003] 靜脈管壁強度減弱和靜脈內壓力升高是引起靜脈曲張的主要原因，因此，增加靜 脈血管的張力，降低靜脈內壓力就可有效地治療靜脈曲張。
[0004] 野菊為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的干燥地上部分。其味甘、苦， 性微寒；歸肝、心經。具有清熱解毒，明目的功效。臨床用于感冒，痢疾，癰腫，疔瘡，目赤腫 痛，眩暈，瘰疬，濕疹等的治療。未見關于野菊用于治療靜脈曲張性疾病的相關專利申請和 研究報道。
【發明內容】
[0005] 本發明的一個目的是提供一種具有較好的消腫、抗炎作用，用于治療靜脈曲張相 關疾病的野菊提取物。
[0006] 本發明另一個目的在于提供一種上述野菊提取物的制備方法。
[0007] 本發明的又一個目的是提供一種包含上述野菊提取物的藥物組合物。
[0008] 本發明的再一個目的是提供上述野菊提取物的用途。
[0009] 本發明在對野菊化學成分和藥理活性進行研究的基礎上，發現該植物中所包含的 黃酮類化合物和咖啡酸酯類化合物具有明顯的抑制局部炎癥引起的水腫、降低微脈血管通 透性和縮短正常小鼠出血時間和凝血時間的作用。
[0010] 本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：
[0011] 一方面，本發明提供一種野菊提取物，所述野菊提取物包含黃酮類化合物和咖啡 酸酯類化合物。
[0012] 優選地，所述所述黃酮類化合物主要包括刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷、木犀草 素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷、刺槐素、木犀草素和芹菜素等；所述咖啡酸酯類化合物主要包括 3-咖啡酰基奎尼酸、3, 5-二咖啡酰基奎尼酸和4, 5-二咖啡酰基奎尼酸等。
[0013] 另一方面，本發明提供一種制備上述野菊提取物的方法，所述方法包括以下步 驟：
[0014] (1)取野菊藥材經溶劑提取；
[0015] (2)將步驟（1)所得的提取液減壓濃縮至等生藥體積，放至室溫，離心，得沉淀和 上清液，備用；
[0016] (3)將上述（2)中上清液通過大孔吸附樹脂或聚酰胺吸附，用水溶液洗脫，棄去洗 脫液；
[0017] (4)用高濃度甲醇或乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收溶劑并干燥，即得提取物 I;
[0018] (5)將步驟（2)中沉淀沉淀加入適當濃度氫氧化鈉溶液，并加入適量醇溶液，攪拌 使溶解，過濾，取濾液，用酸調節pH至6-7,析出沉淀，抽濾，濾餅用蒸餾水充分清洗后，干 燥，粉碎，即得提取物II。
[0019] (6)把提取物I和提取物II合并，即得野菊提取物。
[0020] 優選地，所述步驟（1)中的提取方法為溫浸、熱回流和/或滲漉；所述步驟⑴中 的溶劑選自水、堿溶液、甲醇、乙醇和丙酮中的一種或多種。所述步驟（3)中的大孔吸附樹 脂選自HPD100、HPD300或AB-8。所述步驟（5)中的醇溶液為甲醇、乙醇或二者的混合溶液 等；所述步驟（5)中的酸為濃鹽酸、冰醋酸或濃硫酸等。
[0021] 上述制備方法簡單易行、提取效果好、易于工業推廣應用。
[0022] 又一方面，本發明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含上述野菊提取物。
[0023] 優選地，所述藥物組合物為膠囊劑、普通片劑、顆粒劑、滴丸劑、軟膠囊劑、分散片、 口腔崩解片、緩釋片、控釋片、注射液、輸液或注射用無菌粉末。
[0024] 可以采用常規方法將野菊提取物與任何一種或一種以上藥用輔料，如淀粉、糊精、 乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯聚維酮、羧甲基淀粉鈉、聚 乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、甘氨酸等混合制成上述劑型。
[0025] 再一方面，本發明提供所述的野菊提取物在制備預防和/或治療靜脈曲張疾病的 藥物中的用途。
[0026] 優選地，其中所述靜脈曲張疾病為痔瘡或下肢靜脈曲張等。
[0027] 野菊提取物中總黃酮的含量測定方法如下：
[0028] 總黃酮的測定（分光光度法）
[0029] 對照品溶液的制備：精密稱取干燥恒重的刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷對照品適 量，用甲醇溶解制成每lml含15μg的溶液，即得。
[0030] 供試品溶液的制備：精密稱取本品粉末50mg，置10ml量瓶中，加蒸餾水溶解至刻 度，搖勻，濾過。沉淀連濾紙置于l〇〇ml具塞錐形瓶中，加甲醇50ml，精密稱定重量，超聲處 理30min，再次稱重，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。取續濾液lml，置25ml量瓶中，加 甲醇至刻度，搖勾，即得。
[0031] 標準曲線的繪制：精密量取刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷對照品溶液（0. 13mg/ ml) 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0ml，分別置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，以甲醇為空 白，在326mn波長處測定吸光度。以吸收度（A)為縱坐標，濃度C(μg·πι1-1)為橫坐標，繪 制標準曲線。
[0032] 測定法：取供試品溶液，以甲醇為空白，按照分光光度法（中國藥典2005年版一部 附錄VA)，在326nm波長處測定吸收度。
[0033] 對本發明的藥物的藥效學部分進行了初步研究，結果發現本發明的藥物對醋酸致 大鼠肛周潰瘍具有明顯治療作用。在上述藥理活性試驗的基礎上，野菊提取物在臨床可用 于痔瘡、下肢靜脈曲張等疾病的預防和治療。
[0034] 本發明的藥物原料來源易得，易于產業化，可以根據需要制成各種劑型，為臨床提 供了使用更加方便、治療更加有效、質量更加可控的現代中藥，為患者帶來更多的益處，從 而產生了巨大的社會效益。
【具體實施方式】
[0035] 下面結合【具體實施方式】對本發明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發明，而不是為了限制本發明的范圍。
[0036] 實施例1
[0037] 取野菊藥材10kg，用100L80% (體積）乙醇熱回流提取三次，每次1小時。收集 提取液，減壓回收乙醇，并濃縮至10L，放置至室溫，離心，分別收集上清液和沉淀，備用。取 上述上清液，通過HPD-300型大孔吸附樹脂柱（樹脂體積20L)，先用3倍樹脂體積水溶液 洗脫，水洗脫液棄去，再用3倍樹脂體積70 %濃度乙醇溶液洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減 壓回收乙醇并濃縮至干，得提取物I。取上述沉淀加入1. 5L濃度10%氫氧化鈉溶液，加入 4. 5L乙醇，攪拌使溶解，過濾，取濾液，加濃鹽酸調節pH至6-7,靜置析出沉淀，抽濾，濾餅分 另IJ用50%乙醇和蒸餾水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取物II。合并提取物I和II，即得野 菊提取物。
[0038] 實施例2
[0039] 取野菊藥材2kg，用60L80% (體積）乙醇滲漉提取，收集滲漉液，減壓回收乙醇， 并濃縮至2L，放置至室溫，分別收集上清液和沉淀，備用。取上述上清液，通過AB-8型大孔 吸附樹脂柱（樹脂體積4L)，先用3倍樹脂體積水溶液洗脫，水洗脫液棄去，再用3倍樹脂體 積60%濃度乙醇溶液洗脫，收集60%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮至干，得提取物I。 取上述沉淀加入0. 4L濃度5%氫氧化鈉溶液，加入1. 2L乙醇，攪拌使溶解，過濾，取濾液，加 濃硫酸調節pH至6-7,靜置析出沉淀，抽濾，濾餅用蒸餾水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取 物II。合并提取物I和II，即得野菊提取物。
[0040] 實施例3
[0041] 取野菊藥材2kg，用20L70% (體積）甲醇熱回流提取二次，每次1. 5小時。收集 提取液，減壓回收甲醇，并濃縮至2L，放置至室溫，離心，分別收集上清液和沉淀，備用。取上 述上清液，通過HPD-100型大孔吸附樹脂柱（樹脂體積4L)，先用3倍樹脂體積水溶液洗脫， 水洗脫液棄去，再用3倍樹脂體積50%濃度乙醇溶液洗脫，收集50%乙醇洗脫液，減壓回收 乙醇并濃縮至干，得提取物I。取上述沉淀加入0. 2L濃度10 %氫氧化鈉溶液，加入0. 6L乙 醇，攪拌使溶解，過濾，取濾液，加20%硫酸調節pH至6-7,靜置析出沉淀，抽濾，濾餅用蒸餾 水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取物II。合并提取物I和II，即得野菊提取物。
[0042] 實施例4
[0043] 取野菊藥材2kg，用30L85% (體積）乙醇熱回