專利名稱：一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法
技術領域：
本發明涉及一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法。
背景技術：
南極磷蝦是一種生活在南冰洋的南極洲水域的磷蝦，以群集方式生活，有時密度高達I萬-3萬只/M3，它們可能是地球上最成功的動物物種，據統計大約有5-50億噸(因統計方法不一樣有較大差異)。目前南極磷蝦漁業每年約10萬噸，其中80%由日本捕獲，由于南大洋以磷蝦為主食物的須鯨也被殲捕殆盡。有關科學家曾根據旺盛時期鯨類對磷蝦類的攝食量估計大約每年有I. 5億噸由于鯨類資源的衰退而剩余的磷蝦可供捕獲。世界上每年的全部的漁業產量為0. 99億噸，這標志著南極磷蝦有較大的可利用空間。我國正在試探捕南極磷蝦以完善南極磷蝦的捕撈和相關海上技術。南極磷蝦的大量捕撈標志著深加工技術的開始。在日本南極磷蝦大多作為料理，而在其他國家則主要作為漁業的飼料和魚的餌料。南極磷蝦高附加值的研究是其深加工的研究核心。南極磷蝦含有較為豐富的油脂，含有不飽和脂肪酸、蝦青素和磷脂。磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol ;PI)是細胞信號的通路成分,稱為第三信使,信號通路的研究是當前生命科學研究的熱點，也是生物制劑爭相開發利用的重大課題。已知的信使如第一信使脂類激素和含氮激素，第二信使cAMP等均或為藥物，或為保健成分。第三信使PI在人體、細胞代謝中起著極為重要的生理生化作用。是細胞快速應答和緩慢應答的啟點、交叉點、關鍵點。PI就像通信網絡中控制著信息傳遞方向的接線員，控制著人體生理生化、細胞生與死的進展方向。PI的應用開發備受世界各國關注，2001年美國開發出了世界上第一個以PI作為中間體的抗艾滋病藥物(US 6316424. B)。科學家在PI的肌醇環上接上磺酰基基團(_S03)，當這種藥物插入細胞膜后，暴露在膜外帶有I-幾個磺酰基團的肌醇環有極強的殺病菌、病毒作用，就像細胞全身穿上了盔甲。PI有望成為抗其他病毒藥物的中間體。在流感病毒、SARS、霍亂等菌毒肆虐世界的今天，PI的應用具有極其廣闊的前景。日本等國把PI也用于化妝品，作為藥物脂質體和日常保健品的原料、食品和藥物的乳化劑(JP 05097873 A2)海產品的保鮮劑；PI還是心、肝、腎等人體重要器官移植前保存液的主要成分，有抗細胞凋亡(W0 99/47101)，也有很好的免疫效果(W0 03/013513 Al)。另外實驗證明PI有抗動脈粥樣硬化的作用，有利尿和治療便秘的作用等。PI因sn-1和sn-2位所聯接的脂肪酸不一而分子結構和分子量有很大差異。不同動物體PI分子群中各種PI分子種類及其比例有很大差異，即PI是一個分子群。不同的動物體中磷脂中的卵磷脂(PC)、腦磷脂(PE)、PI和磷脂酸，磷酯酰絲氨酸(PS)等比例也有很大差異。南極磷蝦中蝦油(磷脂是油的伴隨物)的磷脂中PC占80%以上，而PS、PE、PA以及溶血性磷脂的總含量低于20%，而PI量很少，因此制備南極磷蝦中的PI，最重要的第一步是PI的富集，然后才能在此基礎上進一步再提取，分離，純化。至今，人們還尚未對南極磷、蝦中的PI進行過研究報道。
發明內容
針對上述現有技術，本發明提供了一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，為南極磷蝦中磷脂酰肌醇的深入研究奠定了基礎。本發明是通過以下技術方案實現的一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下(I)取I公斤冰凍的南極磷蝦，加入到I I. 3升的體積分數為90 100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4 6次，每次I 3h，提取液過濾合并，得濾液；(2)將上述得到的濾液于60 65。C和-0. 07 -0. 09MPa條件下濃縮至濾液體積的8 10%，得濃縮提取液；(3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液；(4)將上述得到的最下層液于50 55° C和-0. 07 -0. 09MPa條件下蒸發除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產品，該產品中含磷脂2. 70 2. 76% (質量分數)，其中PI占磷脂的50. 5 51. 92% (質量分數)。本發明的從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，在低溫下進行，能夠保證南極磷蝦中的磷脂、DHA, EPA、蝦紅素、動物類黃酮素、不飽和脂肪酸、維生素A、維生素E和微量元素等成分不受到破壞，且富集過程中的上層溶液可以回收再利用，提取后的南極磷蝦可以再用于生產其它產品。經本發明的方法得到的產品，磷脂酰肌醇的富集效率高，產品中含磷脂2. 70 2. 76%，其中磷脂酰肌醇占磷脂的50. 5 51. 92%，可以在此基礎上對磷脂酰肌醇進行進一步的再提取、分離、純化等。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步的說明。實施例I稱冰凍的南極磷蝦500g (含水80%，蝦干物質占20%，下同)，加入95%乙醇600mL，在室溫下攪拌3h，倒出上清液并過濾。沉淀再反復提取4次，共提取5次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在60°C，-0. 07MPa條件下蒸發濃縮至合并濾液體積的10%，得到濃縮提取液；向濃縮提取液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅色的最下層液，在52° C，-0. 08MPa條件下蒸發除去正己烷，得13g油狀液。該液體中磷脂含量為2. 72%，其中PI占磷脂的51. 92%。實施例2稱冰凍的南極磷蝦500g，加入90%乙醇550mL。在室溫下攪拌提取3h，倒出上清液并過濾。沉淀再重復提取3次，共提取4次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在65° C，-0. 09MPa條件下濃縮至合并濾液體積的8%，得到濃縮提取液；向濃縮液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在55° C，-0.09MPa條件下蒸除溶劑，得Ilg油狀液。該液體中磷脂含量為2. 70%，其中PI占磷脂的50. 5%。實施例3
稱冰凍的南極磷奸500g,加入無水乙醇650mL,在室溫下攪拌提取Ih,倒出上清液并過濾。沉淀再重復提取5次，共提取6次。提取液過濾合并得濾液；將濾液在60° C，-0. 08MPa條件下濃縮至合并濾液體積的10%，得到濃縮提取液；向濃縮液中加入同體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在50° C，-0.07MPa下蒸除溶劑，得12g油狀液。該液體中磷脂含量為2. 76%，其中PI占磷脂的51. 7%。實施例4稱冰凍的南極磷蝦500g，加入95%乙醇500mL，在室溫條件下攪拌提取2h，倒出上清液并過濾。沉淀再重復提取4次，共提取5次，提取液過濾合并得濾液；將濾液在65° C，-0. 09MPa條件下濃縮至合并濾液體積的9%，得到濃縮提取液；向該濃縮液中加入同 體積的正己烷，搖勻靜置分層，取透明微紅的最下層液，在50° C，-0. 09MPa條件下蒸發溶齊U，得12g油狀液，該液體中磷脂含量為2. 74%，其中PI占磷脂的51. 9%。
權利要求
1.一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下 (1)取I公斤冰凍的南極磷蝦，加入到I I.3升的體積分數為90 100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4 6次，每次I 3h，提取液過濾合并，得濾液； (2)將上述得到的濾液于60 65°C和-0. 07 -0. 09MPa條件下濃縮至濾液體積的8 10%，得濃縮提取液； (3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液； (4)將上述得到的最下層液于50 55°C和-0. 07 -0. 09MPa條件下蒸發除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產品。
全文摘要
本發明公開了一種從南極磷蝦中富集磷脂酰肌醇的方法，步驟如下(1)取1公斤冰凍的南極磷蝦，加入到1～1.3升的體積分數為90～100%的乙醇液中，自然條件下攪拌提取4～6次，每次1～3h，提取液過濾合并，得濾液；(2)將上述得到的濾液于60～65°C和-0.07～-0.09MPa條件下濃縮至濾液體積的8～10%，得濃縮提取液；(3)向上述得到的濃縮提取液中加入等體積的正己烷，混勻，靜止分層后，取透明微紅的最下層液；(4)將上述得到的最下層液于50～55°C和-0.07～-0.09MPa條件下蒸發除去正己烷，得油狀液，即為富集了磷脂酰肌醇的產品，該產品中含磷脂2.70～2.76%，其中PI占磷脂的50.5～51.92%，可以在此基礎上對磷脂酰肌醇進行進一步的再提取、分離、純化等。
文檔編號C11B1/02GK102746941SQ201210249120
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月18日 優先權日2012年7月18日
發明者劉代成, 馬夫翠 申請人:山東師范大學