專利名稱：大豆皂甙b的制備方法
技術領域：
本發明屬于化學工程與技術領域，一種大豆皂甙B的提取和純化工藝。
背景技術：
大豆皂苷(Soyasaponins)是大豆中含有的一類重要的生物活性成分。皂甙的種類很多但大豆皂甙B的活性較好。近年研究表明，大豆皂苷B具有顯著的降血脂和抗動脈粥樣硬化等多種重要的生理功能，可開發成保健食品或藥品，同時它還是一種重要的發泡劑、 乳化劑、穩定劑和風味改良劑，市場潛力大。目前大豆皂甙制備工藝，將原料脫脂，有機溶劑提取，濾液濃縮后用正丁醇萃取， 正丁醇相減壓蒸干后得到粗品。但這種工藝有機溶劑用量多。大孔樹脂制備大豆皂甙已被應用，該法回收率高。用此法文獻較多，例如:CN1245811A, CN1315323A, CN1327983A, CN1590385A等。大豆皂甙B的純化工藝多是采取制備色譜，硅膠住，逆流色譜等。這樣制得的皂甙B，用的有機試劑較多，污染環境，溶劑消耗量大，難以實現工業化生產。采用結晶法制備皂甙，易于實現工業，如CN200610053603. 3，但該文獻用乙醇結晶且得到的是總皂甙， 未將皂甙B分離出來。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種從脫脂大豆胚芽中提取并純化得到高純度大豆皂甙B的工藝，該工藝對環境友好，成本低，可實現工業化生產。本發明所采用的技術方案是以脫脂的大豆胚芽為原料制備高含量的大豆皂甙B，其中通過大孔樹脂的吸附分離，得到皂甙粗品，在通過結晶將皂甙B分離出來，得到含量>85.0%的大豆皂甙B。具體步驟如下1.以脫脂大豆胚芽為原料，加入60% -90%的乙醇(體積百分比)，固液比為 1 20，加熱至沸騰，回流提取2-5個小時，過濾濃縮至原來體積的1/3-1/5;2.將濃縮液加水后通入裝有非極性大孔樹脂的吸附柱中，在溫度為20-30°C范圍內，以流速為0. 5-3倍柱體積/小時上樣；3.用1-4倍柱體積的水，在溫度為20_30°C范圍內，以流速為0. 5-3倍柱體積/小時洗去雜質；4.用1-4倍柱體積的5-40%的乙醇(體積百分比)，在溫度為20_30°C范圍內，以流速為0. 5-3倍柱體積/小時洗去雜質；5.用1-4倍柱體積的50-90%的乙醇(體積百分比)，在溫度為20_30°C范圍內， 以流速為0. 5-3倍柱體積/小時洗脫產物；6.將得到的洗脫液旋轉蒸發，得到大豆皂甙粗品；7.將上述粗品加入水或30%乙醇(體積百分比)做為結晶溶劑，固液比為 1 10-30，在80°C下溶解，按1_7°C /小時的降溫速率冷卻到0_30°C，離心，干燥得到較純的大豆皂甙B;8.將第7步得到的產品加入水或30%乙醇(體積百分比)做為結晶溶劑，固液比為1 25-45，在80°C下溶解，按1_7°C /小時的降溫速率冷卻到0_30°C，離心，干燥得到純度較高的大豆皂甙B。上述大孔吸附樹脂可為非極性或弱極性的大孔吸附樹脂，如NKA，DlOl樹脂。結晶溶劑可是去離子水或者30%乙醇。本發明的優點是本發明包括大孔樹脂吸附，結晶等工藝。比起以前的工藝制備總皂甙該工藝優點是分離純化大豆皂甙B，所選樹脂對皂甙B的選擇吸附性較高，所用溶劑對環境友好，所得產品純度高，色澤為白色，成本低，易于產業化，可創出較好的經濟效益。
具體實施例方式實施例1 稱取脫脂大豆胚芽(華北制藥廠提供)300g,加入6000ml70 %的乙醇溶液。在回流罐內，加熱至沸騰回流提取池，趁熱過濾，得到提取液。通過減壓閃蒸除去提取液中的乙醇， 濃縮至約原來體積的1/3。再向濃縮液加入600ml水作為上樣液。層析柱尺寸0^6*700mm。 內裝NKA樹脂(南開大學提供)約245g (約350ml的樹脂)。上樣大豆皂甙B原料液濃度為1. 69mg/ml，上樣體積為6倍柱體積，上樣流速為7ml/min。上樣及洗脫溫度為25°C。先用2倍柱體積的水洗，流速為8. 8ml/min,除去大豆低聚糖等雜質。再用2倍柱體積的20% 乙醇洗脫，流速為8. 8ml/min,除去異黃酮等雜質。最后用2. 5倍柱體積的80%乙醇洗脫，洗脫流速為5. Sml/min，收集大豆皂甙洗脫液，洗脫體積825ml。真空旋干得大豆皂甙粗品，呈棕黃色。皂甙B含量為20.0%，回收率88.0%。將上述大豆皂甙粗品放入燒杯中，加入水， 固液比1 20，在溫度為80°C下使其溶解，以3°C/h的降溫速率，降溫到20°C，然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到第一步產品。該步得到的產品純度為陽.0%，回收率64. 0%, 呈淺黃色。最后將上一步的產品，加水，固液比1 35，在溫度為80°C下使其溶解，以；TC/ h的降溫速率，降溫到20°C，然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到產品。產品中大豆皂甙B的含量為85%，總收率為50. 0%，色澤為白色。實施例2 稱取脫脂大豆胚芽(華北制藥廠提供)300g，加入6000ml60%的乙醇溶液。在回流罐內，加熱至沸騰回流提取證，趁熱過濾，得到提取液。通過減壓閃蒸除去提取液中的乙醇， 濃縮至約原來體積的1/5。再向濃縮液加入600ml水作為上樣液。層析柱尺寸0^6*700mm。 內裝DlOl樹脂(南開大學提供)約200g(約^Ktoil的樹脂)。上樣大豆皂甙B原料液濃度為2. 43mg/ml，上樣體積為4. 5倍柱體積，上樣流速為2. 42ml/min。上樣及洗脫溫度為 20°C。先用4倍柱體積的水洗，流速為14. 5ml/min，除去大豆低聚糖等雜質。再用4倍柱體積的5%乙醇洗脫，流速為14. 5ml/min，除去異黃酮等雜質。最后用4倍柱體積的50%乙醇洗脫，洗脫流速為2. 42ml/min，收集大豆皂甙洗脫液，洗脫體積1160ml。真空旋干得大豆皂甙粗品，呈棕黃色。皂甙B含量為18.6%，回收率90.0%。將上述大豆皂甙粗品放入燒杯中，加入水，固液比1 30，在溫度為80°C下使其溶解，以l°C/h的降溫速率，降溫到30°C， 然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到第一步產品。該步得到的產品純度為49.0%，回收率60.0%，呈淺黃色。最后將上一步的產品，加水，固液比1 45，在溫度為80°C下使其溶解，以1°C /h的降溫速率，降溫到30°C，然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到產品。產品中大豆皂甙B的含量為78%，總收率為48.4%，色澤為白色。實施例3 稱取脫脂大豆胚芽(華北制藥廠提供)300g，加入6000ml90 %的乙醇溶液。在回流罐內，加熱至沸騰回流提取池，趁熱過濾，得到提取液。通過減壓閃蒸除去提取液中的乙醇， 濃縮至約原來體積的1/4。再向濃縮液加入IOOml水作為上樣液。層析柱尺寸0^6*700mm。 內裝NKA樹脂(南開大學提供)約M5g (約350ml的樹脂)。上樣大豆皂甙B原料液濃度為 0. 77mg/ml，上樣體積為13倍柱體積，上樣流速為17. 5ml/min。上樣及洗脫溫度為30°C。先用1倍柱體積的水洗，流速為2. 92ml/min,除去大豆低聚糖等雜質。再用1倍柱體積的40% 乙醇洗脫，流速為2.92ml/min，除去異黃酮等雜質。最后用1倍柱體積的90%乙醇洗脫，洗脫流速為17. 5ml/min，收集大豆皂甙洗脫液，洗脫體積350ml。真空旋干得大豆皂甙粗品， 呈棕黃色。皂甙B含量為對.5%，回收率73.0%。將上述大豆皂甙粗品放入燒杯中，加入 30%乙醇，固液比1 10，在溫度為80°C下使其溶解，以7°C/h的降溫速率，降溫到0°C，然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到第一步產品。該步得到的產品純度為47.5%，回收率 49.0%，呈淺黃色。最后將上一步的產品，加30%乙醇，固液比1 25，在溫度為80°C下使其溶解，以7。C /h的降溫速率，降溫到0°C，然后離心分離母液和結晶，冷凍干燥得到產品。 產品中大豆皂甙B的含量為63%，總收率為32. 0%，色澤為淡黃色。
權利要求
1. 一種大豆皂甙B的制備方法，其特征在于具體步驟如下1).以脫脂大豆胚芽為原料，加入體積百分比為60%-90%的乙醇，固液比為1 20， 加熱至沸騰，回流提取2-5個小時，過濾濃縮至原來體積的1/3-1/5 ；2).將濃縮液加水后通入裝有NKA或DlOl樹脂的吸附柱中，在溫度為20-30°C范圍內， 以流速為0. 5-3倍柱體積/小時上樣；3).用1-4倍柱體積的水，在溫度為20-30°C范圍內，以流速為0.5-3倍柱體積/小時洗去雜質；4).用1-4倍柱體積體積百分比為5-40%的乙醇，在溫度為20-30°C范圍內，以流速為 0. 5-3倍柱體積/小時洗去雜質；5).用1-4倍柱體積體積百分比為50-90%的乙醇，在溫度為20-30°C范圍內，以流速為 0. 5-3倍柱體積/小時洗脫產物；6).將得到的洗脫液旋轉蒸發，得到大豆皂甙粗品；7).將上述粗品加入水或體積百分比為30%乙醇做為結晶溶劑，固液比為1 10-30， 在80°C下溶解，按1_7°C /小時的降溫速率冷卻到0-30°C，離心，干燥得到較純的大豆皂甙 B ；8).將第7)步得到的產品加入水或體積百分比為30%乙醇做為結晶溶劑，固液比為 1 25-45，在80°C下溶解，按1_7°C /小時的降溫速率冷卻到0_30°C，離心，干燥得到純度較高的大豆皂甙B。
全文摘要
本發明公開了一種大豆皂甙B的制備方法，以解決大豆皂甙B的生產成本高，污染環境和工業化問題。本發明的工藝包括以下步驟1.脫脂大豆胚芽中皂甙的提取；2.過濾濃縮；3.過大孔吸附樹脂；4.梯度洗脫大孔樹脂柱，得到大豆皂甙；5.通過第一次結晶得到大豆皂甙B粗品；6.重結晶得到高純度大豆皂甙B。本發明是大豆皂甙B可以進行工業化，并且對環境友好。
文檔編號C07H15/256GK102516349SQ20111034340
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月3日 優先權日2011年11月3日
發明者袁其朋, 趙麗 申請人:北京化工大學