1.利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,將鱈魚內臟粉碎,用堿性乙醇液攪拌提取,提取液經包合凈化劑脫膽固醇、脫色后得到粗磷脂;粗磷脂經超聲強化超臨界萃取、聚苯乙烯凝膠柱層析得到高純度多不飽和脂肪酸磷脂。
2.如權利要求1所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,包括以下步驟:
(1)將鱈魚內臟粉碎,加入85~100%的堿性乙醇液攪拌提取2~3次,每次2~4小時,合并提取液,用鹽酸調pH值到中性;
(2)提取液中加入包合凈化劑,攪拌30~50min,離心取上清液,于低于50℃下減壓濃縮,得到脫膽固醇、脫色的粗磷脂;
(3)粗磷脂用少量無水乙醇溶解,用適量活性白土分散,揮干溶劑,進行超聲強化超臨界CO2提取,超聲頻率為10~25KHz,萃取溫度為20~24℃,萃取壓力為20~26Mpa,萃取時間為1~2.5h,CO2流量為10~15L/h,萃取結束后收集總磷脂;
(4)總磷脂用少量二氯甲烷溶解后,過濾,經Bio-Beads S-X2聚苯乙烯凝膠柱層析,環己烷洗脫除去小極性雜質后,環己烷-乙酸乙酯洗脫劑洗脫,收集洗脫液,薄層色譜檢測后,合并洗脫液,于低于50℃下減壓濃縮,干燥,得到精制磷脂。
3.如權利要求2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述步驟(1)中的鱈魚內臟原料與堿性乙醇液按照質量體積比1:6~1:12混合;堿性乙醇液為向乙醇液中添加堿性物質,使其pH達到9.0~10.0。
4.如權利要求2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述包合凈化劑為β-環糊精和活性炭的混合物,其中,β-環糊精和活性炭的重量比例為1:10,包合凈化劑用量為每1000mL提取液中加入10~40g包合凈化劑。
5.如權利要求2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述步驟(2)中離心轉速為3000~5000rpm。
6.如權利要求2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述步驟(3)中活性白土的用量為粗磷脂重量的2~4倍,超聲頻率為18~24KHz,萃取溫度為20~24℃,萃取壓力為22~24Mpa,萃取時間為1.5~2h,CO2流量為10~15L/h。
7.如權利要求2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述步驟(4)中洗脫劑為環己烷-乙酸乙酯按照1:1比例混合后的溶劑,洗脫速度為每小時0.5~1.5倍柱體積。
8.如權利要求1或2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所述的鱈魚內臟包括生殖腺,如卵和魚白;心臟、肝臟、胃和腸。
9.如權利要求1或2所述的利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法,其特征是,所獲得的磷脂純度大于等于97%。