本發明涉及微生物檢測，特別涉及微生物ATP釋放試劑及檢測方法。
背景技術：
ATP生物發光法是一種用于分析待檢測樣品中有無微生物及其數量的方法。傳統微生物培養耗時費力，在實際應用中有較大的限制。而該方法具有靈敏，快速，簡便，穩定等優勢，可將ATP數量化，用熒光強度把光定量，廣泛應用于食品工業，醫藥，生物學等領域。
ATP生物發光法采用的反應體系是蟲熒光素-熒光素酶體系，微生物體內的ATP經過破裂釋放而出，在蟲熒光素酶的催化作用下，與體系中的蟲熒光素在有氧環境及二價鎂離子的共同作用下，反應釋放熒光。
當蟲熒光素及熒光素酶在過量的情況下，釋放的熒光與ATP在一定范圍內成線性關系，我們可以通過監測熒光光強，判斷出檢測樣品中的ATP含量，進而表征出其中的細菌總數。
因此，微生物中ATP的釋放量會直接影響到測試結果，選擇合適的ATP釋放試劑至關重要，若ATP釋放不完全，則會使測試結果偏低。并且ATP是一種易降解的能量物質，若釋放試劑會破壞ATP，也會導致測試結果偏低。同時，若釋放試劑影響到反應體系的活性，也會造成結果的不準確。
目前，眾多研究中涉及到的ATP釋放試劑包括酸(如TCA)，以及季銨鹽內表面活性劑等。
針對酸類，適用范圍較廣，但若濃度小了，細菌裂解不完全，若濃度大了，則會嚴重影響到發光試劑的活性，使測試結果不準確。
而季銨鹽類表面活性劑，同樣適用范圍較廣，對發光試劑的活性影響較小，但是該類試劑振蕩時容易起泡，并且低溫情況下有晶體析出，嚴重影響發光測試，不利于廣泛使用。
技術實現要素：
為解決上述現有技術方案中的不足，本發明提供了一種穩定性好、高效、干擾地、應用廣泛的微生物ATP釋放試劑。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的：
一種微生物ATP釋放試劑；所述微生物ATP釋放試劑包括：
Tris-堿：20-30mM；EDTA.2Na：0.1-0.4g/L；TritonX-100：0.9-1.2％；溶菌酶：0.5-1.5mg/mL；甘油：9-12％；上述百分比是體積百分比。
本發明的目的還在于提供了一種應用上述微生物ATP釋放試劑的微生物檢測方法，該發明目的通過以下技術方案得以實現：
微生物檢測方法，所述微生物檢測方法包括以下步驟：
(A1)向待檢測樣中加入上述的微生物ATP釋放試劑，并混合，得到ATP裂解液；
(A2)ATP裂解液加入到生物發光反應體系中，并混合；
(A3)采集熒光，獲得ATP的量，從而得出微生物的量。
與現有技術相比，本發明具有的有益效果為：
1.應用廣泛：環境中微生物種類繁多，該試劑能夠盡可能的將所有種類的微生物裂解；
2.ATP釋放高效：能在短時間內破壞微生物，并充分釋放ATP；
3.低干擾：該試劑不會破壞ATP，并且不會影響到發光試劑的活性；
4.穩定性好：該試劑不易受到環境的影響，在低溫條件下保存，穩定性可持續半年以上。
具體實施方式
以下說明描述了本發明的可選實施方式以教導本領域技術人員如何實施和再現本發明。為了教導本發明技術方案，已簡化或省略了一些常規方面。本領域技術人員應該理解源自這些實施方式的變型或替換將在本發明的范圍內。本領域技術人員應該理解下述特征能夠以各種方式組合以形成本發明的多個變型。由此，本發明并不局限于下述可選實施方式，而僅由權利要求和它們的等同物限定。
實施例1：
本發明實施例的微生物的檢測方法，所述微生物的檢測方法包括以下步驟：
(A0)在無菌環境中，配置生物發光反應體系，包括：蟲熒光素-熒光素酶、Mg2+；
(A1)以體積比1:1的比例向待檢測樣中加入微生物ATP釋放試劑，并混合，得到ATP裂解液；
所述微生物ATP釋放試劑包括：Tris-堿：25mM；EDTA.2Na：0.3g/L；TritonX-100：1.0％；溶菌酶：1.0mg/mL；甘油：10％；上述百分比是體積百分比；微生物ATP釋放試劑的PH值為7.8；
(A2)ATP裂解液加入到生物發光反應體系中，并混合；
(A3)采集熒光，獲得ATP的量，從而得出微生物的量。
實施例2：
本發明實施例的微生物的檢測方法，所述微生物的檢測方法包括以下步驟：
(A0)在無菌環境中，配置生物發光反應體系，包括：蟲熒光素-熒光素酶、Mg2+；
(A1)以體積比1:1的比例向待檢測樣中加入微生物ATP釋放試劑，并混合，得到ATP裂解液；
所述微生物ATP釋放試劑包括：Tris-堿：20mM；EDTA.2Na：0.4g/L；TritonX-100：1.2％；溶菌酶：1.5mg/mL；甘油：12％；上述百分比是體積百分比；
(A2)ATP裂解液加入到生物發光反應體系中，并混合；
(A3)采集熒光，獲得ATP的量，從而得出微生物的量。
實施例3：
本發明實施例的微生物的檢測方法，所述微生物的檢測方法包括以下步驟：
(A0)在無菌環境中，配置生物發光反應體系，包括：蟲熒光素-熒光素酶、Mg2+；
(A1)以體積比1:1的比例向待檢測樣中加入微生物ATP釋放試劑，并混合，得到ATP裂解液；
所述微生物ATP釋放試劑包括：Tris-堿：30mM；EDTA.2Na：0.1g/L；TritonX-100：0.9％；溶菌酶：0.5mg/mL；甘油：9％；上述百分比是體積百分比；
(A2)ATP裂解液加入到生物發光反應體系中，并混合；
(A3)采集熒光，獲得ATP的量，從而得出微生物的量。