br>[0083] 可溶性透明質酸酶糖蛋白（sHASEGP)、其制備方法及其在藥物組合物中的用途已 經記載于W0 2004/078140。已經在W0 2006/091871中提及與多種例示性抗體，諸如例如曲 妥單抗組合使用可溶性透明質酸酶糖蛋白。
[0084] 如下文進一步概述的詳細實驗工作已經顯示了，令人驚訝地，本發明的配制劑具 有有利的貯存穩定性，而且滿足健康權力機構批準的所有必需要求。
[0085] 本發明的配制劑中的透明質酸酶酶增強抗HER2抗體對系統循環的投遞，例如通 過增加活性物質的吸收來實現（它充當滲透增強劑）。透明質酸酶酶還通過可逆水解乙酰 透明質酸（即SC間質組織的一種胞外組分）來提高治療性抗HER2抗體經由皮下應用路徑 對系統循環的投遞。下皮中的乙酰透明質酸水解暫時打開SC組織的間質空間中的通道，并 且由此改善治療性抗HER2抗體對系統循環的投遞。另外，施用顯示了人的疼痛降低和SC 組織的體積衍生的腫脹較小。
[0086] 透明質酸酶在局部施用時在局部具有其全部效應。換言之，透明質酸酶在數分鐘 中局部失活并代謝，而且尚未注意到具有系統或長期效應。在透明質酸酶進入血流時它在 數分鐘內快速失活排除在不同透明質酸酶產品間實施可比較的生物分布研究的實際能力。 此特性還使任何潛在的系統安全性憂慮最小化，這是因為透明質酸酶產品不能在遠離的部 位起作用。
[0087] 所有透明質酸酶酶的統一特征是其解聚乙酰透明質酸的能力，不管化學結構、物 種來源、組織來源、或源自相同物種和組織的藥物產品的批次的差異。它們的與眾不同之處 在于，盡管具有不同結構，它們的活性是相同的（除了效力外）。
[0088] 依照本發明的配制劑的透明質酸酶酶賦形劑以對本文中所描述的穩定的藥物配 制劑中的抗J1ER2抗體的分子完整性沒有不利影響為特征。此外，透明質酸酶酶僅僅修飾抗HER2抗體對系統循環的投遞，但是不擁有可以提供或促成系統吸收的抗HER2抗體的治療 效果的任何特性。透明質酸酶酶不是系統生物利用的，并且在依照本發明的穩定的藥物配 制劑的推薦貯存條件沒有不利地影響抗J1ER2抗體的分子完整性。因此，它被認為是依照本 發明的抗HER2抗體配制劑中的賦形劑。因為它不施加治療效果，所以它代表除治療活性抗 HER2抗體外的藥學形式組分。
[0089] 依照本發明的許多合適的透明質酸酶酶自現有技術已知。優選的酶是人透明質 酸酶酶，最優選地稱為rHuPH20的酶。rHuPH20是通過水解N-乙酰基葡糖胺的Q位置與 葡糖醛酸的C4位置間的0 _1，4連接來解聚乙酰透明質酸的中性和酸性活性0 _1，4糖基 水解酶家族成員。乙酰透明質酸是一種在結締組織，諸如皮下間質組織，和某些特化組織， 諸如臍帶和玻璃體液的胞內基質中找到的多糖。乙酰透明質酸的水解暫時地降低間質組 織的粘性，并且促進注射流體或局部漏出液或滲出物的分散，如此便于其吸收。透明質酸酶 的效果是局部的，并且在24至48小時內發生的組織乙酰透明質酸完全重建的情況中可逆 [Frost，G.I./'Recombinanthumanhyaluronidase(rHuPH20)：anenablingplatformfor subcutaneousdrugandfluidadministration'，，ExpertOpiniononDrugDelivery, 2007 ;4 :427-440]。經由水解乙酰透明質酸的結締組織滲透性升高與透明質酸酶在其提高 共施用分子的分散和吸收能力方面的功效相關聯。
[0090] 人基因組含有數種透明質酸酶基因。僅PH20基因產物擁有生理學胞外條件下的 有效透明質酸酶活性，并且充當鋪展劑，而酸性活性透明質酸酶沒有此特性。
[0091]rHuPH20是目前可用于治療用途的第一種且唯一的重組人透明質酸酶酶。天然存 在的人PH20蛋白具有將其錨定于質膜的附著于羧基端氨基酸的脂質錨。由Halozyme開發 的rHuPH20酶是一種截短的刪除變體，其缺乏負責脂質附著的羧基端的此類氨基酸。這生 成與牛睪丸制備物中找到的蛋白質相似的可溶性中性pH活性酶。rHuPH20蛋白與35個氨 基酸的信號肽一起合成，所述信號肽在分泌過程期間自N端除去。成熟的rHuPH20蛋白含 有與一些牛透明質酸酶制備物中找到的N端氨基酸序列直向同源的真實N端氨基酸序列。
[0092]PH20透明質酸酶（包括動物衍生的PH20和重組人rHuPH20)通過水解N-乙酰 基葡糖胺的Q位置與葡糖醛酸的(：4位置間的0-1，4連接來解聚乙酰透明質酸。四糖 是最小的消化產物[Weissmann，B.，"Thetransglycosylativeactionoftesticular hyaluronidase"，J.Biol.Chem.，1955 ;216 :783_94]。此N-乙酰基葡糖胺 / 葡糖醛酸結構 未在重組生物學產物的N連接的聚糖中找到，并且因此，rHuPH20不會影響與其一起配制的 抗體，諸如例如曲妥單抗的糖基化。rHuPH20酶自身擁有每個分子6個N連接的聚糖，其中 核心結構與單克隆抗體中找到的核心結構相似。如預期的，這些N連接的結構不隨時間變 化，確認rHuPH20對這些N-連接的聚糖結構的酶活性的缺乏。rHuPH20的短半衰期和乙酰 透明質酸的持續合成導致酶對組織的短的且局部的作用。
[0093] 可以通過使用重組DNA技術來制備作為依照本發明的皮下配制劑中的賦形劑的 透明質酸酶酶。因此，確保始終獲得相同蛋白質（相同的氨基酸序列），并且避免例如由自 組織提取期間共純化的污染性蛋白質引起的變應性反應。如本文中例示的配制劑中使用的 透明質酸酶酶是人酶，即rHuPH20。
[0094]rHuPH20 (HYLENEX?)的氨基酸序列是公知的，并且以CAS登記號75971-58-7可獲 得。近似的分子量是61kDa。
[0095] 已經在天然來源的哺乳動物透明質酸酶與來自人和其它哺乳動物的PH-20cDNA 克隆間實施多重結構和功能比較。PH-20基因是重組產物rHuPH20使用的基因；然而，重組 藥物產物是一種由PH-20基因編碼的完整蛋白質的447個氨基酸的截短型式。就氨基酸序 列而言的結構相似性在任何比較中很少超過60%。功能比較顯示rHuPH20的活性與先前批 準的透明質酸酶產品的活性非常相似。此信息與過去50年期間的臨床發現一致，即不管透 明質酸酶來源，透明質酸酶的臨床安全性和單位功效是等同的。
[0096]rHuPH20在依照本發明的抗HER2抗體SC配制劑中的使用容許施用較高體積的藥 物產物，并且潛在地增強皮下施用的曲妥單抗吸收入系統循環中。
[0097] 依照本發明的穩定的藥物配制劑的摩爾滲透壓濃度是330±50m0sm/kg。
[0098] 依照本發明的穩定的藥物配制劑基本上沒有可見的（人眼檢查）顆粒。亞-可見 的顆粒（如通過光遮蔽測量的）應當滿足下列標準：
[0099] _每個管形瓶彡10ym顆粒的最大數目-> 6000
[0100] -每個管形瓶彡25ym顆粒的最大數目-> 600
[0101] 在又一方面，本發明提供了配制劑用于制備可用于治療受試者中適合于用抗J1ER2 抗體治療的疾病或病癥，諸如例如癌癥或非惡性疾病的藥物的用途，包括以有效治療所述 疾病或病癥的量對受試者施用本文中所描述的配制劑。可以與化療劑伴隨或序貫共施用抗 HER2抗體。
[0102] 在又一方面，本發明提供了治療受試者中適合于用抗HER2抗體治療的疾病或病 癥（例如癌癥或非惡性疾病）的方法，包括以有效治療所述疾病或病癥的量對受試者施用 本文中所描述的配制劑。癌癥或非惡性疾病一般會牽涉J1ER2表達細胞，使得依照本發明的 治療性藥物SC配制劑中的HER2抗體能夠結合受影響的細胞。下文的定義部分中進一步列 出了可以用依照本發明的配制劑治療的各種癌癥或非惡性疾病。
[0103] 可以將依照本發明的藥學活性抗HER2抗體的穩定的藥物配制劑作為皮下注射施 用，其中以3周時間間隔（q3w)重復施用幾次。在大多數情況中在1至10分鐘，優選地2 至6分鐘，最優選地3 ± 1分鐘的時間段內施用注射流體的整個體積。在佐劑EBC患者中及 接受曲妥單抗單一療法的MBC患者（其中沒有給予其它靜脈內（IV)化療劑）中，此類皮下 施用導致患者便利增加及在家自身施用的潛力。這導致改善的順從性，并且降低/消除與 IV施用有關的成本（即，IV施用的護理成本、躺椅租費、患者出行等）。依照本發明的皮下 施用最可能會與輸注相關反應的頻率和/或強度降低有關。
[0104] 對配制劑添加透明質酸酶容許增加可以安全且舒適地皮下施用的注射體積。在 正常的情況下，注射體積是1至15ml。已經觀察到依照本發明的配制劑的施用提高治療 性抗體的分散、吸收和生物利用度。經由SC路徑施用的大分子（即大于16kDa)經由引 流淋巴液優先吸收入血管區室中[Supersaxo，A?等，"EffectofMolecularWeighton theLymphaticAbsorptionofWater-SolubleCompoundsFollowingSubcutaneous Administration1990 ；2 ：167-169 ；Swartz,M.A./^AdvancedDrugDeliveryReview,The physiologyofthelymphaticsystem"，2001;50:3-20]。如此，這些大分子引入系統循環 的速率相對于靜脈內輸注是減緩的，因此潛在地導致輸注相關反應的頻率/強度降低。
[0105] 依照本發明的皮下曲妥單抗配制劑的生成要求制造工藝的最終純化步驟中的高 抗體濃度（約120mg/ml)。因此，將額外的工藝步驟（超濾/滲濾）添加至曲妥單抗的常規 制造工藝。依照W0 97/04801中的教導，依照本發明的高度濃縮的穩定的藥物抗HER2抗體 配制劑也可以以穩定化的蛋白質配制劑提供，所述穩定化的蛋白質配制劑可以用合適的稀 釋劑重建以生成高抗J1ER2抗體濃度重建的配制劑。
[0106] 主要使用依照本發明的HER2抗體SC配制劑來治療癌癥。其中，術語"癌癥"和"癌 性"指或描述哺乳動物中通常以不受調節的細胞生長為特征的生理學狀況。癌癥的例子包 括但不限于癌瘤、淋巴瘤、母細胞瘤（包括髓母細胞瘤和視網膜母細胞瘤）、肉瘤（包括脂肪 肉瘤和滑膜細胞肉瘤）、神經內分泌腫瘤（包括類癌瘤、胃泌素瘤、和胰島細胞癌）、間皮瘤、 神經鞘瘤（schwannoma)(包括聽神經瘤）、腦膜瘤、腺癌、黑素瘤、和白血病或淋巴樣惡性腫 瘤。此類癌癥的更具體例子包括鱗狀細胞癌（例如上皮鱗狀細胞癌）、肺癌（包括小細胞肺 癌、非小細胞肺癌、肺腺癌和肺鱗癌）、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌（包括胃腸癌）、胰腺癌、成膠 質細胞瘤、宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝瘤、乳腺癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮 內膜或子宮癌瘤、唾液腺癌、腎癌、前列腺癌、外陰癌、甲狀腺癌、肝癌、肛門癌、陰莖癌、睪丸 癌、食管癌、膽管腫瘤、及頭和頸癌。
[0107] 如本專利說明書中所使用的，術語"約"意指規定所提供的特定數值可以以某種程 度變化，諸如例如意指給定數值中包括范圍為±10%，優選地±5%，最優選地±2%的變 化。
[0108] "過表達"HER受體的癌癥是與相同組織類型的非癌性細胞相比在其細胞表面上具 有顯著更高水平的HER受體，諸如HER2的癌癥。此類過表達可以由基因擴增或由轉錄或翻 譯升高引起。可以在診斷或預后測定法中通過評估細胞表面上存在的ffiR蛋白的水平升高 (例如經由免疫組織化學測定法；IHC進行）來測定HER受體過表達。或者/另外，可以例 如經由熒光原位雜交（FISH;見W098/45479)、Southern印跡、或聚合酶鏈式反應（PCR)技 術，諸如實時定量PCR(RT-PCR)來測量細胞中的HER編碼核酸的水平。也可以通過測量生物 學流體，諸如血清中的脫落抗原（例如，HER胞外域）來研究HER受體過表達[見例如1990 年6月12日公告的美國專利No. 4,933,294 ;1991年4月18日公布的W091/05264 ;1995年 3月28日公告的美國專利5,401，638;及51&8等，了.1臟111101.]^七11〇(18 1990;132:73-80]〇 除了上述測定法外，各種體內測定法是熟練從業人員可用的。例如，可以將患者身體內的細 胞暴露于任選地用可檢測標記物，例如放射性同位素標記的抗體，并且可以例如通過外部 掃描放射性或者通過分析自先前暴露于抗體的患者采集的活組織檢查來評估抗體對患者 中的細胞的結合。
[0109] 相反地，"不過表達HER2受體"的癌癥是與相同組織類型的非癌性細胞相比不表達 比正常水平高的HER2受體的癌癥。
[0110] "過表達"HER配體的癌癥是與相同組織類型的非癌性細胞相比生成顯著更高水平 的所述配體的癌癥。此類過表達可以由基因擴增或由轉錄或翻譯升高引起。可以通過評估 患者中，例如腫瘤活組織檢查中的配體（或其編碼核酸）的水平或者通過各種診斷測定法， 諸如IHC、FISH、Southern印跡、PCR或本領域中公知的體內測定法來診斷性測定HER配體 的過表達。
[0111] 涵蓋的是，也可以使用依照本發明的HER2抗體SC配制劑來治療各種非惡性疾 病或病癥，其包括自身免疫性疾病（例如銀肩病）；子宮內膜異位癥；硬皮病；再狹窄；息 肉，諸如結腸息肉、鼻息肉或胃腸息肉；纖維腺瘤；呼吸系統疾病；膽囊炎；神經纖維瘤病； 多囊腎病；炎性疾病；皮膚病癥，包括銀肩病和皮炎；血管疾病；牽涉血管上皮細胞的異 常增殖的狀況；胃腸潰瘍；門內特里埃（Menetrier)氏病、分泌型腺瘤或蛋白質損失綜合 征（proteinlosssyndrome);腎病癥；血管生成性病癥（angiogenicdisorder);眼病， 諸如年齡相關黃斑變性、推測的眼組織胞漿菌病綜合征、來自增殖性糖尿病視網膜病變的 視網膜新血管化、視網膜血管化、糖尿病視網膜病變、或年齡相關黃斑變性；骨相關病理 學，諸如骨關節炎、佝僂病和骨質疏松；腦缺血事件后的損傷；纖維變性或水腫疾病，諸如 肝硬變、肺纖維化、結節病（carcoidosis)、甲狀腺炎（throiditis)、系統性高粘滯綜合 征（hyperviscositysyndromesystemic)、OsierWeber-Rendu疾病、慢性阻塞性肺疾 病（occlusivepulmonarydisease)、或燒傷、創傷、福射、中風、缺氧或缺血后的水腫；皮 膚的超敏感性反應；糖尿病視網膜病和糖尿病腎病；格-巴二氏綜合征（Guillain-Barre syndrome);移植物抗宿主病或移植排斥；佩吉特（Paget)氏病；骨或關節炎癥；光老化 (例如由對人皮膚的UV輻射引起的）；良性前列腺肥大；某些微生物感染，包括選自下組 的微生物病原體：腺病毒、漢坦病毒、布氏疏螺旋體（Borreliaburgdorferi)、耶爾森氏菌 (Yersiniaspp.)和百日咳博德特氏菌（Bordetellapertussis);由血小板聚集引起的 血栓；生殖狀況，諸如子宮內膜異位癥、卵巢過度刺激綜合征、先兆子癇、功能障礙性子宮 出血、或月經頻多；滑膜炎；粥樣斑；急性和慢性腎病（包括增殖性腎小球腎炎和糖尿病誘 導的腎病）；濕疹；肥厚性瘢痕形成；內毒素性休克和真菌感染；家族性腺瘤病息肉病；神 經變性性疾病（例如阿耳茨海默（Alzheimer)氏病、AIDS相關癡呆、帕金森（Parkinson) 氏病、肌萎縮側索硬化、視網膜色素變性、脊柱性肌萎縮（spinalmuscularatrophy)和小 腦變性）；骨髓增生異常綜合征；再生障礙性貧血；缺血性損傷；肺、腎或肝的纖維化；T細 胞介導的超敏感性疾病；嬰兒肥大性幽門狹窄；泌尿阻塞綜合征（urinaryobstructive syndrome);銀肩病關節炎；和橋本（Hasimoto)氏甲狀腺炎。本文中的療法的例示性非惡性 適應癥包括銀肩病、子宮內膜異位癥、硬皮病、血管疾病（例如再狹窄、動脈粥樣硬化、冠狀 動脈疾病、或高血壓）、結腸息肉、纖維腺瘤或呼吸系統疾病（例如，哮喘、慢性支氣管炎、支 氣管擴張或囊性纖維化病）。
[0112] 在適應癥是癌癥的情況中，可以用抗體配制劑和化療劑的組合治療患者。聯合施 用包括共施用或同時施用（其使用分開的配制劑或單一藥物配制劑進行）和以任意次序的 連續施用，其中優選地，存在著所有活性劑同時施加其生物學活性的時間段。如此，可以在 施用依照本發明的抗體配制劑之前、或之后施用化療劑。在此實施方案中，化療劑的至少一 次施用與依照本發明的抗體配制劑的至少一次施用間的時機優選地是約1個月或更小，且 最優選地約2周或更小。或者，可以在單一配制劑或分開的配制劑中對患者同時施用化療 劑和依照本發明的抗體配制劑。
[0113] 用所述抗體配制劑的治療會導致癌癥或疾病的體征或癥狀的改善。例如，在所治 療的疾病是癌癥的情況中，此類療法可以導致存活（總體存活和/或無進展存活）的改善 和/或可以導致客觀臨床響應（部分的或完全的）。此外，用化療劑和抗體配制劑的組合治 療可以對患者產生協同或大于疊加的治療益處。
[0114] 通常，所施用配制劑中的抗體是裸抗體。然而，所施用的抗體可以與細胞毒劑綴 合。然后，免疫綴合物和/或其結合的抗原被細胞內在化，導致免疫綴合物在殺死其結合的 癌細胞方面的治療功效升高。在一個實施方案中，細胞毒劑靶向或干擾癌細胞中的核酸。 此類細胞毒劑的例子包括美登木素生物堿類、加利車霉素（calioheamicin)、核糖核酸酶和 DNA內切核酸酶。臨床上最先進的免疫綴合物是曲妥單抗-美登木素生物堿類免疫綴合物 (T-DM1)，如它們記載于W0 2003/037992的，特別是免疫綴合物T-MCC-DM1，其化學名稱是 N2' -脫乙酰基-N2' -(3-巰基-1-氧丙基）-美登素-4-馬來酰亞胺基甲基-環己基-1-羧 基-曲妥單抗。
[0115] 對于皮下投遞，可以經由合適的裝置，諸如（但不限于）注射器；注射裝置（例 如INJECT-EASE?和GENJECT?裝置）；輸注栗（諸如例如Accu-Chek?);注射筆（諸如 GENPEN?; -種無針裝置（例如MEDDECTOR?和BI0JECT0R?);或者經由皮下貼片投遞系統來 施用配制劑。適合于依照本發明的配制劑的投遞系統記載于W0 2010/029054。此類裝置包 含約5至約15ml或更具體地5ml依照本發明的液體配制劑。
[0116] 對于預防或治療疾病，抗體的合適劑量會取決于要治療的疾病類型（如上文所限 定的）、疾病的嚴重性和過程、抗體是出于預防還是治療目的施用、先前的療法、患者的臨床 史及他對抗體的響應、和主治內科醫生的判斷。在一次或一系列治療里對患者適當地施用 抗體。根據疾病的類型和嚴重性，約1yg/kg至50mg/kg體重或更具體地約0.lmg/kg至 20mg/kg體重的抗HER2抗體是對患者施用的候選初始劑量，其例如通過一次或多次分開 的施用，或者通過連續輸注來進行。更具體地，抗體的劑量會在約0. 05mg抗HER2抗體/kg 體重至約l〇mg抗HER2抗體/kg體重的范圍中。若施用化療劑，因此它通常以已知的劑量 施用，或者任選地由于藥物的組合作用或可歸因于化療劑施用的負面副作用而降低。可以 依照制造商的指令或如熟練從業人員憑經驗確定的那樣使用此類化療劑的制備和劑量給 藥日程表。此類化學療法的制備和劑量給藥日程表也記載于ChemotherapyServiceEd.， M.C.Perry，Williams&Wilkins，Baltimore，MD(1992)〇
[0117] 其它治療方案可以與抗體組合，包括但不限于第二（第三、第四等）化療劑（換言 之，不同化療劑的"混合物（cocktail"）；另一種單克隆抗體；生長抑制劑；細胞毒劑；化療 劑；EGFR靶向藥物；酪氨酸激酶抑制劑；抗血管生成劑；和/或細胞因子等；或其任何合適 的組合。
[0118] 在上述治療方案外，患者可以進行癌細胞的手術除去和/或放射療法。
[0119] 在本發明的另一個實施方案中，提供了制品，其含有本發明的藥物配制劑且提供 其使用指令。此制品包含容器。合適的容器包含例如瓶、管形瓶（例如多或雙室管形瓶）、 注射器（諸如多或雙室注射器）和試管。容器可以自多種材料諸如玻璃或塑料形成。容器 容納配制劑，并且容器上或與容器結合的標簽可以指示使用指導。容納配制劑的容器可以 是多次使用管形瓶，其容許重建配制劑的重復施用（例如2至6次施用）。制品可以進一步 包含從商業和用戶觀點看期望的其它材料，包括其它緩沖液、稀釋劑、濾器、針、注射器、和 具有使用指令的包裝插頁。
[0120] 術語"藥物配制劑"指處于使得容許活性成分的生物學活性有效的形式，且不含對 于會接受配制劑施用的受試者具有不可接受的毒性的別的組分的制劑。此類配制劑是無菌 的。
[0121] "無菌"配制劑是無菌的或沒有所有活的微生物及其孢子。
[0122] "穩定的"配制劑是其中的所有蛋白質在于預期的貯存溫度，例如2_8°C貯存后基 本上保留其物理穩定性和/或化學穩定性和/或生物學活性的配制劑。期望的是，配制劑在 貯存后基本上保留其物理和化學穩定性，及其生物學活性。一般地，基于配制劑的預期保存 期選擇貯存期。此外，配制劑在冷凍（至例如-70°C)和融化配制劑后，例如1、2或3個循 環的冷凍和融化后應當是穩定的。用于測量蛋白質穩定性的各種分析技術在本領域中是可 用的，并且綜述見例如PeptideandProteinDrugDelivery，247_301，VincentLeeEd.， MarcelDek