cacid)、諾拉霉素（nogalamycin)、 橄欖霉素（olivomycin)、培洛霉素（peplomycin)、potfiromycin、卩票呤霉素（puromycin)、 三鐵阿霉素（quelamycin)、羅多比星（rodorubicin)、鏈黑菌素（streptonigrin)、 鏈佐星（streptozocin)、殺結核菌素（tubercidin)、烏苯美司（ubenimex)、凈司 他丁（zinostatin)、佐柔比星（zorubicin);抗代謝物類，諸如甲氨蝶呤、吉西他濱 (gemcitabine) (GEMZAR?)、替加氣（tegafur) (UFT0RAL?)、卡培他濱（capecitabine) (XEL0DA?)、埃博霉素（印othilone)和5-氟尿嘧啶（5-FU);葉酸類似物，諸如二甲葉 酸（denopterin)、甲氨蝶呤、蝶酰三谷氨酸（pteropterin)、三甲曲沙（trimetrexate); 口票呤類似物，諸如氟達拉濱（fludarabine)、6_疏基卩票呤（mercaptopurine)、硫咪卩票呤 (thiamiprine)、硫鳥卩票呤（thioguanine);喃啶類似物，諸如安西他濱（ancitabine)、 阿扎胞苷（azacitidine)、6_氮尿苷、卡莫氟（carmofur)、阿糖胞苷（cytarabine)、雙 脫氧尿苷（dideoxyuridine)、去氧氟尿苷（doxifluridine)、依諾他濱（enocitabine)、 氟尿苷（floxuridine);抗腎上腺類，諸如氨魯米特（aminoglutethimide)、米托坦 (mitotane)、曲洛司坦（trilostane);葉酸補充劑，諸如亞葉酸（folinicacid);醋葡 醛內酯（aceglatone);醛磷酰胺糖苷（aldophosphamideglycoside);氨基乙酰丙酸 (aminolevulinicacid);恩尿喃口定（eniluracil);安 口丫啶（amsacrine)；bestrabucil； 比生群（bisantrene);依達曲沙（edatraxate);地磷酰胺（defofamine);地美可辛 (demecolcine);地口丫酉昆（diaziquone);elfomithine;依利酉昔鞍（elliptiniumacetate)； 依托格魯（etoglucid);硝酸鎵；輕脲（hydroxyurea);香燕多糖（lentinan);氯尼達明 (lonidainine);美登木素生物堿類（maytansinoids)，諸如美登素（maytansine)和安 絲菌素（ansamitocin);米托胍腙（mitoguazone);米托蒽醌（mitoxantrone);莫哌達醇 (mopidamol);二胺硝卩丫啶（nitracrine);噴司他丁（pentostatin);蛋氨氮芥（phenamet); P比柔比星（pirarubicin);洛索蒽醌（losoxantrone) ;2_ 乙基酰肼（ethylhydrazide);丙 卡巴餅（procarbazine) ;PSK?多糖復合物（JHSNaturalProducts，Eugene，OR);雷佐 生（razoxane);根霉素（rhizoxin);西索菲蘭（sizofiran);螺方定鍺（spirogermanium)； 細交鏈孢菌酮酸（tenuazonicacid);三亞胺醌（triaziquone) ;2,2'，2"_三氯三乙胺； 單端孢菌素類（trichothecenes)(尤其是T-2毒素、疏孢菌素（verruca;rin)A、桿孢菌素 (roridin)A和蛇行菌素（anguidin));烏拉坦（urethan);達卡巴嗪（dacarbazine);甘露 醇氮芥（mannomustine);二溴甘露醇（mitobronitol);二溴衛矛醇（mitolactol);哌泊溴 燒（pipobroman);gacytosine;阿糖胞苷（arabinoside) ( "Ara_C"）；塞替派（thiotepa); 類紫杉醇（taxoid)，例如帕利他塞（paclitaxel) (TAX0L?)、清蛋白改造的納米顆粒劑型帕 利他塞（ABRAXANE?)和多西他塞（doxetaxel) (TAX0TERE?);苯丁酸氮芥（chloranbucil); 硫鳥噪呤（thioguanine);疏基噪呤（mercaptopurine);甲氨蝶呤（methotrexate); 鉬劑，諸如順鉬（cisplatin)、奧沙利鉬（oxaliplatin)和卡鉬（carboplatin);長春藥 類（vincas)(其阻止微管蛋白聚合形成微管），包括長春堿（vinblastine) (VELBAN?)、 長春新堿（vincristine) (ONCOVIN?)、長春地辛（vindesine) (ELDISINE?)、FILDESIN?)、 和長春瑞濱（vinorelbine) (NAVELBINE?));依托泊苷（etoposide) (VP-16);異環磷酰胺 (ifosfamide);米托恵酉昆（mitoxantrone);亞葉酉愛（leucovovin);能滅瘤（novantrone)； 依達曲沙（edatrexate);道諾霉素（daunomycin);氨基蝶呤（aminopterin);伊本膦酸 鹽（ibandronate);拓撲異構酶抑制劑RFS2000 ;二氟甲基鳥氨酸（DMF0);類視黃酸 (retinoids)，諸如視黃酸（retinoicacid)，包括貝沙羅汀（bexarotene)(TARGRETIN?); 二膦酸鹽類（bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽（clodronate)(例如B0NEF0S?或 0STAC?)、依替膦酸鈉（etidronate) (DIDROCAL?)、NE-58095、唑來膦酸/唑來膦酸鹽 (zoledronicacid/zoledronate) (Z0META?)、阿倫勝酸鹽（alendronate) (F0SAMAJX?)、帕 米膦酸鹽（pamidronate) (AREDIA?)、替魯膦酸鹽（tiludronate) (SKELID?)或利塞膦酸鹽 (risedronate) (ACT0NEL?);曲沙他濱（troxacitabine) (1，3_ 二氧戊環核苷胞啼啶類似 物）；反義寡核苷酸，特別是抑制牽涉異常（abherant)細胞增殖的信號傳導途徑中的基因 表達的反義寡核苷酸，諸如例如PKC-a、Raf、H_Ras和表皮生長因子受體（EGF-R);疫苗，諸 如THERATOPE?疫苗和基因療法疫苗，例如ALLOVECTIN?疫苗、LEUVECTIN?疫苗和VAXID? 疫苗；拓撲異構酶1抑制劑（例如LURTOTECAN?) ;rmRH(例如ABARELIX?) ;BAY439006(索 拉非尼（sorafenib) ;Bayer) ;SU_11248(Pfizer);哌立福辛（perifosine)、C0X_2 抑制劑 (例如塞來考昔（celecoxib)或依托昔布（etoricoxib))、蛋白體抑制劑（例如PS341);保 特佐米（bortezomib) (VELCADE?) ;CCI_779 ;替P比法尼（tipifarnib) (R1 1577) ;orafenib、 ABT510 ;Bcl_2 抑制劑諸如奧利默森鈉（oblimersensodium) (GENASENSE?);pixantrone; EGFR抑制劑（見下文定義）；酪氨酸激酶抑制劑（見下文定義）；及任何上述物質的藥學可 接受鹽、酸或衍生物；以及兩種或更多種上述物質的組合，諸如CHOP(環磷酰胺、多柔比星、 長春新堿和潑尼松龍聯合療法的縮寫）和F0LF0X(奧沙利鉑（EL0XATIN?)聯合5-FU和亞 葉酸的治療方案的縮寫）。
[0149] 該定義還包括作用為調節或抑制激素對腫瘤作用的抗激素劑，諸如具有混合的激 動劑/詰抗劑概況的抗雌激素，包括他莫昔芬（tamoxifen) (NOLVADEX?)、4_羥基他莫昔芬、 托瑞米芬（toremifene)(FARESTON?)、艾多昔芬（idoxifene)、屈洛昔芬（droloxifene)、 雷洛昔芬（raloxifene)(EVTSTA?)、曲沃昔芬（trioxifene)、那洛昔芬（keoxifene)、和選 擇性雌激素受體調節劑類（SERM)諸如SERM3 ;沒有激動劑特性的純抗雌激素，諸如氟維司 群（fulvestrant) (FASLODEX?)、和EM800(此類藥劑可以阻斷雌激素受體（ER)二聚化、抑 制DNA結合、提高ER周轉、和/或阻抑ER水平）；芳香酶抑制劑，包括類固醇芳香酶抑制 劑諸如福美坦（formestane)和依西美坦（exemestane) (AR0MASIN?)、和非類固醇芳香酶 抑制劑諸如阿那曲唑（anastrazole) (AR頂IDEX?)、來曲唑（letrozole) (FEMARA?)和氨魯 米特（aminoglutethimide)、和其它芳香酶抑制劑，包括伏羅唑（vorozole) (RIVIS0R?)、 醋酸甲地孕酮（megestrolacetate) (MEGASE?)、法倔唑（fadrozole)、咪唑；促黃體生 成激素釋放激素激動劑，包括醋酸亮丙瑞林（leuprolide) (LUPR0N?和ELIGARD?)、戈 舍瑞林（goserelin)、布舍瑞林（buserelin)、和曲普瑞林（triptorelin);性類固醇， 包括妊娠素（progestines)諸如醋酸甲地孕酮（megestrolacetate)和醋酸甲輕孕酮 (medroxyprogesteroneacetate)、雌激素諸如己稀雌酸（diethylstilbestrol)和倍美力 (premarin)、和雄激素/類視黃醇諸如氟甲睪酮、全反視黃酸（transretionicacid)和芬 維A胺（fenretinide);奧那司酮（onapristone);抗孕酮；雌激素受體下調劑（ERD);抗雄 激素諸如氟他胺（flutamide)、尼魯米特（nilutamide)和比卡米特（bicalutamide);睪內 酯（testolactone);及任何上述物質的藥學可接受鹽、酸或衍生物；以及兩種或更多種上 述物質的組合。
[0150] 如本文中所使用的，術語"EGFR靶向藥物"指結合EGFR并任選地抑制EGFR活化的 治療劑。此類藥劑的例子包括結合EGFR的抗體和小分子。結合EGFR的抗體的例子包括單 抗 579(ATCCCRLHB8506)、單抗 455(ATCCCRLHB8507)、單抗 225(ATCCCRL8508)、單抗 528(ATCCCRL8509)(見美國專利No. 4, 943, 533,Mendelsohn等）及其變體，諸如嵌合化 225 (C225 或西妥昔單抗（Cetuximab) ;ERBITUX?)和重構人 225 (H225)(見W0 96/40210， ImcloneSvstemsInc.);結合II型突變體EGFR的抗體（美國專利No. 5, 212, 290);結合 EGFR的人源化的和嵌合的抗體，如美國專利No. 5, 891，996中所描述的；和結合EGFR的人 抗體，諸如ABX-EGF(見W098/50433，Abgenix)。抗EGFR抗體可以與細胞毒劑綴合，如此生 成免疫綴合物（見例如EP-A-659439,MerckPatentGmbH)。結合EGFR的小分子的例子包 括ZD1839 或吉非替尼（Gefitinib) (IRESSA?;AstraZeneca)、CP-358774 或鹽酸厄洛替尼 (ErlotinibHC1)(TARCEVA?Genentech/Roche/OSI)和AG1478，AG1571(SU5271 ;Sugen)〇
[0151] "酪氨酸激酶抑制劑"指以某種程度抑制酪氨酸激酶諸如HER受體的酪氨酸激 酶活性的分子。此類抑制劑的例子包括上一段中記錄的EGFR靶向藥物及小分子HER2 酪氨酸激酶抑制劑諸如可獲自Takeda的TAK1 65、優先結合EGFR但抑制HER2和EGFR 二者過表達細胞的雙重ffiR抑制劑諸如EKB-569 (可獲自Wyeth)、GW572016 (可獲自 Glaxo)，一種口服HER2和EGFR酪氨酸激酶抑制劑、和PKI-166 (可獲自Novartis);泛 HER(pan-HER)抑制劑諸如卡奈替尼（canertinib) (CI-1033 ;Pharmacia) ;Raf_l抑制 劑，諸如可獲自ISISPharmaceuticals的、抑制Raf-1信號傳導的反義劑ISIS-5132 ; 非HER革巴向TK抑制劑，諸如可獲自Novartis的甲磺酸伊馬替尼（Imatinibmesylate) (Gleevec?) ;MAPK胞外調節激酶I抑制劑CI-1040 (可獲自Pharmacia);喹唑啉類，諸 如153035,4-(3_氯苯胺基）喹唑啉；吡啶并嘧啶類；嘧啶并嘧啶類；吡咯并嘧啶類， 諸如CGP59326、CGP60261和CGP62706;吡唑并嘧啶類，4-(苯氨基）-7H-吡咯[2， 3_d]嘧啶；姜黃素（二阿魏酰甲烷，4, 5-雙（4-氟苯胺基）-酞亞胺）；含硝基噻吩模 塊的tyrphostinesJD-OISSSOS(Warner-Larnber);反義分子（例如那些結合HER編 碼核酸的反義分子）；喹喔啉類（美國專利No. 5, 804, 396);tryphostins(美國專利N〇.5,804,396) ;ZD6474(AstraZeneca) ;PTK-787(Novartis/ScheringAG);泛HER抑制 劑，諸如CI-1033(Pfizer) ;Affinitac(ISIS3521;Isis/Lilly);PKI166(Novartis); GW2〇l6(GlaxoSmithKline) ;CI-l〇33 (Pfizer) ;EKB_569 (Wyeth);司馬沙尼（Semaxinib) (Sugen) ；ZD6474(AstraZeneca) ；PTK-787(Novartis/ScheringAG) ；INC-IC11(Imclone)； 或任何如下專利出版物中所記載的：美國專利No. 5, 804, 396 ;W099/09016(American Cyanamid) ；W098/43960(AmericanCyanamid) ；W097/38983(WarnerLambert)； W099/06378(WarnerLambert) ；W099/06396(WarnerLambert) ；W096/30347 (Pfizer,Inc)； W096/33978(Zeneca) ;W096/3397(Zeneca);及W096/33980(Zeneca)。
[0152] "抗血管生成劑"指以某種程度阻斷或干擾血管形成的化合物。例如，抗血管生成 因子可以是結合牽涉促進血管發生的生長因子或生長因子受體的小分子或抗體。本文中優 選的抗血管生成因子是結合血管內皮生長因子（VEGF)的抗體，諸如貝伐單抗（AVASTIN?)。
[0153] 術語"細胞因子"指由一種細胞群體釋放的作為細胞間介導物對另一細胞起作用 的蛋白質的通稱。此類細胞因子的例子是淋巴因子、單核因子、和傳統的多肽激素。細胞因 子中包括生長激素諸如人生長激素、N-甲硫氨酰人生長激素、和牛生長激素、甲狀旁腺素、 甲狀腺素、胰島素、胰島素原、松弛素；松弛素原、糖蛋白激素諸如促卵泡激素（FSH)、促甲 狀腺激素（TSH)、和黃體生成素（LH)、肝生長因子；成纖維細胞生長因子、促乳素、胎盤催乳 激素、腫瘤壞死因子a和0、Mullerian抑制物質、小鼠促性腺激素相關肽、抑制素；激活蛋 白、血管內皮生長因子、整聯蛋白、血小板生成素（TP0)、神經生長因子諸如NGF-P、血小板 生長因子；轉化生長因子（TGF)諸如TGF-a和TGF-P、胰島素樣生長因子-I和-II、紅細 胞生成素（EP0)、骨誘導因子；干擾素諸如干擾素-a、-0和-y、集落刺激因子（CSF)諸 如巨噬細胞-CSF(M-CSF)、粒細胞-巨噬細胞-CSF(GM-CSF)、和粒細胞-CSF(G-CSF)、白介 素（IL)諸如IL-1，IL-1a，IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-11， IL-12,腫瘤壞死因子諸如TNF-a或TNF-P，及其它多肽因子，包括LIF和kit配體（KL)。 如本文中所使用的，術語細胞因子包括來自天然來源或來自重組細胞培養物的蛋白質和天 然序列細胞因子的生物學活性等同物。
[0154] 術語"有效量"指提供期望效果的量。在配制劑成分諸如依照本發明的透明質酸 酶酶的情況中，有效量是以如下方式提高共施用的抗J1ER2抗體的分散和吸收，使得抗HER2 抗體能以治療有效方式起作用必需的量，如上文所概述的。在藥用藥物物質的情況中，它是 活性成分有效治療患者中的疾病的量。在疾病是癌癥的情況中，藥物的有效量可以降低癌 細胞的數目；降低腫瘤大小；抑制（即以某種程度減緩且優選地停止）癌細胞浸潤入周圍 器官中；抑制（即以某種程度減緩且優選地停止）腫瘤轉移；以某種程度抑制腫瘤生長；和 /或以某種程度減輕一種或多種與癌癥有關的癥狀。就藥物可以阻止生長和/或殺死存在 的癌細胞的程度而言，它可以是細胞抑制的和/或細胞毒性的。有效量可以延長無進展存 活，產生客觀響應（包括部分響應PR或完全響應CR)，增加總體存活時間，和/或改善一種 或多種癌癥癥狀。
[0155] 依照本發明配制的抗體優選是基本上純的，且期望地基本上同質的（即沒有污染 性蛋白質等，其中認為依照本發明的配制劑中的透明質酸酶酶不是依照本發明的抗J1ER2 單克隆抗體的污染性蛋白質）。"基本上純的"抗體意指包含至少約90% (按重量計），優 選地至少約95% (按重量計）的抗體（基于組合物的總重量）的組合物。"基本上同質的" 抗體意指包含至少約99% (按重量計）的抗體（基于組合物的總重量）的組合物。
[0156] 本發明通過參照以下實施例會得到更完整的理解。然而，它們不應解釋為限制本 發明的范圍。通過提及而將所有文獻和專利引用收入本文。
[0157] 附圖簡述
[0158] 通過附圖進一步例示實施例，附圖顯示以下實驗結果：
[0159] 圖1:就通過大小排阻-HPLC檢出的低分子量（LMW)種類而言配制劑A至F(見下 文表1)在8周后的穩定性。如此圖中所顯示的，在于30°C貯存后，PS20配制劑A、C和E比 PS80配制劑B、D和F顯示略好的穩定性。
[0160] 圖2:就通過大小排阻-HPLC檢出的高分子量（HMW)種類而言配制劑A至F(見下 文表1)在8周后的穩定性。如此圖中所顯示的，含有海藻糖而沒有添加氯化鈉的配制劑A 和B在8周貯存時間后顯示較小的HMW增加。
[0161] 圖3:就濁度而言在8周后的穩定性。如此圖中所顯示的，含有海藻糖的配制劑A 和B顯示低濁度；而含有NaCl的配制劑C至F顯示高得多的濁度。含有海藻糖及NaCl的 配制劑E和F顯示中間的濁度。在貯存8周后沒有觀察到顯著升高。
[0162] 圖4:液體配制劑A至F(見下文表1)的粘度，如通過于周圍溫度使用板-錐 (plate-cone)粘度測定法所測量的。所有配制劑在容許皮下注射的低粘度范圍中。 實施例
[0163] 使用如下文所概述的通用制備和分析方法和測定法，基于如下文所提供的實驗結 果開發依照本發明的供皮下施用的抗J1ER2配制劑。
[0164]A)制備配制劑的組分
[0165] 通過一般已知用于生成重組蛋白的技術來制造曲妥單抗。自母細胞庫將如在 EP-B-590058中所描述的那樣制備的經遺傳工程改造的中國倉鼠卵巢細胞（CH0)系在細胞 培養物中擴充。自細胞培養物流體收獲曲妥單抗單克隆抗體，并使用固定化的蛋白A親和 層析、陽離子交換層析（例如SP-S印haroseFF)、除去病毒污染的過濾步驟（例如PVDF膜 (由Milipore以名稱Viresolve濾器銷售）），接著進行陰離子交換層析（例如Q-Sepharose FF)和超濾/滲濾步驟來純化。為了制備依照這些實施例的配制劑，在20mM組氨酸緩沖液 (pH約6. 0)中以約100mg/ml的濃度提供曲妥單抗。
[0166] 通過一般已知用于生成重組蛋白的技術制造rHuPH20。該方法以自工作細胞庫 (WCB)或母細胞庫（MCB)融化細胞開始，并經由在一系列轉瓶中細胞培養來擴充，接著在生 物反應器中擴充。在完成生產階段后，通過過濾使細胞培養物液體澄清，然后用溶劑/去污 劑處理以使病毒滅活。然后，通過一系列柱層析工藝來純化蛋白質以除去工藝和產品相關 雜質。實施病毒過濾步驟，然后將過濾后的散劑濃縮，配制入最終的緩沖液：20mML-組氨 酸/HC1 緩沖液，pH6. 5、130mMNaCl、0. 05% (w/v)聚山梨酯 80 中的 10mg/mLrHuPH20。將 rHuPH20散劑在-70°C之下貯存。
[0167] 依照本發明的配制劑的其它賦形劑在實踐中廣泛使用，并且是本領域技術人員已 知的。因此，不需要在這里詳細解釋它們。
[0168] 如下開發依照本發明的供皮下施用的液體藥物產品配制劑。
[0169] 實施例1:液體配制劑的制備
[0170] 為了制備液體配制劑，將曲妥單抗針對含有預期的緩沖液組成的滲濾緩沖液進行 緩沖液交換，并且在需要時，通過滲濾濃縮成約150mg/ml的抗體濃度。完成滲濾操作后，將 賦形劑（例如海藻糖、rHuPH20)以儲備溶液添加至抗體溶液。然后，以5