實驗結結果見附圖2至附圖7所示,優化試驗結果如表1所 /Jn 〇
[0107] 表1真空輔助提取條件優化試驗結果
[0110]利用Design-Expert 8.0統計軟件對表1實驗數據進行回歸擬合,分別得到提取液 中多酚、黃酮、多糖、花青素的含量對真空度、提取溫度和提取時間3個因素的二次多項回歸 方程:
[0111] 多酚:
[0112] Yi = 367.83+17.33Xi+l. 67X2+2.25X3-19.25ΧιΧ2-1.75ΧιΧ3+9.13Χ 2Χ3-9.35Χι2-3.98Χ22+2.40Χ 32
[0113] 黃酮:
[0114] Y2 = 470.67+22.17Χι-1.58Χ2+0.083Χ3-21.25ΧιΧ2-2.62ΧιΧ 3+11. OOX2X3-H. 79Χι2-9.54Χ22-1.17Χ3 2
[0115] 多糖:
[0116] Υ3 = 774·17+19·79Χι-1·13Χ2+0·79Χ3-15·69ΧιΧ2-2·06ΧιΧ3+6·31Χ2Χ3-9·99Χι 2-3.74Χ22+0.010Χ32
[0117] 花青素 :
[0118] Υ4=48 · 50+3 · 04Χι+0 · 54X2+0 · 96X3-3 · 94ΧιΧ2-0 · 56ΧιΧ3+1 · 19Χ2Χ3-0 · 36Χι2-0 · 36Χ22+ 1 · 64Χ32
[0119]根據Des ign-Expert軟件對回歸模型進行分析,得出各抗氧化成分的最佳提取工 藝條件參數,分別為:多酚:真空度〇 . 67Mpa,提取溫度80 °C,提取時間36min;黃酮:真空度 O . 7Mpa,提取溫度77 °C,提取時間38min ;多糖:真空度O . 7Mpa,提取溫度80 °C,提取時間 35min;花青素:真空度0.68Mpa,提取溫度75°C,提取時間38min。綜合考慮各抗氧化活性成 分的含量,結合其它因素的單因素實驗結果,得出真空輔助提取的最優提取條件為:干燥油 茶花粉碎粒度為60~80目,提取溶劑乙醇-水體積分數為60%~70%,料液比為Ig: 30~ 40mL,提取時間為30~40min,提取溫度為70~80°C,真空度為0.6~0.7MPa。單因素試驗結 果進一步證明了本發明工藝的優越性。
[0120] 實施例19超高壓二次輔助提取的工藝條件優化
[0121] 為進一步證實本發明工藝的優越性,本實施例通過單因素實驗進行驗證。采用超 高壓二次輔助提取時,壓力、提取溫度和提取時間3個因素對干燥油茶花中抗氧化成分提取 的影響較顯著。在此基礎上,采用Box-Behnken設計方法,設計三因素三水平優化試驗,優化 超高壓二次輔助提取工藝條件,實驗結果見附圖8至附圖10所示,具體試驗結果如表2所示。
[0122] 表2超高壓二次輔助提取條件優化試驗結果
[0125]利用Design-Expert 8.0統計軟件對表2實驗數據進行回歸擬合,分別得到提取液 中多酚、黃酮、多糖、花青素的含量對提取壓力、提取時間和提取溫度3個因素的回歸方程:
[0126] 多酚:
[0127] Yi = 364.60+28.00Xi+3.62X2-7.13X3-2.00ΧιΧ2-3.00ΧιΧ 3+5.75Χ2Χ3+1.08Χι2-10.67Χ 22-23.68Χ32
[0128] 黃酮:
[0129] Υ2 = 482.40+41.63Χι+21.25Χ2+10.63Χ3-13.75ΧιΧ2-12.50ΧιΧ 3-5.75Χ2Χ3-33.45Χι2-37.70Χ 22-31.45Χ32
[0130] 多糖:
[0131] Y3 = 799.00+27.88Χι+5.13Χ2-5.75Χ3-11.50ΧιΧ2-8.25ΧιΧ 3-2.25Χ2Χ3-11.50Χι2-40.50Χ 22-41.75Χ32
[0132] 花青素 :
[0133] Y4= 59 · 80+3 · 88Χι+0 · 88X2-1 · 25X3+1 · 75ΧιΧ2-1 · 50ΧιΧ3_0 · 50X2X3-4 · 78Χι2-6 · 28Χ22-9.52Χ32
[0134]根據Design-Expert軟件對回歸模型進行分析,得出各抗氧化成分的最佳提取工 藝條件參數,分別為:多酚:提取壓力373Mpa,提取時間7.2min,提取溫度49°C ;黃酮:提取壓 力400Mpa,提取時間6 · 2min,提取溫度42°C ;多糖:提取壓力398Mpa,提取時間7 · Omin,提取 溫度44.3 °C ;花青素:提取壓力362Mpa,提取時間7.5min,提取溫度43 °C。綜合考慮各抗氧化 活性成分的含量,結合其它因素的單因素實驗結果,得出超高壓二次輔助提取的最優提取 條件為:干燥油茶花粉碎粒度為80~100目,提取溶劑乙醇-水濃度為50%~60%,料液比 為Ig: 30~40mL,提取壓力為300~400Mpa,提取時間為6~8min,提取溫度為40~50°C,間歇 加壓提取兩次。單因素試驗結果進一步證明了本發明工藝的優越性。
[0135] 實施例20油茶花顆粒沖劑配方優選試驗
[0136] 為進一步證實本發明工藝的優越性,本實施例通過配方優選實驗進行驗證。結合 制備顆粒沖劑的常用輔料并綜合考慮到提取到的油茶花提取濃縮液中的活性成分及其本 身風味,重點考慮營養成分的大限度保留和風味的優選,本發明通過大量前期研究,確定添 加可溶性淀粉包埋苦味物質,添加阿拉伯膠、葡萄糖粉作為賦形劑,添加檸檬酸調節風味, 獲得具有抗氧化活性的油茶花顆粒沖劑的最佳配方,輔料與油茶花提取濃縮液的香味、口 味等感官品質相得益彰。
[0137] 所述油茶花顆粒沖劑的配方中各成分重量百分比為:濃縮液10%~70%、可溶性 淀粉1 %~5 %、阿拉伯膠10 %~40 %,葡萄糖粉10 %~70 %,檸檬酸0.5 %~3 %,所述濃縮 液由油茶花抗氧化活性原液濃縮得到。優選配方為:濃縮液30%~50%、可溶性淀粉1 %~ 2%、阿拉伯膠10%~20%,葡萄糖粉30%~50%,檸檬酸0.5%~1.5%。本實施例以油茶花 提取濃縮液、可溶性淀粉、阿拉伯膠、葡萄糖粉和檸檬酸的添加重量百分比為因素,選用L 18 (35)正交實驗表進行配方優選試驗驗證。調配后根據工藝程序制備油茶花抗氧化顆粒沖 劑,每個配方取15g顆粒,加入IOOmL溫開水沖溶,讓10個有品嘗經驗的業內人士品嘗,以顆 粒沖劑的感官狀態、沖溶性、沖溶后的色澤、滋味和氣味等為評價指標進行評價并打分,最 后得到綜合評分,實驗結果見表3所示。
[0138] 表3配方優選正交實驗表
[0141] 由表3的數據通過極差分析可以優化得到油茶花顆粒沖劑配方的最佳配比為:油 茶花提取濃縮液40%、可溶性淀粉1.5%、阿拉伯膠18%、葡萄糖粉40%和檸檬酸0.5%。
[0142] 實施例21油茶花顆粒沖劑產品質量分析
[0143] 對本發明制得的油茶花顆粒沖劑隨機抽取產品進行感官指標、微生物指標以及抗 氧化性能的分析。
[0144] (1)感官指標:對油茶花抗氧化顆粒沖劑的色澤、組織形態、顆粒度、滋味及沖調性 進行評定。色澤:顆粒呈褐色,色澤一致;沖調后,湯劑為淺褐色;組織形態:外觀干燥、顆粒 均勻;無雜質、無結塊受潮現象;顆粒度:14~30目的顆粒占比95%以上;滋味:沖調后,湯劑 滋味可□,且有油茶花特有香氣,無其它怪味;沖調性:沖調性好,能夠較快溶解,湯底無焦 肩等雜質。
[0145] (2)微生物指標:經檢測,結果為細菌總數(cfu/gH 100個/g,大腸桿菌(MPN/ 100g) < 30,無致病菌檢出。
[0146] (3)抗氧化性能:取本發明油茶花抗氧化顆粒沖劑,以溫開水沖調為一系列不同濃 度,測定樣品液的還原能力及對自由基的清除能力。
[0147]①油茶花顆粒沖劑的還原能力測定
[0148] 在2.5mL pH = 6.6磷酸緩沖液中加入1ml樣品液(稀釋一定樣液梯度)和ImL 1 %鐵 氰化鉀溶液,混合均勻后將混合物在50 °C恒溫條件下加熱20min后,急速冷卻,加入2.5mL 10%三氯乙酸,離心分離lOmin。取上層清液5ml,依次加入5ml水和Iml 0.1 %氯化鐵溶液, 混合均勻,靜置IOmin后在波長710nm下測定吸光值(A) J值越大,則樣品的還原力越強。實 驗以低濃度0.05mg/mL的抗壞血酸為對照。實驗結果如附圖12所示。
[0149] 由附圖12可得,本發明油茶花顆粒沖劑的還原能力很強,沖調后4g/100mL的湯劑 的還原能力相當于0.005g/l OOmL的抗壞血酸溶液。
[0150] ②油茶花顆粒沖劑清除DPPH ·自由基的效果
[0151] 將濃度為I X 10-4M的DPPH ·無水乙醇溶液3.OmL與0.1 mL不同濃度的樣品液混合, 搖勾,室溫、暗室反應30min,以無水乙醇調零測定其517nm處吸光值(A)。同時測定0.1 mL樣 液與3. OmL無水乙醇混合液的吸光值(B)和0.1 mL無水乙醇與3. OmL DPPH ·醇溶液混合液的 吸光值(Ao)。樣品對DPPH ·自由基的清除率(% ) = [ 1-(Α-Β)/Α0] X 100( % )。實驗結果如附 圖13所示。由附圖13可得,本發明油茶花顆粒沖劑對DPPH ·自由基的清除率隨濃度的增加 而提高,IOgAOOmL濃度的湯劑對DPPH ·的清除