技術領域：
本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種食用菌絲蓋冬菇flammulinafiliformis栽培方法，以及絲蓋冬菇一野生耐高溫菌株。
背景技術：
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金針菇flammulinavelutipes隸屬于膨瑚菌科physalacriaceae，冬菇屬flammulina。由于該種常于冬天出菇，故又名冬菇。目前，我國雖已成為世界上最大的金針菇生產國，然而，目前我國工廠化栽培所用的金針菇菌株均依賴日本進口，我國還尚無具有自主知識產權的工廠化栽培菌株。此外，由于金針菇具有喜低溫的生理特性，因此工廠化栽培所用菌株的出菇溫度均嚴格控制在15℃以內，故而工廠化栽培金針菇較為耗能，成本較高。
本發明人前期于夏天在云南龍陵采集到了金針菇屬另一物種絲蓋冬菇flammulinafiliformis的子實體，并從其子實體上分離得到了該種的野生菌株。經栽培實驗發現，該野生菌株最適菌絲體生長溫度為23℃，最適子實體分化溫度為18℃，均高于工廠化栽培金針菇菌株的最適菌絲體生長及子實體分化溫度。且在該溫度條件下，該野生菌株的生物學轉化率要顯著高于工廠化栽培所用菌株。因此，該野生菌株為一耐高溫菌株。若將該野生菌株代替金針菇栽培菌株進行推廣種植，將極大節省金針菇工廠化栽培過程中的能耗及成本。然而，目前還沒有關于絲蓋冬菇栽培的報道，本發明旨在報道絲蓋冬菇及其栽培方法，以及絲蓋冬菇的一野生耐高溫菌株。
技術實現要素：
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本發明目的在于提供金針菇屬絲蓋冬菇flammulinafiliformis一野生菌株cgmccno.13682，同時提供該絲蓋冬菇野生菌株在高溫下的栽培方法，以期今后在工廠化生產中能夠推廣使用該菌株。為我國金針菇企業提供具有自主知識產權的栽培菌株及栽培方法。
本發明的上述目的是通過下述技術方案來實現的：
絲蓋冬菇耐高溫菌株，該菌株保藏號為：cgmccno.13682。
如所述的絲蓋冬菇耐高溫菌株，其最適菌絲體培養溫度為23℃，最適子實體分化溫度為18℃。
本發明同時還提供了一種絲蓋冬菇的栽培方法，該方法包括其母種制作、栽培種制作和出菇管理步驟。母種制作步驟為：取絲蓋冬菇一野生菌株cgmccno.13682的菌絲體保藏材料于加富pda固體培養基上，在23℃下避光培養7天得到母種。栽培種制作步驟為：將母種接種至pda液體培養基中，在23℃下于搖床中避光培養，轉速為150轉/分，培養10天制成栽培種。出菇管理步驟為：取栽培種10ml接種到栽培料上，在23℃下避光培養，培養至菌絲長滿菌瓶后10天進行搔菌，搔菌后打開瓶口置于18℃下，空氣相對濕度90％進行出菇管理，15-20天后采收。
根據所述的絲蓋冬菇的栽培方法，其中所述的加富pda固體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g，瓊脂8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用。所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。加富pda液體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用。所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。
根據所述的絲蓋冬菇的栽培方法，其中所述的栽培料成分為棉籽殼90％、麥麩9％、輕質碳酸鈣1％，含水量60％，裝入聚丙烯瓶或聚丙烯袋中，并用接種棒在栽培料正中豎直打孔，于121℃下滅菌2-3小時。
具體地，本發明的絲蓋冬菇的栽培方法包括下述步驟：
母種制作：取絲蓋冬菇flammulinafiliformis野生菌株cgmccno.13682于加富pda固體培養基上活化，于23℃下培養7天后得到母種。
其中加富pda固體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、瓊脂8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用，所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。
栽培種制作：將上述母種菌絲常規接種于滅菌后的加富pda液體培養基中，于搖床上在23℃、150轉/分的條件下培養10天后得到栽培種。
其中加富pda液體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用，所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。
栽培料接種：取10ml液體栽培種均勻接種于聚丙烯瓶中的栽培料表面，使液體栽培種覆蓋于栽培料上表面，并通過正中的豎直孔流入栽培料內部；接種后的菌瓶避光放置于23℃、空氣相對濕度70％的條件下培養菌絲。
栽培料制作：采用棉籽殼90％，麥麩9％，輕質碳酸鈣1％，含水量60％-65％，裝入聚丙烯瓶并壓緊實，并用接種棒在栽培料正中豎直打孔，于121℃下滅菌2.5小時。
出菇管理和采收：待菌絲長滿菌瓶后第10天進行搔菌，搔菌后開蓋置于18℃、空氣相對濕度90％的條件下進行出菇管理，15-20天后采收。
與目前工廠化栽培金針菇flammulinavelutipes所用菌株和技術相比，本發明的優益性在于：本發明提供了冬菇屬一物種絲蓋冬菇flammulinafiliformis一野生耐高溫菌株的栽培方法。該菌株的最適菌絲生長溫度及子實體分化溫度均顯著高于工廠化栽培所用的金針菇栽培菌株，且在其最適生長溫度及子實體分化溫度下其生物轉化率要顯著高于工廠化栽培所用的金針菇栽培菌株。若運用該菌株代替金針菇栽培菌株進行推廣種植，將大大降低在金針菇栽培過程中由于控制低溫所產生的較高能耗及成本。
具體實施方式：
本發明的絲蓋冬菇flammulinafiliformis野生菌株已于2017年2月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編：100101，電話：010-64807355)，保藏號為：cgmccno.13682。
實施例1：
本發明的絲蓋冬菇flammulinafiliformis野生菌株cgmccno.13682為從腐木上采集的絲蓋冬菇野生子實體通過組織分離獲得，其組織分離具體方法為取菌蓋內部于菌柄交界處干凈無菌的菌肉組織，接種于普通pda培養基上。采集時間為2014年6月24日，采集地點為云南省保山市小黑山自然保護區，海拔約2560米。其最適菌絲體培養溫度為23℃，最適子實體分化溫度為18℃。
本發明的絲蓋冬菇栽培方法包括下述步驟：
1、母種制作：取絲蓋冬菇flammulinafiliformis野生菌株cgmccno.13682于加富pda固體培養基上活化，于23℃下培養7天后得到母種。
2、加富pda固體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、瓊脂8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用。所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。
3、栽培種制作：將母種菌絲常規接種于步驟2滅菌后的加富pda液體培養基中，于搖床上在23℃、150轉/分的條件下培養10天后得到栽培種。
4、加富pda液體培養基制作步驟如下：馬鈴薯80g、葡萄糖8g、磷酸氫二鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、酵母粉0.8g、蛋白胨0.8g、水400ml，裝于1000ml錐形瓶中混合均勻后于121℃下滅菌30分鐘，滅菌后晾至室溫并加入40ul氨芐卡青霉素鈉備用。所述馬鈴薯在沸水中煮熟，用其浸出液。
5、栽培料接種：取10ml由步驟3所得的液體栽培種均勻接種于聚丙烯瓶中的栽培料表面，使液體栽培種既能覆蓋于栽培料上表面，又能通過正中的豎直孔流入栽培料內部；接種后的菌瓶避光放置于23℃的條件下培養菌絲。
6、栽培料制作：采用棉籽殼90％，麥麩9％，輕質碳酸鈣1％，含水量60％，裝入聚丙烯瓶并壓緊實，并用接種棒在栽培料正中豎直打孔，于121℃下滅菌2.5小時。
7、出菇管理和采收：待菌絲長滿菌瓶后第10天進行搔菌，搔菌后開蓋置于18℃、空氣相對濕度90％的條件下進行出菇管理，15-20天后采收。