專利名稱：一種速效多菌種微生物復合沖施肥及其制備方法
技術領域：
本發明屬生物肥領域，特別涉及一種速效多菌種微生物復合沖施肥及其制備方法。
背景技術：
目前沖施肥以供給植物氮、磷、鉀大量元素及中微量元素居多。傳統的沖施肥是以 無機元素為主。大量使用該類沖施肥，可使土壤出現板結，土質惡化，地力下降，農產品品質 下降，同時嚴重地打破了土壤的微生態平衡，加劇了作物病蟲害的發生幾率，也明顯增加了 農藥的使用量，這使得土壤的微生態環境進一步受到破壞，形成惡性循環。傳統的沖施肥在 使用時，由于其水溶性過高，而容易隨雨水流失或隨地表水分蒸發，使得真正被作物吸收的 營養物質還不到1/3。現有的有機微生物沖施肥主要存在以下不足所使用的菌種以解磷、解鉀和固氮 為主，有一少部分加入少量具有抗病害作用的菌種，但是見效較慢，肥料損失率較高，并受 使用方法和使用環境的影響較大。
發明內容
本發明是針對現有技術的不足，提供一種速效多菌種微生物復合沖施肥的方法。 該速效多菌種微生物復合沖施肥可提高作物品質，提高作物產量，縮短作物生長周期。為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案為
一種速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于它包括由光合細菌O^oi/o^a/ ^ elegans ) ACCC 10649、酵母獻Pichia fermentans lodder) ACCC 20319τ、乳酸菌 Uactococcus lactis) ACCC 11092、雙歧桿菌(召i/ii/o如cieri腫 sp) ACCC 11054、枯草 芽孢桿菌(feci/A/s subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242T、地衣 芽孢桿菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、側孢芽孢桿菌 (Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽抱桿菌 {Bacillus mega terium de Bary) ACCC 10010、膠凍芽抱桿菌 CfeciBw1S muciIaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013> 0|§| |Μ lif {Azotobacter chroococum Bei jerinck) ACCC 10001 和放線菌 Mciiflo力aci/A/s capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051 分別經發酵 培養制得的菌粉復配而成，該速效多菌種微生物復合沖施肥中酵母菌QPichia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌數彡 2. 0 X 108cfu/g，其他各菌種的菌數均彡 2. 0 X 109cfu/g。按上述方案，所述各菌種菌粉的重量百分數為光合細菌菌粉10% 12. 5%、酵母 菌菌粉10% 12. 5%、乳酸菌菌粉10% 12. 5%、雙歧桿菌菌粉10% 12. 5%、枯草芽孢桿菌 菌粉10% 12%、地衣芽孢桿菌菌粉10% 12%、側孢芽孢桿菌菌粉10% 12%、巨大芽孢桿 菌菌粉5% 8%、膠凍芽孢桿菌菌粉5% 8%、圓褐固氮菌菌粉5% 8%、放線菌菌粉5% 8%。按上述方案，所述的菌粉是將各菌種的菌液以輕質碳酸鈣為載體復配而得到的。
按上述方案，所述的菌粉是通過在各菌種的菌液中加入輕質磷酸鈣，所述輕質碳 酸鈣的加入量為菌液重量的40 % 50 % (重量百分數)，攪拌30min 40min，脫水濃縮， 低溫烘干至含水率彡5 %，粉碎至細度彡100目而得到的。按上述方案，所述的速效多菌種微生物復合沖施肥還包括有機硅和黃腐酸鉀， 所述各菌種的菌粉總量、有機硅和黃腐酸鉀的重量百分數為菌粉總量5% 25%，有機硅 0. 5% 1%，黃腐酸鉀74. 5% 94%，所述的有機硅由杭州包爾得有機硅有限公司生產，產品 型號BD-3077-F，產品名稱捷潤粉劑。一種速效多菌種微生物復合沖施肥的制備方法，包括以下步驟 (1)復合菌粉的制備
①各菌種菌液的制備
光合細菌elegans ) ACCC 10649 菌液的制備
在無菌條件下，將光和細菌elegans)KCCC 10649接種到液體培養基中， 所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為酵母粉3. 0g、蛋白胨3. 0g、七水 硫酸鎂0. 5g、無水氯化鈣0. 3g，PH值調至6. 8 7. 0，置于常規光培養箱內，28°C 30°C常 規光照培養6 7天，得到菌數彡5. 0 X 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧 氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天， 得到菌數彡1. OX 109CfU/ml的光合細菌菌液；
酵母菌 G0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌液的制備 在無菌條件下，將酵母菌O0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ接種到液體培養 基中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為七水硫酸鎂l.Og、磷酸二氫 鉀2. 0g、尿素30. g、玉米漿1. 0g、硫酸錳0. 02g、硫酸亞鐵0. 2g，PH值調至5. 5，30°C 31 °C 培養4 5天，得到菌數彡5. OX 108CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量 百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧氣的 體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到 菌數彡1. OX 108Cfu/ml的酵母菌菌液；
乳酸菌(ZaciococciAs lactis) ACCC 11092 菌液的制備
在無菌條件下，將乳酸菌Oactococcm lactis) ACCC 11092接種到液體培養基中，所 述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉0. 5g、 蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g, pH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數彡5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含 有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到菌數彡1. OX 109CfU/ml的乳酸菌菌液；
雙歧桿菌(ZaciococciAs lactis) KCCC 11092 菌液的制備
在無菌條件下，將雙歧桿菌OaciococcM lactis) KCCC 11092接種到液體培養基 中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉 0. 5g、蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g，pH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數≥5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到菌數彡1.0X 109CfU/ml的雙歧桿菌菌液；
枯草芽抱桿 lif {Bacillus subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242T、地衣芽孢桿菌(feci/A/iicAefli/brfflis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、 側孢芽孢桿菌、Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、膠凍芽孢桿菌Uaci/A/s mucilaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013、 Bl H |S| M lif (Azοtobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 禾口放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制備，其中所述的培養基按重量百分數計均為淀粉5 %、豆餅粉7.5 %、磷酸 氫二鉀0. 2 %、硫酸銨0. 1 %、硫酸鎂0. 05 %、三氯化鐵0. 005 %、碳酸鈣0. 05 %、酵母粉 0. 01 %、硼酸 0. 005 %、pH 值調至 7. 2 7. 4
枯草芽抱桿菌 CfeciBw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ 菌液的制備
在無菌條件下，將枯草芽孢桿菌 Cfeci^Zw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐 壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中枯草芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
地衣芽孢桿菌(PacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146 菌液的 制備
在無菌條件下，將地衣芽孢桿菌、BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中地衣芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
側孢芽孢桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079 菌液的制備
在無菌條件下，>1 奪偵1Ji包芽抱桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培養基中，通氣量0. 5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐 壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中側孢芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010 菌液的制備 在無菌條件下，將巨大芽孢桿菌(feci/^As ffl^aieri腫de Bary) ACCC 10010接入到 培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗氧培 養48小時，得到的菌液中巨大芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
^ (.Bacillus muci laginosus Krasil'nikov) ACCC 10013 菌液的制備 在無菌條件下，將膠凍芽孢桿菌(feci/A/s muci laginosus Krasil'nikov) ACCC 10013接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L-min,攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中膠凍芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 圓褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 菌液的制備 在無菌條件下，將圓褐固氮菌 C^oioAacier chroococum Beijerinck) ACCC 10001 接 入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗 氧培養48小時，得到的菌液中圓褐固氮菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；
8放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051 菌液的制備 在無菌條件下，將放線菌(Actinobacillus capsu latus Arseculeratne) ACCC 11051 接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2, 耗氧培養48小時，得到的菌液中的放線菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；
②各菌種菌粉的制備
通過分別在各菌種的菌液中加入輕質碳酸鈣，所述輕質碳酸鈣的加入量為菌液重量的 40 % 50 %，攪拌30min 40min，脫水濃縮，低溫烘干至含水率彡5 %，粉碎，得到細度 ^ 100目的各菌種的菌粉，其中酵母菌菌粉中酵母菌的菌數> 2.0X108cfu/g，其余各菌種 菌粉中相應菌種的菌數彡2.0X109cfu/g ；
③各菌種菌粉的混合
將各菌種的菌粉按照重量百分數為光合細菌O^oi/o^a/ ^ elegans)kCCC 10649菌 粉 10% 12. 5%、酵母菌 G0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌粉 10% 12. 5%、乳 酸菌 OaciococciAs lactis) ACCC 11092 菌粉 10% 12. 5%、雙歧桿菌(歷/ii/ο力acieri腫 sp) ACCC 11054 菌粉 10% 12. 5%、枯草芽孢桿菌 UaciBw1S 仰力ii/Zs subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242τ 菌粉 10% 12%、地衣芽孢桿菌(feci/A/iicAefli/brfflis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146 菌粉 10% 12%、側孢芽孢桿菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079 菌粉 10% 12%、巨大芽孢桿菌 {Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010 菌粉 5% 8%、膠凍芽孢桿菌 UaciBw1S mucilaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013 菌粉 5% 8%、圓褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 菌粉 5% 8% 和放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌粉5% 8%進行混合，得到復合菌粉； (2)復配
將步驟(1)混合得到的復合菌粉與有機硅和黃腐酸鉀按重量百分數為復合菌粉 5% 25%、有機硅0. 5% 1%、黃腐酸鉀74. 5% 94%復配而得到速效多菌種微生物復合沖 施肥。本發明所選用的菌種功能如下
(1)光合細菌OWoi/o/^afles elegans) ACCC 10649、酵母菌O0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ、乳酸菌(Laciococc^s lactis) ACCC 11092 和雙歧桿菌 {Bifidobacterium sp) ACCC 11054，能產生大量不同種類的氨基酸、具有生物活性的酶類 如淀粉酶、蛋白酶等，提高還田秸稈的利用率。⑵枯草芽孢桿菌他以‘“肪 subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ、地衣芽孢桿菌 iBacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、側孢 芽孢桿菌(^reri力aciBws laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079和放線菌 (Actinobacillus cap sulatus Arseculeratne) ACCC 11051，抑制病原菌繁殖，減輕病蟲 害，降低農藥殘留，促進根系生長，增強根系吸收能力，并能活化土壤養分。(3)巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010，把土壤中的無 效磷轉化為作物能夠直接吸收利用的有效磷。(4)膠凍芽孢桿菌UaciBw1S仰S Krasil'nikov)ACCC 10013，促進作 物對鉀的吸收。
(5)圓褐固氮菌 C^oioAacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001，將空氣中 的氮轉化成氨類物質，為作物的生長提供氮源。本發明利用多菌種復合配制的速效多菌種微生物復合沖施肥可為植物提供由微 生物固定、產生或分解的氮、磷、鉀，解決施肥不均衡造成的肥害和不必要的資源浪費。有益 效果如下
1.本發明采用11個具有各自不同功能的菌種按照一定的比例復合配制而成的速效多 菌種微生物復合沖施肥，即可有效的避免了菌種間的競爭和排異等現象，也使每個菌種都 能充分發揮其特有的功效。2.本發明所選用的黃腐酸鉀，能明顯地促進作物根系的生長，提高作物吸肥能力。3.本發明提供的速效多菌種微生物復合沖施肥能夠使作物的葉片變厚，提高光合 作用的效率，增加作物的抗逆性、抗重茬、抗病害，促進作物體內的亞硝酸鹽轉化為可被作 物吸收利用的氨類物質。4.本發明能夠明顯地消除作物的藥殘和肥殘，提高作物品質，提高作物產量，縮短 生長周期。5.本發明所選用的有機硅可使速效多菌種微生物復合沖施肥迅速被種植物吸收， 并將其快速定殖在種植物根圈內，減少土著細菌對速效多菌種微生物復合沖施肥中的微生 物產生的不利影響。
具體實施例方式下面用具體實施例對本發明作進一步的詳細說明，但本發明不僅僅局限于以下實 施例。下述實施例中，所述的有機硅由杭州包爾得有機硅有限公司生產，產品型號 BD-3077-F,
產品名稱捷潤粉劑，結構式或組分乙氧基改性聚三硅氧烷與合適的無機填料，物化 數據及指標活性物(％):50士2 ；水溶液表面張力(25°C)mN/m 21. 0 24. 0 ；外觀白色粉 體，性能特點優異的農用化學品增效劑，具有低表面張力，良好的展著性、滲透性及乳化分 散性，是一種新型高效的農藥助劑，效果遠優于JFC、氮酮、噻酮等普通表面活性劑，具有比 普通的脂肪胺、乙氧基醇類等表面活性劑更低的植物毒性和環境危害，可極大地減少對人 類和環境的不良影響。實施例1
一種速效多菌種微生物復合沖施肥的制備方法，其特征在于包括以下步驟 (1)復合菌粉的制備 ①各菌種菌液的制備
光合細菌elegans ) ACCC 10649 菌液的制備
在無菌條件下，將光和細菌elegans)KCCC 10649接種到液體培養基中， 所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為酵母粉3. 0g、蛋白胨3. 0g、七水 硫酸鎂0. 5g、無水氯化鈣0. 3g，pH值調至6. 8 7. 0，置于常規光培養箱內，28°C 30°C常 規光照培養6 7天，得到菌數彡5. 0 X 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天， 得到菌數彡 1. 0X109cfu/ml 的光合細菌OWoi/o/^afles elegans) kCCC 10649 菌液； 酵母菌 G0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌液的制備 在無菌條件下，將酵母菌O0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ接種到液體培養 基中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為七水硫酸鎂l.Og、磷酸二氫 鉀2. 0g、尿素30. g、玉米漿1. 0g、硫酸錳0. 02g、硫酸亞鐵0. 2g，pH值調至5. 5，30°C 31 °C 培養4 5天得到菌數彡5. OX 108CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量 百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧氣的 體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到 菌數彡 1. OX 108cfu/ml 的酵母菌 O0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌液； 乳酸菌(ZaciococciAs lactis) ACCC 11092 菌液的制備
在無菌條件下，將乳酸菌Oactococcm lactis) ACCC 11092接種到液體培養基中，所 述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉0. 5g、 蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g, PH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數彡5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含 有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15 天，得到菌數彡 1. 0X109cfu/ml 的乳酸菌(Laciococc^s lactis) ACCC 11092 菌液; 雙歧桿菌(ZaciococciAs lactis) KCCC 11092 菌液的制備
在無菌條件下，將雙歧桿菌OaciococcM lactis) KCCC 11092接種到液體培養基 中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉 0. 5g、蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g，PH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數彡5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含 有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15 天，得到菌數彡 1. 0X109cfu/ml 的雙歧桿菌(Laciococc^s lactis) ACCC 11092 菌液；
枯草芽抱桿 lif {Bacillus subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242T、地衣芽孢桿菌(feci/A/iicAefli/brfflis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、 側孢芽孢桿菌、Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、膠凍芽孢桿菌Uaci/A/s mucilaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013、 Bl H |S| M lif (Azοtobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 禾口放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制備，其中所述的培養基按重量百分數計均為淀粉5 %、豆餅粉7.5 %、磷酸 氫二鉀0. 2 %、硫酸銨0. 1 %、硫酸鎂0. 05 %、三氯化鐵0. 005 %、碳酸鈣0. 05 %、酵母粉 0. 01 %、硼酸 0. 005 %、pH 值調至 7. 2 7. 4
枯草芽抱桿菌 CfeciBw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ 菌液的制備
在無菌條件下，將枯草芽孢桿菌 Cfeci^Zw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中枯草芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
地衣芽孢桿菌(PacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146 菌液的 制備
在無菌條件下，將地衣芽孢桿菌、BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中地衣芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
側孢芽孢桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079 菌液的制備
在無菌條件下，>1 奪偵1Ji包芽抱桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培養基中，通氣量0. 5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐 壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中側孢芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010 菌液的制備 在無菌條件下，將巨大芽孢桿菌(feci/^As ffl^aieri腫de Bary) ACCC 10010接入到 培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗氧培 養48小時，得到的菌液中巨大芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；
^(.Bacillus mucilaginosus Krasil'nikov) ACCC 10013 菌液的制備 在無菌條件下，將膠凍芽孢桿菌(feci/A/s muci laginosus Krasil'nikov) ACCC 10013接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L-min,攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中膠凍芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 圓褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 菌液的制備 在無菌條件下，將圓褐固氮菌 C^oioAacier chroococum Beijerinck) ACCC 10001 接 入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗 氧培養48小時，得到的菌液中圓褐固氮菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；
放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051 菌液的制備 在無菌條件下，將放線菌(Actinobacillus capsu latus Arseculeratne) ACCC 11051 接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2, 耗氧培養48小時，得到的菌液中的放線菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；
②各菌種菌粉的制備
通過分別在各菌種的菌液中加入輕質碳酸鈣，所述輕質碳酸鈣的加入量為菌液總重量 的40 % 50 %，攪拌30min 40min，脫水濃縮，低溫烘干至含水率彡5 %，粉碎，得到細度 彡100目的各菌種的菌粉，其中，酵母菌O0ZcAia fermentans lodder)ACCC 20319τ菌粉的 菌數彡2.0X108cfu/g，其余各菌粉中的菌數均彡2. OX 109CfU/g ；
③各菌種菌粉的混合
將各菌種的菌粉按重量百分數為光合細菌菌粉10%、酵母菌菌粉10%、乳酸菌菌粉 10%、雙歧桿菌菌粉10%、枯草芽孢桿菌菌粉10%、地衣芽孢桿菌菌粉10%、側孢芽孢桿菌菌粉 10%、巨大芽孢桿菌菌粉8%、膠凍芽孢桿菌菌粉8%、圓褐固氮菌菌粉8%和放線菌菌粉6%混 合得到復合菌粉； (2)復配
將復合菌粉與有機硅和黃腐酸鉀按重量百分數為復合菌粉5%、有機硅1%、黃腐酸鉀
1294%，復配而得到速效多菌種微生物復合沖施肥。實施例2
一種速效多菌種微生物復合沖施肥的制備方法，其特征在于包括以下步驟
(1)復合菌粉的制備
①各菌種菌液的制備
按照實施例1的方法制得各菌種的菌液；
②各菌種菌粉的制備
按照實施例1的方法將步驟①制得的各菌種菌液制得菌粉，其中，酵母菌O0Zdia fermentans lodder) ACCC 20319τ菌粉的菌數彡2. OX 108cfu/g，其余各菌粉中的菌數均 彡 2. 0X109cfu/g ；
②各菌種菌粉的混合
將制備得到的各菌種菌粉按重量百分數為光合細菌菌粉12%、酵母菌菌粉12%、乳酸 菌菌粉12%、雙歧桿菌菌粉12%、枯草芽孢桿菌菌粉11%、地衣芽孢桿菌菌粉11%、側孢芽孢桿 菌菌粉10%、巨大芽孢桿菌菌粉5%、膠凍芽孢桿菌菌粉5%、圓褐固氮菌菌粉5%和放線菌菌粉 5%混合得到復合菌粉；
(2)復配
將復合菌粉與有機硅和黃腐酸鉀以重量比分別為菌粉25%、有機硅0. 5%、黃腐酸鉀 74. 5%，復配而得到速效多菌種微生物復合沖施肥。實施例3
一種速效多菌種微生物復合沖施肥的制備方法，其特征在于包括以下步驟
(1)復合菌粉的制備
①各菌種菌液的制備
按照實施例1的方法制得各菌種的菌液；
②各菌種菌粉的制備
按照實施例1的方法將步驟①制得的各菌種菌液制得菌粉，其中，酵母菌O0Zdia fermentans lodder) ACCC 20319τ菌粉的菌數彡2. OX 108cfu/g，其余各菌粉中的菌數均 彡 2. 0X109cfu/g ；
②各菌種菌粉的混合
將制備得到的各菌種菌粉按重量百分數為光合細菌菌粉11%、酵母菌菌粉11%、乳酸 菌菌粉11%、雙歧桿菌菌粉11%、枯草芽孢桿菌菌粉12%、地衣芽孢桿菌菌粉12%、側孢芽孢桿 菌菌粉12%、巨大芽孢桿菌菌粉6%、膠凍芽孢桿菌菌粉6%、圓褐固氮菌菌粉6%和放線菌菌粉 8%混合得到復合菌粉；
(2)復配
將復合菌粉與有機硅和黃腐酸鉀按重量百分數為菌粉10%、有機硅1%、黃腐酸鉀89%， 復配而得到速效多菌種微生物復合沖施肥。應用實施例
采用本發明實施例1制備的速效多菌種微生物復合沖施肥，按照IOkg/畝作為沖施 肥使用，根據不同作物生長規律，在作物生長、開花期和坐果期，共沖施3次，或在作物定植 后，每10 — 20天一次，共使用2 3次。使用效果如下以白菜為例株重增加1. 8kg、株幅擴大7. lcm、球高增加1. 2cm、葉長增力口 4. 3cm葉寬 增加1. 8cm、葉柄增長2. 5cm。以小麥為例株高增加13. 2cm、成熟期提前8 10天、產量提到8% 10%、品質可 達到一級小麥。以黃瓜為例葉片加厚、保花率提高50%、掛果提前7 10天、產量提高15 20%、
角斑病、霜霉病、白粉病發病率為零。以西紅柿為例與不使用沖施肥相比，維生素C含量增加4. 1倍，可溶性固形物減 少、糖酸比增加，葉綠素增加20 30%，真菌、細菌病害減少、果實整齊，坐果期延長20 30天。
權利要求
1.一種速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于它包括由光合細菌O^oi/o^a/ ^ elegans ) ACCC 10649、酵母獻Pichia fermentans lodder) ACCC 20319τ、乳酸菌 Uactococcus lactis) ACCC 11092、雙歧桿菌(召i/ii/o如cieri腫 sp) ACCC 11054、枯草 芽孢桿菌(feci/A/s subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242T、地衣 芽孢桿菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、側孢芽孢桿菌 (Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽抱桿菌 {Bacillus mega terium de Bary) ACCC 10010、膠凍芽抱桿菌 CfeciBw1S muciIaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013> 0|§| |Μ lif {Azotobacter chroococum Bei jerinck) ACCC 10001 和放線菌 Mciiflo力aci/A/s capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051 分別經發酵 培養制得的菌粉復配而成，該速效多菌種微生物復合沖施肥中酵母菌QPichia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌數彡 2. 0 X 108cfu/g，其他各菌種的菌數均彡 2. 0 X 109cfu/g。
2.根據權利要求1所述的速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于所述各菌種 菌粉的重量百分數為光合細菌菌粉10% 12. 5%、酵母菌菌粉10% 12. 5%、乳酸菌菌粉 10% 12. 5%、雙歧桿菌菌粉10% 12. 5%、枯草芽孢桿菌菌粉10% 12%、地衣芽孢桿菌菌 粉10% 12%、側孢芽孢桿菌菌粉10% 12%、巨大芽孢桿菌菌粉5% 8%、膠凍芽孢桿菌菌 粉5% 8%、圓褐固氮菌菌粉5% 8%、放線菌菌粉5% 8%。
3.根據權利要求1所述的速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于所述的菌粉是 將各菌種的菌液以輕質碳酸鈣為載體復配而得到的。
4.根據權利要求1所述的速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于所述的菌粉是 通過在各菌種的菌液中加入輕質磷酸鈣，所述輕質碳酸鈣的加入量為菌液重量的40 % 50 % (重量百分數)，攪拌30min 40min，脫水濃縮，低溫烘干至含水率< 5 %，粉碎至細 度彡100目而得到的。
5.根據權利要求1所述的速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于所述的速效多 菌種微生物復合沖施肥還包括有機硅和黃腐酸鉀，所述各菌種的菌粉總量、有機硅和黃腐 酸鉀的重量百分數為菌粉總量5% 25%，有機硅0. 5% 1%，黃腐酸鉀74. 5% 94%，所述 的有機硅由杭州包爾得有機硅有限公司生產，產品型號BD-3077-F，產品名稱捷潤粉劑。
6.根據權利要求1所述的速效多菌種微生物復合沖施肥的制備方法，其特征在于包 括以下步驟(1)復合菌粉的制備①各菌種菌液的制備光合細菌elegans ) ACCC 10649 菌液的制備在無菌條件下，將光和細菌elegans)KCCC 10649接種到液體培養基中， 所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為酵母粉3. 0g、蛋白胨3. 0g、七水 硫酸鎂0. 5g、無水氯化鈣0. 3g，PH值調至6. 8 7. 0，置于常規光培養箱內，28°C 30°C常 規光照培養6 7天，得到菌數彡5. 0 X 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧 氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天， 得到菌數彡1. OX 109CfU/ml的光合細菌菌液；酵母菌 G0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌液的制備在無菌條件下，將酵母菌O0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ接種到液體培養 基中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為七水硫酸鎂l.Og、磷酸二氫 鉀2. 0g、尿素30. g、玉米漿1. 0g、硫酸錳0. 02g、硫酸亞鐵0. 2g，PH值調至5. 5，30°C 31 °C 培養4 5天，得到菌數彡5. OX 108CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含有5% (重量 百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵罐中氧氣的 體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到 菌數彡1. OX 108Cfu/ml的酵母菌菌液；乳酸菌(ZaciococciAs lactis) ACCC 11092 菌液的制備在無菌條件下，將乳酸菌Oactococcm lactis) ACCC 11092接種到液體培養基中，所 述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉0. 5g、 蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g, pH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數彡5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含 有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到菌數彡1. OX 109CfU/ml的乳酸菌菌液；雙歧桿菌(ZaciococciAs lactis) KCCC 11092 菌液的制備在無菌條件下，將雙歧桿菌OaciococcM lactis) KCCC 11092接種到液體培養基 中，所述的液體培養基為各組分在1. OL蒸餾水中的含量為番茄汁200. 0ml、可溶性淀粉 0. 5g、蛋白胨15. 0g、氯化鈉5. 0g、酵母菌6. 0g、吐溫80 1. 0g、葡萄糖20. 0g，pH值調至7. 2， 30°C 35°C培養2 3天，得到菌數彡5. OX 109CfU/ml的種子培養液，然后接種到50升含 有5% (重量百分數)紅糖的無菌水中，接種量為無菌水重量的2 %，在溶氧量為5 %即發酵 罐中氧氣的體積與發酵液的體積比為5%的條件下，25°C 30°C于密封罐中靜置培養10 15天，得到菌數彡1.0X 109CfU/ml的雙歧桿菌菌液；枯草芽抱桿 lif {Bacillus subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242T、地衣芽孢桿菌(feci/A/iicAefli/brfflis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、 側孢芽孢桿菌、Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、膠凍芽孢桿菌Uaci/A/s mucilaginosus Krasil' nikov) ACCC 10013、 Bl H |S| M lif (Azοtobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 禾口放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制備，其中所述的培養基按重量百分數計均為淀粉5 %、豆餅粉7.5 %、磷酸 氫二鉀0. 2 %、硫酸銨0. 1 %、硫酸鎂0. 05 %、三氯化鐵0. 005 %、碳酸鈣0. 05 %、酵母粉 0. 01 %、硼酸 0. 005 %、pH 值調至 7. 2 7. 4 枯草芽抱桿菌 CfeciBw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ 菌液的制備在無菌條件下，將枯草芽孢桿菌 Cfeci^Zw1S subtil Is subsp. spizienii Nakamura et al )ACCC 10242τ接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐 壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中枯草芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；地衣芽孢桿菌(PacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146 菌液的 制備C 在無菌條件下，將地衣芽孢桿菌(BacilIusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中地衣芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；側孢芽孢桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079 菌液的制備在無菌條件下，>1 奪偵1Ji包芽抱桿菌 iBrevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培養基中，通氣量0. 5 1.0L / L*min，攪拌速度150 200rpm，罐 壓0. 5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中側孢芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010 菌液的制備 在無菌條件下，將巨大芽孢桿菌(feci/^As ffl^aieri腫de Bary) ACCC 10010接入到 培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗氧培 養48小時，得到的菌液中巨大芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ；^(.Bacillus mucilaginosus Krasil'nikov) ACCC 10013 菌液的制備 在無菌條件下，將膠凍芽孢桿菌(feci/A/s muci laginosus Krasil'nikov) ACCC 10013接入到培養基中，通氣量0.5 1.0L / L-min,攪拌速度150 200rpm，罐壓 0.5kg / cm2，耗氧培養48小時，得到的菌液中膠凍芽孢桿菌菌數彡2. OX IO9Cfu/ mL ； 圓褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001 菌液的制備 在無菌條件下，將圓褐固氮菌 C^oioAacier chroococum Beijerinck) ACCC 10001 接 入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2,耗 氧培養48小時，得到的菌液中圓褐固氮菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051 菌液的制備 在無菌條件下，將放線菌(Actinobacillus capsu latus Arseculeratne) ACCC 11051 接入到培養基中，通氣量0. 5 1. OL / L'min,攪拌速度150 200rpm，罐壓0. 5kg / cm2, 耗氧培養48小時，得到的菌液中的放線菌菌數> 2. OX IO9Cfu/ mL ；②各菌種菌粉的制備通過分別在各菌種的菌液中加入輕質碳酸鈣，所述輕質碳酸鈣的加入量為菌液重量的 40 % 50 %，攪拌30min 40min，脫水濃縮，低溫烘干至含水率彡5 %，粉碎，得到細度 ^ 100目的各菌種的菌粉，其中酵母菌菌粉中酵母菌的菌數> 2.0X108cfu/g，其余各菌種 菌粉中相應菌種的菌數彡2.0X109cfu/g ；③各菌種菌粉的混合將各菌種的菌粉按照重量百分數為光合細菌O^oi/o^a/ ^ elegans)kCCC 10649菌 粉 10% 12. 5%、酵母菌 G0ZcAia fermentans lodder) ACCC 20319τ 菌粉 10% 12. 5%、乳 酸菌 OaciococciAs lactis) ACCC 11092 菌粉 10% 12. 5%、雙歧桿菌(歷/ii/ο力acieri腫 sp) ACCC 11054 菌粉 10% 12. 5%、枯草芽孢桿菌 UaciBw1S 仰力ii/Zs subsp. spizienii Nakamura et al) ACCC 10242τ 菌粉 10% 12%、地衣芽孢桿菌(feci/A/iicAefli/brfflis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146 菌粉 10% 12%、側孢芽孢桿菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079 菌粉 10% 12%、巨大芽孢桿菌 {Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010 菌粉 5% 8%、膠凍芽孢桿菌 UaciBw1S muci laginosus Krasil' nikov) ACCC 10013 菌粉 5% 8%、圓褐固氮菌(Azotobacterchroococum Beijerinck) ACCC 10001 菌粉 5% 8% 和放線菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌粉5% 8%進行混合，得到復合菌粉； (2)復配將混合得到的復合菌粉與有機硅和黃腐酸鉀按重量百分數為菌粉5% 25%、有機硅 0. 5% 1%、黃腐酸鉀74. 5% 94%復配而得到速效多菌種微生物復合沖施肥。
全文摘要
本發明涉及一種速效多菌種微生物復合沖施肥及其制備方法。一種速效多菌種微生物復合沖施肥，其特征在于它包括由光合細菌、酵母菌、乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、側孢芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠凍芽孢桿菌、圓褐固氮菌和放線菌分別經發酵培養制得的菌粉復配而成，該速效多菌種微生物復合沖施肥中酵母菌(Pichiafermentanslodder)ACCC20319T菌數≥2.0×108cfu/g，其他各菌種的菌數均≥2.0×109cfu/g。該速效多菌種微生物復合沖施肥可提高作物品質，提高作物產量，縮短作物生長周期。
文檔編號C12R1/065GK102002470SQ20101054018
公開日2011年4月6日 申請日期2010年11月11日 優先權日2010年11月11日
發明者司金安, 唐清池, 文鳳發, 李忠宏, 王學賓, 胡偉, 郭銀保 申請人:唐清池