專利名稱：檢測α珠蛋白基因拷貝數的方法和系統的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物醫學領域，具體而言，涉及a-珠蛋白基因拷貝數的方法、引物組合物、標簽組合物和系統。
背景技術：
地中海貧血(以下簡稱地貧)是ー種常見的溶血性單基因遺傳病，多發于中東、中亞、非洲、東南亞和中國南方等地區。導致地貧的分子機理是珠蛋白基因發生缺陷使其編碼的肽鏈ー種或幾種合成減少或缺失，致使血紅蛋白的組成成分比例失衡，進而導致血紅蛋白不穩定。根據缺陷的珠蛋白基因種類不同，地貧主要分為a地貧和P地貧。a地貧大部分是由于a珠蛋白基因發生缺失，部分是由突變所致，其中缺失型占90%以上；0地貧大部分由于P珠蛋白基因發生突變、小的插入或缺失，部分是由大片段缺失或a珠蛋白 基因發生重復所致。其中a珠蛋白基因包含2個HBAl基因和2個HBA2基因，其基因拷貝數變異(缺失和重復)不僅會導致a地貧也會導致P地貧，因此檢測a珠蛋白基因拷貝數對地貧診斷具有重要意義。
發明內容
本發明g在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的ー個方面提出了ー種能夠確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的方法。另ー方面提供了一種能夠有效實施該方法的確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的系統。根據本發明的實施例，確定a-珠蛋白基因拷貝數的方法包括以下步驟對核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物；針對擴增產物，構建測序文庫；對測序文庫進行測序，以便得到測序結果，該測序結果由多個測序數據構成；確定測序結果中來自于a-珠蛋白基因的測序數據；基于a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。根據本發明的一些實施例，上述確定a-珠蛋白基因拷貝數的方法還可以具有下列附加技術特征根據本發明的一個實施例，所述核酸樣本是從對象的血漿、血清、全血和ロ腔脫落細胞的至少ー種分離的。其中，所述對象為人。由此，可以方便地從生物體獲取這些樣本，并且能夠具體地針對某些疾病采取不同的樣本，從而針對某些特殊疾病采取特定的分析手段。根據本發明的一個實施例，所述a-珠蛋白基因為選自HBAl基因和HBA2基因的至少ー種。根據本發明的一個實施例，使用特異性引物組對所述核酸樣本進行擴增，其中，所述特異性引物組包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID NO: I所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述第一引物和第二引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID N0:5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，利用選自Hiseq2000、SOLID,454和單分子測序裝置的至少ー種進行所述測序。根據本發明的一個實施例，所述特異性引物組進一歩包括第三引物和第四引物，其中，所述第三引物和第四引物對于內參基因是特異性的，并且進一歩包括確定所述測序結果中來自所述內參基因的測序數據。根據本發明的一個實施例，所述內參基因是FLNB，所述第三引物具有如SEQ IDNO :3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQ ID NO :4所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述第三引物和第四引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO 5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測 序數據是通過將所述測序結果與參照序列進行比對而得到的。根據本發明的一個實施例，基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數進ー步包括對測序結果中來自于a-珠蛋白基因的測序數據進行計數，得到數值H ;對測序結果中來自于內參基因的測序數據進行計數，得到數值C ;計算所述數值H和C的比值，得到第一參數H/C，并將所述第一參數與第一參照值進行比較；以及基于所述第一參數與所述第一參照值的比例，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。根據本發明的一個實施例，所述第一參照值是針對來自己知a -珠蛋白基因拷貝數的個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第一參數。根據本發明的一個實施例，所述第一參照值是針對來自正常個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第一參數。根據本發明的一個實施例，所述a -珠蛋白基因為HBAl和HBA2，所述測序結果中來自于所述HBAl的測序數據數目為Hl，所述測序結果中來自于所述HBA2的測序數據數目為H2，其中，基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數進ー步包括計算所述數值H2和Hl的比值，得到第二參數H2/H1，并將所述第二參數與第二參照值進行比較；以及基于所述第二參數與所述第二參照值的比例，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。根據本發明的一個實施例，所述第二參照值是針對來自己知a -珠蛋白基因拷貝數的個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第二參數。根據本發明的又一方面，本發明提供了ー種引物組合物。根據本發明的實施例，該引物組合物，包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID N0:1所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。根據本發明的實施例，前述的第一引物和第二引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO 5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，本發明的引物組合物進ー步包括第三引物和第四引物，其中，所述第三引物具有如SEQ ID NO :3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQID NO:4所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述第三引物和第四引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述序列為選自SEQ ID N0:5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的又一方面，本發明提供了上述引物組合物在確定核酸樣本中a -珠蛋白基因拷貝數中的用途。根據本發明的又一方面，本發明提供了一種標簽組合物。根據本發明的實施例，該標簽組合物由SEQ ID NO:5-100所示的標簽構成。根據本發明的又一方面，本發明提供了一種確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的系統。根據本發明的實施例，其特征在于，包括擴增裝置，所述擴增裝置用于對所述核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物；文庫構建裝置，所述文庫構建裝置與所述擴增裝置相 連，并且適于針對所述擴增產物，構建測序文庫；測序裝置，所述測序裝置與所述文庫構建裝置相連，并且適于對所述測序文庫進行測序，以便得到測序結果，所述測序結果由多個測序數據構成；分析裝置，所述分析裝置與所述測序裝置相連，并且適于確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據；以及基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。根據本發明的一些實施例，用于確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的系統還可以具有下列附加技術特征根據本發明的一個實施例，進ー步包括核酸樣本分離裝置，所述核酸樣本分離裝置適于從對象的血漿、血清、全血和口腔脫落細胞的至少ー種分離核酸樣本。根據本發明的一個實施例，所述a-珠蛋白基因為選自HBAl基因和HBA2基因的至少ー種。根據本發明的一個實施例，所述擴增裝置中設置有特異性引物組，其中，所述特異性引物組包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID NO: I所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述第一引物和第二引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID N0:5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述測序裝置為選自Hiseq2000、SOLID,454和單分子測序裝置的至少ー種。根據本發明的一個實施例，所述特異性引物組進一歩包括第三引物和第四引物，其中，所述第三引物和第四引物對于內參基因是特異性的，并且所述分析裝置適于確定所述測序結果中來自于所述內參基因的測序數據。根據本發明的一個實施例，所述內參基因是FLNB，所述第三引物具有如SEQ IDN0:3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQ ID N0:4所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述第三引物和第四引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID N0:5-100的至少之一所示的核苷酸序列。根據本發明的一個實施例，所述分析裝置適于通過將所述測序結果與參照序列進行對比而確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據。根據本發明的一個實施例，所述分析裝置適于通過下列步驟確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數對測序結果中來自于a-珠蛋白基因的測序數據進行計數，得到數值H ;對測序結果中來自內參基因的測序數據進行計數，得到數值C ;計算所述數值H和C的比值，得到第一參數H/C，并將所述第一參數與第一參照值進行比較；以及基于所述第一參數與所述第一參照值的比例，確定所述核酸樣本中a -珠蛋白基因的拷貝數。根據本發明的一個實施例，所述a -珠蛋白基因為HBAl和HBA2，所述測序結果中來自所述HBA2的測序數據數目為H2，其中，所述分析裝置適于通過下列步驟確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數；計算所述數值H2和Hl的比值，得到第二參數H2/H1，并將所述第二參數與第二參照值進行比較；以及基于所述第二參數與所述第二參照值的比例，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。本發明的附加方面和優點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發明的實踐了解到。
本發明的上述和/或附加的方面和優點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中圖I :顯示了根據本發明一個實施例的a I和a 2的共擴區域；圖2 :顯示了根據本發明一個實施例的HBA1，HBA2引物候選區域的序列；圖3 :顯示了根據本發明一個實施例的a-珠蛋白基因(HBA)與內參基因(Control)引物擴增效率，其中，左圖為HBA擴增曲線及擴增效率，右圖為Control擴增曲線及擴增效率；圖4 :顯示了根據本發明一個實施例的primer index和adaptor index標記后的PCR產物的示意圖；圖5 :顯示了根據本發明一個實施例的測序數據分類流程圖；圖6 :顯示了根據本發明一個實施例的a -珠蛋白基因拷貝數分析流程；圖7 :顯示了根據本發明一個實施例的1-64號樣本的電泳檢測結果；圖8 :顯示了根據本發明一個實施例的結果不符樣本進行HBAl和HBA2定量PCR檢測的結果；以及圖9 :顯示了根據本發明一個實施例的結果不符樣本進行Anti-3. 7和Anti_4. 2特異性引物PCR檢測的結果。
具體實施例方式下面詳細描述本發明的實施例，所述實施例的示例在附圖中示出，其中自始至終相同或類似的標號表示相同或類似的元件或具有相同或類似功能的元件。下面通過參考附圖描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。需要說明的是，術語“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術特征的數量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個或者更多個該特征。進一歩地，在本發明的描述中，除非另有說明，“多個”的含義是兩個或兩個以上。根據本發明的ー個方面，本發明提出了一種能夠有效確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的方法。根據本發明的實施例中確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的方法包括下列步驟對所述核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物；
根據本發明的實施例，核酸樣本的來源是不受限制的。根據本發明的一些實施例，核酸樣本可以是從對象的血漿、血清、全血和口腔脫落細胞的至少ー種分離的。根據本發明的實施例，對象的來源并不受特別限制。根據本發明的ー些具體示例，可采用的對象包括哺乳動物，優選的是人。根據本發明的實施例，核酸樣本中的a-珠蛋白基因為選自HBAl基因和HBA2基因的至少ー種。根據本發明的實施例，本發明采用特異性引物組對所述核酸樣本進行擴增，其中，所述特異性引物組包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID NO :1所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID NO :2所示的核苷酸序列。根據定量PCR相對定量對引物擴增效率的要求，HBAl和HBA2引物的擴增效率要求基本一致；結合HBAl和HBA2高度同源，且都存在序列相似度很高的假基因(u/ a 1，V a 2)的特點，本發明提供的高保守性的引物組能夠特異性地共擴增HBAl和HBA2基因區域。其設計包括以下步驟I. I確定HBAl和HBA2引物初級共擴候選區域把HBAl和HBA2基因的gDNA序列導入MegAlign程序，進行序列比對分析，將其中HBAl和HBA2序列連續相同堿基數在18bp以上的區域作為初級共擴候選區域。I. 2初級引物共擴候選區域序列保守性分析將dbSNP數據庫和hbvar數據庫記錄的引物共擴候選區域的SNP和突變信息標記在相應引物初級共擴候選區域，篩選其中序列連續18個堿基以上無常見基因突變(〈O. 1%)的區域為次級共擴候選區域。I. 3次級共擴候選區域序列特異性分析將a I和a 2 (在本文中分別指HBAl基因和HBA2基因)的次級共擴候選區域序列及其假基因V a 1，￥a2對應區域的序列導入MegAlign程序，進行序列比對分析，將其中的序列差異堿基位點作為序列特異性候選位點。I. 4特異性引物設計以序列特異性候選位點為引物的3’末端設計引物，將引物序列進行全基因組比對(blast)分析，除精確比對到a I和a 2タト，在基因組的其它位置無精確比對的引物為候選引物；對候選引物進行正反配對，將滿足正反候選引物對的擴增長度在80_150bp范圍內，且其共擴增的a I和a2序列有差異堿基存在的引物對命名為候選引物對。I. 5引物擴增區域涵蓋所有已知缺失型將候選引物對的擴增區域與hbvar數據庫記錄的所有a缺失突變的缺失區域進行比對，引物擴增區域涵蓋所有已知缺失型的引物對為最終選定的引物對。根據以上引物設計原則，最終選定的引物對為HBA-F和HBA-R(表I);其共擴的a I和a 2區域見圖1，如圖I所示，最上方線框為a珠蛋白基因序列，其下多條直線為a地貧各種缺失型對應的缺失區域，虛線框內的區域(Al和A2)為各種缺失型涉及HBAl或HBA2基因的共缺失區域，即A1，A2分別為HBAl和HBA2上的共擴增區域；圖2顯示了 HBA1，HBA2引物候選區域的序列，如圖2所示，其中HBAl-Q為Al區域序列，HBA2-Q為A2區域序列，框內為兩者的差異序列。表I. HBA、HBA2弓丨物序列
權利要求
1.一種確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的方法，其特征在于，包括 對所述核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物； 針對所述擴增產物，構建測序文庫； 對所述測序文庫進行測序，以便得到測序結果，所述測序結果由多個測序數據構成；確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據；以及基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。
2.根據權利要求I所述的方法，其特征在于，所述核酸樣本是從對象的血漿、血清、全血和口腔脫落細胞的至少ー種分離的， 任選地，所述對象為哺乳動物，優選人， 任選地，所述a-珠蛋白基因為選自HBAl基因和HBA2基因的至少ー種， 任選地，使用特異性引物組對所述核酸樣本進行擴增，其中，所述特異性引物組包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID NO: I所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID NO: 2所示的核苷酸序列， 任選地，所述第一引物和第二引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO:5-100的至少之一所不的核苷酸序列， 任選地，利用選自Hiseq2000、SOLID,454和單分子測序裝置的至少ー種進行所述測序。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述特異性引物組進一歩包括第三引物和第四引物， 其中，所述第三引物和第四引物對于內參基因是特異性的， 并且進一歩包括確定所述測序結果中來自所述內參基因的測序數據， 任選地，所述內參基因是FLNB，所述第三引物具有如SEQ ID NO :3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQ ID NO :4所示的核苷酸序列， 任選地，所述第三引物和第四引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO 5-100的至少之一所不的核苷酸序列， 任選地，確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據是通過將所述測序結果與參照序列進行比對而得到的。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a -珠蛋白基因的拷貝數進ー步包括 對測序結果中來自于a -珠蛋白基因的測序數據進行計數，得到數值H ; 對測序結果中來自于內參基因的測序數據進行計數，得到數值C ； 計算所述數值H和C的比值，得到第一參數H/C，并將所述第一參數與第一參照值進行比較；以及 基于所述第一參數與所述第一參照值的比例，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數， 任選地，所述第一參照值是針對來自己知a-珠蛋白基因拷貝數的個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第一參數， 任選地，所述第一參照值是針對來自正常個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第一參數， 任選地，所述a -珠蛋白基因為HBAl和HBA2，所述測序結果中來自于所述HBAl的測序數據數目為Hl，所述測序結果中來自于所述HBA2的測序數據數目為H2， 其中，基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數進一步包括 計算所述數值H2和Hl的比值，得到第二參數H2/H1，并將所述第二參數與第二參照值進行比較；以及 基于所述第二參數與所述第二參照值的比例，確定所述核酸樣本中a -珠蛋白基因的拷貝數， 任選地，所述第二參照值是針對來自已知a-珠蛋白基因拷貝數的個體的核酸樣本進行平行實驗而得到的第二參數。
5.一種引物組合物，其特征在于，包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ IDNO: I所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列， 任選地，所述第一引物和第二引物的至少之一的5’端進一步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO 5-100的至少之一所不的核苷酸序列， 任選地，其特征在于，進一步包括第三弓丨物和第四引物， 其中，所述第三引物具有如SEQ ID NO :3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQID NO:4所示的核苷酸序列， 任選地，所述第三引物和第四引物的至少之一的5’端進一步含有標簽序列，所述序列為選自SEQ ID NO:5-100的至少之一所示的核苷酸序列。
6.一種標簽組合物，其特征在于，由SEQ ID NO:5-100所示的標簽構成。
7.權利要求5所述的引物組合物在確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數中的用途。
8.一種確定核酸樣本中a-珠蛋白基因拷貝數的系統，其特征在于，包括 擴增裝置，所述擴增裝置用于對所述核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物； 文庫構建裝置，所述文庫構建裝置與所述擴增裝置相連，并且適于針對所述擴增產物，構建測序文庫； 測序裝置，所述測序裝置與所述文庫構建裝置相連，并且適于對所述測序文庫進行測序，以便得到測序結果，所述測序結果由多個測序數據構成； 分析裝置，所述分析裝置與所述測序裝置相連，并且適于 確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據；以及基于所述a-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。
9.根據權利要求8所述的系統，其特征在于，進一步包括核酸樣本分離裝置，所述核酸樣本分離裝置適于從對象的血漿、血清、全血和口腔脫落細胞的至少一種分離核酸樣本， 任選地，所述a-珠蛋白基因為選自HBAl基因和HBA2基因的至少一種， 任選地，所述擴增裝置中設置有特異性引物組， 其中，所述特異性引物組包含第一引物和第二引物，所述第一引物具有SEQ ID NO: I所示的核苷酸序列，所述第二引物具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列， 任選地，所述第一引物和第二引物的至少之一的5’端進一步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO:5-100的至少之一所不的核苷酸序列， 任選地，其特征在于，所述測序裝置為選自Hiseq2000、SOLID,454和單分子測序裝置的至少ー種， 任選地，所述特異性引物組進一歩包括第三弓I物和第四引物， 其中，所述第三引物和第四引物對于內參基因是特異性的， 并且所述分析裝置適于確定所述測序結果中來自于所述內參基因的測序數據， 任選地，所述內參基因是FLNB，所述第三引物具有如SEQ ID NO: 3所示的核苷酸序列，所述第四引物具有如SEQ ID N0:4所示的核苷酸序列， 任選地，所述第三引物和第四引物的至少之ー的5’端進ー步含有標簽序列，所述標簽序列為選自SEQ ID NO:5-100的至少之一所不的核苷酸序列。
10.根據權利要求8所述的系統，其特征在于，所述分析裝置適于通過將所述測序結果與參照序列進行對比而確定所述測序結果中來自于所述a-珠蛋白基因的測序數據， 任選地，所述分析裝置適于通過下列步驟確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數 對測序結果中來自于a -珠蛋白基因的測序數據進行計數，得到數值H ; 對測序結果中來自內參基因的測序數據進行計數，得到數值C ； 計算所述數值H和C的比值，得到第一參數H/C，并將所述第一參數與第一參照值進行比較；以及 基于所述第一參數與所述第一參照值的比例，確定所述核酸樣本中a -珠蛋白基因的拷貝數， 任選地，所述a -珠蛋白基因為HBAl和HBA2，所述測序結果中來自所述HBA2的測序數據數目為H2， 其中， 所述分析裝置適于通過下列步驟確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數；計算所述數值H2和Hl的比值，得到第二參數H2/H1，并將所述第二參數與第二參照值進行比較；以及 基于所述第二參數與所述第二參照值的比例，確定所述核酸樣本中a-珠蛋白基因的拷貝數。
全文摘要
本發明提供了一種確定核酸樣本中α-珠蛋白基因拷貝數的方法和系統。該方法包括對所述核酸樣本進行擴增，以便得到擴增產物；針對所述擴增產物，構建測序文庫；對所述測序文庫進行測序，以便得到測序結果，所述測序結果由多個測序數據構成；確定所述測序結果中來自于所述α-珠蛋白基因的測序數據；以及基于所述α-珠蛋白基因的測序數據的數目，確定所述核酸樣本中α-珠蛋白基因的拷貝數。利用該方法，能夠有效確定所述核酸樣本中α-珠蛋白基因的拷貝數。
文檔編號C12M1/34GK102952877SQ20121027714
公開日2013年3月6日 申請日期2012年8月6日 優先權日2012年8月6日
發明者陳仕平, 李劍, 張現東, 甄賀富, 陳彩粉, 張濤, 王俊 申請人:深圳華大基因研究院