專利名稱：(2s,3s)-戊諾酰胺生物酶催化合成方法
技術領域：
本發明涉及一種治療癲癇新藥(2S，3S)_戊諾酰胺的生物酶催化合成方法，屬于醫藥技術領域。
背景技術：
在目前眾多的抗癲癇藥物中，丙戊酸(Valproic Acid，VPA)是臨床應用廣、療效高和安全性較好的首選、廣譜藥物。雖然丙戊酸的使用存在不可忽視的副作用，如已孕婦女服用后會使新生兒的神經管缺陷的發生率顯著提高，但其全球的銷量仍然較大，其在2006年的銷售額達20億美元。因此通過對丙戊酸研究而尋找更高活性和低毒低副作用的替代物成為一直以來的研究熱點。丙戊酸類似物之一有戊諾酰胺，它作為一種鎮靜安眠藥，被廣泛應用。戊諾酰胺·化學結構式中含有兩個手性碳原子，目前市場上銷售的是其四個異構體的混合物，即(s，s)型、(R，R)型、(S，R)型和(R，S)型的混合物。1997年，以色列一研究小組報道文獻Clin.Pharmacol. Ther. 1997，61，442-449采用手性氣相柱從戊諾酰胺的四個異構體中將(S，S)型異構體成功分離出來，研究表明(S，S)型戊諾酰胺即(2S，3S)_戊諾酰胺對抗癲癇具有高的活性和選擇性。以色列研究小組于1999年報道的文獻Tetrahedron: Asym. 1999,10,841是以
L-異亮氨酸為起始原料、Evans不對稱烷基化反應為關鍵步驟的(2S，3S)-戊諾酰胺的合成
路線，共8步反應，總產率約為1%，反應路線如下
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上述以色列研究小組的合成路線，所采用的L-異亮氨酸原料昂貴，且后續工藝分離方法十分復雜，難以用于大批量生產。美國Neurocrine Biosciences, Inc.制藥公司公開的以Myers不對稱燒基化反應為關鍵步驟(Org. Process Res. Dev. 2009，13，463.)，進一步合成得到(2S, 3S)-戊諾酰胺的合成路線。該合成工藝具有總產率較高，原料便宜，操作簡單，產物純度高等特點，并且可以很可靠地放大到kg級，反應路線如下
權利要求
1.一種(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于步驟一，以(3S)-甲基戊酸為起始原料，經過酯化反應制得(3S)-甲基戊酸乙酯；步驟二，將步驟一制得的(3S)-甲基戊酸乙酯經由烷基化反應得到(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯；步驟三，將步驟二制得的(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯采用生物酶進行立體選擇性催化反應制得中間體(2S, 3S)-3-甲基-2-乙基戊酸；步驟四，將步驟三制得的經過酰化反應制得(2S，3S)-戊諾酰胺。
2.根據權利要求I所述的(2S，3S)-戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三包括先將PH值為6-9的磷酸二氫鉀/磷酸氫二鉀緩沖溶液升溫至25°C -75°C，向其投入(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯和脂肪酶，其中脂肪酶的質量為(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯的質量的O. 05-0. 5倍，調節反應液的pH值為4-9，在反應溫度20°C -60°C，反應時間I天-5天的條件下制得(2S，3S)-3-甲基-2-乙基戊酸。
3.根據權利要求2所述的(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三中的脂肪酶為熒光假單胞菌脂肪酶或者洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶中的任意一種。
4.根據權利要求2所述的(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三中的磷酸二氫鉀/磷酸氫二鉀緩沖溶液的pH值為6. 5-7. 5。
5.根據權利要求2所述的(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三中的磷酸二氫鉀/磷酸氫二鉀緩沖溶液升溫至30°C -50°C。
6.根據權利要求2所述的(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三中的反應溫度為32°C -38°C。
7.根據權利要求2所述的(2S，3S)_戊諾酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步驟三中的反應液pH值為7. 0-7. I。
全文摘要
本發明揭示了一種(2S,3S)-戊諾酰胺生物酶催化合成方法，以廉價易得的(3S)-甲基戊酸為起始原料，以生物酶不對稱催化水解反應為關鍵步驟，最終制得(2S,3S)-戊諾酰胺。本發明通過利用酶不對稱催化反應、高選擇性的制備得關鍵中間體，從而制得高光學純度的(2S,3S)-戊諾酰胺，使其純度符合藥品標準，工藝路線簡單，操作簡便，成本低，總產率較高，具有良好的工業應用前景。
文檔編號C12P13/02GK102876744SQ201210363049
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月26日 優先權日2012年9月26日
發明者陳建戈, 李斌峰, 孫濤 申請人:暨明醫藥科技(蘇州)有限公司