用蛋清制備溶菌酶的方法
【專利摘要】本發明公開了一種用蛋清制備溶菌酶的方法,它的技術方案是這樣實現的:用蛋清制備溶菌酶的方法,其操作步驟如下:室溫下,將雞蛋清用氯化鈉溶液稀釋至原來的1.5-2倍,用2mol/L鹽酸調節PH值4-5.5,攪拌45分鐘,以6000r/min的轉速離心去除沉淀和雜質,收集上清液,將上清液用膜截留分子量為11000Da的中空纖維超濾膜裝置超濾,在所得濾液中加入硫酸銨固體對濾液分級沉淀,傾去上清液,將所得沉淀噴霧干燥。本發明具有以下有益效果:溶菌酶以蛋清含量最為豐富,而且提取過程簡單,工業生產成本低,適合大規模生產。
【專利說明】用蛋清制備溶菌酶的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及溶菌酶制備領域,尤其涉及用蛋清制備溶菌酶的方法。
【背景技術】
[0002]溶菌酶是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用,還用于生化研究,臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,它是一種天然酶,安全綠色的添加劑,無抗藥性。該酶廣泛存在于人體多種組織中,鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸,有4對二硫鍵維持酶構型,是一種堿性蛋白質,其N端為賴氨酸,C端為亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。溶菌酶是很穩定的蛋白質,有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型,是已知的最耐熱的酶。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種用蛋清制備溶菌酶的方法,溶菌酶以蛋清含量最為豐富,而且提取過程簡單,適合大規模生產。
[0004]為了實現上述目的,本發明的技術方案是這樣實現的:用蛋清制備溶菌酶的方法,其操作步驟如下:室溫下,將雞蛋清用氯化鈉溶液稀釋至原來的1.5-2倍,用2mol/L鹽酸調節PH值4-5.5,攪拌45分鐘,以6000r/min的轉速離心去除沉淀和雜質,收集上清液,將上清液用膜截留分子量為IlOOODa的中空纖維超濾膜裝置超濾,在所得濾液中加入硫酸銨固體對濾液分級沉淀,傾去上清液,將所得沉淀噴霧干燥。
[0005]進一步地,硫酸銨固體的質量占濾液體積的3%。
[0006]進一步地,干燥塔進口溫度110_160°C,出口溫度50_75°C。
[0007]本發明具有以下有益效果:溶菌酶以蛋清含量最為豐富,而且提取過程簡單,工業生產成本低,適合大規模生產。
【具體實施方式】
[0008]本實施例用蛋清制備溶菌酶的方法,其操作步驟如下:室溫下,將雞蛋清用氯化鈉溶液稀釋至原來的1.5-2倍,用2mol/L鹽酸調節PH值4-5.5,攪拌45分鐘,以6000r/min的轉速離心去除沉淀和雜質,收集上清液,將上清液用膜截留分子量為IlOOODa的中空纖維超濾膜裝置超濾,在所得濾液中加入硫酸銨固體對濾液分級沉淀,硫酸銨固體的質量占濾液體積的3%,傾去上清液,將所得沉淀噴霧干燥,干燥塔進口溫度110-160°C,出口溫度50-75。c。
[0009]最后說明的是,以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制,本領域普通技術人員對本發明的技術方案所做的其他修改或者等同替換,只要不脫離本發明技術方案的精神和范圍,均 應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。
【權利要求】
1.用蛋清制備溶菌酶的方法,其特征在于,其操作步驟如下:室溫下,將雞蛋清用氯化鈉溶液稀釋至原來的1.5-2倍,用2mol/L鹽酸調節PH值4-5.5,攪拌45分鐘,以6000r/min的轉速離心去除沉淀和雜質,收集上清液,將上清液用膜截留分子量為IlOOODa的中空纖維超濾膜裝置超濾,在所得濾液中加入硫酸銨固體對濾液分級沉淀,傾去上清液,將所得沉淀噴霧干燥。
2.根據權利要求1所述的用蛋清制備溶菌酶的方法,其特征在于,硫酸銨固體的質量占濾液體積的3%。
3.根據權利要求1所述的用蛋清制備溶菌酶的方法,其特征在于,干燥塔進口溫度.110-160。C,出口溫度 50-75 0C。
【文檔編號】C12N9/36GK104004731SQ201410269341
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年6月17日 優先權日:2014年6月17日
【發明者】王俊偉 申請人:南通康德生物制品有限公司