一種蛹蟲草液體菌種的培養方法
【專利摘要】本發明涉及一種蛹蟲草液體菌種的培養方法，包括：液體培養基制備，將配制好的液體培養基分裝入三角燒瓶中，每瓶滴4～5滴菜油，瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口，滅菌；將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30℃以下，無菌條件下接入3～4塊0.4～0.6cm3的斜面菌種，于20～22℃下靜置培養48～72h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為80～100次/min，振幅6～10cm或者將三角燒瓶置于旋轉式搖床，震蕩頻率為120～200轉/min，振幅4cm，培養室溫度在20～21℃，培養3～5d。本發明采用搖瓶培養蛹蟲草液體菌種，投資少，設備技術簡單，適合一般菌種廠生產。
【專利說明】一種蛹蟲草液體菌種的培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及蟲草菌生產【技術領域】，具體涉及一種蛹蟲草液體菌種的培養方法。
【背景技術】
[0002]蛹蟲草為子囊菌亞門，麥角菌目，麥角菌科、蟲草屬的模式種，又名北冬蟲夏草、北蟲草等。蛹蟲草形態特征子座單生或數個一起從寄生蛹體的頭部或節部長出，顏色為橘黃或橘紅色，全長2~8厘米，蛹體顏色為紫色，長約1.5~2厘米。
[0003]冬蟲夏草與人參、鹿茸齊名為為中國傳統的三大補品而馳名中外，國內外許多專家對蛹蟲草營養化學成份，藥理及臨床效果的研究，都基本上和冬蟲夏草相同，主要有保肺益腎，止血化痰，調節身體機能，主治肺結核咳血，陽痿遺精，腰膝酸痛，美容護膚，神精衰弱，糖尿病，升白血球，防癌、抗癌，對化療作用也很大。人工栽培的蛹蟲草藥用功效與野生蟲草的功效相差無幾，某些方面的醫用表現甚至優于野生蟲草。藥化、藥理和臨床實驗證明蛹蟲草完全可以作為冬蟲夏草的代用品。經研究證明，人工培養的蛹蟲草醫藥臨床效果，與天然的冬蟲夏草相同，同樣能夠調節全身功能、提高免疫能力、增強巨噬細胞的吞噬功能、促進抗體的形成，主要有保肺益腎養肝、止咳平喘祛痰、潤膚防皺抗衰老、抗菌抗炎、鎮靜、擴張血管、降低血壓、降低血糖、抗疲勞、耐缺氧等作用。人工蛹蟲草主治:虛癆咳血、腰膝酸痛、陽痿遺精、神經衰弱、心悸失眠、盜汗、心率失常、食欲不振、鼻咽癌、肺氣腫、肺結核、氣管炎、哮喘癥、肝炎、腎炎、腎虛、糖尿病、尿頻及放、化療后白細胞減少等癥。
[0004]蛹蟲草液體菌種培養常見的有采用搖床來生產的搖瓶培養法和采用發酵罐來生產的深層培養法，若少量生產可以采用搖瓶培養法，深層培養需要一整套工業發酵設備，如鍋爐、空氣壓縮機、空氣凈化系統、發酵罐等，故投資大，只適用于工廠化的大規模生產。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種蛹蟲草液體菌種的培養方法，以適合一般菌種廠生產。
[0006]本發明采用以下技術方案:
[0007]一種蛹蟲草液體菌種的培養方法，包括如下步驟:
[0008]步驟一、液體培養基制備:將200g 土豆放入100ml水中，煮沸25min,過濾取濾清液，之后加入1g葡萄糖、3g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5g瓊脂、20mgVBl,微火熔化，調節pH至6.8 ;或者將15g蛋白胨、1g葡萄糖、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5瓊脂、20mgVBl放入100ml水中，混合均勻，調節pH至6.8 ;
[0009]步驟二、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為300~350ml，每瓶滴4~5滴菜油，瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌30~35min ；
[0010]步驟三、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入3~4塊
0.4~0.6cm3的斜面菌種，于20~22°C下靜置培養48~72h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為80~100次/min，振幅6~1cm或者將三角燒瓶置于旋轉式搖床，震蕩頻率為120~200轉/min，振幅4cm，培養室溫度在20~21°C，培養3~5d。
[0011]本發明的有益效果:本發明采用搖瓶培養蛹蟲草液體菌種，投資少，設備技術簡單，適合一般菌種廠生產。
【具體實施方式】
[0012]下面結合實施例對本發明做更進一步地解釋。下述實施例不以任何形式限制本發明，凡采用等同替換或等效變換的方式所獲得的技術方案，均處于本發明的保護范圍之中。
[0013]一種蛹蟲草液體菌種的培養方法，包括如下步驟:
[0014]步驟一、液體培養基制備:將200g 土豆放入100ml水中，煮沸25min,過濾取濾清液，之后加入1g葡萄糖、3g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5g瓊脂、20mgVBl,微火熔化，調節pH至6.8 ;或者將15g蛋白胨、1g葡萄糖、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5瓊脂、20mgVBl放入100ml水中，混合均勻，調節pH至6.8 ;
[0015]步驟二、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為300~350ml，每瓶滴4~5滴菜油起消泡作用，瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌30~35min ；
[0016]步驟三、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入3~4塊
0.4~0.6cm3的斜面菌種，于20~22°C下靜置培養48~72h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為80~100次/min，振幅6~1cm或者將三角燒瓶置于旋轉式搖床，震蕩頻率為120~200轉/min，振幅4cm，培養室溫度在20~21°C，培養3~5d。
[0017]如果沒有搖床設備,可以用手搖來解決,每天搖2~5次,每次搖I~3min,搖得多菌絲也生長得快。可以把幾十個瓶子放在搖籃或吊床上一起搖。
[0018]實施例1
[0019]1、液體培養基制備:將200g 土豆放入100ml水中，煮沸25min，過濾取濾清液，之后加入1g葡萄糖、3g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5g瓊脂、20mgVBl,微火熔化,調節pH至6.8 ;
[0020]2、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為300ml，每瓶滴4滴菜油，瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌30min ；
[0021]3、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入3塊0.4~0.6cm3的斜面菌種，于20°C下靜置培養48h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為80次/min，振幅6cm，培養室溫度在20°C，培養3d。
[0022]實施例2
[0023]1、液體培養基制備:將15g蛋白胨、1g葡萄糖、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5瓊脂、20mgVBl放入100ml水中，混合均勻，調節pH至6.8 ;
[0024]2、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為350ml，每瓶滴5滴菜油,瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌35min ；
[0025]3、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入4塊0.4~0.6cm3的斜面菌種，于22°C下靜置培養72h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為100次/min，振幅10cm，培養室溫度在211:，培養5(1。
[0026]實施例3
[0027]1、液體培養基制備:將200g 土豆放入100ml水中，煮沸25min，過濾取濾清液，之后加入1g葡萄糖、3g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5g瓊脂、20mgVBl,微火熔化,調節pH至6.8 ;
[0028]2、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為320ml，每瓶滴5滴菜油,瓶口加棉塞后再包扎無紡布封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌35min ；
[0029]3、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入4塊0.4~0.6cm3的斜面菌種，于21°C下靜置培養56h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于旋轉式搖床，震蕩頻率為200轉/min，振幅4cm，培養室溫度在21°C，培養4d。
【權利要求】
1.一種蛹蟲草液體菌種的培養方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟一、液體培養基制備:將200g 土豆放入100ml水中，煮沸25min，過濾取濾清液，之后加入1g葡萄糖、3g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5g瓊脂、20mgVBl,微火熔化，調節pH至6.8 ;或者將15g蛋白胨、1g葡萄糖、2g磷酸二氫鉀、Ig硫酸鎂、0.5瓊脂、20mgVBl放入100ml水中，混合均勻，調節pH至6.8 ; 步驟二、將配制好的液體培養基分裝入500ml容量的三角燒瓶中，每瓶裝量為300~350ml，每瓶滴4~5滴菜油，瓶口加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口，在1.4kg/m2壓力下滅菌30~35min ； 步驟三、將滅菌后的三角燒瓶取出，冷卻至30°C以下，無菌條件下接入3~4塊0.4~0.6cm3的斜面菌種，于20~22°C下靜置培養48~72h，菌種塊上菌絲萌發將三角燒瓶置于往復式搖床上震蕩培養，震蕩頻率為80~100次/min，振幅6~1cm或者將三角燒瓶置于旋轉式搖床，震蕩頻率為120~200轉/min，振幅4cm，培養室溫度在20~21°C，培養3~5d。
【文檔編號】C12R1/645GK104164369SQ201410384764
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年8月6日 優先權日:2014年8月6日
【發明者】趙勝華 申請人:趙勝華