一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法

一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法
【專利摘要】本發明涉及食用菌栽培領域，特別涉及一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟：將蛹蟲草菌種活化培養，制得孢子懸液；將孢子懸液以體積百分數為3-8％的比例接種于蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；將種子液接種于蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，得到蛹蟲草子實體。本發明提供的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，將孢子懸液接種于本發明中提供的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；將種子液接種到本發明提供的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，培養方法簡單，培養周期短，得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高，且用該蛹蟲草子實體提取的蟲草酸的純度高。
【專利說明】一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及食用菌栽培領域，具體而言，涉及一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法。
【背景技術】
[0002]蛹蟲草又稱北蟲草、北冬蟲夏草，是真菌寄生于鱗翅目等昆蟲的蟲體上形成的蟲菌復合體，是一種具有滋補作用的重要和營養品。蛹蟲草具有抗腫瘤、抗炎等多種藥力功效，它已經在東亞地區被廣泛作為滋補品及藥用菌使用，我國衛生部于2009年3月16日正式將其列為新資源食品。
[0003]蟲草酸是蛹蟲草的主要活性成分之一，蟲草酸含量的高低是衡量蟲草質量的主要標準之一，一般認為蟲草酸含量高的蟲草的藥用價值高。蟲草酸可預防與治療腦血栓、腦出血、心肌梗塞、長期衰竭；抗肝組織纖維化，抗脂質過氧化，同時由于蟲草的增強免疫功能使肝臟的解毒作用增強，從而能夠有效保護肝細胞。
[0004]目前，蛹蟲草蟲 草酸含量主要集中于通過液體深層發酵來提高，但是，深層發酵得到的為蛹蟲草的菌絲體，其產生的蟲草酸的含量一般在3-4.5%左右，并且發酵得到的培養物不僅包括蛹蟲草自身，還含有一些培養基殘渣，影響蟲草酸的純度。

【發明內容】

[0005]本發明的目的在于提供蛹蟲草種子培養基、蛹蟲草生長培養基以及一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，以解決上述的問題。
[0006]在本發明的實施例中提供了一種蛹蟲草種子培養基，按重量份計，包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氫鉀0.02-0.06份、硫酸鎂0.02-0.06份、氯化鈉4-6份、維生素B10.05-0.15份、高粱粉8-12份、水800-1200份。
[0007]在本發明的實施例中還提供了一種蛹蟲草生長培養基，按重量份計，包括以下成分:高粱粉24-26份、銀杏葉粉4-6份、蛋白胨0.04-0.06、甘露糖0.04-0.08份、磷酸二氫鉀 0.02-0.04 份、硫酸鎂 0.02-0.03 份、葡萄糖 0.04-0.06 份、維生素 B10.0005-0.001 份、水30-40份。
[0008]一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟:
[0009](a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為1-3 X 107CFU/ml的孢子懸液；
[0010](b)將所述孢子懸液以體積百分數為3-8%的比例接種于權利要求1所述的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；
[0011](C)將所述種子液接種于權利要求2所述的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，得到蛹蟲草子實體。
[0012]優選地，在所述步驟(b)中，培養條件為:25-30°C，240-260rpm/min振蕩培養。
[0013]優選地，在所述步驟(b)中，培養3-5d，得到所述種子液。
[0014]優選地，將所述種子液稀釋20-30倍后，以體積百分數為5-8%進行接種。
[0015]優選地,在所述步驟(C)中,所述菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養,培養條件為:溫度20-25°C，每天光照2-4h，光照強度為250-300Lux，濕度60-70%，培養5_7d。
[0016]優選地，在所述步驟(C)中，所述菌絲轉色培養的培養條件為:溫度14_18°C，濕度70-80%，每天通風1.5-2.5h，光照8_12h，光照強度為250_300Lux，培養3_5d。
[0017]優選地，在所述步驟(C)中，所述子實體培養的培養條件為:透氣培養，溫度為20 °C ±2°C，濕度為80-90 %，每天通風1.5-2.5h，藍光光照12_14h，光照強度為250-300Lux,培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體。
[0018]優選地，所述消毒為:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于75_85°C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為90-100min，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3_3.2g ;消毒期間，培養間室溫不低于20°C，濕度為60% -80%。
[0019]本發明實施例提供的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，將孢子懸液接種于本發明中提供的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；將種子液接種到本發明提供的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，培養方法簡單，培養周期短，得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高，且用該蛹蟲草子實體提取的蟲草酸的純度高。
【具體實施方式】
[0020]下面通過具體的實施例子對本發明做進一步的詳細描述。
[0021]在本發明的實施例中提供了一種蛹蟲草種子培養基，按重量份計，包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氫鉀0.02-0.06份、硫酸鎂0.02-0.06份、氯化鈉4-6份、維生素B10.05-0.15份、高粱粉8-12份、水800-1200份。
[0022]進一步地，按重量份計，包括以下成分:葡萄糖9-11份、蛋白胨3-4份、酵母粉4-5份、磷酸二氫鉀0.04-0.05份、硫酸鎂0.04-0.05份、氯化鈉4-5份、維生素B10.10-0.15份、高粱粉9-10份、水1000份。
[0023]得到的蛹蟲草種子培養基營養全面，培養基成分濃度及配比合適；將蛹蟲草的孢子懸液接種至本培養基，部分孢子生長成菌絲體，孢子生命力旺盛，孢子數擴增快，并且得到部分菌絲體，得到的種子液含有孢子和菌絲體，利于后續生長。
[0024]在本發明的實施例中還提供了一種蛹蟲草生長培養基，按重量份計，包括以下成分:高粱粉24-26份、銀杏葉粉4-6份、蛋白胨0.04-0.06、甘露糖0.04-0.08份、磷酸二氫鉀 0.02-0.04 份、硫酸鎂 0.02-0.03 份、葡萄糖 0.04-0.06 份、維生素 B10.0005-0.001 份、水30-40份。
[0025]進一步地，按重量份計，包括以下成分:高粱粉25-26份、銀杏葉粉4_5份、蛋白胨0.04-0.05、甘露糖0.06-0.07份、磷酸二氫鉀0.03-0.04份、硫酸鎂0.02-0.03份、葡萄糖0.04-0.05 份、維生素 B10.0005-0.001 份、水 30-40 份。
[0026]得到的蛹蟲草生長培養基營養全面，培養基成分濃度及配比合適；將蛹蟲草的種子液接種至本培養基，利于孢子生長為菌絲體，得到較多的菌絲體，利于獲得更多的蛹蟲草子實體，且得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高。
[0027]其中，蛹蟲草種子培養基和蛹蟲草生長培養基中涉及的高粱粉是過20-30目篩得到的，銀杏葉粉為將干銀杏葉粉粉碎為片狀大小為0.5-1.5mmX0.5-1.5mm。使用這種粒度的高粱粉和銀杏葉粉，其在滅菌過程中能分布均勻，滅菌后得到的培養基中的成分分布均
O[0028]分別將蛹蟲草種子培養基和蛹蟲草生長培養基各自含有的成分稱取后混合，均采用高溫高壓滅菌，具體為121°C，滅菌20-30min，滅菌后冷卻至室溫，得到可直接用于培養菌株的培養基。
[0029]一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟:
[0030](a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為1-3 X 107CFU/ml的孢子懸液；
[0031](b)將所述孢子懸液以體積百分數為3-8%的比例接種于權利要求1所述的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；
[0032](c)將所述種子液接種于權利要求2所述的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，得到蛹蟲草子實體。
[0033]采用本發明提供的蛹蟲草種子培養基和蛹蟲草生長培養基進行蛹蟲草的培養，培養方法簡單，培養周期短，成本低，得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高；另外，現有技術中采用液體發酵培養蛹蟲草，蛹蟲草的大部分在發酵液中，自身產生的分泌物等物質混雜在發酵液中，因而得到的蛹蟲草含有發酵液的成分，而本發明提供的蛹蟲草生長培養基為固體培養基，采用固體培養蛹蟲草，采摘得到的蛹蟲草子實體，避免了采用液體發酵培養時培養基中的雜質混入蛹蟲草子實體中的缺陷，得到的蛹蟲草雜質更少，因此，后續蛹蟲草提取的蟲草酸的純度更高。
[0034]蛹蟲草菌種活化培養，使用的蛹蟲草菌種購自中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCC M2013056，將蛹蟲草菌種接種于馬鈴薯斜面培養基，27°C ±2°C培養6_8d，得到蛹蟲草的孢子，用含有0.05%的吐溫80的無菌水洗下孢子，制得濃度為1-3X 107CFU/ml的孢子懸液。其中，馬鈴薯斜 培養基成分包括馬鈴薯100g、葡萄糖10g、磷酸二氫鉀lg、瓊脂16g、水1000ml ;配制方法為:取已去皮的馬鈴薯100g，切成小塊，加水1000ml，煮沸20min，用4-6層紗布過濾，然后補足失水至1000ml，加入瓊脂16g溶化，然后再加入葡萄糖10g，磷酸二氫鉀lg，分裝試管，121°C高壓滅菌25-30min，制備得到馬鈴薯斜面培養基。采用馬鈴薯斜面培養基活化蛹蟲草菌種，方法簡單易行，且得到的孢子多。采用0.05%的吐溫80的無菌水將孢子制成濃度為1-3X 107CFU/ml的孢子懸液，制得的孢子懸液孢子分布均勻；然后以體積百分數為3-8%的比例接種至蛹蟲草種子培養基，接種量適中，利于在蛹蟲草種子培養基快速生長。
[0035]優選地，在所述步驟(b)中，培養條件為:25-30°C，240-260rpm/min振蕩培養。經驗證，培養溫度為25-30°C，蛹蟲草在蛹蟲草種子培養基中生長快速；轉速240-260rpm/min，在不損害蛹蟲草孢子的情況下，增加溶氧量，利于孢子和菌絲體的生長，同時可以將蛹蟲草種子培養基混合均勻，以防止局部蛹蟲草種子培養基營養成分不足而影響孢子和菌絲體的生長，因此，這種培養條件下蛹蟲草的孢子生長速度快，形成的菌絲體較多，節約培養時間。
[0036]優選地，在所述步驟(b)中，培養3-5d，得到所述種子液。培養3-5d，得到的種子液菌體含量高，且生長旺盛。
[0037]優選地，將所述種子液稀釋20-30倍后，以體積百分數為5-8%進行接種。在蛹蟲草生長培養基中接種適量的種子液，利于得到蛹蟲草子實體；為了防止接種量差異大以及接種后分布不均一，先將種子液進行稀釋，然后以體積百分數為5-8%進行接種，可以得到種子液分布均勻的蛹蟲草生長培養基，利于菌體的生長。[0038]優選地，在所述步驟(C)中，所述菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養，培養條件為:溫度20-25°C，每天光照2-4h，光照強度為250-300Lux，濕度60-70 %，培養5_7d。該培養條件下，菌體生長快速，培養容器長滿菌絲，培養周期短。
[0039] 優選地，在所述步驟(C)中，所述菌絲轉色培養的培養條件為:溫度14_18°C，濕度70-80%，每天通風1.5-2.5h，光照8-12h，光照強度為250_300Lux，培養3_5d。該培養條件下，菌體生長快速，開始在培養基表面形成小米狀原基，菌絲體轉色效果好，且培養周期短。
[0040]優選地，在所述步驟(C)中，所述子實體培養的培養條件為:透氣培養，溫度為20 °C ±2°C，濕度為80-90 %，每天通風1.5-2.5h，藍光光照12_14h，光照強度為250-300Lux,培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體。
[0041]透氣培養為:蛹蟲草生長培養基35-45ml放入三角培養瓶(200_250ml)中，其口用封口薄膜封住，然后培養，通過在封口薄膜上扎3-5個孔，進行透氣培養，以利于空氣流通，利于培養物生長。并且在該培養條件下，菌體生長快速，培養周期短，得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高。
[0042]此外，固體培養得到的蛹蟲草，直接切割即可得到，防止了培養基中的雜質混入得到的蛹蟲草子實體中，得到的蛹蟲草雜質更少。因此，后續蛹蟲草提取的蟲草酸的純度更聞。
[0043]優選地，所述消毒為:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于75_85°C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為90-100min，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3_3.2g。對蛹蟲草生長的空間進行消毒，以防止其受病，且防止其他微生物的污染；采用過氧乙酸對熏蒸對培養間消毒，消毒徹底，且對蛹蟲草培養物本身無傷害，在培養期間，蛹蟲草培養物生長狀態好，得到的蛹蟲草子實體無污染且得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高。
[0044]本發明實施例提供的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，將孢子懸液接種于本發明中提供的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液；將種子液接種到本發明提供的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，培養方法簡單，培養周期短，得到的蛹蟲草子實體蟲草酸含量高，且用該蛹蟲草子實體提取的蟲草酸的純度高。
[0045]實施例1
[0046]按重量份計，稱取以下成分:葡萄糖8份、蛋白胨2份、酵母粉4份、磷酸二氫鉀0.02份、硫酸鎂0.02份、氯化鈉4份、維生素B10.05份、高粱粉8份、水800份，然后121°C，滅菌25min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草種子培養基；
[0047]按重量份計，稱取以下成分:高粱粉24份、銀杏葉粉4份、蛋白胨0.04、甘露糖0.04份、磷酸二氫鉀0.02份、硫酸鎂0.02份、葡萄糖0.04份、維生素B10.0005份、水30份，然后121°C，滅菌25min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草生長培養基；
[0048]高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟:
[0049](a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為I X 107CFU/ml的孢子懸液；
[0050](b)將孢子懸液以體積百分數為8%的比例接種于蛹蟲草種子培養基中培養，培養條件為:25°C，240rpm/min振蕩培養，培養3d，得到種子液；
[0051](c)將種子液稀釋20倍后，以體積百分數為5%將種子液接種于蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養；
[0052]菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養，培養條件為:溫度20°C，每天光照4h，光照強度為250Lux，濕度60%，培養7d ；
[0053]菌絲轉色培養的培養條件為:溫度14°C，濕度70%，每天通風1.5h，光照12h，光照強度為250LUX，培養3d;
[0054]菌絲轉色培養完成后，對培養物進行子實體培養，培養條件為:透氣培養，溫度為200C ±2°C，濕度為80%，每天通風1.5h，藍光光照14h，光照強度為250Lux，培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體；
[0055]其中，對培養間采用以下方式進行消毒:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于75°C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為lOOmin，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3-3.2g ;消毒期間，培養間室溫不低于20°C，濕度為60% -80%。
[0056]得到的蛹蟲草子實體呈金黃色，比色法測定蟲草酸的含量，得到蟲草酸含量為18%。
[0057]實施例2
[0058]按重量份計，稱取以下成分:葡萄糖10份、蛋白胨3份、酵母粉5份、磷酸二氫鉀0.04份、硫酸鎂0.04份、氯化鈉5份、維生素B10.10份、高粱粉10份、水1000份，然后121 °C，滅菌30min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草種子培養基； [0059]按重量份計，稱取以下成分:高粱粉25份、銀杏葉粉5份、蛋白胨0.05、甘露糖0.06份、磷酸二氫鉀0.03份、硫酸鎂0.03份、葡萄糖0.05份、維生素BI0.001份、水35份，然后121 °C，滅菌30min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草生長培養基；
[0060]高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟:
[0061](a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為2X 107CFU/ml的孢子懸液；
[0062](b)將孢子懸液以體積百分數為5%的比例接種于蛹蟲草種子培養基中培養，培養條件為:27°C，250rpm/min振蕩培養，培養4d，得到種子液；
[0063](c)將種子液稀釋25倍后，以體積百分數為6%將種子液接種于蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養；
[0064]菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養，培養條件為:溫度22°C，每天光照3h，光照強度為280LUX，濕度65%，培養6d ；
[0065]菌絲轉色培養的培養條件為:溫度16°C，濕度75%，每天通風2.0h，光照10h，光照強度為280LUX，培養4d;
[0066]菌絲轉色培養完成后，對培養物進行子實體培養，培養條件為:透氣培養，溫度為200C ±2°C，濕度為85%，每天通風2.0h，藍光光照13h，光照強度為280Lux，培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體；
[0067]其中，對培養間采用以下方式進行消毒:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于80°C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為95min，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3_3.2g0
[0068]得到的蛹蟲草子實體呈金黃色，比色法測定蟲草酸的含量，得到蟲草酸含量為20%。
[0069]實施例3
[0070]按重量份計，稱取以下成分:葡萄糖12份、蛋白胨4份、酵母粉6份、磷酸二氫鉀0.06份、硫酸鎂0.06份、氯化鈉6份、維生素B10.15份、高粱粉12份、水1200份，然后121 °C，滅菌35min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草種子培養基；
[0071]按重量份計，稱取以下成分:高粱粉26份、銀杏葉粉6份、蛋白胨0.06、甘露糖
0.08份、磷酸二氫鉀0.04份、硫酸鎂0.03份、葡萄糖0.06份、維生素B10.001份、水40份，然后121°C，滅菌35min，滅菌后冷卻至室溫，得到蛹蟲草生長培養基；
[0072]高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，包括以下步驟:
[0073](a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為3 X 107CFU/ml的孢子懸液；
[0074](b)將孢子懸液以體積百分數為3%的比例接種于蛹蟲草種子培養基中培養，培養條件為:30°C，260rpm/min振蕩培養，培養5d，得到種子液；
[0075](c)將種子液稀釋30倍后，以體積百分數為8%將種子液接種于蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養；
[0076]菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養，培養條件為:溫度25°C，每天光照2h，光照強度為300LUX，濕度70%，培養5d ；
[0077]菌絲轉色培養的培養條件為:溫度14_18°C，濕度70-80%，每天通風2.5h，光照8h，光照強度為300Lux，培養5d ；
[0078]菌絲轉色培養完成后，對培養物進行子實體培養，培養條件為:透氣培養，溫度為200C ±2°C，濕度為90%，每天通風2.5h，藍光光照12h，光照強度為300Lux，培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體；
[0079]其中，對培養間采用以下方式進行消毒:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于85°C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為90min，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3_3.2g0
[0080]得到的蛹蟲草子實體呈金黃色，比色法測定蟲草酸的含量，得到蟲草酸含量為25%。
[0081]本發明提供的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，培養方法簡單，在不同培養階段采用不同的培養基進行培養，以確保菌種的活力和適應栽培目標的需求；各個培養階段的培養條件、環境條件嚴格控制，利于蛹蟲草培養和管理的規范化和標準化；得到的蛹蟲草子實體蛹蟲草蟲草酸含量高，為18-25%，且用該蛹蟲草子實體提取的蟲草酸的純度高。
[0082] 以上所述僅為本發明的優選實施例而已，并不用于限制本發明，對于本領域的技術人員來說，本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.蛹蟲草種子培養基，其特征在于，按重量份計，包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氫鉀0.02-0.06份、硫酸鎂0.02-0.06份、氯化鈉4_6份、維生素B10.05-0.15份、高粱粉8-12份、水800-1200份。
2.蛹蟲草生長培養基，其特征在于，按重量份計，包括以下成分:高粱粉24-26份、銀杏葉粉4-6份、蛋白胨0.04-0.06、甘露糖0.04-0.08份、磷酸二氫鉀0.02-0.04份、硫酸鎂0.02-0.03 份、葡萄糖 0.04-0.06 份、維生素 B10.0005-0.001 份、水 30-40 份。
3.一種高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，包括以下步驟: (a)將蛹蟲草菌種活化培養，制得濃度為l_3X107CFU/ml的孢子懸液； (b)將所述孢子懸液以體積百分數為3-8%的比例接種于權利要求1所述的蛹蟲草種子培養基中培養，得到種子液； (c)將所述種子液接種于權利要求2所述的蛹蟲草生長培養基中依次進行菌絲生長培養、菌絲轉色培養和子實體培養，得到蛹蟲草子實體。
4.根據權利要求3所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(b)中，培養條件為:25-30°C，240-260rpm/min振蕩培養。
5.根據權利要求4所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(b)中，培養3-5d，得到所述種子液。
6.根據權利要求5所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(c)中，將所述種子液稀釋20-30倍后，以體積百分數為5-8%進行接種。
7.根據權利要求6所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(c)中，所述菌絲生長培養在已消毒的培養間進行培養，培養條件為:溫度20-25°C，每天光照2_4h，光照強度為 250-300Lux，濕度 60-70%，培養 5_7d。
8.根據權利要求7所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(c)中，所述菌絲轉色培養的培養條件為:溫度14-18°C，濕度70-80%，每天通風1.5-2.5h，光照8-12h，光照強度為250-300Lux，培養3_5d。
9.根據權利要求8所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，在所述步驟(c)中，所述子實體培養的培養條件為:透氣培養，溫度為20°C ±2°C，濕度為80-90%，每天通風1.5-2.5h，藍光光照12-14h，光照強度為250-300LUX，培養至子實體長度為7-8cm，采收得到所述蛹蟲草子實體。
10.根據權利要求7所述的高產蟲草酸蛹蟲草培養方法，其特征在于，所述消毒為:將裝有過氧乙酸溶液的容器置于75-85 °C的水浴中熏蒸對所述培養間消毒，熏蒸時間為90-100min，所述過氧乙酸每立方米空間用量為3_3.2g ;消毒期間，培養間室溫不低于20°C，濕度為 60% -80%。
【文檔編號】C12N1/14GK103981105SQ201410234565
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月29日 優先權日:2014年5月29日
【發明者】熊艷 申請人:熊艷