本發明涉及一種活性肽的制備方法，尤其涉及一種海藻活性肽的制備方法。
背景技術：
海洋生態環境的特殊性，造就了海洋生物能產生與陸生動植物次生代謝產物相比獨特的天然產物。近幾年，有關海藻生物活性肽的研究極為活躍，盡管海藻生物活性肽的研究歷史較短，但因其獨特的生物活性作用，而成為活性肽領域的研究熱點之一。我國對海藻活性肽研究開發起步較晚，基礎和應用研究都很薄弱，目前仍處于起步階段，至目前為止，真正實現工業化生產的海藻多肽產品未見有報道，廠家仍關注于海藻多糖等常見海藻粗提物的生產。
技術實現要素：
本發明的目的在于，提供一種海藻活性肽的制備方法，該制備方法無需添加脫鹽、真空濃縮等工藝，簡化了生產工藝，降低了生產成本，納濾分離的濾渣、濾液可作為原料用于海藻肥的生產，資源利用率高。
本發明的技術方案：一種海藻活性肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
①按照（2～5）︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入1～2倍量的純凈水，調節混合物ph值至3～4，溫度保持在50～75℃后，維持壓力0.8mpa水解2～3小時，然后對該水解液進行失活、脫色以及過濾處理，得到海藻多肽提取液；
②將上述海藻多肽提取液通過分子量為1200da和500da的納濾膜進行純化和濃縮，得濃縮液；
③將上述濃縮液經過超高溫瞬時滅菌，放入高壓罐中，加壓至3kgf/cm2，并保持10～20min，使其壓力均勻，然后在0～3秒突然使壓力降至okgf/cm2；
④滅菌后，通過真空干燥得到海藻活性肽粉末。
前述的一種海藻活性肽的制備方法，所述蛋白酶包括植物蛋白酶和動物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和動物蛋白酶以1︰（1.2～1.5）的比例混合而成。
前述的一種海藻活性肽的制備方法，所述植物蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述動物蛋白酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。
前述的一種海藻活性肽的制備方法，所述步驟①中，按照5︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入1.2倍量的純凈水，調節混合物ph值至4，溫度保持在75℃后，維持壓力0.8mpa水解3小時。
與現有技術相比，本發明以植物活性肽酶解工藝為基礎，以海藻粗提物食品級海藻酸鈉原料，采用多酶復合耦合水解工藝，使得海藻多肽平均分子量在800da左右，解決了傳統植物活性肽酶解工藝分子量不均勻的問題。
本發明采用分子量1200da和500da的組合納濾技術分離純化海藻多肽，截留分子量在500～1200da海藻多肽，簡化了生產工藝，無需采用傳統脫鹽工藝以及真空濃縮工藝，降低生產成本。
具體實施方式
下面實施例對本發明作進一步的說明，但并不作為對本發明限制的依據。
實施例1：
一種海藻活性肽的制備方法，包括以下步驟：
①按照5︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入1.2倍量的純凈水，調節混合物ph值至4，溫度保持在75℃后，維持壓力0.8mpa水解3小時，然后對該水解液進行失活、脫色以及過濾處理，得到海藻多肽提取液；
②將上述海藻多肽提取液通過分子量為1200da和500da的納濾膜進行純化和濃縮，得濃縮液；
③將上述濃縮液經過超高溫瞬時滅菌，放入高壓罐中，加壓至3kgf/cm2，并保持10min，使其壓力均勻，然后在3秒突然使壓力降至okgf/cm2；
④滅菌后，通過真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和動物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和動物蛋白酶以1︰1.2的比例混合而成。
所述植物蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述動物蛋白酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。
實施例2：
一種海藻活性肽的制備方法，包括以下步驟：
①按照2︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入1倍量的純凈水，調節混合物ph值至3，溫度保持在50℃后，維持壓力0.8mpa水解2小時，然后對該水解液進行失活、脫色以及過濾處理，得到海藻多肽提取液；
②將上述海藻多肽提取液通過分子量為1200da和500da的納濾膜進行純化和濃縮，得濃縮液；
③將上述濃縮液經過超高溫瞬時滅菌，放入高壓罐中，加壓至3kgf/cm2，并保持20min，使其壓力均勻，然后在2秒突然使壓力降至okgf/cm2；
④滅菌后，通過真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和動物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和動物蛋白酶以1︰1.5的比例混合而成。
所述植物蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述動物蛋白酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。
實施例3：
一種海藻活性肽的制備方法，包括以下步驟：
①按照3︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入2倍量的純凈水，調節混合物ph值至3，溫度保持在75℃后，維持壓力0.8mpa水解3小時，然后對該水解液進行失活、脫色以及過濾處理，得到海藻多肽提取液；
②將上述海藻多肽提取液通過分子量為1200da和500da的納濾膜進行純化和濃縮，得濃縮液；
③將上述濃縮液經過超高溫瞬時滅菌，放入高壓罐中，加壓至3kgf/cm2，并保持15min，使其壓力均勻，然后在2秒突然使壓力降至okgf/cm2；
④滅菌后，通過真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和動物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和動物蛋白酶以1︰1.3的比例混合而成。
所述植物蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述動物蛋白酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。
實施例4：
一種海藻活性肽的制備方法，包括以下步驟：
①按照4︰1的蛋白酶和食品級海藻酸鈉比例進行催化水解，加入1.5倍量的純凈水，調節混合物ph值至4，溫度保持在70℃后，維持壓力0.8mpa水解2.5小時，然后對該水解液進行失活、脫色以及過濾處理，得到海藻多肽提取液；
②將上述海藻多肽提取液通過分子量為1200da和500da的納濾膜進行純化和濃縮，得濃縮液；
③將上述濃縮液經過超高溫瞬時滅菌，放入高壓罐中，加壓至3kgf/cm2，并保持15min，使其壓力均勻，然后在3秒突然使壓力降至okgf/cm2；
④滅菌后，通過真空干燥得到海藻活性肽粉末。
所述蛋白酶包括植物蛋白酶和動物蛋白酶，蛋白酶以植物蛋白酶和動物蛋白酶以1︰1.4的比例混合而成。
所述植物蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶和木瓜蛋白酶，所述動物蛋白酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。
本發明有如下創新：
1、采用復合酶耦合催化水解，通過對酶加量、ph值、水解溫度和水解時間關鍵工藝參數的控制，多肽分子量分布集中；
2、采用納濾膜兩步法過濾，脫鹽、濃縮一步完成，無需脫鹽和真空濃縮工藝，簡化了生產工藝，降低成本；
3、納濾殘渣以及濾液可作為海藻肥原料，用于生產海藻肥，資源利用率高；
4、產品分子量在500～1200da左右（平均分子量800da），易于人體吸收。